[摘要] 目的 探討AnuA在SLE患者中的應(yīng)用價(jià)值。方法 采用免疫印跡法檢測(cè)SLE患者、其他結(jié)締組織病患者及正常人血清中抗AnuA抗體、抗dsDNA抗體、抗Sm抗體。結(jié)果 AnuA主要見(jiàn)于SLE、SSC、MCTD等風(fēng)濕性疾病患者血清中，在SLE患者中AnuA的陽(yáng)性率是61.8%，抗dsDNA抗體的陽(yáng)性率是42.1%，抗Sm抗體的陽(yáng)性率是27.6%。結(jié)論 AnuA抗體的檢測(cè)有助于SLE的早期診斷。

[關(guān)鍵詞] 抗核小體抗體; 系統(tǒng)性紅斑狼瘡; 免疫印跡法

[中圖分類(lèi)號(hào)] R593.24 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701(2009)23-23-02

Application of Antinucleosome Antibody in Systemic Lupus Erythematosus

ZHANG Dingding ZHONG Dongmei

The People’s Hospital of Sichuan Province，Chengdu，Sichuan 610072，China

[Abstract] ObjectiveTo investigate the clinical value of the determination of antinucleosome antibody in systemic lupus erythematosus(SLE). MethodsAn immunoblotting assay was utilized to detect AnuA，ds-DNA and Sm antibody in the serum of patients with SLE，other connective tissue diseases and healthy control. ResultsAnuA was mainly found in the serum of patients with SLE，SSC and MCTD. The positive rate of AnuA with SLE was 61.8%，ds-DNA 42.1%，and Sm antibody 27.6%. ConclusionThe detection of antinucleosome antibody may be helpful in the early diagnosis of SLE.

[Key Words]Antinucleosome antibody; Systemic lupus Erythematosus; Immunoblotting assay

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus，SLE)是一種累及多系統(tǒng)、多器官、病程反復(fù)遷延的自身免疫性疾病，其主要特征是體內(nèi)產(chǎn)生抗多種自身抗原的自身抗體。近年研究發(fā)現(xiàn)抗核小體抗體(Antinucleosome antibody，AnuA)與SLE的病理變化有關(guān)[1-3]，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)72例SLE患者AnuA、抗dsDNA抗體、抗Sm抗體等自身抗體的檢測(cè)，旨在探討AnuA的檢測(cè)在SLE患者中的應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

收集2005年1月～2008年6月我院就診的門(mén)診及住院SLE患者76例，其中男15例，女61例。年齡8～69歲，平均年齡36.8歲。其他結(jié)締組織病患者79例[包括類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)35例、系統(tǒng)性硬化癥(SSC)13例、皮肌炎(DM)12例、干燥綜合征(SS)11例、混合性結(jié)締組織病(MCTD)8例]，其中男22例，女47例，年齡9～71歲，平均年齡38.2歲。以上病例均符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)。健康對(duì)照組系健康體檢者71名(均無(wú)結(jié)締組織病史)，其中男24名，女47名，年齡12～70歲，平均年齡38.9歲?；颊呓M與對(duì)照組在性別、年齡上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 受試者取清晨空腹靜脈血3mL(避免高脂和溶血標(biāo)本)。3000rpm離心10min，收集上層血清，-20℃保存待測(cè)。

1.2.2 方法 AnuA、抗dsDNA抗體、抗Sm抗體均采用德國(guó)歐蒙公司提供的抗核抗體譜(IgG)免疫印跡法檢測(cè)。隨批行質(zhì)控。操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件及使用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 各組抗dsDNA、抗Sm抗體、抗AnuA抗體檢測(cè)結(jié)果

AnuA主要見(jiàn)于SLE、SSC、MCTD等風(fēng)濕性疾病患者血清中。見(jiàn)表1。

2.2 SLE患者抗dsDNA、抗Sm抗體、抗AnuA抗體的陽(yáng)性檢出率

76例SLE患者血清中AnuA陽(yáng)性占47例，抗dsDNA陽(yáng)性占32例，抗Sm抗體陽(yáng)性占21例，陽(yáng)性率分別為61.8%、42.1%、27.6%。AnuA的陽(yáng)性率分別與其他兩種抗體相比，差異均有顯著性(P<0.05)。

2.3 抗dsDNA、抗Sm抗體陰性時(shí)抗AnuA抗體的檢出情況

在抗dsDNA及抗Sm均為陰性的17例病例中檢測(cè)出AnuA陽(yáng)性8例，檢出率為47.1%。

3 討論

核小體是構(gòu)成染色質(zhì)的基本單位，每個(gè)核小體是由180～200個(gè)bp繞八聚體核心組蛋白構(gòu)成的復(fù)合物，抗核小體抗體是細(xì)胞凋亡過(guò)程中細(xì)胞核內(nèi)裂解釋放的染色質(zhì)，由雙鏈DNA分子環(huán)繞組蛋白組成的核心構(gòu)成。核小體作為免疫原，可被抗原提呈細(xì)胞如單核細(xì)胞提呈給CD4+Th2細(xì)胞，Th2細(xì)胞增殖活化，激活B細(xì)胞產(chǎn)生AnuA，形成抗原抗體復(fù)合物參與SLE的發(fā)病[4]。核小體的釋放可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生一系列自身抗體，早期主要出現(xiàn)AnuA，隨后逐漸產(chǎn)生抗dsDNA抗體。探明抗體的產(chǎn)生對(duì)SLE病因?qū)W研究意義深遠(yuǎn)。

迄今，臨床SLE特異性抗體檢測(cè)項(xiàng)目主要為抗雙鏈DNA(抗dsDNA)抗體和抗Sm抗體，但抗dsDNA抗體和抗Sm抗體的敏感性較低，在SLE早期不易發(fā)現(xiàn)。本實(shí)驗(yàn)顯示，AnuA主要見(jiàn)于SLE、SSC、MCTD等風(fēng)濕性疾病患者，AnuA在SLE患者中的陽(yáng)性率顯著高于其他風(fēng)濕性疾病，同時(shí)在SLE患者中AnuA的陽(yáng)性率明顯高于抗dsDNA抗體和抗Sm抗體，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]，AnuA在SLE中不僅較早出現(xiàn)，而且敏感性較高，因此，AnuA不失為一SLE的早期診斷指標(biāo)。

本實(shí)驗(yàn)還提示，即使在抗dsDNA抗體和抗Sm抗體陰性的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清中仍可檢出AnuA，其檢出率為47.1%?？筪sDNA抗體和抗Sm抗體是診斷SLE較特異的自身抗體，AnuA 成為SLE早期診斷的新的標(biāo)志性抗體[6]，因而，在血清中檢測(cè)AnuA有助于SLE的早期發(fā)現(xiàn)。鑒于本研究例數(shù)較少，對(duì)AnuA在非SLE組中及與SLE活動(dòng)性的關(guān)系等的研究還有待進(jìn)一步深入。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Gómez-Puerta JA，Burlingame RW，Cervera R. Anti-chromatin(anti- nucleosome)antibodies:diagnostic and clinical value[J]. Autoimmun Rev，2008，7(8):606-611.

[2] Quattrocchi P，Barrile A，Bonanno D，et al. The role of anti-nucleosome antibodies in systemic lupus erythematosus. Results of a study of patients with systemic lupus erythematosus and other connective tissue diseases[J].Reumatismo 2005，57(2):109-113.

[3] Muller S，Dieker J，Tincani A，et al. Pathogenic anti-nucleosome antibodies[J]. Lupus，2008，17(5):431-436.

[4] Gutierrez AO，Koutouzov S，Mota RM，et al. Diagnostic value of anti-nucleosome antibodies in the assessment of disease activity of systemic lupus erythematosus:a prospective study comparing anti-nucleosome with anti-dsDNA antibodies[J]. J Rheumatol，2006，33(8):1538-1544.

[5] Bossuyt X，F(xiàn)rans J，Hendrickx A，et al. Detection of anti-nucleosome antibodies in a routine clinical laboratory setting[J]. Clin Exp Heumatol，2008，26(2):387-388.

[6] Decker P. Nucleosome autoantibodies[J]. Clin Chim Acta，2006，4(2):48-60.

(收稿日期:2009-04-21)