齒蘭環(huán)斑病毒與建蘭花葉病毒分子檢測(cè)研究
2008-04-29 00:44:03聞偉剛譚鐘崔俊霞陳先鋒
植物保護(hù) 2008年6期
聞偉剛 譚 鐘 崔俊霞 陳先鋒
摘要齒蘭環(huán)斑病毒(Odontoglossum ringspot virus，ORSV)與建蘭花葉病毒(Cymbidium mosaic virus，CyMV)是嚴(yán)重危害蘭科植物的兩種主要病毒。本研究根據(jù)病毒外殼蛋白基因設(shè)計(jì)特異性引物，應(yīng)用ELISA、普通RT-PCR、巢式RT-PCR和免疫捕獲RT-PCR4種方法進(jìn)行了檢測(cè)研究與比較。結(jié)果表明：普通RT-PCR與ELISA方法檢測(cè)靈敏度相當(dāng)；巢式RT-PCR檢測(cè)靈敏度要比普通RT-PCR與ELISA方法高出104倍以上；免疫捕獲RT-PCR檢測(cè)靈敏度介于普通RT-PCR和巢式RT-PCR之間。采用巢式RT-PCR方法對(duì)我國(guó)臺(tái)灣進(jìn)境的蝴蝶蘭植株樣本檢測(cè)，1號(hào)樣本出現(xiàn)與陽性對(duì)照一致的特異條帶。雙向測(cè)序分析，擴(kuò)增產(chǎn)物序列與ORSV外殼蛋白基因具有100％的同源性，表明1號(hào)蝴蝶蘭樣本攜帶ORSV。
關(guān)鍵詞齒蘭環(huán)斑病毒；建蘭花葉病毒；巢式RT-PCR；免疫捕獲RT-PCR；檢測(cè)靈敏度
中圖分類號(hào)S 436.8
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