胡曉靜

【摘要】 目的探討不同檢測(cè)方法、不同檢測(cè)試劑對(duì)人類免疫缺陷病毒抗體(抗2HIV) 檢測(cè)結(jié)果的影響。方法 雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法、快速膠體硒法等檢測(cè)模式來(lái)診斷H IV并進(jìn)行比較分析。結(jié)果 雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法與快速膠體硒法比較，快速膠體硒法靈敏度100%,陽(yáng)性預(yù)告值95.24%; EL ISA 法靈敏度95.34%,陽(yáng)性預(yù)告值100%。結(jié)論 多種檢測(cè)模式在血液抗-HIV篩查應(yīng)用是必要的。

【關(guān)鍵詞】 檢測(cè)模式;血液;抗-H IV; EL ISA快速膠體硒法

作者單位：455000河南省安陽(yáng)市中心血站

當(dāng)前我國(guó)艾滋病流行處于快速上升階段,如果不盡早采取有效對(duì)策,將很可能出現(xiàn)艾滋病大流行。艾滋病檢測(cè)是艾滋病防治工作的重要組成部分。對(duì)于采供血機(jī)構(gòu)而言,獻(xiàn)血員人類免疫缺陷病毒抗體(抗2HIV) 篩查尤為重要。用酶聯(lián)免疫吸附方法( EL ISA) 對(duì)疑似患者的血液實(shí)施的血液篩查有利于保障血液安全。選擇合適的檢測(cè)試劑進(jìn)行抗2HIV 檢測(cè)尤其重要,目前采用國(guó)產(chǎn)試劑和進(jìn)口試劑進(jìn)行兩次篩查檢測(cè)。雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法試劑、快速膠體硒法進(jìn)行21例疑似病例比較,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 疑似病例標(biāo)本21份,進(jìn)行血液抗-HIV篩查。

1.2 儀器試劑 EL ISA雙抗原夾心法抗-H IV ( 1 + 2)試劑,由英科新創(chuàng)(廈門)科技有限公司、上海實(shí)業(yè)科華生物技術(shù)有限公司提供。膠體硒試紙條采用美國(guó)DETERMINHIV/ 1 + 2膠體硒法試劑。手工加樣器(金花QYQ 北京) ,恒溫酶標(biāo)儀,酶標(biāo)儀 ,洗板機(jī)等儀器。

1.3 方法 雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法試劑對(duì)每份疑似病例血液進(jìn)行抗-H IV的初、復(fù)檢,所有操作嚴(yán)格按儀器和試劑盒要求操作,儀器配套軟件判定結(jié)果。將采集的獻(xiàn)血者血樣經(jīng)室溫離心,加樣儀自動(dòng)加樣,使用FAME 全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀進(jìn)行2 次免疫檢測(cè),根據(jù)確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室反饋的結(jié)果,計(jì)算每種試劑的檢測(cè)結(jié)果中所包含的真陽(yáng)性、假陽(yáng)性、真陰性、假陰性數(shù),進(jìn)一步分析單一試劑與雙重試劑檢測(cè)的靈敏度和特異性。

2 結(jié)果

21份標(biāo)本最后確診8例，現(xiàn)用雙抗原夾心EL ISA一步法和二步法試劑平衡檢測(cè)抗-HIV結(jié)果一步法初篩陽(yáng)性7例,二步法初篩陽(yáng)性1例,(一步法+二步法)雙試劑檢測(cè)初篩陽(yáng)性8例，復(fù)檢與初檢一致。快速膠體硒法檢測(cè)初篩陽(yáng)性為8例。復(fù)篩為1例。靈敏度100%,陽(yáng)性預(yù)告值95.24%;ELISA法靈敏度95.34%,陽(yáng)性預(yù)告值100%,初檢快速膠體硒法假陽(yáng)性率高于ELISA法;ELISA法的陽(yáng)性預(yù)告值高于快速膠體硒法。

3 討論

近年來(lái)我國(guó)所發(fā)現(xiàn)的HIV感染者和AIDS 患者逐年增加,個(gè)別地區(qū)已經(jīng)開始進(jìn)入HIV 感染的快速增長(zhǎng)期,形勢(shì)嚴(yán)峻。根據(jù)WHO 的統(tǒng)計(jì),全球HIV 感染者約5%~10%為經(jīng)血液傳播而感染 ,而當(dāng)前我國(guó)血液傳播率更高,盡管通過(guò)無(wú)償獻(xiàn)血,血液的安全性得到了很大的提高,但無(wú)償捐血者當(dāng)中也存在HIV感染的情況。近年來(lái)在我國(guó)的可疑病例中不斷發(fā)現(xiàn)HIV感染者,本研究也發(fā)現(xiàn)8例被HIV感染的患者,因此,血液安全的形勢(shì)非常嚴(yán)峻,對(duì)血液進(jìn)行抗-HIV的篩查,對(duì)預(yù)防經(jīng)輸血途徑傳播HIV有積極的意義。由于篩查實(shí)驗(yàn)使用的EL ISA 試劑靈敏度比較高,這雖然可以很大程度地防止血液篩查中出現(xiàn)“漏檢”,但卻不可避免地會(huì)出現(xiàn)較多假陽(yáng)性標(biāo)本。同時(shí)在HIV初篩檢測(cè)的結(jié)果判斷過(guò)程中,擴(kuò)大了陽(yáng)性判斷的范圍,在cut2off值上加20%為灰區(qū)。對(duì)灰區(qū)內(nèi)有反應(yīng)的標(biāo)本均以陽(yáng)性標(biāo)本對(duì)待。再者,初次檢測(cè)和再次檢測(cè)的結(jié)果判讀中有明顯顯色但未達(dá)到灰區(qū)的標(biāo)本,經(jīng)再次檢測(cè)仍然有明顯顯色者,以陽(yáng)性標(biāo)本對(duì)待。應(yīng)用于EL ISA 法的試劑較多,進(jìn)口試劑穩(wěn)定性好、特異性高,但成本較高,國(guó)產(chǎn)試劑成本較低,靈敏度較高?？焖倌z體硒法與EL ISA 比較,兩者的靈敏度均較高,但特異度和準(zhǔn)確度以前者為佳, 國(guó)際通用的血液篩查原則為以一種試劑進(jìn)行檢測(cè),初篩陽(yáng)性的標(biāo)本,進(jìn)行雙孔復(fù)測(cè) 。由于酶聯(lián)免疫診斷試劑是一種生物制品,具有生物活性,易受溫度、孵育時(shí)間、洗滌等諸多因素影響。提高診斷試劑的靈敏性、特異性及改進(jìn)血液篩查手段作為提高血液篩查安全性的首要途徑。現(xiàn)在醫(yī)療機(jī)構(gòu)選用一種國(guó)產(chǎn)、一種進(jìn)口試劑,甚至兩種都用進(jìn)口試劑的檢測(cè)模式,增加了檢測(cè)成本。但隨著國(guó)家對(duì)檢測(cè)試劑的管理規(guī)范,國(guó)產(chǎn)試劑的質(zhì)量逐年提高,目前已達(dá)到國(guó)際上先進(jìn)試劑的水平。因此,通過(guò)選用進(jìn)口試劑來(lái)達(dá)到提高檢測(cè)質(zhì)量的意義有限。血清學(xué)技術(shù)經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,敏感性特異性有了很大的提高,目前歐美等國(guó)已開始在血清學(xué)檢測(cè)的基礎(chǔ)上采用混合法應(yīng)用核酸技術(shù)進(jìn)行復(fù)檢,我國(guó)經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的整頓,也已確定開放結(jié)核分枝桿菌,沙眼衣原體、乙型肝炎病毒及丙型肝炎病毒等的分子生物學(xué)檢測(cè)。隨著試劑商品化,操作自動(dòng)化的發(fā)展,分子生物學(xué)技術(shù)必將成為病毒學(xué)檢測(cè)的首選方法。盡快將核酸檢測(cè)(NAT試驗(yàn)) 或ELISA 抗原檢測(cè)納入常規(guī)血液篩查,而不是增加ELISA 檢測(cè)次數(shù)或選用進(jìn)口試劑。

大力做好社會(huì)宣傳工作，更好的讓社會(huì)關(guān)注與重視H IV的傳播途徑，加強(qiáng)血液的管理力度。盡量以多種模式檢測(cè)血液抗-HIV，使血液及HIV患者得到全社會(huì)的重視。

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