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        芒種花提取物對(duì)四氯化碳致肝損傷小鼠模型的影響

        2007-12-29 00:00:00王曙光熊金武郭世民
        云南中醫(yī)中藥雜志 2007年11期


          摘要:目的:考查芒種花不同提取物對(duì)CCl致肝損傷模型小鼠的保肝作用。方法:小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、芒種花醇提取物大、小劑量組,水提取物大、小劑量組和醇提物加胡黃連醇提物組,分別連續(xù)7天灌胃給予相應(yīng)的受試藥物,末次給藥后造模小鼠一次性腹腔注射5%CCL花生油10ml/kg染毒,12h后取血檢測AST、ALT、LDH。結(jié)果:與正常對(duì)照組比較,模型組小鼠AST、ALT升高;與模型對(duì)照組比較,給藥組AST、ALT值均有降低,LDH值部分降低或改變。結(jié)論:芒種花不同提取物對(duì)CCl所致肝損傷小鼠模型有一定保護(hù)作用。
          關(guān)鍵詞:芒種花;四氯化碳;肝損傷;保護(hù)
          中圖分類號(hào):R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
          文章編號(hào):1007-2349(2007)11-0035-02
          
          芒種花為金絲桃科西南金絲桃(Hypericun heny;Levl.etvan)的干燥地上部分,又名栽秧花、土連翹。其性味苦、辛、寒。有清熱解毒、利尿解痙之功效。民間用于肝炎、利膽、感冒、痢疾等疾病。筆者用芒種花兩種不同溶媒提取物對(duì)四氯化碳所致肝損傷小鼠模型進(jìn)行血清學(xué)改變的實(shí)驗(yàn)觀察,以探索發(fā)現(xiàn)和評(píng)價(jià)芒種花提取物的保肝作用。
          
          1 材料與方法
          
          1.1 芒種花與胡黃連的藥材,購自云南省藥材公司,云南中醫(yī)中藥研究所新藥中心提供提取物。
          1.1.1 芒種花的醇提取 稱取生藥材1400g,加90%9000ml乙醇浸泡12h后,回流提取1h,過濾,濾液另器保存,再向藥渣中加入70%8000ml乙醇回流提取1h,過濾。合并兩次濾液,濃縮至流浸膏(800m1)。并將其置于60℃烘箱中恒溫烘至于浸膏(1g干浸膏相當(dāng)于4.6g生藥)。
          1.1.2 芒種花的水提取 稱取生藥材1400g,加9000ml水浸泡12h后,加熱煮沸1h,過濾,濾液另器保存,再向藥渣中加入9000ml水煮沸1h,過濾。合并兩次濾液,濃縮至流浸膏(400m1),并將其置于60℃烘箱中恒溫烘至于浸膏(1g干浸膏相當(dāng)于5.4g生藥)。1.1.3 胡黃連的提取 稱取生藥材1000g,加90%8000ml乙醇浸泡12h,過濾,濾液另器保存,再向藥渣中加入70%8000ml乙醇回流提取1h,過濾。合并兩次濾液,濃縮至流浸膏(980m1),并將其置于60℃烘箱中恒溫烘至于浸膏(1g干浸膏相當(dāng)于4.9g生藥)。
          1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)ICR種小鼠,體重(20±2)g,雌雄各半,合格證號(hào):滇實(shí)動(dòng)證第2004009號(hào),動(dòng)物及飼料由云南省昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
          1.3 試驗(yàn)器材 小鼠灌胃器,常用手術(shù)剪刀,鑷子,試管,(ALCYON300)全自動(dòng)生化儀,離心機(jī),恒溫水浴。
          1.4 藥物與試劑 芒種花醇提液,芒種花水提液,胡黃連醇提液。6.14%花生油CCl4(批號(hào):4870903-6)。AST檢測試劑盒(批號(hào)字2004第3060165號(hào)),ALT檢測試劑盒(批號(hào)字2004第3060162),LDH檢測試劑盒(批號(hào)字2004第3060212)。以上試劑盒均由四川省邁克科技有限公司提供。
          1.5 試驗(yàn)方法 取小鼠70只,雌雄各半,將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組,造模組,芒種花醇提取物大、小劑量組,芒種花水提取物大、小劑量組,芒種花醇提取物+胡黃連醇提取物組。每組10只小鼠。正常對(duì)照組給予基礎(chǔ)飼料和滅菌飲用水不用CCL染毒;造模對(duì)照組給予基礎(chǔ)飼料和滅菌飲用水喂養(yǎng)7天后,一次性給腹腔注射5%CCl花油10ml/k8染毒;芒種花醇提取物大劑量組(2.55g提取物/kg.d)、小劑量組(0.85g提取物/y/jG/gb7vYmfopRSxbxz2A==kg.d),芒種花水提取物大劑量組(2.16g提取物/kg.d)、小劑量組(0.72g提取物/kg.d),芒種花醇提取物(2.55g提取物/kg.d)+胡黃連醇提取物組(0.93g提取物/kg.d),造模前各受試組小鼠口服灌胃每日1次,灌胃體積10ml/ks連續(xù)灌胃給藥7天,第7天灌胃各受試組動(dòng)物均以1次性腹腔注射5%CCl花生油染毒,12h后,將各組小鼠稱重后,受試各組再行口服灌胃給藥1次。30min后,受試給藥組與染毒12h后造模組,正常對(duì)照組,同時(shí)經(jīng)股動(dòng)脈取血,取血清測定各組動(dòng)物AST、ALT、LDH值。所得數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,用t檢驗(yàn)處理數(shù)據(jù)。
          
          2 結(jié)果
          
          2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 見表1。
          結(jié)果表明,芒種花醇提物大、小劑量組,水提物大、小劑量組和醇提物加胡黃連醇提物組與造模組相比較,谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)指標(biāo)均有所明顯降低(P<0.01),乳酸脫氫酶(LDH)指標(biāo),除醇提物大劑量組和水提物小劑量組外,實(shí)驗(yàn)給藥組與造模組相比較有所降低(P<0.01),門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)指標(biāo)。與造模組比較,均有降低(P<0.01),差異有顯著意義。模型組與空白對(duì)照組比較AL了、AST指標(biāo)有明顯增高。表明實(shí)驗(yàn)給藥組對(duì)因CCL所至的肝損傷小鼠模型血清學(xué)AS了、ALT、LDH指標(biāo)均有所降低和改變。
          
          
          3 討論
          
          CCL為選擇性肝臟毒物,主要用于動(dòng)物肝損傷模型建立。目前認(rèn)為與CCL自身和其自由基代謝產(chǎn)物有關(guān),可使細(xì)胞膜系統(tǒng)發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng),破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整性,干擾細(xì)胞代謝,引起細(xì)胞損傷,小鼠CC乙染毒12h后,出現(xiàn)動(dòng)物血清中AS丁、ALT、LDH活性增高,CCl染毒致肝損傷小鼠模型是一種經(jīng)典造模方法。一次性染毒多用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性急性肝損傷的研究,本實(shí)驗(yàn)用芒種花提取物以預(yù)防口服給藥對(duì)一次性CCl染毒致肝損傷小鼠的動(dòng)物模型的影響進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)觀察。結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)各組動(dòng)物血清ALT指標(biāo)與模型組比較均為降低;實(shí)驗(yàn)組除醇提取物大劑量組和水提取物小劑量組外,其它實(shí)驗(yàn)組血清LDH指標(biāo)與模型組比較均有降低;同時(shí)實(shí)驗(yàn)組血清AS7指標(biāo)與模型組比較均有降低趨向。模型組與空白對(duì)照比較,和AST、ALT值高于空白組,表明CCl染毒后,小鼠已造成一定的肝損傷。對(duì)于LDH指標(biāo)數(shù)據(jù)值情況,初步分析??赡芘c血清量少和溶血有關(guān),但從數(shù)值分析看有一定的改變趨向關(guān)聯(lián)性,根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果所示表明,芒種花水提取物、醇提取物、醇提取物+胡黃連醇提取物均對(duì)因CCl致急性肝損傷小鼠模型血清學(xué)指標(biāo)有影響或不同程度降低,提示有一定的保肝作用,其機(jī)理有待進(jìn)一步研

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