皮建輝, 周建波, 熊海霞, 廖芳芳

(懷化學院生命科學系,湖南懷化 418008)

自從1901年奧地利蘭茨泰納發(fā)現(xiàn)和確定人類第一個血型系統(tǒng)ABO血型系統(tǒng)后,人們對于血型的認識逐漸加深,目前已發(fā)現(xiàn)人類存在20余種血型系統(tǒng).血型是一種十分穩(wěn)定的遺傳性狀,成為人類的一種重要遺傳標記,不同人種或同一人種的不同民族,以及同一民族的不同群體間紅細胞血型基因頻率分布都有所不同,這對研究人類起源、進化和種族間的差異有一定意義.目前我國的56個民族紅細胞血型都有相關的研究報道,但是湖南瓦鄉(xiāng)人這一在族群認同上至今還存在爭議的獨特群體,僅有語言文化、宗教信仰等民族學方面的研究,生物學方面的研究很少[1].為此,我們于2008年對湖南瓦鄉(xiāng)人的血型分布情況進行了調(diào)查分析,增補了湖南瓦鄉(xiāng)人生物學研究的內(nèi)容,同時也為瓦鄉(xiāng)人的族源研究提供了參考資料.

1 材料與方法

1.1 血樣采集

2008年5月,在湖南沅陵縣隨機調(diào)查了230名父母均系瓦鄉(xiāng)人而彼此間無血緣關系的瓦鄉(xiāng)人學生.用臨床用一次性采血管 (事先已涂抹有抗凝劑)在肘正中靜脈處分別采集靜脈血5～8 ml,加上標簽后于保鮮盒中保存?zhèn)溆?

1.2 血型鑒定方法

采用平板法鑒定ABO血型;采用室溫試管法鑒定MN血型;采用抗人球蛋白法鑒定Rhesus血型;采用室溫鹽水試管法鑒定P血型;S抗原用室溫鹽水試管法、s抗原用間接抗人球蛋白方法.抗A,抗B標準血清來自長春生物研究所博德公司,效價1∶256;其他標準血清均為上海紅十字血液中心產(chǎn)品.

1.3 基因頻率的計算方法

Rhesus血型系統(tǒng)的基因頻率計算依據(jù)趙氏法 (趙桐茂,1987)[2],其余的血型系統(tǒng)的基因頻率計算依據(jù)Mourant等人著書所用推算公式 (Mourant et al.1976)[3].

1.4 遺傳距離計算與聚類分析

遺傳距離 (D)根據(jù)

(其中 x和y分別為兩個民族間相同性狀各自所占的百分比,m則是所取性狀的個數(shù))計算所得,系統(tǒng)樹的構成則是根據(jù)Sneath和Sokal氏的不加權聚類原則繪制(Sneath and Sokal,1963)[4].

2 結 果

瓦鄉(xiāng)人的四種血型系統(tǒng)分型結果如表1～4.其中P血型系統(tǒng)采用單一抗血清檢查,不足以作Hardy-Weinberg吻合度測驗,對其余的ABO、MNSs、Rhesus三種血型均進行了Hardy-Weinberg吻合度測驗,X2檢測表明其期望值和觀察值的吻合度良好 (p>0.05).

2.1 ABO血型系統(tǒng)

瓦鄉(xiāng)人的ABO血型分布接近湖南南部漢族的分布(r=0.6287、p=0.2302、q=0.1411)[5],與廣西壯族ABO血型的分布略有差異 (r=0.6722、q=0.1791、p=0.1487)[6].根據(jù)報道,中國人ABO血型分布的主要特點是基因q的頻率與地域有密切關系,以長江流域為界劃分為南北群體,北方人的q值高,在0.2～0.3之間,南方人的q值低,在0.2以下[7].湖南瓦鄉(xiāng)人ABO血型的基因頻率q值為0.1461,符合這一規(guī)律.

表1 湖南瓦鄉(xiāng)人ABO血型系統(tǒng)的分布

2.2 MNSs血型系統(tǒng)

國內(nèi)已有的關于MNSs血型系統(tǒng)在漢族中的分布報道表明,基因頻率m在南方和西南地區(qū)漢族比較高,其次是東北地區(qū),最低是上海[8].湖南瓦鄉(xiāng)人的基因頻率m(0.5196)略大于基因頻率n(0.4804),與南方民族的分布特征 (m>n)相符合[8].中國人的基因頻率S均小于0.1,湖南瓦鄉(xiāng)人的基因頻率S值也很低,僅為0.0152,符合這個分布規(guī)律.中國絕大多數(shù)人群與世界上大部分其他人群一樣,N與S的連鎖率小于M和S的連鎖率,湖南瓦鄉(xiāng)人NS頻率 (0.0228)比MS頻率 (0.0272)小,符合這一基本規(guī)律.但與NS的連鎖率為0的結果[9-10]存在明顯差異.

表2 湖南瓦鄉(xiāng)人MNSs血型系統(tǒng)的分布

2.3 Rhesus血型系統(tǒng)

230例瓦鄉(xiāng)人中僅發(fā)現(xiàn)一例D陰性 (為ccdee),基因頻率d僅為0.0659,CDe的頻率很高,達0.7588.C基因在我國南方人群中的頻率均超過0.7,北方民族一般超過0.6但不足0.7,僅西北的維吾爾族與哈薩克族在0.5～0.6之間.烏茲別克、柯爾克孜和塔塔爾這些中亞細亞民族都不到0.4,E基因在我國北方民族和西北的維吾爾族中,其頻率往往超過0.25,具中亞細亞血統(tǒng)的西北少數(shù)民族中則在0.20左右,而在我國南方民族中僅在0.20以下[11].本次調(diào)查瓦鄉(xiāng)人的七種表現(xiàn)中以CCDee的出現(xiàn)頻率最高,其中基因C和E的頻率分別為0.7674和0.1791,符合南方民族的整體分布規(guī)律.

表3 湖南瓦鄉(xiāng)人Rhesus血型系統(tǒng)

2.4 P血型系統(tǒng)

在調(diào)查的230瓦鄉(xiāng)人中發(fā)現(xiàn)P1(-)型166人占72.17%,P1(+)型64人占27.83%.P1基因頻率在中國人群的最高值為新疆維吾爾族 (0.4174)[12],最低值為廣東客家人 (0.0917)[13],而且分布似乎呈現(xiàn)由南向北的增高趨勢.P1基因頻率在南方民族的分布普遍低于0.2[2],湖南瓦鄉(xiāng)人的P1基因頻率為0.1391,符合這個規(guī)律.

表4 湖南瓦鄉(xiāng)人P血型系統(tǒng)

3 討 論

3.1 血型在不同民族間的表型差異分析

我們比較了湖南瓦鄉(xiāng)人與云貴高原周邊的其他8個民族 (貴州的苗族、侗族、布依族、仡佬族、水族[14-15]和湖南的土家族、漢族[16-17]以及廣西的壯族[18-19])的四種血型系統(tǒng)中各血型出現(xiàn)率的差異,其求得的 u值如表5所示,可知瓦鄉(xiāng)人與苗族、侗族、壯族、漢族的差異比較顯著,而與土家族、水族的差異比較小.

表5 瓦鄉(xiāng)人與其他8個民族各種血型出現(xiàn)率的差異比較 (u值)

3.2 瓦鄉(xiāng)人與南方部分民族的聚類分析

遺傳距離是各種遺傳標記的基因頻率平均值的函數(shù),它與種族、地理位置、語言、宗教文化等因素有關,民族間的遺傳距離反映它們之間的族源或血緣關系.根據(jù)ABO血型系統(tǒng)的表現(xiàn)型頻率計算瓦鄉(xiāng)人與云貴高原周邊的其他8個民族[14-19]兩兩間的遺傳距離(表6)并作聚類分析 (圖1),表明瓦鄉(xiāng)人與湖南土家族的遺傳距離 (0.2481)最近,與貴州水族 (0.3509)的遺傳距離次之,而與貴州仡佬族的 (0.7479)最遠.說明湖南瓦鄉(xiāng)人在紅細胞ABO血型的分布與湖南土家族及貴州水族比較接近.

表6 瓦鄉(xiāng)人與其他8個民族兩兩之間的遺傳距離

在聚類圖上,土家族、漢族、瓦鄉(xiāng)人首先聚類,而布依族和侗族則先聚類后再與之聚為第Ⅰ類;而苗族和水族則先聚類后再與壯族聚為第Ⅱ類;仡佬族作為一個單一的群體成為第Ⅲ類.有資料表明,近代侗族、壯族、水族、布依族等民族均發(fā)源于唐宋時期的“僚”,于北宋初年前后分離出來[20].但是族源作為一個歷史范疇,不是一成不變的,在當今民族中,由于長期以來的通婚、混居導致各民族間的基因交流,因此近代民族的來源往往都不是單一的,通常是多個群體的集合體.

圖1 9個民族與群體ABO血型基因頻率系統(tǒng)樹

“瓦鄉(xiāng)人”是指聚居在長江南岸湘、鄂、川、黔交界的武陵山脈,自貴州苗嶺分支,行烏江、沅江間,蔓延于湘西北的澄水、酉水、武水一帶,迄洞庭湖西境平山上的古五溪蠻地的群體.瓦鄉(xiāng)人這一名稱,首先是由其自稱而來.瓦鄉(xiāng)人自稱“果熊”,“果”與“講”、“瓦”在當?shù)胤窖灾兄C音,“熊”即“鄉(xiāng)”,“果熊”就是“講鄉(xiāng)話”、“講鄉(xiāng)話的人”,即瓦鄉(xiāng)人[21-22].關于“瓦鄉(xiāng)人”的族群認同經(jīng)過了30年之久,1956年國家民委根據(jù)其語言特征將其確定為漢族;但自1982年開始,“瓦鄉(xiāng)人”認為自身的語言、服飾、宗教與苗族同源,申請要求國家民委認同其為苗族成分;至20世紀80年代以后,隨著黨的民族政策的加強,“瓦鄉(xiāng)人”的民族意識空前高漲,要求更改民族的愿望更強烈,最后主要根據(jù)地域分布、婚姻狀況和自己的愿望紛紛更改為苗族、土家族.從遺傳距離與系統(tǒng)聚類圖來看,湖南瓦鄉(xiāng)人似乎與土家族有著較深的淵源.有研究表明,秦滅巴后,巴人流入五溪[23](五溪即為瓦鄉(xiāng)人的發(fā)源地古五溪),成為土家族祖先.然而,楚國大夫屈原放逐沅湘時,曾造訪瓦鄉(xiāng),并在其《楚辭》中作了瓦鄉(xiāng)人以捕魚為業(yè),其語不通的描述.因此,在巴人流入五溪以前,實際上瓦鄉(xiāng)人就已經(jīng)存在.也就是說,瓦鄉(xiāng)人來自于土家族或早期的巴人有悖于歷史時期.本文關于瓦鄉(xiāng)人紅細胞血型的研究結果只能為探討瓦鄉(xiāng)人的族源提供相關的參考資料,對于瓦鄉(xiāng)人的來源,還有待生物學和民族學的進一步的研究.

[1]皮建輝,李林,周建波,等.湖南瓦鄉(xiāng)人舌運動類型的遺傳學研究 [J].懷化學院學報,2009,28(5):51-54.

[2]趙桐茂.人類血型遺傳學 [M].北京:科學出版社,1987,231-234.

[3]Mourant A E,et al.The Distribution of the Human Blood Groups and Other Polymorphisms,2ed[M].Oxford:Oxford University Press,1976:49-56.

[4]Sneath P H A and Sokal R R.Numerical Taxonomy,Freeman,San Francisco,1973:201-213.

[5]呂靖南.湖南邵陽地區(qū)6028人ABO血型調(diào)查 [J].輸血及血液學,1979,3(3):19.

[6]韋業(yè)華,黃立英.貴州省仡佬族、水族、廣西壯族ABO血型調(diào)查研究 [J].人類學學報,1995,14(1):52-53.

[7]金峰,杜若甫,趙紅.湘西土家族、苗族紅細胞血型分布 [J].遺傳,1993,15(4):1-5.

[8]血型調(diào)查組.我國十六個民族的血型調(diào)查報告Ⅱ:MN及P血型調(diào)查結果 [J].中華血液學雜志,1980,1(6):352-356.

[9]肖春杰,郝露萍,張衛(wèi)紅,等.納西族和普米族的紅細胞血型分布 [J].遺傳學報,1995,22(4):252-257.

[10]肖春杰,郝露萍,張衛(wèi)紅,等.云南阿昌族的紅細胞血型分布 [J].人類學學報,1994,13(4):140-143.

[11]血型調(diào)查組.我國十六個民族的血型調(diào)查報告——Rh血型調(diào)查結果 [J].中華血液學雜志,1981,2(3):209-211.

[12]袁達義.新疆維吾爾族的紅細胞血型系統(tǒng)的研究 [J].中華血液學雜志,1984,5(5):305-309.

[13]郝露萍,杜若甫.客家人的紅細胞血型分布 [J].人類學學報,1993,12(3):255-258.

[14]萬昌發(fā),鄭周英,許玉英,等.貴州5個少數(shù)民族的血型分布調(diào)查 [J].中國輸血雜志,2001,14(3):178-180.

[15]覃筱燕,張淑萍,楊林,等.貴州三都地區(qū)水族人群ABO血型分布 [J].人類學學報,2004,23(2):169-170.

[16]劉 陽,田儒林,向 輝,等.湘西自治州土家族、苗族、漢族ABO及RhD血型抗原分布調(diào)查 [J].臨床輸血與檢驗,2003,5(3):199-200.

[17]皮建輝,佘朝文,舒孝順.湖南侗族、漢族ABO血型的調(diào)查與分析 [J].湘潭師范學院學報 (自然科學版),2002,24(2):78-80.

[18]朱芳武,覃成號,林光琪,等.廣西壯族三個組群ABO的及MN血型的人類學研究 [J].廣西民族研究,1994,(3):62-65.

[19]杜詩庫,蘭艷,韋葉生,等.百色地區(qū)壯族血型基因頻率調(diào)查 [J].右江民族醫(yī)學院學報,2003,25(6):840.

[20]尤中.唐宋時期的僚 [J].民族研究,1983,4:12-21.

[21]張永家,侯倉佳.關于“瓦鄉(xiāng)人”的調(diào)查報告 [J].吉首大學學報 (社會科學版),1984,5(1):109-112.

[22]明躍玲.民族識別與族群認同——以湘西紅土溪村的民族識別過程為個案 [J].云南社會科學,2008,(2):42-45.

[23]顏勇.土家族族源論析 [J].貴州民族研究,1993,(4):133-135.