劉　夢(mèng)　陳志洋　萬家樂等

雞新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,感染雞只死亡率在90%以上,對(duì)養(yǎng)雞業(yè)危害極大。該病主要特征是呼吸困難、嚴(yán)重下痢、黏膜和漿膜出血,病程稍長的伴有神經(jīng)癥狀。雞只接種疫苗后體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生特異性抗體,借助酶聯(lián)免疫試驗(yàn)(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)可對(duì)血清中ND抗體水平進(jìn)行定量檢測(cè),有效評(píng)估雞群的免疫狀態(tài)。

鄂西北地區(qū)還未見有關(guān)新城疫抗體監(jiān)測(cè)的報(bào)道,為監(jiān)測(cè)鄂西北地區(qū)規(guī)模化雞場(chǎng)新城疫抗體水平,筆者于2008年4～12月對(duì)鄂西北地區(qū)襄樊、十堰、荊門等地的32家雞場(chǎng)的新城疫抗體進(jìn)行了血清學(xué)監(jiān)測(cè),現(xiàn)將其報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1血樣的采集

對(duì)鄂西北地區(qū)32家存籠1萬只規(guī)模雞場(chǎng)雞只隨機(jī)采血,每只2mL翅下靜脈血樣,共采集血樣1 004份。

1.2血樣的處理

采集血樣靜置1h,待血清析出后,2 000r/min離心10min,取上層血清待檢。

1.3儀器與試劑

酶標(biāo)儀:GF—M2000型酶標(biāo)儀,山東高密彩虹分析儀器有限公司;德國eppendorf單道微量可調(diào)移液槍;37℃恒溫培養(yǎng)箱。

新城疫病毒抗體檢測(cè)試劑盒:來自深圳康百得生物有限公司生產(chǎn)的新城疫病毒抗體檢測(cè)ELISA試劑盒。

1.4新城疫病毒抗體ELISA檢測(cè)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

S/N≥2.1表示雞體內(nèi)有新城疫抗體存在,結(jié)果陽性;

S/N≥4.1表示雞體內(nèi)有較強(qiáng)的新城疫抗體存在,結(jié)果強(qiáng)陽性,免疫合格。S:樣本OD值;N:陰性對(duì)照OD值。

2結(jié)果與分析

在所檢測(cè)的1 004份血樣中,4～6月份檢測(cè)6家雞場(chǎng)共458份血樣,陽性有458份,占100%;強(qiáng)陽性有455份,占99.34%,6家雞場(chǎng)的陽性率都在81%～100%;7～9月份檢測(cè)11家雞場(chǎng)共343份血樣,陽性有340份,占99.13%;強(qiáng)陽性有297份,占86.59%;陰性有3份,占0.87%,11家雞場(chǎng)的陽性率都在81%～100%;10～12月份檢測(cè)12家雞場(chǎng)共203份血樣,陽性有179份,占88.18%;強(qiáng)陽性有104份,占51.23%;陰性有24份,占11.82%,其中有2家雞場(chǎng)的陽性率在41%~60%,1家雞場(chǎng)的陽性率在61%～80%,12家雞場(chǎng)的陽性率在81%～100%。

從ELISA檢測(cè)S/N的分布來看,在受檢的1 004份血清中,抗體陰性樣本數(shù)27份,占2.69%;抗體陽性樣本數(shù)977份,陽性率97.31%。其中,抗體弱陽性樣本118份,占11.75%,抗體強(qiáng)陽性樣本有859份,占85.56%。統(tǒng)計(jì)分析表明,在受檢的32家雞場(chǎng)中,群體免疫合格率在75%以上的有21家,占65.63%。

3討論

(1)通過對(duì)鄂西北地區(qū)新城疫抗體水平監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn),65.63%的雞場(chǎng)新城疫群體免疫合格,表明本地區(qū)新城疫免疫有待進(jìn)一步加強(qiáng)。同時(shí)建議,規(guī)?；u場(chǎng)需規(guī)范新城疫疫苗免疫程序,加強(qiáng)抗體水平監(jiān)測(cè),確保雞群免疫合格。

(2)從表1可知,鄂西北地區(qū)規(guī)模化雞場(chǎng)新城疫免疫強(qiáng)陽性率在監(jiān)測(cè)的3個(gè)季度中呈現(xiàn)高低不一(51.23%～99.34%),產(chǎn)生這種差異可能是由于雞體內(nèi)新城疫抗體水平經(jīng)過一段時(shí)間會(huì)呈現(xiàn)消退。因此,需定期對(duì)雞群抗體水平進(jìn)行檢測(cè),確保雞只體內(nèi)抗體處于合格水平。

(3)表1還表明,鄂西北地區(qū)規(guī)?；u場(chǎng)新城疫免疫總體合格率為85.56%,免疫合格率較高,但是免疫合格率在各雞場(chǎng)分布極不平衡,一部分免疫情況好的雞場(chǎng),合格率可達(dá)100%,而免疫情況差的雞場(chǎng),合格率為0。這與本地區(qū)新城疫在部分雞場(chǎng)散發(fā)是一致的。

(4)通過對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的登記結(jié)合監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)分析來看,新引進(jìn)雞只初次免疫效果通常較差,首免間隔20d后加強(qiáng)一次免疫,有較好的免疫效果,不過還需對(duì)抗體進(jìn)行一次跟蹤,根據(jù)結(jié)果再次調(diào)整免疫。

(5)抗體水平檢測(cè)是評(píng)估養(yǎng)殖場(chǎng)免疫水平的一種十分有效的方法,適合于在注射疫苗15～20d后進(jìn)行檢測(cè)評(píng)估免疫效果,或免疫合格雞場(chǎng)數(shù)月后抗體水平下降,再次評(píng)估群體抗體水平。

致謝:衷心感謝襄樊職業(yè)技術(shù)學(xué)院畜禽疾病診斷中心王長義、熊江林、周華林等老師的指導(dǎo)及本中心實(shí)驗(yàn)室所有工作人員的支持和幫助。