摘要:豬增生性腸炎(PPE)是由細(xì)胞內(nèi)勞森茵引起的豬的接觸性傳染病,介紹了其病原學(xué)、流行病學(xué)、臨床癥狀、病理變化等方面的研究現(xiàn)狀,并提出了診斷方法和防治措施。
關(guān)鍵詞:豬增生性腸炎;細(xì)胞內(nèi)勞森菌;防治
中圖分類號(hào):S858.28;S856.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):1007-273X(2008)01-0022-03
豬增生性腸炎(Porcine Proliferative Enteritis,PPE),又稱豬增生性腸病(Porcine Proliferative Enteropathy。PPE)、豬回腸炎(Porcine Ileitis)、豬增生性腸道病(Porcine Bowl Dis-ease)、豬腸腺瘤樣病(Porcine Intestinal Adenomatosis)、豬增生性出血性腸炎(Porcine Proliferative Haemorrhage En,teritis,PHE)。是以回腸和結(jié)腸段的黏膜呈腺瘤樣增生性炎癥為主要特征的一種腸道綜合征。由細(xì)胞內(nèi)勞森菌(Lawsonnia)引起的豬接觸性傳染病。1991年,美國(guó)首次報(bào)道該病,至今已呈全球性流行。給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,雖然PPE死亡率不高,但嚴(yán)重影響病豬生長(zhǎng),延長(zhǎng)上市時(shí)間,因而是一種具有主要經(jīng)濟(jì)意義的世界性疾病。
1 病原學(xué)
PPE的病原是一種專性細(xì)胞內(nèi)寄生菌,稱之為細(xì)胞內(nèi)勞森菌(Lawsonia IntracellularisLI),有的稱之為回腸共生胞內(nèi)菌(lleal Sym-biont Intracellularis,ISI)、胞內(nèi)羅索尼菌。胞內(nèi)勞森菌主要寄生在病豬腸黏膜細(xì)胞中,在常規(guī)的培養(yǎng)基或雞胚中不能生長(zhǎng)。但能在鼠、豬和人的腸細(xì)胞系上生長(zhǎng),報(bào)道的有IEC-18、IPEC-12、Henle407和IGPC-1651等,感染的細(xì)胞單層一般不出現(xiàn)細(xì)胞病變。該菌微嗜氧。微氧環(huán)境控制在O2:CO2:H2:N2為6:7:7:80,或只控制CO2為5%即可。細(xì)菌能通過(guò)0.65um的濾膜,在5~15℃環(huán)境中至少能存活1~2周,細(xì)菌培養(yǎng)物對(duì)季銨消毒劑和含碘消毒劑敏感,在感染動(dòng)物中,胞內(nèi)勞森菌主要存在于腸道細(xì)胞的原生質(zhì)內(nèi),也可見(jiàn)于糞便中。細(xì)菌多呈小彎曲形、逗點(diǎn)形、S形或直的桿菌,大小為1.25~1.75um×0.25~0.34um。具有波狀的3層膜作外壁,無(wú)鞭毛,無(wú)柔毛,革蘭氏染色陰性,抗酸染色陽(yáng)性,采用改進(jìn)的銀浸染技術(shù)可取得較好效果。
2 流行病學(xué)
PPE是豬的一種接觸性傳染病,呈全球性散發(fā)或流行,胞內(nèi)勞森菌主要侵害豬,其次為倉(cāng)鼠、雪貂、狐貍、大鼠、馬鹿、鴕鳥(niǎo)、兔等。斷奶仔豬至成年豬均有發(fā)病報(bào)道,但以6~16周齡生長(zhǎng)肥育豬易感,發(fā)病率為5%~30%,偶爾達(dá)40%,死亡率一般為1%~10%,有時(shí)高達(dá)40%~50%。多數(shù)豬呈陰性感染,臨床以慢性病例最為常見(jiàn),其死亡率也不高,但可引起患豬生長(zhǎng)緩慢,增加飼養(yǎng)成本。該病主要經(jīng)口感染,人工感染潛伏期為8~10d,攻毒后21d達(dá)到發(fā)病高峰,自然感染潛伏期為2~3周,感染后7d可從糞便中檢出病菌,感染豬排菌時(shí)間不定,但至少為10周。含有大量病菌的感染豬糞便是豬場(chǎng)的主要傳染源,其次為污染的器具、場(chǎng)地。某些應(yīng)激因素,如天氣突變、長(zhǎng)途運(yùn)輸、飼養(yǎng)密度過(guò)大等均可促進(jìn)該病的發(fā)生。MCORIST等和SMITH等的田間及攻毒試驗(yàn)表明,豬感染的持續(xù)時(shí)間可達(dá)10周,且糞便中有大量細(xì)菌排出,若豬場(chǎng)中有1頭豬或幾頭豬發(fā)生感染,其他接觸豬即可發(fā)生感染,生長(zhǎng)肥育豬及種豬感染對(duì)年輕易感豬的傳播起重要作用。根據(jù)流行情況調(diào)查及PCR檢測(cè)結(jié)果證實(shí),在英國(guó)、丹麥等國(guó)家感染此病流行情況也相似。
3 臨床癥狀
該病多為慢性,病程長(zhǎng)的可持續(xù)1年。根據(jù)病程長(zhǎng)短,該病可分為急性型、慢性型和亞臨床型。
急性型:多見(jiàn)于4~12月齡的青年豬,臨床癥狀主要表現(xiàn)為突然發(fā)病,體溫正常或升高,表現(xiàn)有出血性下痢和不確定的死亡率,病程稍長(zhǎng)時(shí),糞便稀呈焦黑色。有的豬未見(jiàn)癥狀而突然死亡,僅表現(xiàn)為蒼白貧血狀。發(fā)病率最高達(dá)40%。
慢性型:多發(fā)于6~20周齡的斷奶仔豬,通常只有10%~15%的豬出現(xiàn)臨床癥狀。主要表現(xiàn)為食欲減退或廢絕,病豬消瘦、貧血、精神沉郁、生長(zhǎng)發(fā)育不良。出現(xiàn)間歇性下痢,糞便變軟、變稀而呈糊狀或水樣,顏色較深,有時(shí)混有血液或壞死組織屑片。有的輕微下痢。如果無(wú)繼發(fā)感染,死亡率不超過(guò)5%,但有些豬則成為僵豬而被淘汰。
亞臨床型:無(wú)明顯臨床癥狀。但生長(zhǎng)速度慢和飼料利用率低。
4 病理變化
4.1 剖檢變化
慢性病例最常見(jiàn)的病變位于小腸末端50cm處和鄰近結(jié)腸1/3處。腸管脹滿,外徑變粗,切開(kāi)見(jiàn)腸黏膜增厚,重癥者腸黏膜出血,有彌漫性、壞死性炎癥,漿膜和腸系膜水腫。急性病豬病變常發(fā)生于回腸末端和結(jié)腸,有時(shí)可以看到其表面有黃灰色假膜附著,刮去假膜見(jiàn)有潰瘍面,有的直腸滲出的血液和糞便混合成黑色柏油樣糞便。腸系膜淋巴結(jié)腫大,顏色變淺。切面多汁。
4.2 組織病理學(xué)變化
組織病理學(xué)變化主要為回腸和結(jié)腸隱窩內(nèi)未成熟的腸細(xì)胞發(fā)生腺瘤樣增生,病變腸段切片進(jìn)行鍍銀染色法,在增生性腸腺瘤上皮細(xì)胞的頂部胞漿中見(jiàn)有大量的勞森菌。
5 診斷
5.1 根據(jù)臨床癥狀和病理變化可作初步診斷,但確診有賴于實(shí)驗(yàn)室檢查
尸體解剖時(shí),對(duì)腸黏膜涂片,用改良的Ziehl-Neelsen染色法和姬姆薩染色法檢查細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌。也可用Levaditi-Sil-ver或Warthin-Starry鍍銀染色法著色顯示組織中存在的胞內(nèi)菌。勞森菌為直的或彎曲的細(xì)菌,帶有革蘭氏陰性菌特有的波浪狀3層外壁。在增殖的腸病變部位可能發(fā)現(xiàn)多種彎曲桿菌。但這些細(xì)菌接種豬不能使豬感染,只在繼發(fā)感染中起作用。
最理想的診斷方法是用適宜的細(xì)胞系。IEC-18、IPEC-12、Henle407和IGPC-1651如,IEC-18大鼠腸細(xì)胞或IPEC-12豬腸細(xì)胞等細(xì)胞系來(lái)分離病原菌,但需特殊培養(yǎng)基處理,且感染的細(xì)胞單層一般不出現(xiàn)細(xì)胞病變。目前,國(guó)內(nèi)未見(jiàn)經(jīng)細(xì)胞成功分離出勞森菌的報(bào)道。
此外,還可應(yīng)用PCR、間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)、免疫過(guò)氧化物酶單層試驗(yàn)(IPMA)、ELISA等技術(shù)對(duì)發(fā)病豬血清和糞樣進(jìn)行診斷。國(guó)外較早開(kāi)展了分子生物學(xué)診斷。JONES等設(shè)計(jì)2條引物,擴(kuò)增出2條基因片段,建立了勞森菌抗原檢測(cè)方法。MC CORMICK BM等應(yīng)用PCR能從每克含103個(gè)勞森菌的豬糞中擴(kuò)增出特異性片段。德國(guó)、澳大利亞和瑞典等國(guó)建立了多重PCR(Mul-PCR)快速診斷方法。該法能直接從豬糞中檢測(cè)到豬痢疾(SD)、豬腸道密螺旋體病(PIS)和PPE 3種腹瀉病病原,并能快速地區(qū)別這些致病微生物。在國(guó)內(nèi),周斌華、黃毓茂等和上海奉賢獸醫(yī)站等應(yīng)用PCR技術(shù)對(duì)豬糞樣品中的勞森菌進(jìn)行了檢測(cè),均取得滿意結(jié)果。
5.2 類癥鑒別
PPE應(yīng)主要與豬痢疾(SD)、腸出血性綜合征(HBS)、豬腸道密螺旋體病(PIS)以及豬沙門氏菌性腸炎等相區(qū)別。
豬痢疾(SD):主要癥狀是排黏性血痢,各種年齡的豬均可感染,但以7~12周齡仔豬多發(fā)。病理變化集中于大腸,可見(jiàn)大腸黏液性出血性或壞死性炎癥。取急性病豬新鮮病樣鏡檢可見(jiàn)大量的彎曲狀的密螺旋體。
豬沙門氏菌性腸炎:臨床癥狀為頑固性腹瀉,多發(fā)于3月齡左右仔豬,發(fā)熱,糞便灰白或黃綠色,惡臭。病變集中于盲腸和結(jié)腸,腸黏膜肥厚,有灰綠色潰瘍病變,肝有點(diǎn)狀灰黃色壞死灶。
腸出血性綜合征(HBS):典型臨床癥狀為生長(zhǎng)發(fā)育良好的豬只突然死亡,尸體蒼白或鼓脹,小腸菲薄和充滿血液,或腸扭轉(zhuǎn),胃內(nèi)充滿食物。無(wú)腸壁肥厚和增生病變。
豬腸道密螺旋體病(PIS):此病國(guó)內(nèi)少見(jiàn)報(bào)道。病原為結(jié)腸菌毛樣螺旋體,是斷奶仔豬結(jié)腸炎的主要病原。臨床癥狀為黏液性腹瀉,重癥病例伴有黏膜碎片或血塊。病變只限于盲腸和結(jié)腸,腸黏膜增厚,有潰瘍病變。結(jié)腸黏膜抹片,革蘭氏染色,在相差顯微鏡下可觀察到大量的螺旋體。
6 防治措施
6.1 預(yù)防
(1)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。加強(qiáng)消毒,空欄時(shí)欄舍要進(jìn)行徹底消毒,空閑7d后,方可進(jìn)豬;加強(qiáng)滅鼠、糞便管理,切斷傳播途徑;實(shí)行早期隔離斷奶;減少外界環(huán)境不良因素的應(yīng)激,提高豬體的抵抗力。
(2)實(shí)行全進(jìn)全出飼養(yǎng)制度,有條件的豬場(chǎng)可考慮實(shí)行多地飼養(yǎng)。
(3)在流行期間和調(diào)運(yùn)前或新購(gòu)入豬只時(shí)在飼料中添加藥物進(jìn)行預(yù)防。
(4)在疫區(qū),飼料中添加泰妙菌素(tiamulin)等藥物,可有效地預(yù)防該病。用法:23日齡斷乳至30日齡,飼料中添加泰妙菌素100g/t;31~40日齡飼料中添加泰妙菌素50g/t,41~130日齡飼料中添加泰妙菌素30g/t;31日齡至出欄不加任何藥物。
6.2 豬增生性腸炎疫苗的研制與接種
KNITTEL與其合作者共同報(bào)道了他們的使用無(wú)毒力的細(xì)胞內(nèi)勞森氏菌(LI)疫苗的研究,這是由致病性LI分離到的無(wú)毒力株制成的冰凍活苗。通過(guò)人工感染不同的LI致病菌株試驗(yàn)。此疫苗可以通過(guò)降低損傷的發(fā)展和糞便病原菌的排出數(shù)量這樣一些臨床指數(shù),說(shuō)明其可以提供良好的保護(hù),同時(shí)提高生長(zhǎng)速度。這些無(wú)毒力菌也附植于腸道內(nèi),但不引起機(jī)體發(fā)病。免疫后2~3周產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力。最初是采取鼻腔接種,豬群得到保護(hù)而可抵抗強(qiáng)毒的攻擊。然后進(jìn)一步使用無(wú)毒力活菌株通過(guò)口服或飲水進(jìn)行免疫試驗(yàn)。結(jié)果疫苗免疫組與未免疫組對(duì)比,口服免疫后用LI毒力株攻毒后隔離觀察7周。攻毒后4周當(dāng)試驗(yàn)豬群發(fā)生腸炎時(shí),免疫組的豬比未免疫組出現(xiàn)較少的病變。PPE疫苗的上市。給PPE陽(yáng)性豬場(chǎng)提供了選擇更好的防制措施的機(jī)會(huì),通過(guò)疫苗免疫來(lái)控制回腸炎對(duì)長(zhǎng)期受回腸炎侵?jǐn)_的豬場(chǎng)也具有經(jīng)濟(jì)上的意義。當(dāng)然使用活菌苗應(yīng)注意如下一些問(wèn)題。
(1)飲水免疫時(shí),由于水中含有的氯可能會(huì)破壞疫苗菌,所以必須添加硫代硫酸鈉以中和水中的氯。在免疫前后2~4周內(nèi),飼料及飲水中禁止添加抗菌素類添加劑,以讓LI疫苗產(chǎn)生激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)的作用。
(2)疫苗株經(jīng)豬體傳代后可能會(huì)出現(xiàn)毒力返強(qiáng)。
(3)活的無(wú)毒力疫苗株仍然對(duì)抗菌素敏感。
(4)母源抗體的影響。
(5)疫苗的服用可能需要在出現(xiàn)高峰期前提前3~4周。
6.3 治療
文獻(xiàn)報(bào)道多種藥物對(duì)于預(yù)防和治療PPE有效。
1993年,Lawsonetal從細(xì)胞培養(yǎng)中分離出Lintracellu,laris,使作為體外抗菌劑實(shí)驗(yàn)及攻毒治療和田間實(shí)驗(yàn)的幾種候選藥物藥性的鑒定得以進(jìn)行。在體外,胞內(nèi)勞森氏菌對(duì)許多抗生素敏感,根據(jù)MCORIST等的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明大環(huán)內(nèi)脂抗生素、林可霉素、金霉素、硫黏菌素很有效。
治療包括病豬和同群其他豬,可用120×10-6硫黏菌素、400×10-6IU泰樂(lè)菌素或400×10-6IU金霉素,溶于水或添加于飼料中口服14d,或相同劑量藥物肌肉注射。各豬場(chǎng)可根據(jù)本場(chǎng)發(fā)病情況,采用間斷性給藥方法。MCORIST博士研究林可霉素和壯觀霉素在用量為10mg/kg體重連用7d或14d的情況下對(duì)生長(zhǎng)豬回腸炎有治療和控制作用。數(shù)據(jù)表明,用林可霉素加上壯觀霉素進(jìn)行治療使病情有很大改善。
另外可采用添加劑的形式有效防治此病,如泰妙菌素或泰樂(lè)菌素。SCHWARTZ等舊用泰妙菌素35g/t添加飼料,于人工攻毒前7d和攻毒后28d連續(xù)用藥,可以有效預(yù)防和治療該病。氯四環(huán)素300g/t添加飼料,連續(xù)使用4d,可有效預(yù)防人工感染。
7 討論
(1)PPE是由細(xì)胞內(nèi)勞森菌引起的豬接觸性傳染病,以生長(zhǎng)肥育豬易感。在臨床上,該病以慢性病例最為常見(jiàn),主要表現(xiàn)為食欲下降、生長(zhǎng)緩慢和間歇性下痢,不引起豬只的高死亡率。因此。并未受到人們的充分重視。
(2)國(guó)內(nèi)獸醫(yī)臨床上,應(yīng)特別注意該病與其他疫病如豬痢疾、腸出血性綜合征、豬腸道密螺旋體病以及豬沙門氏菌性腸炎等混淆,并及時(shí)做好鑒別診斷,及時(shí)對(duì)因治療,才能取得較好的效果。
(3)在我國(guó),PPE相對(duì)來(lái)說(shuō)是一種新病。近幾年來(lái),臨床上PPE疑似病例有增多的趨勢(shì)。國(guó)內(nèi)對(duì)該病的研究較為薄弱。由于基層條件的限制,一些先進(jìn)的診斷方法與真正的臨床應(yīng)用還有一定的差距。鑒于該病在世界范圍流行及其造成的巨大危害,建議該病今后的研究集中于開(kāi)展PPE的流行病學(xué)調(diào)查、建立適合我國(guó)國(guó)情的快速診斷方法以及綜合防治方面。