楊 柱， 田維毅， 王文佳， 韓 潔

(貴陽中醫(yī)學院，貴州貴陽550002)

過度飲酒已成為損害健康的重要因素之一，酒精對機體損害大致可分為急性酒精中毒(即醉酒)和慢性酒精損害。目前，對解酒制品的開發(fā)受到廣泛重視，包括主要針對急性酒精中毒的醒酒防醉制品和主要針對慢性酒精損害的保肝等制品。醒酒防醉制品研發(fā)具有極其重要的社會適用價值，祖國醫(yī)藥在這方面積淀了豐富的理論基礎(chǔ)和治法方藥，具有較好的臨床應用效果，但缺乏統(tǒng)一評價［1］。為了深入探索祖國醫(yī)藥防醉醒酒方劑的效果及其客觀依據(jù)，本文就葛花解酲湯等5首常用經(jīng)方驗方醒酒、防醉、干預血乙醇含量等效應進行同等實驗條件下的對比研究，為進一步研發(fā)和臨床應用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 清潔級昆明小鼠，♀♂各半，體重18～22 g，由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供［SCXK(滬)2007-0005］。

1.2 主要儀器 AB135-S型梅特勒托利多電子天平(梅特勒托利多上海公司);島津GC-2010氣相色譜儀(日本島津公司)。

1.3 試劑與藥材 56%(V/V)紅星二鍋頭白酒(批號081215，北京紅星股份有限公司);根據(jù)前期研究確定的用酒量(另文發(fā)表)，按0.15 mL/10 g體重灌胃，動物可明顯致醉且無大量死亡。實驗方劑包括葛花解酲湯(元·李東垣《脾胃論》)、藿香正氣散(宋﹒太醫(yī)局《太平惠民和劑局方》)、石膏湯(解酒驗方:石膏12 g、葛根10 g、干姜6 g)、葛根散(金·張子和《儒門事親》)和沖和湯(宋·楊倓《楊氏家藏方》)。組方藥材購自上海同仁堂大藥房，按原方比例制備水煎劑(生藥濃度為1 g/mL)備用。根據(jù)動物藥理實驗用藥折算方法，根據(jù)成人常規(guī)用藥量，實驗中統(tǒng)一按10 g生藥/kg小鼠體重設(shè)計給藥中劑量，其2倍量為大劑量、1/2量為小劑量。實驗前用蒸餾水按0.25 mL(藥液)/10 g(小鼠體重)給藥體積調(diào)整水煎劑濃度。

1.4 翻正實驗 參照文獻方法［2］。實驗小鼠按♀♂各半隨機分組，每組10只，實驗前禁食12 h。各給藥組用相應水煎劑按0.25 mL/10 g體重灌服，另設(shè)對照組代以等體積蒸餾水。給藥30 min后，各組均用56%(V/V)紅星二鍋頭按0.15 mL/10 g體重灌服，隨即記錄各小鼠翻正反應消失時間(耐受時間)和消失持續(xù)時間。

1.5 醉酒睡眠實驗 參照文獻方法［3］。動物分組與處置方法同上，灌服白酒后隨即觀察小鼠活動情況。以小白鼠爬行不穩(wěn)、后腹拖地、閉眼懶動為睡眠(醉酒)指標，以行動自如、四肢靈活、精神恢復為蘇醒(醒酒)指標，記錄小鼠入睡時間和蘇醒時間，算出睡眠耐受時間(min)(從灌酒至入睡的時間)及持續(xù)時間(min)(從入睡到蘇醒的時間)。

1.6 攀附實驗 參照文獻方法［3］。動物分組與處置方法同上，灌服白酒后隨即將小鼠放在垂直的金屬網(wǎng)上，記錄各小鼠在網(wǎng)上的攀附時間(s)。

1.7 全血乙醇含量測定 參照文獻方法［4］。動物分組與處置方法同上，分別于灌服白酒 30、60、90、120、150、180 min后，隨機抽取各組小鼠8只，經(jīng)眼球取血0.1 mL抗凝，內(nèi)標法檢測全血乙醇含量。檢測方法參照《中華人民共和國藥典》(2005版)乙醇量測定法。

1.8 統(tǒng)計分析各組計量資料以ˉx±s表示，數(shù)據(jù)處理采用spss 13.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件進行差異性比較，以P＜0.05及P＜0.01為顯著性差異。

2 結(jié)果

由于本研究是對各方解酒效果的對比研究，所以在比較各項指標時，以各復方最佳效果濃度組作為參比組，有關(guān)實驗結(jié)果對比如下。

2.1 翻正實驗

小鼠翻正反應實驗結(jié)果見表1。各方最佳效應組翻正反應消失時間(耐受時間)(min):葛根散＞石膏湯＞葛花解酲湯＞沖和湯＞藿香正氣散，且葛根散與其他參試方劑比較，具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01);葛根散、石膏湯、葛花解酲湯與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.01);沖和湯、藿香正氣散與對照組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。各方最佳效果組翻正反應消失持續(xù)時間(min):石膏湯＜葛根散＜葛花解酲湯＜沖和湯＜藿香正氣散，石膏湯與葛根散比較無顯著性差異(P＞0.05)、與其他參試方劑比較有顯著性差異(P＜0.01);石膏湯、葛根散、葛花解酲湯與對照組比較，具有顯著性差異(P＜0.01);沖和湯、藿香正氣散與對照組比較，無顯著性差異(P＞0.05)。

2.2 醉酒睡眠實驗

小鼠醉酒睡眠實驗結(jié)果見表1。各方最佳效應組醉酒睡眠潛伏時間(min):葛根散＞藿香正氣散＞石膏湯＞葛花解酲湯＞沖和湯，葛根散與藿香正氣散、石膏湯比較無顯著性差異(P＞0.05)，葛根散與葛花解酲湯、沖和湯比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01);各方與對照組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。各方最佳效應組醉酒睡眠持續(xù)時間(min):石膏湯＜藿香正氣散＜葛根散＜葛花解酲湯＜沖和湯，石膏湯與藿香正氣散、葛根散比較無顯著性差異(P＞0.05)，石膏湯與葛花解酲湯、沖和湯比較具有顯著性差異(P＜0.01);各方與對照組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。

2.3 攀附實驗

小鼠攀附實驗結(jié)果見表1。各方最佳效應組攀附時間(s):葛根散＞石膏湯＞葛花解酲湯＞沖和湯＞藿香正氣散，葛根散與其他各方比較具有顯著性差異(P＜0.01);各方與對照組比較具有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)。

2.4 血乙醇含量檢測

小鼠全血乙醇含量檢測結(jié)果見表2。各方實驗動物均用其該時段血乙醇濃度最低組參與比較。對照組灌服白酒30 min后，其血乙醇即有明顯升高，60～90 min達到高峰，之后開始下降。與對照組相比:葛根散、石膏湯最佳效應組實驗動物各時段血乙醇濃度降低幅度顯著(P＜0.01)，藿香正氣散、沖和湯降低幅度不顯著(P＞0.05)，葛花解酲湯不同時段降低幅度大小不等(P＞0.05或P＜0.05或P＜0.01)。除120 min時以石膏湯檢測結(jié)果為最低外，其余時段均以葛根散為最低。與葛根散相比:各時段與其檢測結(jié)果最接近者均為石膏湯(P＞0.05)，與其檢測結(jié)果差異最大的是藿香正氣散、沖和湯(P＜0.05或P＜0.01)，葛花解酲湯在30～90 min時段與之無顯著差異(P＞0.05)、在120～180 min時段則差異顯著(P＜0.01)。在180 min時段，藿香正氣散、沖和湯各組實驗動物血乙醇檢測結(jié)果高于對照組，但差異無顯著性(P＞0.05)。

表1 實驗小鼠翻正反應/醉酒睡眠時間/攀附時間觀察結(jié)果(±s)

表1 實驗小鼠翻正反應/醉酒睡眠時間/攀附時間觀察結(jié)果(±s)

注:表中n為除去實驗過程中死亡和未醉動物之后納入統(tǒng)計的數(shù)量;大劑量組為20 g生藥/kg小鼠體重，中劑量組為10 g生藥/kg小鼠體重，小劑量組為5 g生藥/kg小鼠體重?！局笜俗罴研Ч絼?△各方最佳效果濃度;與本指標效果最好方劑比較，﹡P＜0.05，﹡﹡P＜0.01;與對照組比較，﹟P＜0.05，﹟﹟P＜0.01。

組別 翻正實驗消失時間/min 消失持續(xù)時間/min醉酒睡眠實驗睡眠潛伏時間/min 睡眠持續(xù)時間/min攀附實驗攀附時間/s對照組 24.50±4.30(9) 202.11±10.35(9) 22.87±3.61(9) 235.90±11.68(9) 211.60±45.10(9)葛花解酲湯大劑量組 30.63±5.10(9) 165.50±8.35(9) 26.30±3.92(9) 195.28±9.63(9) 365.33±40.20(8)中劑量組 37.82±4.60(9)△*## 160.33±6.77(9)△**## 28.73±4.19(10) 197.19±10.07(10) 415.40±31.23(10)△**##小劑量組 32.22±4.14(10) 176.15±9.62(10) 33.40±3.91(10)△*## 176.50±9.32(10)△**## 380.70±47.24(10)藿香正氣散大劑量組 25.29±3.76(9)△** 198.50±9.49(9)△** 38.10±5.79(9) 182.51±10.54(9) 291.33±41.85(8)中劑量組 24.90±4.18(10) 210.34±11.12(10) 38.72±4.14(9)△## 137.97±11.85(9)△## 294.36±36.72(10)△**#小劑量組 25.10±4.23(10) 199.75±10.71(10) 29.39±4.61(10) 195.50±9.86(10) 237.82±44.51(10)石膏湯大劑量組 37.16±3.20(10) 122.44±12.64(10) 37.91±5.04(10)△## 134.59±9.87(10)▲△## 525.90±31.88(9)△**##中劑量組 38.05±4.16(10)△*## 100.31±11.27(10)▲△## 33.47±4.11(9) 184.10±9.64(9) 475.61±42.58(9)小劑量組 35.20±4.03(9) 138.73±11.67(9) 31.50±4.08(9) 191.38±10.83(9) 346.69±45.11(10)葛根散大劑量組 46.55±4.21(8)▲△## 109.41±10.33(8)△## 40.99±4.18(9)▲△## 140.27±9.35(9)△## 549.91±47.82(9)中劑量組 43.30±4.81(9) 122.14±9.89(9) 38.68±3.51(10) 185.73±11.60(10) 611.45±41.63(10)▲△##小劑量組 33.86±3.10(10) 156.50±10.22(10) 34.30±4.91(8) 195.48±9.92(8) 471.29±42.11(8)沖和湯大劑量組 27.20±5.14(10) 188.69±9.21(10)△** 24.30±4.03(9) 221.40±9.88(9) 313.77±46.14(9)△**##中劑量組 26.20±4.70(9) 189.83±11.26(9) 28.73±4.69(10)△**# 216.44±9.92(10)△**# 297.38±38.73(10)小劑量組 28.00±5.23(8)△** 193.36±9.75(8) 27.61±4.77(9) 217.84±10.29(9) 264.86±43.63(10)

表2 實驗小鼠血乙醇含量檢測結(jié)果(μL/mL)(±s)

注:各組各時段隨機抽取實驗小鼠8只進行檢測(死亡小鼠不檢測)，最后時段不足8只則按實數(shù)計算;大劑量組為20 g生藥/kg小鼠體重，中劑量組為10 g生藥/kg小鼠體重，小劑量組為5 g生藥/kg小鼠體重?！緯r段血乙醇含量最低的方劑;△各方本時段血乙醇含量最低組;與本時間段血乙醇含量最低的方劑比較，*P＜0.05，**P＜0.01;與對照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01。

組別(動物總數(shù))小鼠血乙醇含量/(μL/mL)30 min 60 min 90 min 120 min 150 min 180 min對照組(52) 0.92±0.13 1.71±0.16 1.67±0.15 1.52±0.15 1.29±0.10 0.96±0.11葛花解酲湯大劑量組(52) 0.70±0.11△# 1.34±0.16△## 1.42±0.13 1.27±0.11△**## 1.15±0.11△** 0.77±0.09(7)△**#中劑量組(52) 0.74±0.13 1.38±0.14 1.41±0.10△## 1.32±0.14 1.16±0.13 0.89±0.10小劑量組(52) 0.82±0.10 1.57±0.14 1.56±0.11 1.38±0.12 1.19±0.09 0.91±0.12藿香正氣散大劑量組(52) 0.89±0.14 1.56±0.11△* 1.52±0.14 1.39±0.10 1.15±0.13△** 1.04±0.12△**中劑量組(52) 0.84±0.11△* 1.64±0.14 1.51±0.12△* 1.37±0.12△** 1.19±0.11 1.12±0.10小劑量組(52) 0.87±0.13 1.67±0.10 1.59±0.14 1.44±0.15 1.20±0.11 1.17±0.14(7)石膏湯大劑量組(52) 0.69±0.10△## 1.29±0.14△## 1.33±0.10△## 0.71±0.14▲△## 0.68±0.09△## 0.62±0.10△##中劑量組(52) 0.73±0.12 1.36±0.12 1.38±0.11 0.88±0.11 0.82±0.11 0.78±0.12小劑量組(52) 0.81±0.11 1.45±0.10 1.51±0.13 0.99±0.15 0.92±0.14 0.82±0.08葛根散大劑量(52) 0.62±0.13▲△## 1.21±0.15▲△## 1.31±0.11▲△## 0.74±0.10△## 0.59±0.09▲△## 0.48±0.10▲△##中劑量(52) 0.69±0.11 1.35±0.11 1.32±0.14 0.77±0.10 0.69±0.10 0.59±0.08小劑量(52) 0.73±0.11 1.39±0.14 1.43±0.10 0.85±0.14 0.74±0.09 0.68±0.10沖和湯大劑量(52) 0.94±0.15 1.60±0.12 1.57±0.14 1.41±0.15△** 1.24±0.13 1.15±0.14(7)中劑量(52) 0.87±0.14△** 1.58±0.14△** 1.57±0.12△** 1.42±0.10 1.19±0.11△** 1.08±0.10△**小劑量(52) 0.88±0.11 1.67±0.11 1.60±0.15 1.46±0.11 1.26±0.14 1.19±0.12

3 討論

醉酒大致可分為三個階段，即興奮期、共濟失調(diào)期、昏睡期?，F(xiàn)代研究醒酒防醉方藥多從協(xié)調(diào)運動、醒神、控制血乙醇等方面入手，實驗方法最常見的有翻正實驗、醉酒睡眠實驗(又稱防醉實驗)、攀附實驗和血中乙醇含量檢測等。本文探討了祖國醫(yī)藥中葛花解酲湯等5首常用醒酒防醉方劑在同一實驗條件的解酒效應，比較了上述指標的效應差異。

翻正實驗結(jié)果顯示(見表1)，與對照組比較，葛花解酲湯中劑量組、石膏湯中劑量組和葛根散大劑量組實驗小鼠的翻正反應消失時間和消失持續(xù)時間均得到顯著改善(P＜0.01);其中改善效果最明顯的方劑分別為葛根散和石膏湯。

醉酒睡眠實驗結(jié)果顯示(見表1)，與對照組比較，葛花解酲湯小劑量組、藿香正氣散中劑量組、石膏湯大劑量組、葛根散大劑量組和沖和湯中劑量組實驗小鼠睡眠潛伏時間和睡眠持續(xù)時間均得到顯著改善(P＜0.05或P＜0.01);其中藿香正氣散中劑量組、石膏湯大劑量組和葛根散大劑量組效果尤為顯著，與葛花解酲湯小劑量組和沖和湯中劑量組比較具有明顯差異(P＜0.05或P＜0.01)。

攀附實驗結(jié)果顯示(見表1)，與對照組比較，葛花解酲湯中劑量組、藿香正氣散中劑量組、石膏湯大劑量組、葛根散中劑量組和沖和湯大劑量組實驗小鼠攀附時間明顯延長(P＜0.05或P＜0.01);其中以葛花解酲湯中劑量組、石膏湯大劑量組、葛根散中劑量組效果尤為明顯(P＜0.01)。

血乙醇含量檢測結(jié)果顯示(見表2)，與對照組比較，葛花解酲湯大劑量組、葛根散大劑量組、石膏湯大劑量組實驗動物各檢測時間段(其中葛花解酲湯90 min時間段為中劑量組)血乙醇含量明顯降低(P＜0.05或P＜0.01);其中以葛根散大劑量組、石膏湯大劑量組效果尤為明顯，與其他參試方劑比較，具有明顯差異(P＜0.05或P＜0.01)。

綜合上述實驗結(jié)果，提示在本研究所選解酒防醉觀察指標中，5首方劑中的葛根散和石膏湯的作用效果更為明顯和全面，葛花解酲湯效果稍弱但與對照組相比仍具有顯著差異。在本研究中，藿香正氣散和沖和湯的解酒防醉作用比較局限，對實驗動物血乙醇沒有明顯降低作用，其臨床解酒效應是否涉及其他途徑，需進一步探索。

在本文實驗中，我們采用目前常用的小鼠醉酒模型，因考慮灌服白酒致醉后影響服藥的問題，所以本研究全部采用的是先給藥、后灌酒。因此，本實驗結(jié)果除了體現(xiàn)解酒效果外，很大程度上還體現(xiàn)防醉效果。同時，為了盡可能體現(xiàn)每個方劑的最佳效果，我們分三個濃度組進行觀察(對比時用效果最好的濃度組數(shù)據(jù))。另外，因動物數(shù)量限制，血乙醇含量檢測每組用8只動物，但仍符合統(tǒng)計要求(最低6只)。當然，由于實驗工作量較大，我們觀察的方劑數(shù)量有限，觀察的指標覆蓋面主要限于基本藥效學指標，要全面深入的研究各方劑的解酒效果，尚需進一步開展工作。

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