[摘要] 臨床工作中血型鑒定工作非常重要，應(yīng)盡力把錯誤的發(fā)生率降到最低。血型鑒定中各種實驗檢測技術(shù)各有利弊和適用范圍，本文探討常用的血型鑒定試驗技術(shù)，并探討在血型報告中常出現(xiàn)錯誤的原因及其避免方式。

[關(guān)鍵詞] 血型鑒定;實驗技術(shù);錯誤原因

[中圖分類號] R457.1+1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1004-8650(2009)08-065-02

ABO血型抗原是由ABO血型抗原基因編碼的特異性糖基轉(zhuǎn)移酶催化合成的紅細(xì)胞膜表面的糖蛋白和糖脂。ABO抗原決定簇共有5種類型，由單糖經(jīng)轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)移到特定核心多糖鏈的末端生成，分別決定血型抗原基礎(chǔ)物質(zhì)、H抗原、A抗原、A1抗原以及B抗原的抗原表型。根據(jù)紅細(xì)胞上有或無A抗原或/和B抗原，將血型分為A型、B型、AB型及O型四種。A型紅細(xì)胞膜上含有A抗原，B型紅細(xì)胞膜上含有B抗原，AB型紅細(xì)胞膜上含有A、B抗原，抗A、抗B試劑是分別針對A抗原和B抗原的特異性抗體。可利用紅細(xì)胞凝集試驗，通過正、反定型準(zhǔn)確鑒定ABO血型。所謂正定型，是用已知的抗A、抗B試劑與受檢者的紅細(xì)胞混合時，與抗A試劑發(fā)生凝集者即為A型，與抗B分型試劑發(fā)生凝集者即為B型，與抗A、抗B試劑均發(fā)生凝集者即為AB型，與抗A、抗B試劑均不凝集者即為O型。所謂反定型，是用已知A細(xì)胞和B細(xì)胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗A或/和抗B[1]。由于血型的鑒定中存在著不同程度的誤判，因此，探討ABO血型分型鑒定中的錯誤原因也是非常重要的。將應(yīng)用較多的集中實驗檢測技術(shù)和常見分型錯誤原因匯報如下。

1常用試驗檢測技術(shù)

1.1血凝試驗

抗體和紅細(xì)胞在液體介質(zhì)中發(fā)生肉眼可見的凝集反應(yīng)。根據(jù)操作方法的不同，主要可以分為玻片法、試管法和全自動微板法。

1.1.1玻片法:目前臨床常用的血型鑒定的初篩試驗方法是玻片法，該法根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)抗體血清與待測紅細(xì)胞在干燥玻片上是否發(fā)生凝集反應(yīng)來確定待測紅細(xì)胞血型，該法操作簡單，省時省力。

1.1.2試管法:實驗室常用的交叉配血試驗是應(yīng)用試管法，在更大的空間以更敏感的方式來進行血型的分型。

1.1.3全自動微板法:是臨床常用的血型分類檢測方法，通過標(biāo)準(zhǔn)化加樣、孵育、離心、懸浮、靜止以及反應(yīng)前后吸光度值增加數(shù)值的計算，從而達(dá)到對血型進行定型與反定型的目的，使獻(xiàn)血者常規(guī)ABO血型鑒定實現(xiàn)了標(biāo)準(zhǔn)化、批量化、自動化，節(jié)約大量昂貴抗血清、縮短檢測時間、操作程序簡單，消除了許多人為因素造成的血型誤定。據(jù)報道，應(yīng)用ABO血型自動化檢測方法進行正反定型試驗，一次判讀正確率在99.8%以上，且能提高檢測靈敏度，使弱凝集標(biāo)本更易顯現(xiàn)。但該法對B3亞型伴抗B的判斷有待進一步完善。

1.2酶聯(lián)免疫吸附試驗

通過酶聯(lián)免疫吸附實驗的原理、相應(yīng)的酶標(biāo)單抗技術(shù)以及酶與底物反應(yīng)顯色的原理達(dá)到鑒定血型的目的。比經(jīng)典的紅細(xì)胞凝集抑制實驗鑒定血型的方法敏感性要高。對樣本要求小，即使樣本在高溫下保存40℃溫度下保存8個月，樣本中仍有超過60%的P84血型物質(zhì)生物學(xué)活性存在，仍然可以用該法進行血型鑒定。

1.3流式細(xì)胞技術(shù)

通過用熒光素標(biāo)記人源抗A、抗B以及相應(yīng)的亞型抗體，將待測血樣的紅細(xì)胞稀釋分裝，入加熒光素標(biāo)記抗體，抗原與相應(yīng)熒光標(biāo)記抗體結(jié)合后用流式細(xì)胞儀檢測與熒光標(biāo)記抗體結(jié)合的紅細(xì)胞，通過軟件分析，得出待測細(xì)胞中與抗A、抗B結(jié)合的細(xì)胞的百分率，從而得到待測樣本的紅細(xì)胞血型。流式細(xì)胞術(shù)能快速、準(zhǔn)確地檢測大量單個細(xì)胞或生物顆粒，且靈敏度高、重復(fù)性好等。適合應(yīng)用于ABO血型亞型的快速鑒定。解決了急診交叉配血不合時，難以做到及時、快速、準(zhǔn)確地鑒定供、受者的血型亞型的問題[2]。

1.4微柱凝膠試驗

用凝膠技術(shù)進行抗球蛋白試驗可提高試驗的靈敏度及特異性，目前微柱凝膠試驗在國外輸血領(lǐng)域已逐漸作為常規(guī)應(yīng)用于ABO及Rh血型定型，未知血型抗體篩查以及直接抗球蛋白試驗。該法與經(jīng)典鹽水法相比， 所需樣本量少，操作簡單，結(jié)果明確可靠、易判讀，靈敏度高，重復(fù)性好，對需大量或反復(fù)輸血的患者配血既安全又快速。

目前ABO血型的實驗室檢測方法較多，既有操作較為簡便易行的血凝試驗，也有結(jié)果較為可靠的微柱凝膠試驗和基因型檢測。這也給我們提出了新的挑戰(zhàn)，如何優(yōu)化出更準(zhǔn)確更經(jīng)濟更省時省力的檢測方法是目前研究的新趨勢。更簡單更方便的試紙條也許是下一步要追求的新的優(yōu)化方法[3]。

2常見血型報告錯誤的原因

2.1血型測定的錯誤

血型檢測時因患者紅細(xì)胞懸液過濃或過淡，抗原和抗體比例不當(dāng)， 離心速度及時間不適合， 不做反定型檢測，都可以造成定型報告錯誤。為防止血型鑒定的錯誤，在進行血型鑒定的過程中，一定要嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，正、反定型同時進行，使用質(zhì)量合格的試劑及細(xì)心觀察結(jié)果，就可避免很多不必要的錯誤。

2.2檢驗者工作粗心的錯誤

由于工作精力不集中造成一些人為錯誤，如試管上未編號，離心后拿錯試管， 不按規(guī)定操作，填寫血型結(jié)果時筆誤，都會造成血型報告結(jié)果的錯誤。在工作中應(yīng)認(rèn)真細(xì)致，精力集中，嚴(yán)格把住血型定型這一關(guān)。

2.3醫(yī)護人員的錯誤

臨床醫(yī)生在填寫輸血申請時，沒有做血型檢測，或者填錯申請單或者輸血檢驗報告單夾錯。護士抽取血標(biāo)本時，弄錯輸血患者的姓名和床號，都會造成血型報告的錯誤。應(yīng)注意此現(xiàn)象并加以避免。

2.4血站發(fā)血的錯誤

由于血站發(fā)送的血液袋上的血型與血袋內(nèi)的血液的血型不符而造成獻(xiàn)血者的血型錯誤?？赡苁怯捎谘救藛T的工作粗心失誤錯拿了血型。在工作中應(yīng)注意力集中，尤其對于人命關(guān)天的輸血事件更應(yīng)該嚴(yán)格把關(guān)，設(shè)立監(jiān)督，做到萬無一失。

2.5疾病導(dǎo)致血型結(jié)果的錯誤

某些疾病(如白血病或惡性腫瘤)可使受檢者血液中紅細(xì)胞上的抗原減弱或含有較高的冷凝集素，而產(chǎn)生自凝現(xiàn)象。高球蛋白血癥的標(biāo)本常見紅細(xì)胞呈緡錢狀排列，而干擾血型判斷，甚至造成血型鑒定的錯誤。如試驗結(jié)果紅細(xì)胞呈緡錢狀排列，加等滲鹽水1滴混勻，往往可使緡錢現(xiàn)象消失[4]。

參考文獻(xiàn):

[1] 蘭炯采，孟慶寶，張印則，等.ABO血型基因分型及應(yīng)用[J].中國免疫學(xué)雜志，2002，18(6):430.

[2] 徐樹良，戴宇東，田愛民，等.流式細(xì)胞術(shù)快速鑒定ABO血型亞型[J].中國輸血雜志，2003，16(3):165.

[3] 胡繼征，陸典瑞，李啟輝.全自動微板法檢測28379例獻(xiàn)血者ABO血型的統(tǒng)計分析[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報，2003，9(9):75.

[4] 張萍，陳荇.常見ABO血型鑒定錯誤原因分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床雜志，2009，1(1):75-76.

(收稿日期2009-05-13)