王姣杰　李建斌

[摘要] 目的：探討手工濃縮血小板的細(xì)菌污染情況。方法：采用BacT /ALERT細(xì)菌培養(yǎng)儀對(duì)22℃振蕩保存24 h后的手工血小板進(jìn)行細(xì)菌篩檢，如果為陽(yáng)性，再進(jìn)一步對(duì)菌種進(jìn)行分析。結(jié)果：隨機(jī)篩檢了2 860袋手工血小板，陽(yáng)性結(jié)果2例，1例為金黃色葡萄球菌，1例為表皮葡萄球菌，陽(yáng)性率為0.07％。結(jié)論：手工血小板具有資源豐富、成本低廉、療效肯定等優(yōu)點(diǎn)，與此同時(shí)細(xì)菌污染問(wèn)題也應(yīng)被重視。

[關(guān)鍵詞] 手工血小板；細(xì)菌污染；篩檢

[中圖分類號(hào)]R378 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-7210（2009）01（a）-142-01

手工濃縮血小板具有資源豐富、成本低廉、療效肯定等優(yōu)點(diǎn)，已被臨床醫(yī)生廣泛接受。在歐美國(guó)家，手工血小板的臨床使用占所有血小板種類的40%～50%[1]。在過(guò)去幾十年人們較多關(guān)注輸血相關(guān)病毒性感染，如HIV、HBV及HCV等，因此，除加強(qiáng)獻(xiàn)血者病毒篩選外，還研究出一系列針對(duì)病毒滅活的方法，通過(guò)嚴(yán)格執(zhí)行對(duì)血液的病毒篩查以及對(duì)血液制品采取病毒滅活措施，大大減低了輸血引起的病毒感染。據(jù)估計(jì)通過(guò)輸血感染HIV的發(fā)病率少于百萬(wàn)分之一，而丙型肝炎也少于十萬(wàn)分之一，然而通過(guò)血小板輸注的細(xì)菌污染可能高達(dá)千分之一，血小板的細(xì)菌污染比病毒污染更加嚴(yán)重，手工血小板更甚。為了解手工血小板細(xì)菌污染情況，2005～2008年我血液中心隨機(jī)抽檢了2 860袋（5 720 U）的手工血小板，現(xiàn)將具體情況作一詳細(xì)報(bào)道：

1材料與方法

1.1試劑

BacT/ALERT BPA(需氧培養(yǎng)液) ；BacT/ALERTBPN (厭氧培養(yǎng)液)；GPI(革蘭陽(yáng)性菌鑒定卡)；GNI (革蘭陰性菌鑒定卡)均由法國(guó) Biom erieux公司生產(chǎn)。

1.2 儀器

BaCT /ALERT 3D 培養(yǎng)箱和VITEK2Ⅱ全自動(dòng)微生物鑒定儀均購(gòu)自法國(guó)Biom erieux公司。

1.3 血小板來(lái)源

取自河南省紅十字血液中心。

1.4 細(xì)菌污染檢測(cè)方法

樣品抽?。撼槿〉?天22℃振蕩保存的血小板，將血小板混勻，取8 ml置于專門(mén)設(shè)計(jì)的附加小袋中，將附加小袋熱合取下。

細(xì)菌篩檢：在無(wú)菌室(臺(tái))中接種樣品, 從附加小袋中各抽取樣品4 ml,分別接種于BacT/ALERT BPA 和BPN 培養(yǎng)液中。接種后的培養(yǎng)液置BacT/ALERT 3D 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)期為12～24 h，總培養(yǎng)期為7 d。該培養(yǎng)箱采用比色計(jì)傳感器和反射檢測(cè)培養(yǎng)液中的CO2的產(chǎn)生和存在狀況,如果試驗(yàn)樣本中存在微生物,生物體在培養(yǎng)液中代謝酶解物,產(chǎn)生CO2，放置在培養(yǎng)瓶底部的透氣傳感器的顏色從藍(lán)綠色變成黃色。系統(tǒng)會(huì)發(fā)出警報(bào),提示培養(yǎng)瓶中有細(xì)菌生長(zhǎng)。用全自動(dòng)微生物鑒定儀對(duì)陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行菌種鑒定。

2 結(jié)果

檢測(cè)了2 860袋的手工濃縮血小板，陽(yáng)性結(jié)果2例，1例為金黃色葡萄球菌，1例為表皮葡萄球菌，陽(yáng)性率為0.07％。

3 討論

臨床輸血已有50多年的歷史，并且已成為醫(yī)學(xué)的一個(gè)獨(dú)立分支。盡管臨床輸血治療為患者帶來(lái)的益處已被廣泛接受，與之相關(guān)的不利因素也逐漸被認(rèn)識(shí)并日趨受到重視。自從1987年確認(rèn)輸血感染HIV/AIDS以來(lái)，人們研究出一系列針對(duì)病毒傳播疾病的措施及方法，這些措施及方法的應(yīng)用大大減低了輸血引起的病毒感染。在過(guò)去幾十年，人們較多關(guān)注輸血相關(guān)病毒性感染，而對(duì)細(xì)菌污染問(wèn)題未得到足夠重視。任何血液制品都可能被細(xì)菌污染，但血小板尤其容易，因?yàn)檠“鍨榱司S持生理功能須貯存于室溫，約22℃，同時(shí)血小板儲(chǔ)存時(shí)不斷搖動(dòng)，血小板中豐富的營(yíng)養(yǎng)也利于細(xì)菌生長(zhǎng)，一旦被污染，細(xì)菌就會(huì)很快在其中繁殖。很早以前人們即認(rèn)識(shí)到血小板的細(xì)菌污染是導(dǎo)致輸血相關(guān)感染的原因之一，但是血小板的細(xì)菌污染問(wèn)題一直處于輸血傳播HIV和HCV的陰影之下，未得到足夠重視。多中心研究[2-4]血小板細(xì)菌污染率1/2 000~1/1 000。血小板細(xì)菌污染是輸血相關(guān)發(fā)病率及死亡率一個(gè)重要因素之一。

我們篩選了2 860袋手工濃縮血小板，陽(yáng)性率為0.07％，與歐美等[2,3]報(bào)道結(jié)果基本相符。污染菌種的鑒定結(jié)果金黃色葡萄菌和表皮葡萄球菌。金黃色葡萄球菌是引起臨床感染的最常見(jiàn)的細(xì)菌。播散入血后可引起深部組織的化膿性感染、敗血癥、心內(nèi)膜炎等全身感染。表皮葡萄球菌是存在于人體皮膚上的正常棲居菌, 它們?cè)?～6℃不生長(zhǎng),但卻可以殘存,并在血小板貯存的20～24℃條件下迅速繁殖，常污染經(jīng)皮膚采集的標(biāo)本。血小板的細(xì)菌污染比濃縮紅細(xì)胞更多，且有更大致命性、更高致死率，因?yàn)樾枰斪⒀“宓娜烁撊酰@些患者多為危重患者，如腫瘤、移植、創(chuàng)傷等患者[4]。手工血小板具有資源豐富、成本低廉、療效肯定等優(yōu)點(diǎn)，已被臨床醫(yī)生廣泛接受，與此同時(shí)細(xì)菌污染問(wèn)題也應(yīng)被重視。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Sullivan MT, Cotten R, Read EJ, et al. Blood collection and transfusion in the United States in 2001[J]. Transfusion,2007,47(3):385-394.

[2]Palavecino EL, Yomtovian RA, Jacobs MR. Detecting bacterial contamination in platelet products[J]. Clin Lab,2006,52(9-10):443-456.

[3]Silva MA, Gregory KR, Carr Greer MA, et al. Summary of the AABB inter organizational task force on bacterial contamination of platelets: fall 2004 impact survey[J].Transfusion,2006,46:636-641.

[4]Brecher ME, Hay SN. Bacterial contamination of blood components[J]. Clin Microbiol Rev,2005,18(1):195-204.

(收稿日期：2008-10-06)