摘要：通過對奶樣中的細(xì)菌進行分離、培養(yǎng)和鑒定，確定了兩頭奶牛的乳房炎是由白色念珠菌引起，系真菌性乳房炎。利用氟康唑氯化鈉注射液乳房灌注及激光照射，病牛乳房炎得到了有效控制，產(chǎn)奶量明顯恢復(fù)。

關(guān)鍵詞：白色念珠菌；乳房炎；奶牛

中圖分類號：S858.23；S857.2+6 文獻標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X(2008)01-0021-01

奶牛乳房炎是危害奶牛養(yǎng)殖業(yè)的最為常見的疾病之一，全世界現(xiàn)存約2.2億頭奶牛中，約1/3的奶牛受到乳房炎的危害Ⅲ。到目前為止，人們已從奶牛的乳腺中分離到大約130種微生物，包括多種細(xì)菌、病毒、真菌、支原體等。過去，人們常用抗生素來控制乳房炎，但隨著用藥時間的延長，病菌的耐藥性越來越強，同時，也因奶牛體內(nèi)的菌群失調(diào)而誘發(fā)真菌感染，給臨床控制帶來很大困難。我縣某個體奶牛場兩頭奶牛相繼發(fā)生真菌性乳房炎，經(jīng)綜合治療，取得明顯效果。

1 發(fā)病情況

我縣某個體奶牛場存欄奶牛30頭，乳房炎是該場常見的疾病，過去，畜主用抗生素進行乳房灌注，可起到比較明顯的控制效果。2007年9月初，2頭臨近干奶期的奶牛發(fā)生乳房炎，每頭牛均有兩個乳區(qū)發(fā)生紅腫，內(nèi)有硬塊。1頭奶牛乳汁呈黃色，乳清與絮狀蛋白完全分離，另1頭奶牛乳汁稀薄。帶有血絲和膠狀物。在發(fā)病初期用青霉素、頭孢類抗生素進行乳房灌注后，紅腫狀態(tài)稍有好轉(zhuǎn)，但很快又復(fù)發(fā)，如此反復(fù)。產(chǎn)奶量逐漸下降，大約至發(fā)病20d后，奶產(chǎn)量由發(fā)病前的每頭每天12kg降至1～2kg。病牛采食量、體溫均無明顯變化。

2 實驗室檢查

2.1 乳樣采集

清洗病牛乳房，并嚴(yán)格消毒乳頭，擠去少量乳汁之后，再用滅菌后的小瓶接取新鮮乳汁。每個病乳區(qū)取1份乳樣，共取4份，迅速送檢，保存于4℃冰箱中待檢。

2.2 病原的分離

將采集的樣品無菌接種于普通營養(yǎng)瓊脂平板，每份乳樣接種1個平板，37℃培養(yǎng)24h后長出針尖大小的菌落，48h后菌落逐漸擴大，菌落呈乳白色，圓形突起，表面濕潤。直接涂片，經(jīng)革蘭氏染色鏡檢，可見卵圓形或瓜子形革蘭氏陽性菌體，大小為2～3um×3～4um。4份乳樣接種培養(yǎng)后均長出一樣菌落。但菌落數(shù)略有差異，且未見雜菌生長。

2.3 病原培養(yǎng)特性觀察

將初次分離的菌落無菌接種于5％的脫纖維兔血液瓊脂平板、沙堡羅氏培養(yǎng)基、玉米吐溫80瓊脂平板、葡萄糖蛋白胨水、營養(yǎng)肉湯。該菌在5％的兔脫纖維血液瓊脂平板上能生長，不溶血，培養(yǎng)24h后可見菌落長出，之后菌落逐漸擴大，呈灰白色奶油狀，表面濕潤。在沙堡羅氏培養(yǎng)基上培養(yǎng)24h后長出較小菌落，繼續(xù)培養(yǎng)3d后，菌落變大，呈乳白色，表面光滑。在玉米吐溫80瓊脂平板上生長較快，菌落呈乳白色圓形隆起，表面光滑。在葡萄糖蛋白胨水、營養(yǎng)肉湯中培養(yǎng)3d。未見菌膜生長，菌體沉于管底。而上層液體澄清。

2.4 藥敏試驗

藥敏試驗按K-B法進行。將純培養(yǎng)物接種于普通營養(yǎng)瓊脂平板，之后將標(biāo)準(zhǔn)藥敏紙片貼于表面。37℃培養(yǎng)48h。結(jié)果表明，頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢唑啉、頭孢拉啶、丁胺卡那霉素、慶大霉素、阿莫西林、氨芐青霉素、克林霉素、環(huán)丙沙星、諾氟沙星等對受試菌無抑制作用，而氟康唑、酮康唑?qū)ζ渥饔眯Ч^好，抑菌圈分別是32mm和29mm。

3 治療

經(jīng)流行病學(xué)分析和實驗室檢查，初步診斷這2頭奶牛的乳房炎是由白色念珠菌感染引起的真菌性乳房炎。

確診后，立即用氟康唑氯化鈉注射液(每瓶100mL，含氟康唑0.2g，河南開元藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H20033871，批號：2007012611)灌注乳房，每個乳區(qū)每次灌注40mL，每天1次。連用4d后，2頭奶牛的乳房外觀紅腫狀態(tài)明顯改善，但乳房內(nèi)仍有腫塊，產(chǎn)奶量上升也不明顯。之后，將藥物灌注次數(shù)改為1次/2d，劑量不變。同時用JG-2型醫(yī)用He-Ne激光機照射，輸出功率為25mw，波長為6328A，光斑直徑為0.4cm，照射距離為30～40cm，照射部位為發(fā)炎乳區(qū)外部，時間為每個乳區(qū)10min，每天1次。經(jīng)上述方法治療，2頭奶牛的產(chǎn)奶量逐漸上升，乳房內(nèi)的腫塊逐漸變小，綜合治療6d后，產(chǎn)奶量分別上升至9kg和10kg，又連續(xù)治療4d，產(chǎn)奶量未見繼續(xù)上升，癥狀基本穩(wěn)定，停止治療。

4 討論

(1)由體外藥敏試驗結(jié)果得知，多種常用的抗生素對本次分離的菌株無抑制作用，而抗真菌藥物則抑菌作用明顯，

據(jù)此特性，結(jié)合菌體形態(tài)及培養(yǎng)特性，初步確定這2頭奶牛的乳房炎由白色念珠菌感染引起，屬真菌性乳房炎。

(2)白色念珠菌又稱白色假絲狀酵母菌，是一種人畜共患的條件性致病真菌?？股?、皮質(zhì)激素的廣泛使用，使動物體內(nèi)的菌群失調(diào)，增加了致病性真菌在動物體內(nèi)的生長繁殖機會，從而導(dǎo)致我國近幾年來動物真菌性疾病發(fā)病率的提高。目前，國內(nèi)許多奶牛個體養(yǎng)殖場在奶牛發(fā)生乳房炎時，多是采用乳房灌注抗生素的方法，這就不可避免地將白色念珠菌帶人乳房內(nèi)而造成感染。在抗生素存在的情況下，白色念珠菌生長更為旺盛。因此，持續(xù)用抗生素來治療真菌性乳房炎時，不但起不到任何治療效果，而且還會加劇白色念珠菌感染程度，造成病情的進一步惡化。

(3)本次采用抗真菌藥物氟康唑乳房灌注和激光療法來控制奶牛真菌性乳房炎，效果明顯。氟康唑是一種新型高效雙三唑類抗真菌藥，抗菌譜廣。對各類動物真菌有效，尤其對念珠菌、隱球菌等有較好療效。其作用機制是抑制真菌細(xì)胞膜主要成分麥角固醇生物合成和真菌細(xì)胞色素P450羥化反應(yīng)，使麥角甾醇合成受阻，破壞了真菌的完整性。利用激光照射，可增強動物體內(nèi)嗜中性白細(xì)胞的吞噬能力，促進T淋巴細(xì)胞的增殖和分化，提高動物非特異性免疫力，可改善機體代謝機能，提高機體的抵抗力。

(4)白色念珠菌感染同其他真菌感染一樣，治療時間較長，且難以徹底恢復(fù)。本次2頭奶牛發(fā)病乳區(qū)在治療結(jié)束后仍有小腫塊存在，且產(chǎn)奶量未達到治療前的水平，可能白色念珠菌已在致病乳區(qū)形成難以消散的器質(zhì)性病變，因此，及早選擇恰當(dāng)?shù)闹委煼椒▽⑹墙鉀Q真菌性乳房炎的關(guān)鍵。