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        微塑料對小麥幼苗生長、葉綠素含量及光系統(tǒng)II的影響

        2025-04-16 00:00:00楊帆張彥軍張蓓蓓
        陜西農(nóng)業(yè)科學(xué) 2025年3期

        摘"要:探究土壤中微塑料對農(nóng)作物生長發(fā)育的影響對保障我國糧食安全尤為重要。本試驗研究了不同濃度(0、0.7、1.4、2.1、2.8 g/kg)粒徑(<6 um)的聚丙烯微塑料(polypropylene-microplastics,PP-MPs)對小麥幼苗生長、葉片葉綠素含量和光系統(tǒng)II的影響。結(jié)果表明:處理7 d后,0.7~2.8 g/kg PP-MPs濃度對小麥比葉面積(SLA)均產(chǎn)生促進作用;處理14 d后,中低濃度和中高濃度(0.7~2.1 g/kg)的PP-MPs均降低了小麥的葉綠素a(Chla)和總?cè)~綠素(Chla+b)含量,低濃度(0.7g/kg)PP-MPs顯著降低了葉片的初始熒光(Fo)和最大熒光(Fm)值;處理21d后,低濃度PP-MPs顯著降低了葉片的Chla、葉綠素a/b(Chla/b)和Fo值;各處理的葉綠素?zé)晒饪焖僬T導(dǎo)曲線(OJIP)得到標(biāo)準(zhǔn)化后差異較?。徊煌瑵舛萈P-MPs均降低了小麥第14天光系統(tǒng)II(PSII)放氧復(fù)合體(OEC)的活性;小麥第21天中高濃度(2.1 g/kg)PP-MPs的電子產(chǎn)額(QY)達到最大值。綜上,不同濃度(0.7~2.8 g/kg)PP-MPs對小麥的生長、葉綠素含量和光系統(tǒng)II均存在顯著影響,其中低濃度(0.7g/kg)PP-MPs對小麥幼苗生長和葉綠素含量的抑制作用最明顯。

        關(guān)鍵詞:微塑料;小麥幼苗;生長發(fā)育;光合作用 ;毒性機制

        中圖分類號:S512.101"文獻標(biāo)識碼:A"文章編號:0488-5368(2025)03-0037-08

        (1.College of Geography and Environment, Baoji, Shaanxi 721013, China;2.School of Surveying and Mapping,

        Henan Polytechnic University, Jiaozuo, Henan 454003, China;3.Baoji University of Arts and Sciences/Shaanxi

        Provincial Key Laboratory of "Disaster Monitoring and Mechanism Simulation, Baoji, Shaanxi 721013, China)

        Abstract: "Understanding the effects of microplastics in soil on crop growth and development is important for ensuring food security in China. This study examined how polypropylene microplastics (PP-MPs) at different concentrations (0, 0.7, 1.4, 2.1, and 2.8 g/kg) affect the growth of wheat seedlings, leaf chlorophyll content, and photosystem II activity.The results showed that after 7 days, PP-MPs at concentrations between 0.7 and 2.8 g/kg helped increase the specific leaf area (SLA) of wheat seedlings. After 14 days, medium-low and medium-high concentrations of PP-MPs (0.7~2.1 g/kg) caused a decrease in chlorophyll a (Chla) and total chlorophyll (Chla+b) content, while a low concentration (0.7 g/kg) greatly reduced initial fluorescence (Fo) and maximum fluorescence (Fm) values. After 21 days, low-concentration PP-MPs (0.7 g/kg) further decreased Chla, the Chla/b ratio, and Fo values. Standardized chlorophyll fluorescence rapid induction curves (OJIP) showed only small differences between treatments. Regardless of concentration, PP-MPs reduced the activity of the photosystem II (PSII) oxygen-evolving complex (OEC) on the 14th day. On the 21st day, wheat seedlings exposed to 2.1 g/kg PP-MPs had the highest electron yield (QY). In conclusion, PP-MPs at concentrations of 0.7~2.8 g/kg have significant effects on wheat seedling growth, chlorophyll content, and PSII activity, with 0.7 g/kg PP-MPs showing the strongest inhibitory effect on growth and chlorophyll levels.

        Key words:Microplastics; Wheat seedlings; Growth and development; Photosynthesis; Toxicity mechanism

        農(nóng)業(yè)地膜覆蓋技術(shù)已廣泛應(yīng)用于農(nóng)作物生產(chǎn)過程中,但絕大多數(shù)地膜由于重復(fù)利用率低、人為處理不當(dāng)和不易降解往往被殘留在土壤之中[1],經(jīng)過犁地翻耕被埋進土壤更深層,再通過生物降解和機械磨損逐漸變?yōu)樗芰纤槠琜2, 3],并可能進一步轉(zhuǎn)化為直徑小于5mm的微塑料[4](microplastics,MPs)。研究表明,微塑料能夠改變土壤的理化性質(zhì),進而影響到農(nóng)作物的出苗和根系生長[5, 6]。微塑料還具有極強的吸附性,往往聚集在植物根部被吸收并積累在植物體內(nèi)[7],通過食物鏈被人類攝入并產(chǎn)生潛在的健康風(fēng)險。微塑料對植物產(chǎn)生的毒性效應(yīng)包括延遲種子萌發(fā)[8]、抑制植物生長[9]、干擾

        光合作用[10]等。安菁[11]等發(fā)現(xiàn)隨著生育期的延遲,中高濃度微塑料顯著降低了大豆植株的葉面積、株高和根系活力;劉菳菳[12]等發(fā)現(xiàn)粒徑為0.002 3~0.003 8 mm的高濃度(100 mg/g)微塑料會顯著抑制綠豆根和芽的生長發(fā)育;李瑞靜[13]等人發(fā)現(xiàn)不同濃度的PS、PVC和PE對黃瓜葉片的葉綠素a和葉綠素b含量的促進作用不一致;但也有研究發(fā)現(xiàn),特定濃度下的微塑料可顯著增加空心菜的地上和地下生物

        量[14];聚乙烯微球?qū)Ω∑既~片的比葉生長速率和光合色素含量無顯著影響,但對其根系具有明顯的機械阻斷作用[15]。由此可見,微塑料對植物生長和生理作用的影響與微塑料類型、粒徑、濃度以及植物種類、生長周期多種因素有關(guān)。

        目前關(guān)于微塑料對農(nóng)業(yè)的影響研究還處于起步階段,微塑料對農(nóng)作物的生長發(fā)育的研究更是鮮有報道[16,17],基于此,本研究采用冬小麥(Triticum aestivum)作為研究對象,通過添加不同濃度的PP-MPs來研究其對小麥幼苗生長發(fā)育及光合生理的影響,為后期評估微塑料對植物的毒性效應(yīng)和抗逆性機制提供理論依據(jù)。

        1材料與方法

        1.1試驗材料

        供試小麥種子選自西北農(nóng)林科技大學(xué)培育的西農(nóng)822,聚丙烯微塑料(PP-MPs)購自東莞市樟木頭華創(chuàng)塑膠原料商行有限公司,粒徑<6 μm。

        1.2試驗方法

        土壤采自寶雞地區(qū)大田土壤并與栽培基質(zhì)(植物營養(yǎng)土)按5∶1混合而成,土壤基本理化性質(zhì)為全氮1.21 g/kg,全磷為0.72 g/kg,pH值為7.1。試驗前過20目篩,以去除土壤中的有機碎屑和小石頭等雜質(zhì),每盆裝土350 g。試驗盆栽的直徑為12 cm,高為10 cm,盆底墊有化學(xué)濾紙以防土壤漏出。將PP-MPs顆粒與過篩土壤充分攪拌使其完全混合,采用稱重法使土壤水分含量達到田間最大持水量(WHC)的60%。

        本研究以寶雞市農(nóng)膜殘留量5.588 kg/hm2為參考依據(jù)[18],換算每盆盆栽的PP-MPs基礎(chǔ)添加量為0.023 3 g/kg,設(shè)置不添加PP-MPs的對照組(CK),添加30倍PP-MPs(T1),添加60倍PP-MPs(T2),添加90倍的PP-MPs(T3),添加120倍的PP-MPs(T4),每個處理設(shè)置3次重復(fù)(表1)。

        試驗于寶雞文理學(xué)院地理與環(huán)境學(xué)院植物生長模擬室內(nèi)進行,所有試驗盆栽放置在光源培養(yǎng)箱(FytoScope LED)光源培養(yǎng)箱中培養(yǎng),設(shè)置光照周期為16/8 h,晝夜溫度為25℃/15℃。將約50粒的小麥種子放在已消毒并鋪有濾紙培養(yǎng)皿(直徑15 cm)內(nèi),加入20 mL去離子水,放置-5℃冰箱進行24 h催芽,待2~3 d小麥出苗后移栽到試驗盆栽中,早晚各澆水一次,并于7 d、14 d和21 d后進行樣品采集和生長、光合生理指標(biāo)的測定。

        1.3植株樣品采集與測定

        小麥葉片用去離子水沖洗干凈,用濾紙擦干之后置于透明密封袋放進-5℃冰箱保存?zhèn)溆?。主要指?biāo)測定方法如下:

        1.3.1比葉面積的測定隨機選取一株幼苗,測量旗葉的長度和最寬的寬度,再將測量后的葉片于烘箱中烘干48 h,稱量葉片恒重,利用葉面積計算公式:0.76×葉長(cm)×葉寬(cm)計算葉面積[19]。計算公式如下:

        SLA=葉面積(cm2)/葉重(g)

        1.3.2葉綠素含量的測定隨機剪下一片葉片,用電子天平稱取0.1 g,將葉片洗干凈后剪碎,裝入25 mL的試管中,立即加入丙酮-無水乙醇混合浸提液,用722型分光光度計分別在波長645 nm、663 nm處測定并記錄光密度值,測定時以混合浸提液作為對照。根據(jù)測得的光密度值,計算出小麥葉片每克鮮重含葉綠素a、葉綠素b和總?cè)~綠素的含量(mg/g)[20]。計算公式如下:

        Ca=12.71A663-2.59A645

        Cb=22.88A645-4.67A663

        C=Ca+Cb=20.29A645+8.04A663

        葉綠素a含量(mg/g)=Ca×V/W

        葉綠素b含量(mg/g)=Cb×V/W

        葉綠素總量(mg/g)=C×V/W

        上式中:V為提取液的體積(L);W為材料的鮮重(g)

        1.3.3快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動力學(xué)和參數(shù)的測定隨機選取幼苗的一片葉片,先進行20 min的暗適應(yīng),再使用FluorPen FP 100 Max手持熒光儀對葉片進行熒光誘導(dǎo)動力學(xué)曲線和快速光響應(yīng)曲線的測定。熒光參數(shù)如表2所示。

        為了比較OJIP曲線及其之間的歸一化PF瞬態(tài)曲線,使用以下公式:

        Vt=(Ft-Fo)/(Fp-Fo)

        ΔVt=VtTR-VtCK

        1.4數(shù)據(jù)處理

        利用Excel2010進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計;采用SPSS22.0進行one way-ANOVA分析和LSD多重比較(P<0.05),采用Origin2018進行作圖。

        2結(jié)果與分析

        2.1微塑料對小麥幼苗比葉面積的影響

        不同濃度PP-MPs對小麥各測定時期的比葉面積(SLA)影響如圖1所示。隨著生育期的延遲,除CK外,T1、T2、T3、T4的SLA均呈下降趨勢。隨著微塑料濃度的增加,處理7 d后小麥的SLA均存在差異(P<0.05),其中以T3處理的比葉面積最高,分別比T1、T2、T4處理高5.51%、5.84%和21.39%。處理14 d后的SLA存在極顯著差異(P<0.01),其中以T3處理下的比葉面積最高,分別比T1、T2、T4處理高34.74%、42.90%和36.65%。處理21 d后的SLA存在極顯著差異(P<0.01),其中以T3處理下的比葉面積最高,分別比T1、T2、T4處理高54.53%、32.95%和32.81%。

        2.2微塑料對小麥葉綠素含量的影響

        不同濃度PP-MPs對小麥各測定時期的葉綠素含量影響如表3所示。處理7d后的葉綠素a、葉綠素b、以及總?cè)~綠素含量均無顯著性差異(F=2.84、1.73、2.94、1.38,P>0.05)。14 d后的葉綠素a和總?cè)~綠素含量差異性較為顯著(F=2.84、2.94,P<0.05),其中葉綠素a含量以CK和T4(2.8 g/kg)處理較高,分別較T1、T2、T3處理高21.22%、21.01%、17.75%和14.48%、14.25%、10.72%,總?cè)~綠素含量以CK和T4(2.8 g/kg)處理最高,分別較T1、T2、T3處理高18.54%、17.28%、16.62%和13.49%、12.16%、11.45%。處理21d后的葉綠素a和葉綠素a/b含量差異性較為顯著(F=3.39、3.38,P<0.05),葉綠素a含量以CK、T3(2.1 g/kg)和T4(2.8 g/kg)處理較高,分別較T1和T2處理高34.94%、29.47%、38.41%、33.23%和41.19%、36.24%,葉綠素a/b值以CK、T3(2.1 g/kg)和T4(2.8 g/kg)處理較高,分別較T1、T2處理高39.00%、23.50%、37.76%、21.94%和44.04%、29.82%。

        2.3微塑料對小麥葉綠素基本熒光參數(shù)的影響

        不同濃度PP-MPs對小麥各測定時期的基本熒光參數(shù)影響如表4所示。不同濃度PP-MPs對處理7 d幼苗的基本熒光并無顯著影響(P>0.05)。處理14 d后,T4處理的Fo(初始熒光)最大,與T1、T2處理存在顯著差異(P<0.01),分別比T1、T2高23.96%、10.47%。處理21 d后,T4處理的Fo最大,除CK處理外(P>0.05),與其他處理差異顯著(P<0.01),分別比T1、T2和T3處理高11.64%、10.27%和11.91%。不同微塑料添加濃度處理14 d后的Fm(最大熒光)以T4處理為最大,顯著大于T1處理(P<0.01),比T1高26.60%。處理21 d后,F(xiàn)m以CK處理為最大,除T4處理以外,與其他處理差異顯著(P<0.01),分別比T1、T2、T3高11.28%、12.34%和18.11%。

        2.4微塑料對小麥快速葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)動力學(xué)曲線的影響

        不同濃度PP-MPs對各測定時期小麥快速葉綠素?zé)晒鈩恿W(xué)曲線(OJIP)和相對可變曲線(Vt)如圖2所示。A、D表示處理7d后小麥OJIP曲線和Vt曲線,與CK相比,其余處理組的熒光趨勢逐漸升高,其中以T2處理下的熒光值增長趨勢最大,5個處理組的相對可變熒光在I點(30ms)差異最為顯著,其中T2的相對可變熒光值最高。B、E表示處理14d后小麥的OJIP和Vt曲線,與CK相比,T1處理下的熒光值增長趨勢最大,5個處理組的相對可變熒光在I點(30ms)差異最為顯著,其中T4的相對可變熒光值最高。C、F表示處理21d后小麥OJIP和Vt曲線,O-J階段T3的熒光值增長加快,J-I段CK的熒光值增長較快,在P點處,熒光值逐漸趨于穩(wěn)定,以CK的熒光值為最大。

        2.5微塑料對小麥相對CK可變熒光曲線和葉片光響應(yīng)曲線的影響

        不同濃度PP-MPs對各測定時期小麥的相對CK的可變熒光(ΔVt)和葉片光響應(yīng)曲線(LC3)如圖3所示。H、J和L表示測定時期為7 d、14 d和21d后小麥的ΔVt曲線,5個處理組間的差異均存在先增大后縮小的趨勢。處

        理7 d和21 d后小麥的的ΔVt>0,處理14 d后小麥的ΔVt<0。I、K和M表示測定時期為7 d、14 d和21 d后小麥的葉片光響應(yīng)曲線(LC3),處理7 d后,T2處理下葉片的量子產(chǎn)額(QY值)為0.63,在20μmol/(m2·s) PPFD達到最大,說明其光補償點(LCP)在20 μmol/(m2·s) PPFD左右;處理14 d后,T2處理下葉片的QY值為0.67,在50 μmol/(m2·s) PPFD達到最大,說明其光補償點(LCP)在50 μmol/(m2·s) PPFD左右;處理21 d后, T3處理下葉片的QY值為0.67,在50 μmol/(m2·s) PPFD達到最大,說明其光補償點(LCP)在50 μmol/(m2·s) PPFD左右。

        3討論與結(jié)論

        幼苗期是農(nóng)作物生長發(fā)育的關(guān)鍵環(huán)節(jié),也是植物生命周期中最重要階段,會直接影響農(nóng)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)[21]。本研究發(fā)現(xiàn),處理7d后不同濃度(0.7~2.4 g/kg)PP-MPs均對小麥葉面積生長起到顯著促進作用,這可能由于微塑料一定程度上改變了土壤容重,提高了小麥根系生長初期對水分的吸收能力[22]。處理14和21 d后,低濃度(0.7 g/kg)和高濃度(2.8 g/kg)對小麥的比葉面積具有明顯抑制作用,這可能是由于生育期的延遲,低濃度微塑料更易被植物吸收,影響了植物生長代謝過程[23];而微塑料在土壤中聚集過多則會增加土壤孔隙度,阻止小麥根系與土壤的接觸,從而抑制了植物的生長發(fā)育[24]。由此可以推測,低濃度(0.7 g/kg)PP-MPs抑制了小麥葉片的生長,而中高濃度(2.1 g/kg)PP-MPs達到了植株的生長損傷的臨界值,激發(fā)了小麥體內(nèi)的抗逆性機制,從而促進了葉片的生長。

        葉綠素是植物進行光合作用的主要色素,是表達植物生長狀況的重要指標(biāo)之一[25]。本研究發(fā)現(xiàn),處理7d后不同濃度(0.7~2.8 g/kg)PP-MPs對小麥的葉綠素含量影響不大,這可能因為該時期小麥的根系正處于發(fā)育階段,對土壤中的微塑料并不敏感。在植物光合系統(tǒng)中,葉綠素a(Chla)負責(zé)接收和傳遞光能[26]。處理14 d和21 d后,低濃度(0.7 g/kg)PP-MPs顯著降低了葉片的葉綠素a含量(Chla),這可能是隨著生育期的延長,微塑料暴露時間的增加,低濃度的微塑料顆粒更容易被植物根系吸收,從而抑制了葉片中與葉綠素a合成相關(guān)的蛋白酶,導(dǎo)致葉片光合色素的合成受阻,最終導(dǎo)致植物體內(nèi)的葉綠素a含量的下降[14]。葉綠素a/b(Chla/b)的變化表現(xiàn)為植物抵御不良環(huán)境的一種自我保護[11]。處理21 d后,低濃度(0.7 g/kg)PP-MPs顯著降低了小麥葉片的Chla/b,這可能是由于微塑料阻礙了部分葉綠素的合成途徑,而Chla/b的降低則可以緩解微塑料對小麥光系統(tǒng)II的損傷[27]。

        葉綠素?zé)晒馀c植物光合作用聯(lián)系密切,葉綠素?zé)晒鈪?shù)與葉綠素含量相結(jié)合可以更為準(zhǔn)確地反映植物的生長狀態(tài)[28]。初始熒光(Fo)值可以反映色素對光能的吸收作用,F(xiàn)o值越低光能利用效率越高[29]。處理14 d和21 d后,隨著PP-MPs濃度的增加,葉片的初始熒光(Fo)呈現(xiàn)先減少后上升的趨勢,說明低濃度(0.7 g/kg)PP-MPs在一定程度上提高了光系統(tǒng)II(PSII)中光能的利用效率,緩解了葉綠素含量的下降對小麥光合作用造成的損傷。最大熒光(Fm)值的高低則反映了電子反應(yīng)活躍度的大小[30]。處理14 d和21 d后,隨著PP-MPs濃度的增加,F(xiàn)m值大致呈上升趨勢,說明小麥在高濃度(2.8 g/kg)PP-MPs下PSII的電子較為活躍,這可能與高濃度PP-MPs在一定程度上促進光合色素生成有關(guān)。Fv/Fm在植物受到環(huán)境脅迫時會下降[31],不同濃度PP-MPs對小麥PSII的Fv/Fm影響不大,這與葉子琪[32]等得出PE-MPs對蠶豆葉片的Fv/Fm影響研究結(jié)果一致,說明PP-MPs未對小麥的光合電子傳遞過程造成影響。

        葉綠素?zé)晒饪焖僬T導(dǎo)曲線(OJIP)可以反映出PSII反應(yīng)中心原初光化學(xué)信息,相對可變熒光Vt可以使OJIP曲線得到標(biāo)準(zhǔn)化并減少誤差[33]。通過OJIP曲線可以發(fā)現(xiàn)各處理組的趨勢大致相同,且各處理的Vt曲線幾乎重合,說明PP-MPs添加未對小麥PSII反應(yīng)中心造成損傷。處理14 d和21 d后,中高濃度(2.1~2.8 g/kg)促進了小麥PSII中電子產(chǎn)額(QY),說明該濃度下的PP-MPs有助于提高植物的光合活性,增強植物對強光的耐受能

        力[34]。

        綜上所述,本研究結(jié)果表明,隨著植株生育期的延長,低濃度(0.7 g/kg)PP-MPs添加顯著抑制了對小麥生長,光合色素的合成,但提高了PSII光能利用效率。中高濃度(2.1~2.8 g/kg)PP-MPs一定程度上促進了小麥葉面積的生長,光合色素的合成以及PSII電子活躍度。未來除了加大對農(nóng)田塑料薄膜的回收利用,還應(yīng)該進一步深入研究不同粒徑、不同種類的微塑料對植物體內(nèi)產(chǎn)生的累積效應(yīng)和毒性機制。

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