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        塔拉豆粉的食用安全性評價研究

        2008-12-29 00:00:00張雪輝
        云南中醫(yī)中藥雜志 2008年5期


          摘要:目的:評價云南引進的珍貴樹種——塔拉豆粉的食用安全性,為新資源食品開發(fā)提供基礎數(shù)據(jù)。方法:按GBl5193—1994《食品安全性毒理學評價程序和方法》進行,包括:急性毒性試驗、Ames試驗、小鼠骨髓微核試驗、小鼠精子畸形試驗、30d喂養(yǎng)試驗和傳統(tǒng)致畸試驗。結(jié)果:雌雄大、小鼠急性經(jīng)口LD>10g/kg.bw,屬無毒級。Ames試驗、小鼠骨髓微核試驗和精子畸形三項遺傳毒性試驗結(jié)果均為陰性,30d喂養(yǎng)試驗未顯示明顯毒性,傳統(tǒng)致畸結(jié)果陰性。結(jié)論:塔拉豆粉經(jīng)食品毒理學安全性評價認為是安全的,可將其運用于保健食品的開發(fā)研究中。
          關鍵詞:塔拉豆粉;安全性;毒理學
          中圖分類號:R965.3
          文獻標識碼:A
          文章編號:1007—2349(2008)05—0047—03
          
          塔拉主要生長于南美洲西北部,盛產(chǎn)于秘魯,當?shù)胤Q塔拉(Tara)。塔拉又名刺云實(Caesalp inia sp inosa Kunt ie)是我國首次從南美洲引進并栽培成功的珍貴經(jīng)濟樹種,現(xiàn)引種栽培地點分布在云南省,栽培面積已達266余hm。引種塔拉的干燥莢果的果皮(莢殼),除可制取沒食子酸,具有較高的經(jīng)濟價值外,還可供藥用,其功效成分包括:清熱解毒、抗菌消炎、清肺止咳、祛痰平喘,可用于治療急慢性咽炎、扁桃體炎、上呼吸道感染引起的咳喘等,療效確切,有很好的開發(fā)利用價值。為了進一步探索將其開發(fā)利用于保健食品,本項目對塔拉豆粉的安全性進行了系統(tǒng)毒理學評價。
          
          1、材料與方法
          
          1.1材料 塔拉豆粉,淡黃色的粉末,由昆明醫(yī)學院重點實驗室提供。中國科學院昆明動物研究所實驗動物開發(fā)中心提供昆明系健康成年小白鼠,批準號:云動管字N00000797,SD大鼠來源于云南省天然藥物藥理重點實驗室,動物質(zhì)量合格證號:N00001120;菌株:選用組氨酸營養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門菌,共4株,即TA97a、TA98、TA100、TA102,經(jīng)生物學鑒定合格;實驗儀器:電子天平,全自動血液分析儀,全自動生化分析儀,顯微鏡,恒溫水浴箱。
          
          1.2方法
          1.2.1急性毒性試驗 昆明種小白鼠及SD大鼠各20只,隨機分成2組,雌雄各半,取樣品配成最高劑量10g/kg·bw,采用1次最大劑量灌胃法,經(jīng)口灌胃。
          1.2.2骨髓微核試驗 昆明種小白鼠50只,隨機分成5組,每組10只,雌雄各半,設陰性對照組、陽性對照組(環(huán)磷酰胺35mg/kg·bw腹腔注射)及3個劑量組,受試劑量分別為1.87g,3.75g,7.50g/kg·BW,間隔24h灌胃2次,末次給藥后24h頸椎脫位處死,取出股骨,常規(guī)制骨髓涂片,用Giemsa染色鏡檢。
          1.2.3精子畸形試驗 試驗動物分為5組;陰性對照組,環(huán)磷酰胺陽性對照組。塔拉豆粉低,中,高劑量組,每組有效動物不低于5只。劑量為1.25g,2.50g,5.00g/kg·bW,每天CU+jO6PRhE5B2IX5YmJiHIz5hzlLBM4D7D6zD1puyhQ=清晨空腹灌胃,連續(xù)灌胃5d,于首次給受試物起,喂養(yǎng)35d。喂養(yǎng)結(jié)束后頸椎脫臼處死小鼠,取雙側(cè)副睪中精子涂片,染色后鏡檢精子細胞數(shù),計數(shù)畸形細胞數(shù)并分類,結(jié)果用γ2檢驗進行比較。
          1.2.4 Ames試驗 設5000、1000、200、40μg/皿4個劑量組,采用摻入法,加S或不加S進行試驗。
          1.2.5 30d喂養(yǎng)試驗 SD斷乳大鼠80只,隨機分成4組,每組20只,雌雄各半,設1個陰性對照組及3個試驗劑量組(2.5、5.0、10.0g/kg),連續(xù)喂養(yǎng)30d。所有動物每7d稱重1次。試驗結(jié)束,取血檢測各項生化指標,取肝、腎、睪丸組織作病理學檢查。
          1.2.6傳統(tǒng)致畸試驗 SD純系健康成年大鼠120只。未交配過的雌性大鼠80只,雄性40只。大鼠按1:1同籠后,于次日晨陰道涂片,確定受孕大鼠及受孕日期,隨機分配至4個受試組。于受孕后第7~16d,自由進食各組配方粉狀飼料,定期稱體重。第20d乙醚麻醉處死,剖腹取出子宮稱重,檢查胚胎著床數(shù)、吸收胎、早死胎、遲死胎及活胎數(shù),對存活胎鼠進行外觀畸形,性別檢查。測量每只活胎鼠的體重,身長及胎盤重,并將每窩活胎鼠1/2制作骨骼標本及骨骼檢查,另1/2固定后進行內(nèi)臟檢查。
          1.2.7數(shù)據(jù)分析與處理 試驗結(jié)果均采用SPSS軟件進行檢驗。
          
          2、結(jié)果
          
          2.1急性毒性試驗 大、小鼠動物試驗期間無死亡,LD50>10g/kg·bw。按急性毒性分級標準評價,屬無毒級。
          
          2.2骨髓微核試驗陽性對照組與陰性對照組比較,差異有高度顯著性(P<0.01),說明本試驗方法是可靠的。各試驗組與陰性對照組比較差異無顯著性(P>0.05),試驗結(jié)果為陰性,即在所測試水平,樣品對昆明種小鼠沒有精子致畸作用。見表1。
          
          
        價值外,有必要對其進行深入的藥物及食物的開發(fā)研究。本項目的研究首次報道塔拉豆粉的安全性。按GBl5193—94《食品安全性毒理學評價程序和方法》對塔拉豆粉進行急性毒性試驗、小鼠骨髓細胞微核試驗、Ames試驗、小鼠精子畸形試驗、大鼠30d喂養(yǎng)試驗及傳統(tǒng)致畸試驗。結(jié)果表明,急性毒性實驗中動物均無明顯中毒反應,無死亡,塔拉豆粉對雌雄大、小鼠經(jīng)口LD均大于10.0g/kg體重,根據(jù)毒性分級標準,屬無毒級。大鼠30d喂養(yǎng)試驗結(jié)果表明,塔拉豆粉對動物不產(chǎn)生明顯毒性作用,對大鼠體重、進食量、食物利用率、血象、血生化均無明顯影響,大體解剖及組織學觀察也未見異常病理改變。大鼠傳統(tǒng)致畸試驗結(jié)果表明,對孕鼠平均活胎數(shù)、窩重、身長、體重和胎盤、胎鼠骨骼發(fā)育及胎鼠內(nèi)臟檢查均未見異常。
          綜合以上分析結(jié)果可以看出,該產(chǎn)品無毒且具有較高的食用安全

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