江國華　依巴代提　阿布力孜　盛　磊

（1.新疆醫(yī)科大學(xué) 藥理教研室；2.新疆醫(yī)科大學(xué) 科研中心，新疆 烏魯木齊 830054）お

摘 要：目的：探討維吾爾藥羅勒醇提物在體外對環(huán)氧化酶的影響，從而研究羅勒抗血栓的作用機(jī)制。方法：測定人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞6-keto-PGF1α、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞PGE2 的含量。結(jié)果：羅勒對環(huán)氧化酶-1（COX-1）和環(huán)氧化酶-2（COX-2）都有不同程度的抑制作用。在劑量相同時(shí)，羅勒醇提物對COX-2的抑制率大于COX-1。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)從底物的角度證實(shí)了羅勒醇提物對COX-1 和COX-2 的作用,抗血栓部分機(jī)理可能是由于抑制環(huán)氧化酶而介導(dǎo)的。

關(guān)鍵詞：羅勒；環(huán)氧化酶-1；環(huán)氧化酶-2；抗血栓

中圖分類號：R973文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1673-2197（2009）01-0037-01オ

羅勒是維吾爾醫(yī)應(yīng)用歷史悠久的常用藥材之一,是唇形科羅勒屬植物Ocimum basilicum L^[1，2]。主要成分：全草，羅勒的化學(xué)成分主要為揮發(fā)油、黃酮、香豆素、甾體化合物等,其中揮發(fā)油的含量最大^[3]。本研究是通過羅勒在體外對環(huán)氧化酶（COX-1和COX-2）活性的影響來探討羅勒抗血栓的作用機(jī)制，給臨床選藥組方提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料

CO₂培養(yǎng)箱,全自動(dòng)酶標(biāo)儀,生物顯微鏡,超凈操作臺。

羅勒，阿司匹林，吲哚美辛；脂多糖(LPS)、花生四烯酸(AA);DMEM干粉；RPMI1640；小牛血清（四季青）；MTT、胰蛋白酶；6-keto-PGF1α和PGE2ELISA試劑盒。

1.2 方法

1.2.1 在體外對COX-1的影響

按文獻(xiàn)方法制備內(nèi)皮細(xì)胞COX-2模型^[4]。將培養(yǎng)至第4代的內(nèi)皮細(xì)胞接種于24孔培養(yǎng)板中生長融合，再加入羅勒提取液,使其終濃度分別為0.1mg/mL、1mg/mL、10mg/mL,或非選擇性環(huán)氧化酶抑制劑陽性對照阿司匹林(終濃度10-6mol/L)、COX-2抑制劑陽性對照吲哚美辛(終濃度10-7mol/L)或陰性對照溶媒。37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h,取出每孔加入底物花生四烯酸,使其終濃度為10μmol/L,37℃繼續(xù)培養(yǎng)20min。收集上清液,-20℃凍存待測^[5]，用ELISA法測定樣品中6-keto-PGF1α。

1.2.2 在體外對COX-2的影響

按文獻(xiàn)方法制備巨噬細(xì)胞COX-2模型^[6]，將細(xì)胞接種于24孔板中生長融合，再加入一定濃度的羅勒提取液,終濃度分別為0.1mg/mL、1mg/mL、10mg/mL，或陽性對照品阿司匹林(終濃度10-6mol/L)、吲哚美辛(終濃度10-7mol/L)或溶媒。37℃、5%CO₂培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h,取出,每孔加入底物花生四烯酸(終濃度10μmol/L),37℃繼續(xù)培養(yǎng)20min。收集上清液,-20℃凍存待測。用ELISA法測定樣品中的PGE2。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件處理,所有結(jié)果用±s表示,采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和方差分析。

2 結(jié)果

羅勒在體外對環(huán)氧化酶的影響，羅勒對環(huán)氧化酶-1（COX-1）和環(huán)氧化酶-2（COX-2）都有不同程度的抑制作用，另外,隨著劑量的增加抑制率也增大,存在一定的量效關(guān)系。結(jié)果見表1。

注：與DMSO比較:*P < 0.05，**P<0.01。

3 討論

環(huán)氧化酶(COX) 是花生四烯酸合成前列腺素過程中一個(gè)重要的限速酶,其催化的產(chǎn)物前列腺素H2是各種前列腺素的共同中間體,在各組織和器官中前列腺素H2 被不同的前列腺素合成酶作用生成各種前列腺素,以自分泌或旁分泌方式和靶細(xì)胞的前列腺素受體結(jié)合發(fā)揮各種各樣的生理功能^{[7］ 。隨著COX-2 的發(fā)現(xiàn),現(xiàn)在普遍認(rèn)為COX-1負(fù)責(zé)維持身體的正常機(jī)能,而COX-2 則是一種誘導(dǎo)酶,參與炎癥反應(yīng),抑制COX-2 可以發(fā)揮抗血栓作用[8] 。本實(shí)驗(yàn)表明,羅勒在3 個(gè)劑量都對COX-2 有抑制作用,并隨劑量的增加而作用增強(qiáng),抑制環(huán)氧化酶可能是其抗血栓的作用機(jī)制之一。}

參考文獻(xiàn)：

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［8］ Marx J . Anti-inflammatories inhibit cancer growth but how［J］. Science，2001， 291 (5504)： 581.

（責(zé)任編輯：姜付平）