中圖分類號：S152.7 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1008-0864（2025）07-0217-12

Influence of Reduced Nitrogen Fertilizer Combined with Organic Fertilizer on Soil Bacterial Community Structure in KorlaPearOrchards

ZHANG Xiyu1，SHEN Xing12，LI Wei1，XIE Wengel，LI Jie1， YANG Changhao’， CHAI Zhongping1，2* （1.CollgeofRsousdEvioent，XjnAlturalUiversity，UuOna；.XinglandPlantolcal Processes Laboratory，CollgeofResourcesandEnvironment，XinjiangAgricultural University，Urumqi83o52，Chia）

Abstract：Inordertoexplore theeffctsof nitrogenreductioncombinedwithorganic fertilizeronsoil bacterial communitystructureand diversityinKorla fragrant pearorchard （Oto 20cm ），conventional fertilization treatment was used as the control （CK），and 3 nitrogen reduction gradients of 10% （N1）， 20% （N2）and 30% （N3）and 2 organic fertilizer gradients were set，that is，sheep manure 22 5OO（F1）and 33750kg^*hm^-2 （F2）were applied， respectively，toformacombinationofnitrogenreductionandorganicfertilizertesttreatment.High-throughput sequencing technology was used todetermine soil bacterial community structure compositionand community diversity，and toanalyzeitscorrelationwith soilphysicaland chemical properties.Theresultsshowed that the dominantphylaofsoilbacteriawereActinobacteria，Proteobacteria，F(xiàn)irmicutes，Gemmatimonadetes，Chloroflexi， Acidobacteriaand Bacteroidetes.Thedominant bacterial genera were Bacilus，Kocuria，Halomonas，Subgroup_6， S0134_terrestrial_group，Arthrobacterand Kineosporia.N1F2treatment couldincreasetherelativeabundanceof Bacteroidetes，N1F2and N2F2 treatments could promote the relativeabundanceof Kocuria，and N2F2 treatment could promote the relative abundance of Arthrobacter.The N3F2 treatment notably increased the α -diversity of the bacterial community.Nitrogen reduction combined with organic fertilizer significantlypromoted soil organic matter， total nitrogen，alkali-hydrolyzed nitrogen，available phosphorus andavailable potassium，andsignificantlyinhbited pHand electrical conductivity.Keyenvironmentalfactors afecting soil microbialcommunitystructure included total nitrogen，soil organic matter，alkali-hydrolysisnitrogen，available potassium，available phosphorus，electrical conductivityandpH.To promote the improvementof soil qualityandthestabilityof soil ecosystemdiversity，it was recommendedtoapply240＼～270kg·hm2nitrogenfertilizerand33750kg·hm2organicfertilizerfor10＼～12years old Korla fragrant pear.

KeyWords：Korlafragrantpear；nitrogen fertilizerreduction；organicfertilizer;bacterialcommunity；soilnutrients

細(xì)菌在土壤微生物中豐度最高，是衡量土壤健康程度和土壤環(huán)境條件的標(biāo)志之一，細(xì)菌的數(shù)量、多樣性以及群落結(jié)構(gòu)組成特征的變化等均會(huì)影響土壤肥力和可持續(xù)生產(chǎn)力，因此，維持高水平的細(xì)菌群落多樣性對農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展至關(guān)重要。氮肥在保持土壤肥力、提高作物產(chǎn)量、改善作物品質(zhì)等方面發(fā)揮著重要作用，但是長期過量施用化肥會(huì)引起土壤酸化板結(jié)、供肥能力下降等問題2]。施用有機(jī)肥有利于提高土壤細(xì)菌數(shù)量和多樣性。有機(jī)肥施入對土壤中細(xì)菌與真菌的生物量比例有促進(jìn)作用，其比值影響土壤生態(tài)系統(tǒng)的健康性和穩(wěn)定性[3]。化肥配施有機(jī)肥對土壤團(tuán)聚體的形成、土壤理化特性、土壤微生物群落結(jié)構(gòu)以及作物對養(yǎng)分的吸收均有促進(jìn)作用4。因此，通過施肥調(diào)控土壤微生物群落結(jié)構(gòu)可有效改善農(nóng)田土壤肥力狀況。馬宜林等研究表明，氮肥配施40% 和 60% 羊糞最適宜煙株的生長發(fā)育。趙力光等研究表明，化肥減量配施生物有機(jī)肥可改善土壤微生物群落結(jié)構(gòu)及多樣性指數(shù)?？傮w而言，施用有機(jī)肥能夠促進(jìn)有益微生物的生長發(fā)育，改善土壤微生物群落結(jié)構(gòu)。

庫爾勒香梨（PyrusbrestschneideriRehd.）作為新疆特色果樹品種，種植面積不斷擴(kuò)大。在生產(chǎn)過程中，因氮肥施用過量和不平衡等，使肥料利用效率降低，導(dǎo)致果品產(chǎn)量不穩(wěn)定等多種問題。過量施用氮肥對土壤微生物生長、組成和功能產(chǎn)生負(fù)面影響，導(dǎo)致土壤微生物多樣性下降、土壤肥力退化等風(fēng)險(xiǎn)8，嚴(yán)重制約了庫爾勒香梨產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。自2004年起，中央一號文件連續(xù)19年聚焦“三農(nóng)”，切實(shí)將綠色、安全、可持續(xù)作為發(fā)展理念。因此，建立有機(jī)無機(jī)相結(jié)合的科學(xué)施肥制度，實(shí)現(xiàn)培肥與環(huán)境保護(hù)協(xié)調(diào)發(fā)展是我國生態(tài)農(nóng)業(yè)的大勢所趨。本研究以10＼～12年生庫爾勒香梨園為研究對象，設(shè)置氮肥減量配施有機(jī)肥的大田試驗(yàn)，研究土壤細(xì)菌群落多樣性對施肥的響應(yīng)，分析土壤細(xì)菌群落的變化及多樣性與土壤理化性質(zhì)之間的關(guān)系，提出以改善土壤環(huán)境為目標(biāo)的氮肥最佳減施用量與有機(jī)肥配比，以期為有機(jī)肥部分替代化肥在庫爾勒香梨生產(chǎn)中的應(yīng)用推廣、改善土壤理化性質(zhì)和肥力狀況、提升香梨產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)效益提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1 試驗(yàn)區(qū)概況及試驗(yàn)材料

以10＼～12年生庫爾勒香梨為試驗(yàn)材料進(jìn)行氮肥減量配施有機(jī)肥處理的大田試驗(yàn)。試驗(yàn)在新疆庫爾勒市阿瓦提農(nóng)場 （41^°40^′28^′′N，86^°07^′12^′′E） 進(jìn)行，海拔 900m ，該區(qū)為暖溫帶大陸性干旱氣候，年均氣溫 10～11°C ，年均降水量 50～55mm ，年均日照時(shí)數(shù) 2800～3000h ，年總計(jì)輻射總量5700MJ?cm^-2 以上，有效積溫 4100～4400^°C 年無霜期 210～230d 試驗(yàn)區(qū)土壤有機(jī)質(zhì)（soilorganicmatter，SOM）和全氮（totalnitrogen，TN）含量本底值分別為 20.94，0.86g?kg^-1 ，堿解氮（alkali-hydrolyzednitrogen，AN）、有效磷（availablephosphorus，AP）、速效鉀（availablepotassium，AK）的含量本底值分別為62.91、63.95、226.71mg^?kg^-1，pH7.86_c 2

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

研究以常規(guī)施肥處理為對照（CK），設(shè)置3個(gè)氮肥減量梯度，即分別較常規(guī)施氮量減少 10% （N1）、 20% （N2）、 30% （N3），設(shè)置2個(gè)有機(jī)肥梯度[1]，即分別施用羊糞 22500（F1）.33750kg?hm^-2 （F2），組合形成氮肥減量配施有機(jī)肥試驗(yàn)處理，共7個(gè)處理，具體施肥量見表1。肥料選擇氮肥（尿素 N46% 、磷肥（重過磷酸鈣 P₂O₅46% 、鉀肥（硫酸鉀 K₂051% 0；有機(jī)肥為半腐熟羊糞，有機(jī)質(zhì)和全氮含量分別為 25.65% 和 0.76% 。選取生長勢相似、健康并且能正常結(jié)果的果樹，依據(jù)株行距大小，每處理選取5株香梨樹，單株香梨樹作為1次重復(fù)。在香梨萌芽前施入氮肥的 60% ，膨果前追施 40% 。磷肥、鉀肥和羊糞作為基肥在萌芽前一次性施入，施肥方式為環(huán)狀溝施，施肥溝距主干50～80cm ，寬 30cm ，深 30～60cm 。施肥后，果園參照常規(guī)管理。

1.3樣品采集及測定方法

1.3.1土樣處理分別于萌芽前期（T1，3月24日）坐果期（T2，6月6日）膨果期（T3，8月3日）和成熟期（T4，9月6日）在庫爾勒香梨園進(jìn)行土壤樣品采集。去除地表凋落物后，在樹體施肥溝2側(cè)采集 0-20cm 土層的土壤，除去石礫等雜物，將土壤樣品混勻后保存在自封袋中，將采集的土樣存放于干冰箱中，密封帶回實(shí)驗(yàn)室。新鮮土樣過 2mm 土篩并混勻，將所有土樣分成2部分，一部分儲存于 4^°C 冰箱保存，并在1周內(nèi)送至上海派森諾生物科技有限公司測定土壤微生物群落多樣性，另一部分經(jīng)室內(nèi)風(fēng)干后，過1.00和0.25mm 土篩，用于測定土壤理化性質(zhì)。

1.3.2土壤理化指標(biāo)測定參照鮑士旦的方法測定土壤理化指標(biāo)， pH 采用 pH 計(jì)測定；電導(dǎo)率（electricalconductivity，EC）使用電導(dǎo)率儀（DDS-11A，雷磁）測定；全氮（TN）有機(jī)質(zhì)（SOM）、堿解氮（AN）、有效磷（AP）速效鉀（AK分別采用半微量凱氏法、重鉻酸鉀外加熱法、堿解擴(kuò)散法、碳酸氫鈉浸提-硫酸鉬銻抗比色法、乙酸銨浸提-火焰光度法測定。

1.3.3土壤DNA提取與PCR擴(kuò)增使用OMEGA Soil DNA Kit（M5635-02）（OMEGA Bio-Tek，Norcross，GA，USA）按照說明書提取總基因組DNA，于 -20^°C 保存。提取DNA的數(shù)量和質(zhì)量分別用NanoDrop NC2000分光光度計(jì)（Thermo FisherScientific，Waltham，MA，USA）和瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行測定[]。上述操作均由上海派森諾生物科技有限公司完成。

1.3.4高通量測序分析PCR產(chǎn)物定量、混樣，利用Quant-iTPicoGreendsDNA AssayKit對PCR產(chǎn)物在Microplatereader （BioTek，F(xiàn)Lx8OO）上進(jìn)行定量，利用Ilumina公司的TruSeq Nano DNALTLibraryPrepKit進(jìn)行建庫。對合格的文庫，在MiSeq機(jī)器上利用MiSeq Reagent KitV3（600cycles）進(jìn)行 2×250bp 的雙端測序[12]。上述操作均由上海派森諾生物科技有限公司完成。

1.4數(shù)據(jù)處理

用Excel2019對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，采用SPSS進(jìn)行單因素方差檢驗(yàn)，對不同處理間的物種組成相對豐度及 ∝ -多樣性指數(shù)進(jìn)行比較，并進(jìn)行顯著性標(biāo)記。王壤理化性質(zhì)與細(xì)菌群落 ∝ -多樣性指數(shù)以及細(xì)菌門（屬）水平優(yōu)勢物種相對豐度的相關(guān)分析、冗余分析均在Genescloud平臺進(jìn)行分析與作圖（https：//www.genescloud.cn）。

2 結(jié)果與分析

2.1減氮配施有機(jī)肥對土壤門水平細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響

挑選相對豐度排名前10的細(xì)菌菌門分析其變化（圖1），坐果期、膨果期和成熟期均存在且平均相對豐度大于 1% 的優(yōu)勢細(xì)菌菌門共7種，分別為放線菌門（Actinobacteria， 16.09%～41.90% ）、變形菌門（Proteobacteria， 19.25%～38.42% ）、厚壁菌門（Firmicutes， 6.77%～37.64% 、芽單胞菌門（Gemmatimonadetes， 1.17%～8.43% 、綠彎菌門（Chloroflexi， 1.04%～7.52% ）、酸桿菌門（Acidobacteria，0.09%～8.36% 和擬桿菌門（Bacteroidetes， 0.87% 212.31% ）

在坐果期，減氮配施有機(jī)肥處理使厚壁菌門的相對豐度較CK有不同程度上升，其中N3F2處理較CK增加 206.38% ;綠彎菌門的相對豐度較CK有不同程度下降，其中N3F1處理較CK降低47.48% 。在膨果期，減氮配施有機(jī)肥處理酸桿菌門的相對豐度較CK上升或下降，無明顯規(guī)律性，其中N1F1較CK增加 72.95% 。在成熟期，減氮配施有機(jī)肥處理使擬桿菌門的相對豐度較CK有不同程度上升，其中N1F2較CK增加 969.98% ；厚壁菌門的相對豐度較CK有不同程度下降，其中N2F1處理較CK降低 67.40% 。

2.2減氮配施有機(jī)肥對土壤屬水平細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響

對相對豐度排名前20的細(xì)菌菌屬進(jìn)行分析（圖2），坐果期、膨果期和成熟期平均相對豐度大于 1% 的優(yōu)勢菌屬共7種，分別為芽孢桿菌屬（Bacillus， 1.54%～13.37% ）、考克氏菌屬（Kocuria，0.55%～8.57% ）、嗜鹽單胞菌屬（Halomonas，0.07%～13.05% ）、Subgroup_6（ 0.03%～3.18% ）、S0134_terrestrial_group 0.15%～2.76% 和節(jié)桿菌屬（Arthrobacter， 0.22%～4.09% ）和動(dòng)孢菌屬（Kineosporia 0.09%～3.67% ）。

在坐果期，減氮配施有機(jī)肥處理使考克氏菌屬的相對豐度較CK有不同程度上升，其中N1F2較CK增加 1 342.81% ;Subgroup_6的相對豐度較CK有不同程度下降，其中N1F2較CK降低57.50% 。在膨果期，減氮配施有機(jī)肥處理使節(jié)桿菌屬的相對豐度較CK有不同程度上升，其中N2F2較CK增加 868.45% ；考克氏菌屬的相對豐度較CK有不同程度的上升或下降，其中N2F2較CK增加 603.15% 。

2.3減氮配施有機(jī)肥對土壤細(xì)菌群落多樣性的影響

∝ 多樣性指數(shù)包含Chao1、Shannon、Pielou’sevenness、Good'scoverage，分別用來評價(jià)細(xì)菌群落豐富度、群落多樣性、群落均勻度以及樣本中物種的檢出率。本研究中，細(xì)菌16SrRNA測序文庫覆蓋度整體超過 96% ，表明各處理測序數(shù)據(jù)達(dá)到飽和，可反映真實(shí)樣本條件。由圖3可知，坐果期、膨果期和成熟期減氮配施有機(jī)肥處理的Chao1、Shannon、Pielou’sevenness、Good’scoverage 指數(shù)與CK相比表現(xiàn)出上升或下降，無明顯規(guī)律性。其中，Chao1、Shannon、Good'scoverage指數(shù)在減氮配施有機(jī)肥與CK處理間無顯著差異，膨果期的Pielou'sevenness指數(shù)，N3F2處理較CK處理顯著增加 0.32%（Plt;0.05） 。

為進(jìn)一步衡量微生物群落結(jié)構(gòu)的差異，使用Bray-Curtis距離算法分析細(xì)菌群落的 β 多樣性。從主坐標(biāo)分析（principal co-ordinatesanalysis，PCoA）結(jié)果（圖4）可以看出，減氮配施有機(jī)肥處理在坐果期、膨果期以及成熟期的最大解釋的主坐標(biāo)成分分別是 32.1%.30.1%.39.5% 。不同減氮配施有機(jī)肥處理下土壤細(xì)菌群落有部分的分異，但是其相異度未達(dá)到顯著水平。通過Permanova檢驗(yàn)方法進(jìn)行組間差異分析，3個(gè)時(shí)期各施肥處理間均無顯著差異。減氮配施有機(jī)肥對細(xì)菌β多樣性無顯著影響，3個(gè)生育期土壤樣品之間較分散，說明減氮配施有機(jī)肥對樣品的菌落組成結(jié)構(gòu)影響較弱。

2.4土壤細(xì)菌群落 ∝ 多樣性與土壤理化性質(zhì)的 相關(guān)分析

由表2可知，N1F1、N2F1、N1F2、N2F2、N3F2處理能顯著提升土壤有機(jī)質(zhì)含量，N1F2、N2F2處理能顯著提升土壤全氮含量，N1F2、N2F2、N3F2處理能顯著提升土壤堿解氮含量，N2F1、N3F1、N3F2處理能顯著降低土壤有效磷含量，N1F1、N1F2、N2F2、N3F2處理能顯著提升土壤速效鉀含量，而N2F1、N3F1、N3F2處理能顯著降低 pH 含量，N1F1、N2F1、N1F2、N2F2、N3F2處理能顯著降低電導(dǎo)率含量。以上說明，減氮配施有機(jī)肥處理對土壤全氮、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、速效鉀含量促進(jìn)作用顯著，而對pH、電導(dǎo)率抑制作用顯著。

由圖5可知，坐果期Chao1、Pielou_e、Goods_coverage分別與電導(dǎo)率呈極顯著正相關(guān)、顯著負(fù)相關(guān)、極顯著負(fù)相關(guān)。膨果期，Pielou_e指數(shù)與電導(dǎo)率呈極顯著正相關(guān)，與有機(jī)質(zhì)呈顯著正相關(guān)，與pH呈極顯著負(fù)相關(guān)，與有效磷呈顯著負(fù)相關(guān)。成熟期，Chao1指數(shù)與 pH 呈顯著正相關(guān)，Goods_coverage指數(shù)與 pH 呈極顯著負(fù)相關(guān)、與有效磷呈顯著負(fù)相關(guān)。由此表明， pH 、電導(dǎo)率對群落的豐富度有促進(jìn)作用，有機(jī)質(zhì)、電導(dǎo)率對群落的均勻度有促進(jìn)作用，而有效磷、速效鉀和 pH 對群落的均勻度有抑制作用，有效磷、pH、電導(dǎo)率對群落的檢出率有抑制作用。

2.5土壤細(xì)菌群落門水平優(yōu)勢物種與土壤理化 性質(zhì)的相關(guān)分析

冗余分析（redundancyanalysis，RDA）結(jié)果（圖6）顯示，在門水平，在坐果期、膨果期、成熟期土壤理化性質(zhì)各解釋了細(xì)菌群落變異的 71.49% 、41.00%，43.41% 。其中，在坐果期有效磷對細(xì)菌門水平影響達(dá)到顯著水平 （Plt;0.05） ，堿解氮和電導(dǎo)率對細(xì)菌門水平群落影響達(dá)到極顯著水平4 （Plt;0.01） ；在膨果期有機(jī)質(zhì)、堿解氮和電導(dǎo)率對細(xì)菌門水平群落影響達(dá)到顯著水平 （Plt;0.05） ；在成熟期全氮和速效鉀對細(xì)菌門水平群落影響達(dá)到顯著水平 （Plt;0.05） ，有機(jī)質(zhì)和電導(dǎo)率對細(xì)菌門水平群落影響均達(dá)到極顯著水平 （Plt;0.01 ）。

由圖7可知，放線菌門與全氮、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、速效鉀呈顯著正相關(guān)，與電導(dǎo)率呈顯著負(fù)相關(guān)。變形菌門與全氮、堿解氮、速效鉀、 ?pH 電導(dǎo)率呈顯著負(fù)相關(guān)。厚壁菌門與全氮、堿解氮、有效磷呈顯著負(fù)相關(guān)。芽單胞菌門與全氮、有效磷和pH 呈顯著正相關(guān)，與電導(dǎo)率呈極顯著負(fù)相關(guān)。綠彎菌門與有效磷、pH呈極顯著正相關(guān)，與有機(jī)質(zhì)、堿解氮、電導(dǎo)率呈顯著負(fù)相關(guān)。酸桿菌門與堿解氮呈顯著負(fù)相關(guān)。擬桿菌門與堿解氮 ?pH 呈顯著正相關(guān)，與有效磷和電導(dǎo)率呈極顯著負(fù)相關(guān)。土壤全氮、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、速效鉀 Φ_?pH 和電導(dǎo)率是影響細(xì)菌門水平群落組成的主要因素，其中全氮、有機(jī)質(zhì)、速效鉀 ?pH 與土壤細(xì)菌群落呈顯著正相關(guān)，堿解氮、有效磷、電導(dǎo)率與土壤細(xì)菌群落呈顯著負(fù)相關(guān)，說明全氮、有機(jī)質(zhì)、速效鉀、pH對細(xì)菌群落有顯著促進(jìn)作用，堿解氮、有效磷、電導(dǎo)率對細(xì)菌群落有顯著抑制作用。

2.6土壤細(xì)菌群落優(yōu)勢物種（屬水平）與土壤理 化性質(zhì)的相關(guān)分析

冗余分析（RDA結(jié)果（圖8）顯示，在屬水平，土壤理化性質(zhì)在坐果期、膨果期、成熟期各解釋了細(xì)菌群落變異的 55.63%.27.62%.68.35% 。在坐果期，全氮對細(xì)菌屬水平群落影響達(dá)到極顯著性水平（ Plt;0.01 ，堿解氮和電導(dǎo)率對細(xì)菌屬水平群落影響達(dá)到顯著水平（ Plt;0.05 ）。在膨果期，全氮、pH 和電導(dǎo)率對細(xì)菌屬水平群落影響達(dá)到極顯著水平 Plt;0.01 ，堿解氮對細(xì)菌屬水平群落影響達(dá)到顯著水平（ （Plt;0.05） 。在成熟期，有機(jī)質(zhì)、堿解氮、速效鉀和電導(dǎo)率對細(xì)菌屬水平群落影響達(dá)到極顯著水平（ （Plt;0.01） ，全氮對細(xì)菌屬水平群落影響達(dá)到顯著水平 （Plt;0.05 ）。

由圖9可知，芽孢桿菌屬與 pH 呈顯著正相關(guān)，與電導(dǎo)率呈顯著負(fù)相關(guān)?？伎耸暇鷮倥c全氮和 pH 呈顯著正相關(guān)。嗜鹽單胞菌屬與堿解氮、速效鉀呈顯著正相關(guān)，與全氮、有效磷和電導(dǎo)率呈顯著負(fù)相關(guān)。Subgroup_6與有效磷呈顯著正相關(guān)，與堿解氮和速效鉀呈顯著負(fù)相關(guān)。S0134_terrestrial_group與堿解氮、pH呈顯著正相關(guān)，與電導(dǎo)率呈極顯著負(fù)相關(guān)。節(jié)桿菌屬與全氮、堿解氮和電導(dǎo)率呈極顯著正相關(guān)，與速效鉀呈顯著正相關(guān)，與有機(jī)質(zhì)呈顯著負(fù)相關(guān)。動(dòng)孢菌屬全氮、有效磷和 pH 呈顯著正相關(guān)，與電導(dǎo)率呈顯著負(fù)相關(guān)。土壤全氮、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、速效鉀、pH和電導(dǎo)率是影響細(xì)菌屬水平群落組成的主要因素，全氮、有效磷、pH與細(xì)菌群落呈顯著正相關(guān)，有機(jī)質(zhì)、堿解氮、速效鉀、電導(dǎo)率與細(xì)菌群落呈顯著負(fù)相關(guān)，說明全氮、有效磷、pH對細(xì)菌群落有顯著促進(jìn)作用，而有機(jī)質(zhì)、堿解氮、速效鉀、電導(dǎo)率對細(xì)菌群落有顯著抑制作用。

3討論

3.1土壤細(xì)菌群落在門水平對減氮配施有機(jī)肥的響應(yīng)

本研究中，優(yōu)勢菌門有放線菌門、變形菌門、厚壁菌門、芽單胞菌門、綠彎菌門、酸桿菌門、擬桿菌門，已有研究所得優(yōu)勢菌門為放線菌門、變形菌門、綠彎菌門和酸桿菌門[13-14]，與本研究不盡相同，說明細(xì)菌群落的差異可能受土壤理化性質(zhì)、作物種類和栽培方式的影響[15]。N1F2處理對擬桿菌門的相對豐度提升效果最好，但對酸桿菌門的相對豐度有抑制效果。N3F2對厚壁菌門的相對豐度提升效果最好，而N2F1對厚壁菌門的相對豐度提升效果最好，N3F1對綠彎菌門的相對豐度有抑制效果。研究表明，厚壁菌門僅存在于高鹽樣品中[，本研究區(qū)土壤養(yǎng)分含量相對較低，施用有機(jī)肥可提高厚壁菌門相對豐度，參與土壤養(yǎng)分分解，供香梨生長所需，更適合厚壁菌門生存，有利于促進(jìn)其相對豐度。綠彎菌門是一類通過光合作用產(chǎn)生能量的細(xì)菌，適宜在養(yǎng)分含量較低的土壤中生長，隨著有機(jī)肥羊糞的施入，增加了土壤中有機(jī)質(zhì)含量，進(jìn)而抑制了綠彎菌門的相對豐度。酸桿菌門適宜生長于可溶性有機(jī)碳含量較低的酸性土壤中[8]，本研究區(qū)是干旱石灰性土壤，偏堿性，抑制了醋桿菌門的相對豐度。擬桿菌門適合在富營養(yǎng)的有機(jī)環(huán)境中生長，這可能與土壤中有機(jī)質(zhì)含量 ??pH 以及堿解氮含量有關(guān)。徐忠山等[20]研究表明，有機(jī)肥的施用對土壤細(xì)菌群落數(shù)量和種類的多樣性有促進(jìn)作用，與本研究結(jié)果相似，說明減氮配施有機(jī)肥有利于土壤細(xì)菌優(yōu)勢菌群，同時(shí)可以改變細(xì)菌優(yōu)勢群落的結(jié)構(gòu)變化，施用不同類型的肥料會(huì)對細(xì)菌優(yōu)勢群落產(chǎn)生不同程度的影響。

3.2土壤細(xì)菌群落在屬水平對減氮配施有機(jī)肥的響應(yīng)

本研究中，優(yōu)勢菌屬為芽孢桿菌屬、考克氏菌屬、嗜鹽單胞菌屬、Subgroup_6、SO134_terrestrial_group、節(jié)桿菌屬、動(dòng)孢菌屬。顧美英等[2、徐賽等[22]研究發(fā)現(xiàn)，優(yōu)勢菌屬中僅有芽孢桿菌屬與本研究的優(yōu)勢菌屬相同。芽孢桿菌屬能夠產(chǎn)生部分植物激素供植物生長利用，并通過誘導(dǎo)植物抗性和抑制病原菌來維持植物健康生長，能夠產(chǎn)生對不利條件具有特殊抵抗力的芽孢[23]。因芽孢桿菌屬的抵抗力較強(qiáng)，在干旱土壤中為優(yōu)勢菌屬，說明不同有機(jī)無機(jī)肥配施改變了土壤中優(yōu)勢細(xì)菌屬的組成。N1F2處理對考克氏菌屬有促進(jìn)效果，但對Subgroup_6有較強(qiáng)抑制效果。N2F2處理對節(jié)桿菌屬、考克氏菌屬有促進(jìn)效果。Subgroup_6屬于酸桿菌門24且一般出現(xiàn)在酸性較高的土壤中，本研究的研究區(qū)域處于偏堿性土壤中，N1F2處理的pH高于完全施氮處理，因此減氮配施有機(jī)肥對Subgroup_6的相對豐度有抑制作用。前期研究發(fā)現(xiàn)，有機(jī)無機(jī)肥配施有利于改善和維持優(yōu)勢菌屬的群落豐度[22]，與本研究結(jié)果相似，說明無機(jī)有機(jī)肥配施不僅有利于作物生長，還能改變土壤中的優(yōu)勢菌屬種類。

3.3土壤細(xì)菌群落與土壤理化性質(zhì)的關(guān)系

本研究表明，減氮配施有機(jī)肥處理對土壤全氮、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、速效鉀含量有顯著提升作用，而對pH、電導(dǎo)率有顯著抑制作用，這與前人研究一致[25]。有機(jī)肥羊糞施入土壤中為土壤提供大量的有機(jī)質(zhì)，使土壤養(yǎng)分大幅提高，對土壤全氮、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、速效鉀有顯著的促進(jìn)作用。門水平上，土壤全氮、有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、速效鉀、電導(dǎo)率對土壤細(xì)菌群落的影響較大。屬水平上，土壤全氮、堿解氮、速效鉀 Φ_?pH 電導(dǎo)率對細(xì)菌群落有顯著或極顯著影響，這與前人研究結(jié)論有機(jī)質(zhì)、堿解氮、有效磷、速效鉀是土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的主要環(huán)境因子一致[14，26]，施用有機(jī)肥給土壤增加了外源有機(jī)物，促進(jìn)了細(xì)菌群落養(yǎng)分的轉(zhuǎn)化，進(jìn)而促進(jìn)土壤速效養(yǎng)分循環(huán)，增加有機(jī)質(zhì)含量，改善土壤質(zhì)量2。不同的施肥處理對土壤細(xì)菌群落的功能具有顯著影響，有機(jī)無機(jī)肥配施有助于土壤有益細(xì)菌的富集。

3.4細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響因子

本研究表明，N3F2處理對細(xì)菌群落的均勻度促進(jìn)作用較顯著。葉盛嘉等[4]、張平究等[28]研究表明，化肥配施有機(jī)肥對土壤細(xì)菌群落 ∝ 多樣性有促進(jìn)作用。這與本研究結(jié)果相似，可能是由于有機(jī)肥的施入為土壤提供了營養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)微生物的大量繁殖2]，因此提高了土壤中微生物的數(shù)量和多樣性。靳曉拓等3研究表明，在芒果園土壤中化肥減量配施有機(jī)肥對細(xì)菌群落的豐富度和多樣性有促進(jìn)作用。本研究表明，減氮配施有機(jī)肥對土壤微生物群落豐富度和均勻度有促進(jìn)作用，也有助于提高土壤細(xì)菌群落 ∝ 多樣性。這與李猛等[31]、徐萬里等[32]在土壤微生物群落研究方面的結(jié)論相似。有機(jī)肥施入土壤中，為微生物生長提供大量的養(yǎng)分，對土壤細(xì)菌群落 ∝ 多樣性產(chǎn)生了影響，使土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)受到改變[33]。本研究中，有機(jī)質(zhì)和 pH 對細(xì)菌群落的 ∝ 多樣性有顯著促進(jìn)作用，而有效磷和電導(dǎo)率對細(xì)菌群落的∝ 多樣性有顯著抑制作用，說明土壤細(xì)菌群落的多樣性與土壤理化性質(zhì)關(guān)系較為密切，減氮配施有機(jī)肥通過影響土壤理化性質(zhì)，進(jìn)一步影響了王壤細(xì)菌群落的多樣性和土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)。

綜上，推薦10＼～12年樹齡的庫爾勒香梨的適宜氮肥施用量為 240～210kg?hm^-2 ，同時(shí)配施有機(jī)肥羊糞 33750kg?hm^-2 。該研究結(jié)果可為優(yōu)化庫爾勒香梨園施肥管理，解決氮肥施用量過多，施肥配比不合理等問題提供理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]WUX，ZHANG T，ZHAO JN，et al..Variation of soil bacterial and fungal communities from fluvo-aquic soil under chemical fertilizerreduction combinedwithorganic materialsin North ChinaPlain[J].J.Soil Sci.PlantNutr.，2021，21（1）：349-363.

[2]張福鎖，王激清，張衛(wèi)峰，等.中國主要糧食作物肥料利用率 現(xiàn)狀與提高途徑[J].土壤學(xué)報(bào)，2008，45（5）：915-924. ZHANGFS，WANGJQ，ZHANGWF，etal..Nutrientuse efficiencies of major cereal crops in China and measures for improvement[J].ActaPedol.Sin.，2008，45（5）：915-924.

[3］劉國紅.芽孢桿菌的分類鑒定及其相關(guān)屬的分類系統(tǒng)演變 研究[D].福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2009. LIUG H.Taxonomic identification of bacillus and the evolution oftaxonomicsystem ofrelated genera [D].Fuzhou： FujianAgriculture and Forestry University，2009.

[4]趙軍，竇玉青，宋付朋，等.有機(jī)和無機(jī)煙草專用肥配合施用 對煙草生產(chǎn)效益和肥料氮素利用率的影響[J].植物營養(yǎng)與 肥料學(xué)報(bào)，2014，20（3）：613-619. ZHAOJ，DOUYQ，SONGFP，etal..Effects of combined application of biological organic fertilizer and inorganic compound fertilizer on the tobacco profit and nitrogen use efficiency[J].J.PlantNutr.Fert.，2014，20（3）：613-619.

[5]馬宜林，吳廣海，申洪濤，等.羊糞有機(jī)肥與化肥配施對烤 煙生長及土壤肥力特性的影響[J].核農(nóng)學(xué)報(bào)，2021，35（10）： 2423-2430. MAYL，WUGH，SHENHT，etal..Effectsof combined application of sheep manure-derived organic fertilizer and chemical fertilizer on tobacco growth and soil fertility[J].J. Nucl.Agric. Sci.，2021，35（10）：2423-2430.

[6]趙力光，唐興瑩，湯利，等.化肥減量配施生物有機(jī)肥對植煙 土壤微生物區(qū)系的影響及其與烤煙青枯病的關(guān)系[J].云南 農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)），2018，33（4）：744-750. 11/1 uiv-uigau fertilizers combination with chemical fertilizer reduction on the soil microbial flora and itscorrelation of bacterial wilt of flue-cured tobacco [J].J.Yunnan Agric.Univ.（Nat.Sci.），2018，33（4）：744-750.

[7]KAVAMURAVN，HAYATR，CLARKIM，et al. Inorganic nitrogenapplication affects both taxonomical and predicted functional structure of wheat rhizosphere bacterial communities [J/OL].Front. Microbiol.，2018，9：1074 [2024-01-07].htps：//doi.org/10.3389/fmicb. 2018.01074.

[8]INSAM H， HUTCHINSON T C， REBER H H. Effects of heavy metal stress on the metabolic quotient of the soil microflora [J]. Soil Biol. Biochem.，1996，28（4/5）：691-694.

[9]馬龍，高偉，欒好安，等.基于宏基因組學(xué)方法分析施肥模式 對設(shè)施菜田土壤微生物群落的影響[J].植物營養(yǎng)與肥料學(xué) 報(bào)，2021，27（3）：403-416. MA L， GAO W，LUAN HA，etal. Soil microbial community characteristics in greenhouse vegetable production under different fertilization pattrnsbased onmetagenomicanalysis [J].J.Plant Nutr.Fert.，2021，27（3）：403-416.

[10]丁闊，王雪梅，陳波浪，等.施用黑炭和羊糞對庫爾勒香梨園 土壤理化性質(zhì)與產(chǎn)量的影響[J].農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境學(xué)報(bào)，2015， 32（5）：449-455. DING K，WANG X M，CHEN B L，et al.Ifluencesof applying black carbon and sheep excrement on soil properties and yield of Korla fragrant pear orchard[J].J.Agric.Resour. Environ.， 2015，32（5）：449-455.

[11］鮑士旦.土壤農(nóng)化分析[M].3版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2000： 1-495.

[12］郭翠蓮，付潔，胡青，等.尖葉木樨欖天然林地不同土層土壤 微生物群落差異研究[J].西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，2023，38（6）：46-53. GUOCL，F(xiàn)UJ，HUQ，et al..Differences of soil microbial communities between different soil layers of Olea cuspidata natural forestland[J].J.NorthwestFor.Univ.，2023，38（6）：46-53.

[13］王娟娟，朱紫娟，錢曉晴，等.減施化肥與不同有機(jī)肥配施對 稻季土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的影響[J].土壤，2021，53 （5）： 983-990. WANGJJ， ZHU Z J， QIAN XQ， et al..Effectsof reducing chemical fertilizer combined with application of different organic fertilizers on soil bacterial community structure during rice season [J]. Soils，2021，53（5）： 983-990.

[14］葉盛嘉，鄭晨萌，張影，等.氮肥減量配施有機(jī)肥對豫中地區(qū) 冬小麥-夏玉米輪作生產(chǎn)力和土壤性質(zhì)的影響[J].中國生態(tài) 農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2022，30 （6）： 900-912. YE SJ， ZHENG C M， ZHANG Y，et al.，Effects of reduced chemical nitrogen input combined with organic fertilizer application on the productivity of winter wheat and summer maize rotation and soil properties in central Henan province [J]. Chin. J. Eco-Agric.，2022，30（6）： 900-912.

[15]YANG L，WEI W，CHEN L，etal..Spatial variations of shallow and deep soil moisture in the semi-arid Loess Plateau， China [J]. Hydrol Earth Syst. Sci.，2012，16（9）：3199-3217.

[16]RODRIGUES JL，PELLIZARI V H，MUELLER R，et al.. Conversion of the Amazon rainforest to agriculture results in biotic homogenization of soil bacterial communities [J].Proc. Natl. Acad. Sci.USA，2013，110（3）：988-993.

[17」XUN W B，XIONG W，HUANG T，et al..Swine manure and quicklime have different impacts on chemical properties and composition of bacterial communities of an acidic soil [J]. Appl. Soil Ecol.，2016，100： 38-44.

[18]SUL W J，ASUMING-BREMPONG S，WANGQ，etal.. Tropical agricultural land management influences onsoil microbial communities through its effct onsoil organic carbon [J]. Soil Biol. Biochem.，2013，65：33-38.

[19］于冰，宋阿琳，李冬初，等.長期施用有機(jī)和無機(jī)肥對紅壤微生 物群落特征及功能的影響[J].中國土壤與肥料，2017（6）：58-65. YU B，SONG A L，LI D C，et al. Influences of long-term application of organic and inorganic fertilizers on the structure andfunction of microbial com-munity inredsoil[J].Soil Fert. Sci. China， 2017（6）：58-65.

[20]徐忠山，劉景輝，逯曉萍，等.施用有機(jī)肥提高黑土土壤酶活 性、增加細(xì)菌數(shù)量及種類多樣性[J].中國土壤與肥料，2020 （4）：50-55. XU Z S，LIUJH，LU XP，et al. The application of organic fertilizer improves the activity of the soil enzyme，increases the number and the species variety of bacteria in black soil[J]. Soil Fert. Sci. China，2020（4）：50-55.

[21］顧美英，唐光木，張?jiān)剖妫?有機(jī)肥與生物炭對新疆鹽堿 沙化土壤微生物群落特征的影響[J].生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2023， 32 （8）： 1392-1404. GU MY，TANG G M， ZHANG YS，et al..Effects of organic fertilizersandbiocharonmicroorganismcommunity characteristicsin saline-alkali sandy soil of Xinjiang [J]. Ecol. Environ. Sci.，2023，32（8）： 1392-1404.

[22］徐賽，楊延杰，圣亞男，等.有機(jī)無機(jī)肥配施對日光溫室番茄 連作土壤微生物的影響[J].土壤通報(bào)，2022，53（4）：897-906. XUS，YANGYJ，SHENGYN，etal..Effectsofcombined application of organicand inorganic fertilizersonsoil microorganisms in continuous cropping in solar greenhouse [J]. Chin.J. Soil Sci.，2022，53 （4）： 897-906.

[23］張曉冰，楊星勇，楊永柱，等.芽孢桿菌促進(jìn)植物生長機(jī)制研 究進(jìn)展[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2020，48（3）：73-80.

[24］趙卉鑫，馬鑫，張瑞喜，等.聚丙烯酰胺和生物炭共施對土壤 細(xì)菌群落、理化因子和玉米產(chǎn)量的影響[J].微生物學(xué)通報(bào)， 2023，50（3）：1136-1148. ZHAO H X，MA X，ZHANG R X，et al..Effectsof polyacrylamide and biochar co-application on soil bacterial community，physical and chemical factors，and maize yield [J]. Microbiol.China，2023，50（3）：1136-1148.

[25］胡媛媛，屈潔，馬琨.長期施肥對旱作區(qū)農(nóng)田土壤細(xì)菌群落組 成和多樣性的影響[J].中國土壤與肥料，2023（7）：138-148. HU Y Y，QUJ， MA K. Effects of long-term fertilization on soil bacterialcommunitycompositionanddiversityindryfaring region [J]. Soil Fert. Sci. China，2023（7）：138-148.

[26]桑文，趙亞光，張鳳華.化肥減量配施有機(jī)液體肥對土壤微生 物群落結(jié)構(gòu)多樣性的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2020，33（11）： 2584-2590. SANGW，ZHAO Y G，ZHANGFH.Efects of chemical fertilizer reduction combined with organic liquid fertilizer on soil microbial community structure diversity [J]. Southwest China J. Agric. Sci.，2020，33（11）：2584-2590.

[27]王興松，王娜，杜宇，等.有機(jī)肥對玉溪植煙土壤有機(jī)質(zhì)組 分和微生物群落結(jié)構(gòu)的影響[J].中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2024， 26（8）： 201-212. WANG X S，WANG N，DU Y，et al..Effects of organic fertilizeronorganicmattercompositionand microbial community structure of tobacco-growing soil in Yuxi [J].J. Agric.Sci. Technol.，2024，26（8）： 201-212.

[28］張平究，李戀卿，潘根興，等.長期不同施肥下太湖地區(qū)黃泥 土表土微生物碳氮量及基因多樣性變化[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2004， 24（12）：2818-2824. ZHANG PJ，LIL Q，PANGX，et al..Influence of long-term fertilizer management on topsoil microbial biomass and genetic diversity of a paddy soil from the Tai LakeRegion，China [J]. Acta Ecol. Sin.，2004，24（12）：2818-2824.

［29］李棟宇，靳輝勇，屠乃美，等.等氮條件下有機(jī)無機(jī)配施對烤 煙根際土壤微生物功能多樣性的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2018，31（11）：2361-2365. LIDY，JINHY，TU NM，etal..Effects of combined application of organic and inorganic on metabolic functional diversity of rhizosphere soil microbial community of flue-cured tobacco under same N condition [J]. Southwest China J. Agric. Sci.，2018，31（11）：2361-2365.

[30］靳曉拓，馬繼勇，周彥妤，等.化肥減量配施有機(jī)肥下芒果園 土壤細(xì)菌多樣性及群落結(jié)構(gòu)特征[J].熱帶作物學(xué)報(bào)，2019， 40（6）：1205-1212. JINXT，MAJY，ZHOUYY，etal.Bacterial diversity and community structurecharacteristicsofmangoorchard soil under reduced chemical fertilizer and in-creased organic fertilizer application [J]. Chin.J. Trop. Crops，2019，40（6）：1205-1212.

[31］李猛，張恩平，張淑紅，等.長期不同施肥設(shè)施菜地土壤酶活 性與微生物碳源利用特征比較[J].植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)， 2017，23（1）：44-53. LI M，ZHANG EP， ZHANG SH， et al..Comparison of soil enzyme activities and microbial C metabolism in installed vegetable fieldsunderlong-term different fertilization [J].J. Plant Nutr.Fert.，2017，23（1）：44-53.

[32]徐萬里，唐光木，葛春輝，等.長期施肥對新疆灰漠土土壤微 生物群落結(jié)構(gòu)與功能多樣性的影響[J].生態(tài)學(xué)報(bào)，2015， 35（2）：468-477. XUWL，TANGGM，GECH，etal.Effects of long-term fertilizationon diversitiesof soil microbial community structure and functionin grey desert soil of Xinjiang[J].Acta Ecol. Sin.，2015，35（2）：468-477.

[33] SADET-BOURGETEAU S， HOUOT S， DEQUIEDT S， et al. Lasting effect of repeated application of organic waste products on microbial communities in arable soils [J].Appl.Soil Ecol.， 2018，125：278-287.