李保華　董向麗　張振芳　趙洪?！【殹∩±顚毢V

摘要在山東萊陽地區(qū)，梨銹病菌冬孢子角自梨花現(xiàn)蕾期開始陸續(xù)成熟，成熟的冬孢子角遇1．5 mm／d以上的降雨，萌發(fā)產(chǎn)生擔(dān)孢子：經(jīng)2～3次降雨后，冬孢全部萌發(fā)，以后不再產(chǎn)生擔(dān)孢子。梨樹初花后35 d內(nèi)對銹病最敏感，即為防治期。若該期內(nèi)降雨量大于1．5mm／次、葉面結(jié)露時(shí)間長于7h／次，擔(dān)孢子即可侵染。其侵染量與梨園周圍越冬菌原的數(shù)量、降雨持續(xù)時(shí)間和品種抗病性等因子有關(guān)。田間試驗(yàn)表明：擔(dān)孢子侵染后至病斑顯癥前(約7 d)是內(nèi)吸性殺菌劑防治的有效時(shí)期。病斑顯癥后只有少數(shù)殺菌劑能抑制病斑擴(kuò)展，20．67％氟硅唑乳油、10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑和15％三唑酮可濕性粉劑3種藥劑在病原菌侵入前噴施能有效地抑制擔(dān)孢子侵染，持效期約7d；擔(dān)孢子侵染后噴藥能有效抑制病斑顯癥，因此，要特別關(guān)注梨樹初花時(shí)第1次降雨后梨銹病的防治。

關(guān)鍵詞植物病理學(xué)；梨銹??；防治適期；藥劑防治

中圖分類號(hào)S 436．612．19

梨銹病(Gyrnnosporangiura haraeanum Syd．)是梨樹的主要病害，在梨樹生長前期危害幼葉、幼果和嫩梢。梨銹病侵染期相對集中，若能掌握其有效防治時(shí)期，用藥1～2次即可有效地控制該病的發(fā)生。山東萊陽地區(qū)足梨產(chǎn)區(qū)，近年來由于市區(qū)和公路大量栽植松柏類常綠樹種，銹病日益嚴(yán)重，藥劑防治成為某些梨園每年必不可少的措施。本研究針對藥劑防治，通過田間監(jiān)測和室內(nèi)外試驗(yàn)以確定梨銹病藥劑防治的最佳時(shí)間，結(jié)果報(bào)道如下。

1材料與方法

1．1梨銹病侵染時(shí)期

于2002、2003年3月初，每年選擇60株一年生秋子梨苗，栽植于直徑15cm的花盆中，置于溫室內(nèi)培育。從梨樹初花期丌始，每逢降雨，于雨前把5盆梨苗從溫室移人每午嚴(yán)重發(fā)病的萊陽農(nóng)學(xué)院農(nóng)場梨園內(nèi)，降雨結(jié)束后，把梨苗再搬回到溫室內(nèi)培育，并保證梨苗不再被侵染。每次降雨更換不同梨苗，直至5月底。梨苗發(fā)病后記錄病葉率和葉上病斑數(shù)。

農(nóng)學(xué)院農(nóng)場梨園發(fā)病后，在園內(nèi)隨機(jī)選10株沒有噴施過任何殺菌劑的茌梨樹，于每株樹的東、西、由、北四個(gè)方向，各選擇2個(gè)枝條，調(diào)查記錄每片葉的病斑數(shù)量。

1．2冬孢子角發(fā)育

從2003年2月下旬開始，在農(nóng)學(xué)院周圍選定3株檜柏樹，每隔7 d采集10個(gè)冬孢子角帶回實(shí)驗(yàn)室，在水中浸泡30 min，然后取山在培養(yǎng)皿中保濕24 h，誘使冬孢子萌發(fā)。若冬孢子角發(fā)育成熟，冬孢子可萌發(fā)產(chǎn)生擔(dān)孢子。與此同時(shí)，在每次降雨快結(jié)束時(shí)，采集數(shù)個(gè)冬孢子角帶回實(shí)驗(yàn)室鏡檢，確定冬孢子是否萌發(fā)。對冬孢子發(fā)育過程監(jiān)測直到檜柏樹上冬孢子角全部消失為止。

1.3氣象數(shù)據(jù)監(jiān)測

氣象數(shù)據(jù)由自動(dòng)氣象站(Automatic WeatherStation，澳大利亞生產(chǎn))監(jiān)測采集。自動(dòng)氣象站安裝在萊陽農(nóng)學(xué)院農(nóng)場梨園內(nèi)，30 1111n記錄1次田間溫度、相對濕度、降雨量和葉面結(jié)露量(o～100％)。當(dāng)葉—面結(jié)露量超過10％時(shí)，計(jì)為降雨開始，葉面結(jié)露量低于10％，計(jì)為降雨結(jié)束。降雨開始到降雨結(jié)束歷經(jīng)的時(shí)間計(jì)為降雨持續(xù)時(shí)間。

1．4孢子懸浮液配制

2003牛4月16日從檜柏樹采集尚未萌發(fā)的冬孢子角，帶回實(shí)驗(yàn)室后保存于S℃冰箱內(nèi)。接種時(shí)，將冬孢子角在水中浸泡30mln，然后取出置于培養(yǎng)皿中20℃下保濕培養(yǎng)5 h，使冬孢子萌發(fā)形成擔(dān)孢子。將萌發(fā)冬孢子置于蒸餾水中攪拌2 rNn，再用紗布將冬孢子角濾出。用血球汁數(shù)板將濾液中擔(dān)孢子含量調(diào)整為5×104個(gè)／mL備用。孢子懸浮液隨配隨用。

1．5寄主感病期

2003年5月下旬在萊陽農(nóng)學(xué)院農(nóng)場的梨園內(nèi)隨機(jī)選取20個(gè)尚未停長的茌梨品種的長梢，標(biāo)記葉序。梢部最新展開葉，即第一個(gè)完全展開葉標(biāo)記為1，向基部依次為2、3……。病原菌接種子18：00左右進(jìn)行。接種時(shí)，用手持噴霧器把擔(dān)孢子懸浮液均勻地噴撒到接種葉片的正面，葉片接種后套袋保濕24h。待全部葉片發(fā)病后，記錄每個(gè)葉片的病斑數(shù)。接種時(shí)，接種梢有葉20～25片。

1．6藥劑試驗(yàn)

供試藥劑有20．67％氟硅唑乳油(萬興，Char－ismaTM20．67 EC，flusilazole)和惡唑菌酮(famoxa－done)，美國杜邦公司產(chǎn)品，藥劑稀釋成2 500倍液；10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑(世高，Score 10 WG，difenoconazole)，瑞土先正達(dá)公司產(chǎn)品，藥劑稀釋成2 500倍液；15％三唑酮可濕性粉劑(triadimefon 15WP)，江蘇克勝集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，試驗(yàn)藥液為2 000倍液。

1．7擔(dān)孢子侵染后藥劑有效防治時(shí)間

試驗(yàn)設(shè)20．67％氟硅唑乳油、10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、15％三唑酮可濕性粉劑3個(gè)藥劑處理和清水對照；分別在擔(dān)孢子接種后第2、4、7、10、15天5個(gè)時(shí)間施藥。全部試驗(yàn)共為20個(gè)組合，每個(gè)組合處理3個(gè)梢，每梢僅處理梢部2個(gè)完全展開葉，重復(fù)3次。

2002年4月26日在萊陽農(nóng)學(xué)院試驗(yàn)果園內(nèi)選擇3株梨樹，品種為小香水，每株樹為1個(gè)重復(fù)，標(biāo)記60個(gè)尚未停長的中、長梢，接種梢部3個(gè)完全展開葉，接種方法同1．5。接種第2天(24 h后)，進(jìn)行第1次藥劑處理，每種藥劑處理3個(gè)梢，以清水為對照。第2、2、4、5次藥劑處理分別于擔(dān)孢子接種后第4、7、10、15天進(jìn)行。

接種20d后調(diào)查記錄每個(gè)接種葉片上產(chǎn)牛性孢子器的病斑數(shù)。用統(tǒng)計(jì)分析軟件SAS對調(diào)查數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析(ANOVA)。

藥劑對病斑顯癥的抑制率(致死率)＝[(對照組平均每葉病斑數(shù)一處理組平均每葉病斑數(shù))／對照組平均每葉病斑數(shù)]×100％。

1．8藥劑抑制擔(dān)孢子侵染的持效期

藥劑持效期試驗(yàn)設(shè)20．67％氟硅唑乳油、10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、15％三唑酮可濕性粉劑3個(gè)藥劑處理和清水對照。設(shè)施藥后第2、3、7、10天接種4個(gè)時(shí)間處理水平。試驗(yàn)共16個(gè)組合，每個(gè)組合處理3個(gè)梢，重復(fù)3次。

試驗(yàn)梨樹同1．7。2002年4月26日，在每株樹標(biāo)記48個(gè)長梢。標(biāo)記后噴施殺菌劑，每種藥劑處理12個(gè)新梢，噴藥時(shí)將藥液均勻地噴撒到標(biāo)記梢的所有葉片上。施藥后第2天，進(jìn)行第1次接種。接種時(shí)從每種藥劑處理的12個(gè)梢中隨機(jī)選取3個(gè)梢，接種梢部的3個(gè)完全展開葉。第2、3、4次接種分別于施藥后第4、7、10天進(jìn)行。

接種20 d后，調(diào)查記錄每片葉的病斑數(shù)量，并對調(diào)查數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析(ANOVA)。

藥劑對擔(dān)孢子侵染的抑制率＝[(對照組平均每葉病斑數(shù)量一處理組平均每葉病斑數(shù)量)／對照組平均每葉病斑數(shù)量]×100％。

2結(jié)果與分析

2．1梨銹病侵染時(shí)期

2002年，萊陽地區(qū)早春氣溫較常年偏高，梨樹于4月5日提前進(jìn)入盛花期。該地區(qū)2002年出現(xiàn)5次降雨，室外暴露的5批盆栽梨苗，其中3批發(fā)生梨銹病，病葉率分別為49．17％(4月5日)、17，00％(4月28日)和13．25％(5月6日)，而5月14日和5月16日暴露的梨苗沒有發(fā)病(表1)。萊陽農(nóng)學(xué)院農(nóng)場梨園于4月16日始見病斑，4月30日調(diào)查，病葉率為73．75％；S月中旬調(diào)查，病葉率為56．25％，平均每片葉上有2．16個(gè)病斑。

2003年，萊陽地區(qū)春季氣溫接近常年，梨樹于4月18日盛花。4、5月出現(xiàn)7次大于0，4 nlm／次、持續(xù)時(shí)間超過2 h／次的降雨。從4月17日降雨起共暴露4批盆栽蒔，有2批發(fā)病(表1)，病葉率分別為27．08％(4月17日)和21，05％(4月22日)。萊陽農(nóng)學(xué)院農(nóng)場梨園于4月24日始見病斑，5月3日調(diào)查，病葉率為24．24％，平均每片葉0．36個(gè)病斑，此后，沒有再出現(xiàn)新的病斑。

2．2冬孢子角發(fā)育

2003年2月下旬，農(nóng)學(xué)院周圍檜柏樹已出現(xiàn)冬孢子角。4月上旬，冬孢子角陸續(xù)成熟，室內(nèi)誘發(fā)部分冬孢子角產(chǎn)生擔(dān)孢子。4月11日降雨中，冬孢子角初次萌發(fā)產(chǎn)生擔(dān)孢子。這次降雨持續(xù)12 h，降雨量1．4mm。由于這時(shí)梨樹尚未吐葉，沒有造成侵染。4月22日降雨過后，田間已難以采集到冬孢子角。

2．3寄主感病期

2003年5月下旬接種的10個(gè)長梢中，梢部的幼嫩葉片都能發(fā)病，以第1完全展開葉病斑數(shù)最多，向基病斑數(shù)依次減少，第5展開葉以下的葉片，沒有出現(xiàn)病斑(圖1)。第5完全展開葉的葉齡為15～20日齡。這表明：當(dāng)葉齡超過20日齡后，葉片的抗病性明顯增強(qiáng)，不再感染梨銹病，20日齡以內(nèi)的葉片均敏感。梨園內(nèi)只要存在短于20日齡的葉片就有感染梨銹病的可能。2002午5月14日和2003年5月7日降雨沒有造成銹病侵染，不是因?yàn)槔鎴@內(nèi)缺少感病葉片，而是松柏樹冬孢子已全部萌發(fā)，沒有擔(dān)孢子。

2．4擔(dān)孢子侵染后的有效防治時(shí)間

4月26日接種銹菌的葉片于接種后第8天開始顯癥，20d后葉片上病斑都已產(chǎn)生性孢子器，40d后存活的病斑背面隆起，部分病斑形成銹孢子器。表2列出了不同藥劑處理葉片亡接種20 d后平均每葉產(chǎn)生性孢子器的病斑數(shù)量。表中數(shù)據(jù)表明：擔(dān)孢子侵染后7 d內(nèi)，20．67％氟硅唑乳油、10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、15％三唑酮可濕性粉劑都能有效抑制病斑的生長與顯癥(Pr<0．01)；病原菌侵染7d后，3種藥劑都不能抑制病斑的顯癥和性孢子器的形成。病原菌侵染后潛育時(shí)間越長，殺菌劑防治效果越差。擔(dān)孢子侵染后第2天施藥，20．67％氟硅唑乳油、10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、15％三唑酮可濕性粉劑對病斑顯癥的抑制率分別為99．49％、99．05％和97．73％；擔(dān)孢子侵染后第4天施藥，3種藥劑對病斑抑制率分別為97．22％、97．67％和95．85％；侵染后第7天施藥，病斑抑制率分別為71．44％、76．71％和66．77％。擔(dān)孢子侵染4、7d后施藥，部分受抑制的病斑變?yōu)橥示G斑；擔(dān)孢子侵染10 d后施藥，病斑都已顯癥，藥劑不能抑制病斑顯癥，但苯醚甲環(huán)唑能抑制銹孢子器的產(chǎn)生，其抑制率為75．09％；病原菌侵染15天后，3種藥劑既不能抑制性孢子器的形成，也不能抑制銹孢子器的產(chǎn)生。

2．5藥劑抑制擔(dān)孢于侵染的持效期

表3為3種藥劑施藥后第2、／1、7、10天接種擔(dān)孢子的各處理平均病斑數(shù)量。表中數(shù)據(jù)表明：20．67％氟硅唑乳油、10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、15％三唑酮可濕性粉劑3種藥劑在施藥后的7 d內(nèi)都能明顯抑制擔(dān)孢子侵染(Pr<20．01)，其持效期?d左右。施藥后第2天，20．67％氟硅唑乳油、10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、15％三唑酮可濕性粉劑對擔(dān)孢子侵染的抑制率都為100％；施藥后第／1天，3種藥劑對擔(dān)孢子侵染的抑制率分別為91．46％、100．00％和日7．11％；施藥后第7天分別為66．08％、76．73％和57．12％；施藥后第10大，3種藥劑都已失去對擔(dān)孢子侵染的抑制效果，不能阻止擔(dān)孢子侵染。

3結(jié)論與討論

在山東萊陽地區(qū)，梨銹病的冬孢子角于2月開始形成，3月下旬或4月初，即從梨花現(xiàn)蕾后陸續(xù)成熟。這一時(shí)間略晚于杭州地區(qū)冬孢子角的成熟時(shí)間。成熟的冬孢子角如遇1．5mm／次以上的降雨即可萌發(fā)產(chǎn)生擔(dān)孢子，2～3次降雨后，冬孢子全部萌發(fā)，以后不再產(chǎn)牛擔(dān)孢子。

馬淑娥報(bào)道，梨葉在17日齡，果實(shí)在11日齡之前對銹病敏感”。本研究也表明：梨園內(nèi)只要有短于20口齡的幼齡葉片，就有被侵染發(fā)病的可能。梨樹絕大部分葉片的葉原基在萌芽前已形成，這些葉原基在初花期后迅速生長，并在35d內(nèi)發(fā)育成熟，此后僅中、長梢上產(chǎn)生少量的新葉。作者認(rèn)為初花期后35d內(nèi)是梨樹對銹病最敏感的時(shí)期，也是防治梨銹病的時(shí)期。

2002年3月份沒有出現(xiàn)降雨，4月5—6日是冬孢子角成熟后遇到的第1次降雨，雨量大、持續(xù)時(shí)間長，又正值梨樹盛花期，幾乎所有已吐露梨葉都被侵染。該次降雨中沒有成熟和尚未萌發(fā)的冬孢子角在4月29日和5月6日降雨中繼續(xù)萌發(fā)侵染。這3次降雨過后，全部冬孢子都已萌發(fā)，冬孢子角不再產(chǎn)生擔(dān)孢子，因此，5月14日和15日的降雨沒有造成侵染。

2003年4月上中旬有4次降雨，4月11日降雨，雖然冬孢子角已萌發(fā)，但此時(shí)梨樹尚未吐葉，未能造成侵染。4月17日降雨也正值梨樹盛花期，然而，這次降雨造成的侵染量明顯少于2002年4月5—6日降雨造成的侵染，部分冬孢子角在早期降雨中萌發(fā)可能導(dǎo)致侵染量低的重要原因。2003年，自然條件下只出現(xiàn)了2次侵染，5月7日及以后的降雨沒有造成侵染。

田間藥效試驗(yàn)表明：擔(dān)孢子侵染后7d內(nèi)施藥，20．67％氟硅唑乳油、10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、15％三唑酮可濕性粉劑都能有效地抑制病斑顯癥，在病斑顯癥初期使用10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑可抑制病斑的擴(kuò)展和銹孢子器的形成。這些三唑類殺菌劑若在擔(dān)孢子侵染前使用，能有效的阻止拒孢子的侵染，持效期可達(dá)7 d左右。

梨銹病的擔(dān)孢子只有在自由水中才能萌發(fā)侵染，在10～20亡溫度下，從冬孢子角萌發(fā)到擔(dān)孢子侵入寄主組織，至少需要7h(另文報(bào)道)。萊陽地區(qū)梨樹花期前后的平均溫度一般都在10～20℃。因此，在梨樹初花期以后的35 d內(nèi)，如果出現(xiàn)大于1.5mm／次，且能使葉面結(jié)露超過7h／次的降雨，即可預(yù)測擔(dān)孢子侵染。其侵染量取決梨園周圍冬孢子角的數(shù)量及其成熟度、降雨持續(xù)時(shí)間和栽培梨品種的抗病性等因子。若在預(yù)測侵染的前7 d內(nèi)沒有使用過殺菌劑，則需在擔(dān)孢子侵染后的7d內(nèi)噴施內(nèi)吸性的殺菌劑，這是使用內(nèi)吸性殺菌劑防治梨銹病的關(guān)鍵時(shí)期。20．67％氟硅唑乳油、10％苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、15％三唑酮可濕性粉劑對梨銹病都有較好的防治效果，肘梨銹病防治要特別關(guān)注初花后第1次降雨的防治。