馬振華　關(guān)興麗　李　暉

Rh血型系統(tǒng)是僅次于ABO血型系統(tǒng)的第二大紅細(xì)胞血型系統(tǒng)。對(duì)于一個(gè)地區(qū)血站來(lái)說(shuō)，能有一個(gè)穩(wěn)定的RH陰性獻(xiàn)血隊(duì)伍，及時(shí)提供臨床所需的RH陰性血液尤為重要。自從2001年7月份開(kāi)始，大慶市血站對(duì)所有公民義務(wù)獻(xiàn)血者進(jìn)行RhD抗原篩查，現(xiàn)將RhD抗原篩查情況總結(jié)分析如下。

1材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 2001年7月1日至2005年6月30日大慶公民義務(wù)獻(xiàn)血樣本共79 602份，年齡18~55歲，平均33.6歲。

1.2 檢測(cè)試劑 抗D、抗-E、抗-C、抗-e、抗-c、抗人球蛋白（以上六種試劑均由美國(guó)DBL公司生產(chǎn)），5%Rh陽(yáng)性紅細(xì)胞（我站自制）。

1.3 主要設(shè)備一次性96孔U行微量板，德國(guó)賀利氏400R臺(tái)式低溫水平離心機(jī)，日本久保田KA-2200細(xì)胞洗滌離心機(jī)，普通光學(xué)顯微鏡，恒溫水浴箱，7號(hào)注射頭（將針頭斜面磨成平頭）。

1.4 檢測(cè)方法 常規(guī)應(yīng)用微量板法檢測(cè)，微量板法檢測(cè)RhD抗原陰性者進(jìn)一步應(yīng)用試管法確定。

1.4.1 微量板方法 向U型微量板底部每個(gè)孔內(nèi)加抗D試劑3~5 ul，用竹簽蘸取獻(xiàn)血者的壓積紅細(xì)胞，混入微量板U 型孔內(nèi)，每快板加待測(cè)血樣93份，最后三孔作為對(duì)照孔。即陽(yáng)性對(duì)照一孔（用抗D試劑加Rh陽(yáng)性紅細(xì)胞5 μl），細(xì)胞陰性對(duì)照一孔（用抗D試劑加5%Rh陰性細(xì)胞5 μl）血清陰性一孔（用AB型血清5 ul加5%Rh陽(yáng)性紅細(xì)胞5 ul）。用震蕩儀溫和振搖微量板，混勻，最后用水平離心機(jī)，1000 r/min離心1 min，判讀、記錄反應(yīng)結(jié)果。1.4.2 試管法 微量板法的樣本需用試管法反復(fù)測(cè)，試管法具體步驟：將每支試管標(biāo)記后加抗Ｄ試劑一滴。然后加３％～５％待檢紅細(xì)胞懸液一滴，室溫放置5 min。以1000 r/min離心15 s后觀察結(jié)果。每批試驗(yàn)均要三管對(duì)照，即陽(yáng)性對(duì)照一管。細(xì)胞陰性對(duì)照一管，血清陰性對(duì)照一管。

1.5 應(yīng)用微量球蛋白試驗(yàn)方法和試管法檢測(cè)均陰性標(biāo)本，需進(jìn)一步做抗人球蛋白試驗(yàn)以排除Du型。抗人球蛋白試驗(yàn)方法：向試管內(nèi)加抗D血清3%~5%的受檢者細(xì)胞各一滴，37℃水浴30 min用生理鹽水洗滌3次，末次洗滌將上清傾干后，每管內(nèi)各加抗人球蛋白試劑一滴，振搖懸浮后，離心看結(jié)果。如仍為陰性結(jié)果，即判定為受檢者為RH陰性。Rh陰性樣本確定后，需要確定后，需進(jìn)一步鑒定E、e、C、c。

2 結(jié)果與討論

檢測(cè)的79602名無(wú)償獻(xiàn)血者，Rh抗原陽(yáng)性79 418人，占99.77%。RhD抗原陰性184人，占0.23%?；痉蟁h陰性0.2%~0.5%的占有比例。但由于在此79 602名無(wú)償獻(xiàn)血者中，有很多獻(xiàn)血者都是多次獻(xiàn)血，致使Rh陰性血占比例相對(duì)較低，(即在0.2%~0.5%的下限)。詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表1。

沒(méi)有檢出Du型。 對(duì)184例Rh陰性樣本E.e.C.c抗原檢測(cè)結(jié)果：ccdee有93人，ccdE有4人，CcdE有3人，Ccdee有57人，CdE有1人，Cdee有6人，ccdEc有17人，CcdEe有3人，可以看出：ccdee此抗原類型占有比例大約占50.5%^[1]。

Rh陰性在ABO血型系統(tǒng)中的分布：在184例RH陰性無(wú)償獻(xiàn)血者中，A型43例占23.4%，B型為65例占35.3%，O型69人占32.6%，AB型16人占8.7%。與大慶地區(qū)群ABO抗原頻率相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義^[2]。

自2002年7月1日至2005年6月30日，大慶地區(qū)共采集Rh陰性血124人次（其中大部分為一次性300~400 ml），約37.2 L，約占采血總量的0.18，低于Rh陰性血源所占的0.23%，可以說(shuō)明大慶地區(qū)現(xiàn)有Rh血緣基本滿足大慶地區(qū)Rh陰性用血的需要，各型供求比例平衡。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 趙桐茂.人類血型遺傳學(xué).北京科學(xué)出版社，1998:231-233.

［2］ 王來(lái)法.大慶地區(qū)ABO血型分布黑龍江省第二屆輸血專業(yè)學(xué)術(shù)交流匯匯編，1993:69.