徐秀珍

摘要:由于微生物檢驗幾乎涵蓋了所有食品企業(yè)的產(chǎn)品,因此,作為企業(yè)內(nèi)部環(huán)境之一的微生物室,是產(chǎn)品的溫床,也是微生物實驗是否準(zhǔn)確的基石。因此建立符合條件的微生物室并定時、定期的對其環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測是實驗可靠性的保證。本文從微生物實驗室環(huán)境對實驗的影響,實驗室應(yīng)具備哪些條件,環(huán)境監(jiān)測如何進(jìn)行幾個方面進(jìn)行論述。

關(guān)鍵詞:潔凈度;空氣細(xì)菌菌落總數(shù);照射強(qiáng)度;交叉感染

我國《食品質(zhì)量安全市場準(zhǔn)入審查通則》(2004版)對食品生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)入市場制定了嚴(yán)格的條件,其中第一點即為環(huán)境衛(wèi)生要求。這里的環(huán)境既包括企業(yè)周圍的外部環(huán)境,又包括企業(yè)內(nèi)部環(huán)境如企業(yè)廠區(qū)、生產(chǎn)加工車間等。

1 從建筑上來說:微生物實驗室分為無菌操作間和緩沖間,實驗人員應(yīng)先進(jìn)更衣室,然后到緩沖間,最后進(jìn)無菌室。實驗室的工作區(qū)域與辦公區(qū)域明顯分開。無菌操作間應(yīng)符合響應(yīng)潔凈級別的操作環(huán)境,采用局部百級措施時,其環(huán)境應(yīng)符合萬級潔凈度要求,每立方米直徑大于等于0.5微米的塵埃粒子數(shù)應(yīng)是小于等于350000個,30分鐘塵降菌落數(shù)小于等于3cfu/立方米。如果空氣潔凈度達(dá)不到這一要求,建議內(nèi)設(shè)一超凈工作臺。進(jìn)入無菌間應(yīng)有人凈和物凈的設(shè)施;無菌操作間應(yīng)根據(jù)檢驗品種的需要,保持對鄰室的相對正壓或相對負(fù)壓,并定期檢測潔凈度。如果是做醫(yī)藥的企業(yè),日常潔凈區(qū)的萬級和百級區(qū)域的浮游菌也是要月檢測一次的,這是國標(biāo)浮游菌檢測方法上面規(guī)定的。檢測潔凈度首要的是對無菌室消毒效果進(jìn)行監(jiān)測:用直徑9cm營養(yǎng)瓊脂平板做空氣暴露采樣,一般可采3個點(呈對角線),暴露5min后置36℃培養(yǎng)24h觀察菌落數(shù)目。按下列公式計算結(jié)果:空氣細(xì)菌菌落總數(shù)(cfu/m3)=5000N/A*T,A:平板面積(平方厘米)T:平均暴露時間(min),N:平均菌落cfu/平皿。普通無菌室的消毒效果每月至少應(yīng)進(jìn)行一次監(jiān)測。其次,消毒后,對無菌實驗進(jìn)行空氣質(zhì)量監(jiān)測:將直徑9cm的普通營養(yǎng)瓊脂平皿放在無菌室四角及中央各一塊(設(shè)一塊空白對照),打開平皿蓋扣放平皿旁,暴露10分鐘蓋好。將平皿至37℃培養(yǎng)24小時,觀察結(jié)果:計算5個平皿中的平均菌落數(shù)。

2 從儀器設(shè)備來說:實驗設(shè)備應(yīng)滿足檢驗工作的需要。微生物實驗室必須配備培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋、紫外燈、冰箱等設(shè)備。這里著重介紹一下紫外燈和高壓滅菌鍋。紫外燈是微生物室主要的消毒工具,紫外燈的穿透能力特別弱,因此必須定時定期對紫外燈進(jìn)行清潔。一般情況下每月使用浸有75%乙醇的抹布擦拭燈管一次,擦拭前先拔掉插頭并冷卻10分鐘,還應(yīng)經(jīng)常檢測紫外燈的照射強(qiáng)度,當(dāng)照射強(qiáng)度低于原始照射強(qiáng)度的70%時,應(yīng)由專業(yè)人員更換燈管,一般情況下每三個月檢查一次紫外燈的照射強(qiáng)度,記錄監(jiān)測結(jié)果(<200)。對紫外線燈管的監(jiān)測可以采用下列方法:用中心波長253.7nm的紫外線強(qiáng)度儀(標(biāo)定有效期內(nèi)需經(jīng)中國計量院檢測,測定值ⅹ校正系數(shù)=燈管真正照度值)在燈管垂直下方1m處測定。新購置的燈管應(yīng)≥90uw/平方厘米,使用中的燈管應(yīng)≥70uw/平方厘米。這里需要特別注意的是:在消毒照射時,工作人員應(yīng)佩帶保護(hù)眼鏡,以防紫外線損害角膜而引起急性角膜炎。

對微生物室常用的試管、吸管、營養(yǎng)瓊脂平板等器皿的消毒,實驗室最常用的滅菌器是手提式高壓滅菌鍋。它的工作原理是通過使鍋內(nèi)壓力增加,溫度也隨之增加從而提高蒸氣溫度,進(jìn)而達(dá)到徹底滅菌之目的。對手提式高壓鍋進(jìn)行監(jiān)測可以采用下列方法:樣品數(shù)量:3件,步驟:將生物指示劑放置被消毒物品中心部位和外層各一個,按常規(guī)消毒。消毒后的生物指示劑以無菌手續(xù)放入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水內(nèi),在55-60℃溫箱中培養(yǎng)7天,觀察最終結(jié)果。如有嗜熱脂肪桿菌生長,培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色,包內(nèi)包外有一菌片長菌視為高壓鍋滅菌不和格。

3 從位置和結(jié)構(gòu)布局來說:實驗室工作面積和總體布局應(yīng)能滿足從事檢驗工作的需要,實驗室布局應(yīng)采用單方向工作流程。微生物實驗室的位置應(yīng)距離車間、鍋爐房、交通要道稍遠(yuǎn)些,以減少煙囪和馬路上的灰塵的侵襲。房屋結(jié)構(gòu)應(yīng)能防震、防火、防塵、光線要充足。房屋應(yīng)建成套間互相隔開。抗生素微生物檢驗室應(yīng)分為半無菌操作間和緩沖間,半無菌操作間設(shè)有紫外燈,操作臺應(yīng)穩(wěn)固,并保持水平,實驗室內(nèi)應(yīng)光線明亮,配有控制溫度、相對濕度的設(shè)備,并應(yīng)注意交叉感染。微生物檢驗室的環(huán)境溫濕度也需要監(jiān)控,一般建議溫度為20℃左右,濕度50-60左右。

4 從實驗室內(nèi)部環(huán)境來說:實驗室的墻壁、天花板和地面應(yīng)平整、易清潔、不滲水、耐化學(xué)品和消毒劑的腐蝕。地面應(yīng)防滑,不得鋪設(shè)地毯。每個實驗室設(shè)地漏,可減少跑水事故的危害。實驗室地面要濕式拖掃,禁止干拖干掃。需消毒時,可用有效氯為500-10000mg/l的氯消毒液噴灑或拖地,消毒液用量不小于100ml/立方米。污染區(qū)和清潔區(qū)拖把應(yīng)分用,不得混用。使用后,用上述消毒液浸泡30分鐘,再用水清洗干凈,懸掛晾干。

總之,由于環(huán)境條件既包括物理因素、又包括化學(xué)因素和生物因素,不良的環(huán)境條件會使微生物的生長受到抑制,甚至導(dǎo)致菌體的死亡。但是某些微生物產(chǎn)生的芽孢,對惡劣的環(huán)境條件又有較強(qiáng)的抵抗能力。當(dāng)微生物的不同種類出現(xiàn)在一個限定的空間內(nèi),它們之間互為環(huán)境,相互影響,既有相互依賴又有相互排斥,表現(xiàn)出相互間復(fù)雜的關(guān)系,而這種復(fù)雜性又嚴(yán)重影響微生物的實驗結(jié)果,影響數(shù)據(jù)的真實性,可靠性。因此,控制微生物實驗室的環(huán)境并定期對其進(jìn)行監(jiān)測,是企業(yè)、質(zhì)檢人員首要考慮并實施的問題。這既是實驗的要求,也是對企業(yè)、對消費(fèi)者負(fù)責(zé)的表現(xiàn)。

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