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        耐根結(jié)線蟲瓜類砧木的篩選

        2010-01-01 00:00:00金國良霍雨猛何啟偉徐苑芳
        山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2010年5期

        摘 要:本試驗(yàn)以8份南瓜及1份西瓜為試材,進(jìn)行了耐根結(jié)線蟲砧木的篩選。結(jié)果表明,砧木1號、砧木2號母本2份材料較耐根結(jié)線蟲,栗南瓜易感根結(jié)線蟲。根結(jié)線蟲的侵染降低了砧木材料地上部的生物量,并對根系生長有影響。耐根結(jié)線蟲材料根系SOD值在侵染后顯現(xiàn)出升高趨勢,表明其表達(dá)量與耐根結(jié)線蟲有關(guān)。

        關(guān)鍵詞:瓜類;根結(jié)線蟲;砧木篩選

        中圖分類號:S436.421.1+9 文獻(xiàn)標(biāo)識號:A 文章編號:1001-4942(2010)05-0089-03

        根結(jié)線蟲病近年來危害日趨嚴(yán)重,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,使世界農(nóng)業(yè)年平均減產(chǎn)24.5%[1]。其寄主廣泛,瓜類屬于易感作物。目前,現(xiàn)行防治研究有基因工程方面的,如霍雨猛等[2]構(gòu)建了受根結(jié)線蟲誘導(dǎo)的特異性表達(dá)啟動(dòng)子的克隆載體,但尚無簡便可行防治根結(jié)線蟲的方法,而通過選育抗根結(jié)線蟲品種也是比較重要的途徑。劉海河等(2008)[3]用曼陀羅嫁接番茄防治根結(jié)線蟲病的研究,表明曼陀羅具有抗根結(jié)線蟲能力。得到對根結(jié)線蟲有抗性的砧木,則可以省去很多的人力物力,而且可以減少化學(xué)防治帶來的蔬菜產(chǎn)品污染問題,因此有廣闊的前景。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        本試驗(yàn)所用的材料及編號:1.黑籽南瓜;2.栗南瓜(印度南瓜);3.砧木1號;4.砧木1號父本;5.砧木2號父本;6.砧木1號母本;7.砧木2號母本;8.強(qiáng)力綠光;9. 07-4(西瓜材料)。

        根結(jié)線蟲為本實(shí)驗(yàn)室保存的南方根結(jié)線蟲。

        1.2 試驗(yàn)方法

        本試驗(yàn)于2009年在山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)基地隔離區(qū)內(nèi)進(jìn)行。設(shè)2個(gè)處理:不接種(對照),接種線蟲30 ml(9 000條)。采用盆栽方式完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),共計(jì)9份材料,每份材料30盆,對照和處理各15盆,每盆1株。于4月上旬播種育苗,5月上旬移栽到15 cm×18 cm塑料盆中并接種線蟲。線蟲的接種參照劉維志(2002)[4]的方法,將有足量根瘤的番茄根系打碎過篩并收集線蟲卵,孵化計(jì)數(shù)備用。35 d后測定生物學(xué)及根系超氧化物歧化酶(SOD)指標(biāo)。

        1.3 測定指標(biāo)

        1.3.1 根結(jié)指數(shù) 以Boiteux等(1996)[5]的根結(jié)指數(shù)作為根結(jié)線蟲病抗性的指標(biāo)。根結(jié)指數(shù)=單株根結(jié)數(shù)/根鮮重。

        1.3.2 生物學(xué)指標(biāo) 測定株高、地上部鮮重、根鮮重。

        1.3.3 生理指標(biāo) 參照趙世杰等(2000)[6]的方法測定SOD活性。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 根結(jié)指數(shù)

        由圖1可知,砧木1號、砧木2號母本2個(gè)材料較耐根結(jié)線蟲,其根結(jié)指數(shù)為15.87和16.58個(gè)/g;栗南瓜易感根結(jié)線蟲,其根結(jié)指數(shù)為62.49個(gè)/g(圖1)。

        2.2 生物學(xué)指標(biāo)

        2.2.1 株高 株高即蔓長,各砧木材料對照的株高均比根結(jié)線蟲處理的要高,其中栗南瓜、砧木1號父本對照與處理間差異較大,砧木1號與砧木2號母本對照與處理間差異則較小,與根結(jié)指數(shù)基本一致,說明根結(jié)線蟲侵染降低了砧木植株的株高(圖2)。

        2.2.2 地上部鮮重 從地上部鮮重分析,處理組均比對照組要低。其中,砧木1號與砧木2號母本處理與對照間差異較小,栗南瓜與砧木1號母本對照與處理間差異較大,而且根結(jié)線蟲的侵染對植株地上部鮮重的影響比株高更顯著(圖3)。

        圖3 根結(jié)線蟲侵染對9種材料地上部鮮重的影響

        2.2.3 根鮮重 圖4表明,供試材料的對照與處理間的根鮮重有明顯差異,南瓜、砧木1號父本、砧木1號母本、07-4的根鮮重比對照值高,而這些材料均為較易感材料,其原因可能是被處理植株根系根結(jié)生長后使根系增重所致;其它材料的對照與處理間差異較小,其中,較耐根結(jié)線蟲材料砧木1號與砧木2號母本的對照與處理間差異較小,且處理根系鮮重值小于對照,其原因可能是少量根結(jié)的存在抑制了根系生長。

        2.3 SOD值的變化

        從SOD的測定結(jié)果(圖5)中看出,砧木1號、砧木2號父本、砧木2號母本SOD值比對照高,而這3份材料為本試驗(yàn)中較耐根結(jié)線蟲的材料,因此推測,植物根系受根結(jié)線蟲侵染后SOD值的升高可能與耐根結(jié)線蟲有一定的相關(guān)性。

        3 結(jié)論與討論

        本試驗(yàn)中,砧木1號、砧木2號母本2份材料較耐根結(jié)線蟲,栗南瓜、砧木1號母本和9號的西瓜材料易感根結(jié)線蟲。受到根結(jié)線蟲侵染后,各材料間的處理比對照在株高與地上部生物量方面均有所降低,說明根結(jié)線蟲侵染植株根系后,抑制了植株地上部的生長。同時(shí),根系的生長也受到抑制,有的材料則是根結(jié)的膨大而使根鮮重超出了正常根的重量。徐小明等(2008)[7]發(fā)現(xiàn)接種南方根結(jié)線蟲后抗病和感病茄子砧木根系超氧陰離子生成速率和H2O2含量均提高,表明茄子砧木抗南方根結(jié)線蟲水平與超氧陰離子生成速率及H2O2含量存在正相關(guān)關(guān)系。逆境脅迫可使植物活性氧代謝失衡,導(dǎo)致活性氧過度積累,從而對植物造成氧化傷害[8]。超氧化物歧化酶SOD是廣泛存在于各種動(dòng)植物和微生物體內(nèi)清除活性氧類的一種主要酶類。覃鵬等(2005)[9]研究指出煙草體內(nèi)的SOD活性一直處于上升趨勢可能是適應(yīng)干旱脅迫加深,更快地清除體內(nèi)活性氧的需要。線蟲侵染后,耐根結(jié)線蟲材料根系SOD酶活性有顯著升高。張自坤等(2009)[10]的測定結(jié)果表明,感染南方根結(jié)線蟲后的黃瓜嫁接苗SOD活性也高于自根苗,推測SOD活性的升高達(dá)到了清除活性氧的目的,也就減少了過量的活性氧對植物根系本身的毒害作用,因此提高了根系對根結(jié)線蟲的耐性,說明SOD活性可以作為砧木篩選的一個(gè)參考指標(biāo)。

        致 謝:2~7號材料為青島農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院李敏老師提供,特此致謝!

        參 考 文 獻(xiàn):

        [1] 泰勒A L,薩塞J N.植物根結(jié)線蟲[M].北京:科學(xué)出版社,1983:3.

        [2] 霍雨猛, 王 偉, 徐苑芳, 等. 根結(jié)線蟲誘導(dǎo)型啟動(dòng)子RKNIP的克隆及序列分析[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,4:5-8,15.

        [3] 劉海河,謝 彬,郭守朋.曼陀羅嫁接番茄防治根結(jié)線蟲技術(shù)[J].長江蔬菜,2008,1:25-26.

        [4] 劉維志.植物病原線蟲學(xué)[J].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2002.

        [5] Boiteu X L S, Charchar J M.Genetic resistance to root-knot nematode (Meloidogyne javanica) in eggplant (Solanum melongena)[J]. Plant Breeding ,1996,115(3):198-200.

        [6] 趙世杰,史國安,董新純.植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社,2000.

        [7] 徐小明,于 芹,徐 坤,等.南方根結(jié)線蟲侵染對茄子砧木幼苗根系活性氧代謝及相關(guān)酶活性的影響[J].園藝學(xué)報(bào),2008,35(12):1770-1771.

        [8] 趙天宏,孫加偉,付 宇.逆境脅迫下植物活性氧代謝及外源調(diào)控機(jī)理的研究進(jìn)展[J].作物雜志, 2008,3:10-13.

        [9] 覃 鵬,劉葉菊,劉飛虎,等.干旱處理對煙草葉片SOD和POD活性的影響[J]. 中國煙草科學(xué),2005,2:28-30.

        [10]張自坤,劉世琦,張 強(qiáng),等.根結(jié)線蟲對不同砧木黃瓜嫁接苗生理生化指標(biāo)的影響[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué),2009,7:82-86.

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