中圖分類(lèi)號(hào):S858.325.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):1007-273X(2008)07-0029-02
鴨病毒性肝炎是雛鴨的一種傳播迅速的急性傳染病。此病病程短,死亡率高。一年四季都可發(fā)生,但多數(shù)在冬季或早春暴發(fā)。
1 發(fā)病情況及臨床癥狀
2008年2月28日,山東濱州沾化縣一肉鴨養(yǎng)殖戶(hù)帶12只7日齡病死鴨到我院獸醫(yī)診斷中心就診。據(jù)養(yǎng)鴨戶(hù)介紹,其飼養(yǎng)的這批肉雛鴨共2 100只,進(jìn)雛時(shí)小鴨無(wú)任何臨床癥狀,表現(xiàn)非常健康。養(yǎng)鴨戶(hù)從進(jìn)雛開(kāi)始在飲水中加入氟哌酸、多維電解質(zhì)和葡萄糖。連用3d。6日齡時(shí)有部分肉雛鴨沒(méi)有任何癥狀而突然死亡。部分病鴨離群,縮頭拱背,行動(dòng)呆滯,不久即伏地不能走動(dòng),食欲廢絕,眼半閉呈昏迷狀態(tài)。個(gè)別鴨子有腹瀉癥狀,隨著病程發(fā)展,出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào),雙腳呈痙攣性運(yùn)動(dòng),頭向后仰,似游泳狀,翅膀下垂,張口伸頸呼吸,死前頭頸扭曲于背上,腿伸直向后張開(kāi),呈角弓反張姿勢(shì)。
2 剖檢變化
肝臟腫大、容易撕裂,質(zhì)脆,呈土黃色、褐黃色、黃白色,肝表面有大小不等的深紫色出血點(diǎn)、斑狀條紋或壞死灶;膽囊腫大,膽汁稀薄:脾臟、腎臟也有不同程度腫大、充血、出血;胰臟充血成粉紅色,心肌質(zhì)軟呈熟肉樣;腦充血、水腫。其他器官無(wú)明顯變化。
3 實(shí)驗(yàn)室診斷
3.1 細(xì)菌分離
無(wú)菌采集病死鴨肝、脾臟組織,分別接種麥康凱瓊脂和鮮血瓊脂平板上,置37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h。
診斷結(jié)果:在麥康凱瓊脂和鮮血瓊脂平皿上均無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng),可排除傳染性漿膜炎等細(xì)菌病繼發(fā)感染。
3.2 病毒分離
3.2.1 病料采集 無(wú)菌取患病雛鴨典型肝臟病料放置于滅菌的玻璃瓶。凍結(jié)保存作為病毒分離材料。
3.2.2 病料處理 取病鴨肝組織,用組織研磨器磨碎后,用滅菌的生理鹽水制成1:4的懸液后反復(fù)凍融3次。3000r/min離心20min,取上清液,加人青、鏈霉素各2 000IU/mL,4℃過(guò)夜備用。
3.2.3 胚胎接種 將病毒分離材料接種11~13日齡易感鴨胚或10~11日齡雞胚6-8枚,每胚尿囊腔接種0.1-0.2mL。鴨胚一般48~96h后死亡。雞胚死亡差異較大,較不穩(wěn)定,通常在接種后96~120h死亡。胚胎特征性病變是胚體生長(zhǎng)停滯,全身皮膚和皮下充血、出血,腹部和股部皮下發(fā)生水腫,尿囊液增多和變?yōu)榈G色。肝臟腫大,呈淡綠色或紅黃色。表面有淡黃色的壞死灶。死亡時(shí)間較長(zhǎng)的胚胎中,尿囊液明顯變綠,肝臟病變和胚胎發(fā)育受阻更加明顯。雞胚在接種后60、72、96、120h分別死亡2只、2只、1只、3只,其他一直到21日齡還存活,剖檢死亡胚體,觀察病變:尿囊液少而清亮,呈淡綠色;胚體頸部水腫、輕微出血,較脆,稍碰即碎;肝臟呈墨綠色,有點(diǎn)狀壞死灶。與對(duì)照組相比。21日齡存活雞胚普遍呈現(xiàn)典型侏儒胚癥狀。
3.2.4 易感雛鴨接種 用病毒分離材料或鴨胚或雞胚分離毒株的尿囊液接種5~10只,1-7日齡易感雛鴨每只皮下或肌肉注射0.2~0.5mL。接種24h后開(kāi)始發(fā)病和死亡,并具有典型臨床癥狀和病理變化。
3.2.5 細(xì)胞培養(yǎng) 在單層鴨胚肝細(xì)胞接種病毒分離材料,在室溫吸附15min,加入細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)液于37%溫箱培養(yǎng)觀察。有細(xì)胞變圓等病變。
3.3 血清學(xué)診斷方法
3.3.1 保護(hù)試驗(yàn) 用已知抗鴨病毒性肝炎高免血清或抗鴨病毒性肝炎特異蛋黃抗體注射5只1~7日齡易感健康的雛鴨,每只雛鴨皮下注射1-2mL,12~24h后用≥103 LD50的病毒分離物或尿囊液皮下或肌肉注射攻毒。未注射抗血清的5只對(duì)照組雛鴨同時(shí)攻毒。經(jīng)7d飼養(yǎng)觀察,結(jié)果注射特異抗體組的雛鴨有80%~100%存活,而對(duì)照組雛鴨有80%~100%死亡。由此,可判定分離毒株為鴨肝炎病毒。
3.3.2 被動(dòng)免疫試 驗(yàn)取經(jīng)鴨肝炎病毒免疫種鴨的1~5日齡雛鴨5只(含母源抗體)和5日齡易感雛鴨10只。進(jìn)行LD50的病毒分離物攻毒。經(jīng)7d飼養(yǎng)觀察,結(jié)果免疫組有80%~100%雛鴨存活,而對(duì)照組有80%~100%死亡,即可判定分離毒株為鴨肝炎病毒。
3.4 病毒血凝效價(jià)測(cè)定
按常規(guī)微量血凝試驗(yàn)方法測(cè)定病毒的血凝效價(jià)。
3.5 病例復(fù)制試驗(yàn)
取48h后死亡的雞胚尿囊液,經(jīng)生理鹽水10倍稀釋后,用一次性微孔濾除菌,置于4℃冰箱備用。取6日齡雛鴨20只,分為兩組,試驗(yàn)組15只,頸部皮下注射上述稀釋液0.1mL/只:對(duì)照組5只,頸部注射滅菌生理鹽水0.1mL/只。
診斷結(jié)果:接種稀釋尿囊液的雛鴨在第3天發(fā)病死亡7只,第4天死亡5只,第5天死亡3只,對(duì)照組無(wú)一死亡。死亡前病鴨主要表現(xiàn)為:突然發(fā)病,兩腿向上亂蹬,呈游泳狀,頭部向后仰彎曲到背部,呈背脖狀,表現(xiàn)為明顯的角弓反張狀態(tài);高聲嗚叫,叫聲凄慘。剖檢死亡雛鴨,其肝臟呈黃色腫大,有明顯的出血斑,脾臟、腎臟也有不同程度腫大、充血、出血;胰臟充血成粉紅色,心肌質(zhì)軟呈熟肉樣;其他無(wú)明顯病變。對(duì)照組健活。
4 鑒別診斷
4.1 與鴨瘟鑒別
鴨瘟是由鴨瘟病毒引起鴨的一種高死亡率的急性傳染病。雖然各種日齡的鴨均可感染發(fā)病,但3周齡以?xún)?nèi)的雛鴨較少發(fā)生死亡,而病毒性鴨肝炎對(duì)1~2周齡易感雛鴨有極高的發(fā)病率和致死率,超過(guò)3周齡雛鴨不發(fā)病,這在流行病學(xué)上是重要鑒別之一。從患鴨瘟的鴨食道、泄殖腔和眼瞼黏膜呈出血性潰瘍和假膜為主要特征性病變,與鴨病毒性肝炎完全不同,可作為重要鑒別之一。用抗鴨瘟病毒高免血清和抗鴨病毒性肝炎高免血清,在易感1-7日齡雛鴨作交叉中和試驗(yàn),或交叉保護(hù)試驗(yàn),可作為重要鑒別之二。必要時(shí)用鴨胚和雞胚作病毒分離檢驗(yàn)。
4.2 與鴨巴氏桿菌病鑒別
鴨巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌引起的急性敗血性傳染病,發(fā)病率和死亡率很高。青年鴨、成年鴨比雛鴨更易感,尤其是3周齡以?xún)?nèi)的雛鴨很少發(fā)生,這在流行病學(xué)上是重要鑒別之一?;及褪蠗U菌病的鴨肝臟腫大,有灰白色針尖大的壞死灶和心冠溝脂肪組織有出血斑,心包積液,十二指腸黏膜嚴(yán)重出血等特征性病變,與鴨病毒性肝炎完全不同,可作為重要鑒別之二。肝臟觸片,心包液涂片,革蘭氏或美藍(lán)染色見(jiàn)有許多兩極染色的卵圓形小桿菌。用肝臟和心包液接種鮮血培養(yǎng)基能分離到巴氏桿菌,而鴨病毒性肝炎均為陰性,可作為重要鑒別之三。
5 防治措施
(1)為預(yù)防該病發(fā)生,平時(shí)應(yīng)嚴(yán)格孵化室、鴨舍及周?chē)h(huán)境的衛(wèi)生消毒。
(2)1~3日齡雛鴨,每只皮下注射山東綠都生物科技有限公司生產(chǎn)的雛鴨病毒性肝炎精制抗體0.5mL。
(3)對(duì)發(fā)病鴨立即進(jìn)行隔離和消毒。肌肉注射高免血清,每只注射0.5mL。在飲水中加入山東綠都安特動(dòng)物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的電解多維。
(4)中草藥防治法:板蘭根、黃芩、蒲公英、地丁各100g,茵陳、地骨皮、夏枯葉各120g,連翹80g,柴胡、升麻各70g。蒼術(shù)、白術(shù)各40g,共同粉碎后按每只鴨每日3g的量加入飼料中飼喂。連用5~7d。