林加根 林一心 張樹河

摘要以白玉果蔗脫毒后長出的莖類組織作為外殖體進行離體培養(yǎng),篩選出各階段適宜的培養(yǎng)基:不定芽誘導培養(yǎng)基為MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA;芽的繼代增殖培養(yǎng)基為MS+5.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA;壯苗培養(yǎng)基為MS+0.2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA;生根培養(yǎng)基為1/2 MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L IBA+2.0mg/L多效唑,在繼代增殖及壯苗培養(yǎng)階段用液體淺層培養(yǎng)。在培養(yǎng)期間,苗勢較好,苗體粗壯,生長均勻,充分證明組培脫毒的可行性。

關(guān)鍵詞白玉果蔗;脫毒;組培;快繁技術(shù)

中圖分類號S566.1文獻標識碼A文章編號 1007-5739(2009)14-0080-01

白玉果蔗是廣西貴港市特有的地方品種,是繼黑皮、 白蔗、 黃皮蔗之后的又一當家種,因蔗皮乳黃如玉,故稱為“白玉果蔗”。其蔗莖粗壯,節(jié)間長、皮薄、汁多、清甜、爽脆、可口,似密汁濃香,又似冰水般清涼,是果蔗中的珍品。但由于連年種植,與其他果蔗品種一樣,其種性有退化和感染病毒的情況。果蔗中花葉病和宿根矮化病目前尚無有效藥物防治,患病植株矮小,節(jié)間短,病斑多,產(chǎn)量大幅下降,嚴重影響果蔗的可食性和外觀。組培脫毒技術(shù)是克服這一難題的較佳方法,試驗結(jié)果表明,經(jīng)脫毒的果蔗種苗生長快,植株高大,節(jié)間長,產(chǎn)量比未脫毒的增產(chǎn)20%~30%左右。因此,組培脫毒是保持果蔗種性、提高產(chǎn)量的有效途徑。

1材料與方法

1.1材料

白玉果蔗植株由福建省農(nóng)科院甘蔗研究所甘蔗資源圃提供。

1.2脫毒材料的獲取及預培養(yǎng)

從田間取回果蔗植株中尾梢的莖段,將莖段砍成雙芽苗,然后將砍好的莖段放在52℃的恒溫水槽中浸泡30min,再于38℃ 恒溫條件下培植10~15d,待蔗芽萌發(fā)1~2片葉時,把蔗芽切下,剝?nèi)ネ獠咳~鞘,用自來水沖洗干凈后,先用75% 酒精進行表面消毒,再用2% 次氯酸鈉溶液消毒10~15 min或0.1% 升汞消毒8min,然后用無菌水沖洗4~ 5次。移至無菌條件下,用接種針和解剖刀小心剝離莖尖生長點以外的組織,直至露出生長點為止(最好在解剖顯微鏡下進行)。切下約l~2mm 的莖尖組織(1個生長點帶1~2個葉原基),然后接種到培養(yǎng)基上進行誘導培養(yǎng)。

1.3培養(yǎng)條件與方法

以MS為基本培養(yǎng)基,附加不同濃度的激素(6-BA)、生長素(NAA、IBA),添加蔗糖3%、活性炭0.05%、瓊脂0.65%,pH值5.8,培養(yǎng)溫度26~28℃,光照強度1 500~2 000Lx,光照時間10~12h/d。

2結(jié)果與分析

2.1初代培養(yǎng)

接種后的莖尖10d后開始膨大萌動,20d后即可將萌動生長的外殖體轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基MS+4.0~5.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA上繼代培養(yǎng),經(jīng)幾次轉(zhuǎn)接逐漸形成叢生芽。

2.2不同濃度6-BA對繼代增殖的影響

將已分化的植株接入不同濃度激素組合的增殖分化培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),結(jié)果見表1?？梢钥闯?在NAA濃度相同的情況下,低濃度激素組合的增殖率差,但苗的生長較均勻,不產(chǎn)生叢芽苗。隨著激素濃度的提高,增殖率也隨著提高,在2.0mg/L 6-BA時開始有叢芽苗產(chǎn)生。從快速增殖方面考慮,MS+4.0~5.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA是較好的增殖配方。

2.3壯苗及液體培養(yǎng)

由于組培苗在繼代擴繁階段主要是以叢生芽的方式增殖,芽苗大部分呈叢簇團狀生長,轉(zhuǎn)生根時因苗太小,大部分達不到苗高1cm以上有2~3片葉的要求,因此壯苗培養(yǎng)是生根前的關(guān)鍵步驟,同時壯苗培養(yǎng)可采用液體培養(yǎng)方式進行。結(jié)果表明(表2),液體培養(yǎng)比固體培養(yǎng)節(jié)省成本,且苗生長均勻、健壯,生長速度較快。經(jīng)15~20d培養(yǎng)即有95%的植株可誘導生根。

2.4根的誘導

將無根的幼苗3~5株為1叢轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基。結(jié)果表明(表3),不同的植物生長素對誘導生根都有較強的效果,其中1/2 MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L IBA+多效唑2.0mg/L的配方根苗粗壯、生長快,為較佳的生根培養(yǎng)基。

2.5組培苗的假植

將已有完整根系、8~12cm高的瓶苗移出培養(yǎng)室,在自然光照下煉苗5d,然后洗去培養(yǎng)基,叢植于營養(yǎng)土中。種植后噴灑70%甲基托布津800倍液殺菌防病,保持相對濕度在80%左右,當苗長到20cm以上即可定植大田。

3小結(jié)與討論

(1)白玉果蔗脫毒苗在繼代增殖及壯苗階段,主要采取液體培養(yǎng)的方法,效果顯著。與固體培養(yǎng)基相比,它不僅降低了生產(chǎn)成本,且苗長勢好,苗粗壯、均勻,生長快速,可在大規(guī)模工廠化生產(chǎn)中推廣應用,但其配套技術(shù)有待進一步研究完善。

(2)生根前壯苗培養(yǎng),對提高生根率尤為重要。由于在繼代擴繁階段,芽苗是叢生狀繁殖,苗生長參差不齊,只有通過壯苗培養(yǎng),降低激素濃度(0.2~0.5mg/L 6-BA),提高生長素的比例,才能有利于芽苗生根,使植株生長較整齊一致。

4參考文獻

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