高永峰 焦 賀 陳 強(qiáng) 李 冬

(1．泰山醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東 泰安 271016； 2.泰山醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，山東 泰安 271016)

柿葉黃酮(flavonoids from persimmon leaf, PLF)是從柿樹(shù)科(Ebenaceae)柿樹(shù)屬(Diospyros)植物柿(Diospyroskaki L.f.)的新鮮或干燥葉中分離而得。現(xiàn)代藥理研究表明，柿葉具有廣泛的藥理作用，包括擴(kuò)張血管、降血脂、降血壓、抗氧化、止血等多種功效[1]。在上世紀(jì)70年代，中國(guó)人民解放軍第58醫(yī)院制藥廠[2]曾用柿葉注射劑治療高血壓12例，對(duì)改善頭昏、頭痛等癥狀效果良好。2009年覃斐章等[3]觀察到柿葉黃酮對(duì)一氧化氮合酶抑制劑N G-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine- methlester，L-NAM E)誘導(dǎo)的高血壓大鼠的降壓作用及其作用機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)建立腎血管性高血壓大鼠模型(renovascular hypertensive rat, RHR)，觀察柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利對(duì)RHR的降壓作用。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1藥品與試劑 柿葉于2009年10月～11月份采自泰山山麓，經(jīng)過(guò)烘干粉碎、提取分離、冷凍干燥得黃酮提取物。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定黃酮含量為33.37%?？ㄍ衅绽?captopril，CAP)，中美上海施貴寶制藥有限公司，批號(hào)：0601031。

1.1.2動(dòng)物 雄性Wistar大鼠，體重280～320 g，清潔級(jí)，由山東省魯抗醫(yī)藥股份有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，魯動(dòng)質(zhì)字：SCXK 魯20080002。

1.1.3儀器 ZH-HX-Z無(wú)創(chuàng)血壓測(cè)定儀(淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司)； Medlab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)(南京美易科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1腎血管性高血壓大鼠模型的建立

應(yīng)用二腎一夾方法制作RHR模型[4]：取雄性Wistar大鼠，戊巴比妥鈉45 mg·kg-1麻醉，分離左側(cè)腎動(dòng)脈，放置特制銀夾(0.2 mm)，使腎動(dòng)脈狹窄。術(shù)后靜脈滴注青霉素預(yù)防感染。術(shù)前1 d及術(shù)后每周同一時(shí)間段測(cè)定大鼠尾動(dòng)脈收縮壓，術(shù)后3周內(nèi)收縮壓≥20 kPa者納入實(shí)驗(yàn)。

1.2.2動(dòng)物分組及處理 術(shù)后第4周，將RHR隨機(jī)分為模型組(model )、卡托普利10 mg·kg-1組(CAP )、柿葉黃酮100 mg·kg-1組(PLF )、柿葉黃酮100 mg·kg-1+卡托普利10 mg·kg-1組(PLF+CAP)，每組10只。給藥組每天灌胃給藥一次，模型組和假手術(shù)組(sham-operation group)每天灌胃生理鹽水1次，連續(xù)4周。每周固定時(shí)間段測(cè)定大鼠尾動(dòng)脈收縮壓，觀察給藥前后和停藥1周后血壓的變化情況。

2 結(jié) 果

2.1 PLF及其聯(lián)合卡托普利對(duì)RHR血壓的影響

給藥前與假手術(shù)組相比，所有造模大鼠血壓均明顯升高(P<0.05)，表明模型制備成功。在給藥第3天后，PLF+CAP組大鼠血壓與模型組相比，出現(xiàn)明顯降低(P<0.05)；給藥第7天后，與模型組相比CAP組大鼠血壓出現(xiàn)明顯降低(P<0.05)，PLF+CAP組大鼠血壓進(jìn)一步降低(P<0.01)；在給藥21天后，PLF組大鼠血壓出現(xiàn)下降(P<0.05)。停藥7后，CAP組、PLT組、PLF+CAP組大鼠血壓均有回升，其中PLF+CAP組大鼠血壓回升幅度最小，與CAP組和PLT組相比，有顯著性差異(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利對(duì)RHR血壓的影響±s，n=10)

注：與假手術(shù)組相比，aP﹤0.05；與模型組相比，bP﹤0.05；cP﹤0.01；與PLF+CAP組相比，dP﹤0.05。

2.2 PLF及其聯(lián)合卡托普利對(duì)RHR心率的影響

模型制備成功后，與假手術(shù)組相比，模型大鼠心率明顯加快(P﹤0.05)；給藥3天后，與模型組相比，CAP組和PLF+CAP組大鼠心率出現(xiàn)顯著下降(P﹤0.05)；在給藥21天后，與模型組相比，PLF組大鼠心率也出現(xiàn)明顯降低(P﹤0.05)。停藥7天后，各給藥組大鼠心率出現(xiàn)增高，但低于模型組大鼠心率(P﹤0.05)。見(jiàn)表2。

表2 柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利對(duì)RHR心率的影響±s，n=10)

注：與假手術(shù)組相比，aP﹤0.05；與模型組相比，bP﹤0.05。

3 討 論

目前柿葉黃酮降壓作用的研究報(bào)道較少，國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)柿葉黃酮對(duì)腎性高血壓大鼠的降壓作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，柿葉黃酮對(duì)腎性高血壓大鼠具有一定的降壓作用，給藥1周后大鼠血壓開(kāi)始緩慢下降，到給藥3周后，出現(xiàn)明顯降壓效果；對(duì)柿葉黃酮聯(lián)合卡托普利組大鼠觀察發(fā)現(xiàn)，兩者聯(lián)合后降壓效果尤為顯著，給藥3天后，即可出現(xiàn)明顯降壓效果。隨著給藥時(shí)間的增加，血壓持續(xù)下降；停藥7天后，卡托普利組、柿葉黃酮組、柿葉黃酮聯(lián)合卡托普利組大鼠血壓均有一定回升，其中柿葉黃酮聯(lián)合卡托普利組大鼠血壓回升緩慢，表明其對(duì)RHR降壓作用維持時(shí)間較長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)同時(shí)觀察到在柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利在降壓的過(guò)程中，可降低RHR心率。

腎血管性高血壓是由腎血管狹窄引起腎缺血，導(dǎo)致腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system，SAS)的激活，從而引發(fā)血壓的升高。在RAS系統(tǒng)中，血管緊張素(angiotensin，Ang)是強(qiáng)的血管收縮劑，適量的Ang可維持血管張力，有利于調(diào)節(jié)體液平衡和血壓穩(wěn)定，過(guò)量的Ang分泌可促進(jìn)內(nèi)皮素分泌，使交感神經(jīng)張力增高，腎臟水鈉潴留，從而誘發(fā)和加重高血壓[5]?？ㄍ衅绽茄芫o張素轉(zhuǎn)化酶抑制藥，抑制AngⅡ生成，具有明顯的降壓作用。賈斐章等[3]在L-NAME制備高血壓大鼠模型中，觀察到柿葉黃酮可以降低L-NAME模型大鼠體內(nèi)的AngⅡ的含量。由此推測(cè)，柿葉黃酮對(duì)RHR的降壓作用，柿葉黃酮聯(lián)合卡托普利具有的顯著降壓作用，以及在降壓過(guò)程中伴隨的心率減慢，其機(jī)制可能與降低大鼠體內(nèi)AngⅡ的含量有關(guān)。對(duì)于柿葉黃酮及其聯(lián)合卡托普利降壓作用的具體機(jī)制，有待進(jìn)一步研究。

[1] 張秋燕，王亮，肖峰，等．柿葉藥理作用研究進(jìn)展[J]．河北職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，21(3)：39-40．

[2] 中國(guó)人民解放軍第58醫(yī)院制藥廠．柿樹(shù)葉的實(shí)驗(yàn)研究及初步療效觀察[J]．中草藥通訊，1973，(3)：9．

[3] 賈斐章，林興，張緒東，等． 柿葉黃酮的降壓作用及其作用機(jī)制研究[J]．廣西科學(xué)，2009，16(3)：310-313.

[4] [德]H．G． 沃格爾，[美]W．H．沃格爾編著，杜冠華等譯. 藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南[M]．北京：科學(xué)出版社，2001：102．

[5] 張朝霞．蓮椹湯對(duì)腎性高血壓大鼠血壓的療效觀察[J]．實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志，2008，22(7)：56-57．