摘要：

本試驗(yàn)通過(guò)抑菌法、盆栽及苗床防治試驗(yàn)測(cè)定了10%苯醚甲環(huán)唑EC、12.5%腈菌唑EC、98%惡霉靈原藥、58%甲霜靈錳鋅WP共4種殺菌劑對(duì)煙草莖腐病的防治效果。結(jié)果表明，4種供試藥劑中，12.5%腈菌唑EC對(duì)煙草莖腐病具有良好的防治效果，毒力室內(nèi)測(cè)定EC50為7.3 μg/mL，盆栽相對(duì)防效達(dá)93.3%，苗床防治效果為78.7%，在煙草生產(chǎn)中具有較好的推廣應(yīng)用價(jià)值。

關(guān)鍵詞：煙草莖腐??；藥劑；篩選試驗(yàn)

中圖分類號(hào)：S435.72 文獻(xiàn)識(shí)別碼：A 文獻(xiàn)編號(hào)：1005-6114（2025）01-054-03

煙草莖腐病是由半知菌亞門灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea Pevs.）引起的一種苗期根莖病害，受害煙苗莖部腐爛，植株凋萎死亡，病莖、病葉表面密生灰色霉層，高溫高濕或陰雨連綿的天氣有利于發(fā)病，傳播速度較快，特別是在當(dāng)前大棚漂浮育苗過(guò)程中，若防治不及時(shí)或用藥不當(dāng)將對(duì)煙苗培育及大田生產(chǎn)帶來(lái)重大損失。煙草育苗大棚的多年連續(xù)使用，導(dǎo)致苗棚內(nèi)病原菌存量增加，煙草莖腐病發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)［1，2］。

目前化學(xué)防治仍是煙草病害最為快速、有效的防治措施。筆者前期對(duì)福建煙區(qū)烤煙根莖類病害進(jìn)行藥劑篩選和防治試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)10%苯醚甲環(huán)唑 EC和12.5%腈菌唑EC及其復(fù)配劑對(duì)煙草立枯絲核菌、煙草炭疽病菌、煙草根腐尖孢鐮刀菌均具有較強(qiáng)的抑制作用［3］。 王秋萍等研究發(fā)現(xiàn)，甲霜·錳鋅和中生菌素與煙草專用肥混合施用對(duì)煙草病害具有較好的防治效果，并且可以提高煙葉產(chǎn)量。但是長(zhǎng)期施用單一的化學(xué)藥劑，會(huì)增加病原菌的抗藥性，導(dǎo)致防效降低［4］。本試驗(yàn)通過(guò)藥劑室內(nèi)毒力測(cè)定、盆栽及苗床防治試驗(yàn)，開(kāi)展煙草莖腐病防治藥劑篩選，以期為有效防治該病害及化學(xué)藥劑的輪換施用提供科學(xué)依據(jù)，培育健壯煙苗，保障大田生產(chǎn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試藥劑：10%苯醚甲環(huán)唑EC，中國(guó)科學(xué)院植保所廊坊農(nóng)藥中試廠；12.5%腈菌唑EC，山東省聯(lián)合農(nóng)藥工業(yè)有限公司；98%惡霉靈原藥，延邊綠洲化工有限責(zé)任公司；58%甲霜靈錳鋅WP，西安美邦藥業(yè)有限公司。

供試菌株：灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea Pevs.）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 藥劑室內(nèi)毒力測(cè)定

1.2.1.1 菌株接種活化

將供試菌株在PSA培養(yǎng)基平板上接種活化，置于溫度26℃、 濕度70%的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.2.1.2 活化菌株致病性測(cè)定

選取生長(zhǎng)健壯的4～6葉期煙苗種植在黑色花盆中，緩苗后，采用刺傷接種法進(jìn)行活化菌株致病性測(cè)定。將煙苗莖基部用消毒的針輕微刺傷，挑取1.2.1.1中活化3 d的帶培養(yǎng)基的菌株貼于煙苗傷口處，并用濕棉布保濕，以貼不帶菌株的純培養(yǎng)基為對(duì)照，刺傷接種病菌和對(duì)照處理各3次重復(fù)，每一重復(fù)10株煙苗，放置于室內(nèi)培養(yǎng)，保持室內(nèi)溫度26℃，3 d后觀察處理煙株的生長(zhǎng)及發(fā)病情況。

1.2.1.3 毒力測(cè)定

參照蔣家珍等［5］采用菌落生長(zhǎng)測(cè)定法，將上述各藥劑經(jīng)過(guò)濾滅菌后加于溶解冷卻至45℃左右的PSA培養(yǎng)基中，使其有效濃度分別為5、10、20、30、40 μg/mL，每一培養(yǎng)皿倒入上述含藥培養(yǎng)基15 mL，以加無(wú)菌水為對(duì)照，共6個(gè)處理，每一處理3次重復(fù)，每一重復(fù)3皿。培養(yǎng)基凝固后在培養(yǎng)皿中央接1 mm×1 mm大小活化的菌塊，置于26℃恒溫箱中培養(yǎng)36 h，測(cè)定菌落徑向線性生長(zhǎng)量，計(jì)算藥劑對(duì)菌落生長(zhǎng)的抑制率。通過(guò)菌絲生長(zhǎng)抑制概率值和藥劑濃度對(duì)數(shù)值之間的線性回歸分析，求出各藥劑對(duì)病菌的有效抑制中濃度（EC50值）。

1.2.2 盆栽防治試驗(yàn)

1.2.2.1 灰葡萄孢菌孢子懸浮液的制備

將單孢分離物在PSA平板上培養(yǎng)5 d，用內(nèi)徑6 mm的打孔器打取菌餅，接種到Bilays培養(yǎng)液中，每250 mL培養(yǎng)液接種4個(gè)菌餅，于26℃、120 r/min搖床上振蕩培養(yǎng)8 d。將培養(yǎng)好的病菌懸浮液經(jīng)2層紗布過(guò)濾，在顯微鏡下采用血球計(jì)數(shù)法計(jì)孢子數(shù)，配成濃度約1×105個(gè)/mL的孢子懸浮液。

1.2.2.2 帶菌育苗基質(zhì)的制備

參照李艷瓊等［6］的方法，取常規(guī)育苗基質(zhì)進(jìn)行高壓滅菌，將上述配制的孢子懸浮液與滅菌基質(zhì)攪拌混勻，制備孢子濃度為150個(gè)/g的帶菌育苗基質(zhì)。

1.2.2.3 藥液配制

A.10%苯醚甲環(huán)唑EC 1 500倍液；B.12.5%腈菌唑EC 2 000倍液；C.98%惡霉靈原藥3 000倍液；D.58%甲霜靈錳鋅WP 800倍液。

1.2.2.4 防治處理

采用規(guī)格為60 cm×24 cm×4 cm的育苗盤，用70%（v/v）乙醇表面消毒，填上1.2.2.2中制備的帶菌育苗基質(zhì)，使之與孔穴邊緣齊平，播種。將化學(xué)藥劑與營(yíng)養(yǎng)液混配為1.2.2.3中的藥液，以添加等量清水為對(duì)照，共5個(gè)處理，每一處理3個(gè)育苗盤，每盤種植10株煙苗。將育苗盤放置于裝有藥液及對(duì)照處理的搪瓷盤內(nèi)，置于20～26℃的溫室內(nèi)光照培養(yǎng)，每隔7 d換一次含藥劑的營(yíng)養(yǎng)液。待煙苗4～6片葉時(shí)候觀察、統(tǒng)計(jì)不同處理煙苗發(fā)病率及危害程度。

1.2.3 苗床防治試驗(yàn)

選取同一育苗大棚內(nèi)煙苗生長(zhǎng)較為一致的相鄰漂浮育苗池進(jìn)行試驗(yàn)，在煙苗大十字期，分別在試驗(yàn)苗池中加入上述藥劑，使苗床中營(yíng)養(yǎng)液藥劑濃度分別為10%苯醚甲環(huán)唑EC 1 500倍液、12.5%腈菌唑EC 2 000倍液、98%惡霉靈原藥3 000倍液、58%甲霜靈錳鋅WP 800倍液，以不添加任何藥劑的苗池作為對(duì)照，共5個(gè)處理，每處理1個(gè)育苗池，其余均按照常規(guī)漂浮育苗技術(shù)進(jìn)行培育［7，8］。在成苗期移栽前6 d觀察、記錄不同處理苗床煙苗發(fā)病情況。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)處理利用DPS 2000數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，Microsoft Excel XP進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用Duncans新復(fù)極差分析比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 活化菌株致病性測(cè)定

活化菌株致病性測(cè)定結(jié)果顯示，接種活化菌株的煙苗發(fā)病率為100%，接種煙苗莖部腐爛，植株凋萎死亡，病莖、病葉表面密生灰色霉層，與大棚集約化漂浮育苗發(fā)病癥狀一致，僅貼純培養(yǎng)基的對(duì)照煙苗沒(méi)有出現(xiàn)發(fā)病癥狀，生長(zhǎng)狀況良好。由此可見(jiàn)，保存菌株經(jīng)活化后保持良好的致病性。

2.2 藥劑室內(nèi)毒力測(cè)定

藥劑毒力測(cè)定結(jié)果表明，12.5%腈菌唑EC具有良好的抑菌效果，EC50值最小，為7.3 μg/mL；98%惡霉靈原藥和58%甲霜靈錳鋅WP次之，EC50分別為11.5 μg/mL和15.8 μg/mL；10% 苯醚甲環(huán)唑EC的EC50值為21.7 μg/mL，抑菌效果較差（表1）。

2.3 盆栽防治效果

試驗(yàn)結(jié)果表明，所有供試藥劑對(duì)煙草莖腐病均有一定的防治效果，煙苗發(fā)病率與對(duì)照差異顯著（表2）。4種藥劑中，12.5%腈菌唑EC 2 000倍液對(duì)煙草莖腐病相對(duì)防效最佳，施藥后10 d煙苗發(fā)病率為6.7%，相對(duì)防效達(dá)93.3%；98%惡霉靈原藥3 000倍液和58%甲霜靈錳鋅WP 800倍液對(duì)煙草莖腐病防治效果次之，煙苗發(fā)病率分別為16.7%和36.7%，相對(duì)防效分別為83.3%和63.3%；10%苯醚甲環(huán)唑EC 1 500倍液防治效果最差，煙苗發(fā)病率高達(dá)93.3%。

2.4 苗床防治效果

4種供試殺菌劑對(duì)煙草莖腐病均具有一定的防效，在成苗期移栽前6 d觀察，12.5%腈菌唑EC 2 000倍液對(duì)煙草莖腐病防治效果最佳，煙苗發(fā)病率為3.2%，病情指數(shù)為5.4，相對(duì)防效為78.7%；98%惡霉靈原藥3 000倍液處理煙苗發(fā)病率為5.6%，病情指數(shù)為7.4，相對(duì)防效為70.8%；58%甲霜靈錳鋅WP 800倍液處理煙苗發(fā)病率為6.8%，病情指數(shù)為9.2，相對(duì)防效為63.6%；10%苯醚甲環(huán)唑EC 1 500倍液處理煙苗發(fā)病率為9.4，病情指數(shù)為12.4，相對(duì)防效為51%，對(duì)煙草莖腐病防治效果較差（表3）。試驗(yàn)中供試煙苗均生長(zhǎng)正常，無(wú)藥害現(xiàn)象發(fā)生。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)合平板抑菌、盆栽及苗床防治試驗(yàn)，對(duì)12.5%腈菌唑EC等4種殺菌劑對(duì)煙草莖腐病的防治效果進(jìn)行測(cè)定。室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果顯示，不同殺菌劑對(duì)煙草莖腐病菌（灰葡萄孢菌）均有一定的抑制效果，以12.5%腈菌唑EC抑菌效果最為顯著，室內(nèi)毒力測(cè)定EC50值為7.3 μg/mL；盆栽防治試驗(yàn)結(jié)果表明，4種殺菌劑對(duì)煙草莖腐病均具有一定的防效，其中12.5%腈菌唑EC 2 000倍液處理表現(xiàn)最佳，施藥后7 d相對(duì)防效達(dá)93.3%；苗床防治試驗(yàn)結(jié)果表明，4種殺菌劑在大棚育苗過(guò)程中對(duì)煙草莖腐病均具有一定的防效，以12.5%腈菌唑EC 2 000倍液最明顯，相對(duì)防效為78.7%。綜上，12.5%腈菌唑EC在室內(nèi)毒力測(cè)定、盆栽及苗床試驗(yàn)中，對(duì)煙草莖腐病具有顯著的防效，均優(yōu)于其它3種供試藥劑，具有較好的推廣應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

［1］ "陳志敏，過(guò)賦文，張曉陽(yáng)，等.煙草莖腐病的病原鑒定及生物學(xué)特性［J］.煙草科技，2011，285（4）：78-80.

［2］ 李小杰，李琦，劉暢，等.河南煙區(qū)煙草根莖類病害調(diào)查與病原鑒定［J］.煙草科技，2022，55（1）：41-47.

［3］ 陳志敏. 福建省煙草根莖病害診斷及防治藥劑篩選［D］.福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2009.

［4］ 王秋萍，張承，龍友華，等.藥肥混用對(duì)煙草病害防控及生長(zhǎng)、品質(zhì)產(chǎn)量的影響［J］.農(nóng)藥，2019，58（1）：6769，78.

［5］ 蔣家珍，吳學(xué)民.新型殺菌劑對(duì)立枯絲核菌的室內(nèi)毒力測(cè)定［J］.江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2004，20（4）：271-272.

［6］ 李艷瓊，楊根華.云南香石竹立枯病病原的鑒定及致病性研究［J］.植物病例學(xué)報(bào)，2008，38（2）：199-202.

［7］ GB/T 25241.1-2010，煙草集約化育苗技術(shù)規(guī)程［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2010.

［8］ 張涵，劉占卿，葉紅朝，等.漂浮育苗溫度特征及保溫措施對(duì)煙草幼苗生長(zhǎng)的影響［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2015（2）：15-17.