摘要:為建立辣椒苗期耐熱性綜合評(píng)價(jià)體系,以30份辣椒種質(zhì)為試驗(yàn)材料,隨機(jī)分成2組,分別用于耐熱性預(yù)測(cè)模型構(gòu)建(20份)和模型驗(yàn)證(10份)。利用人工氣候室模擬高溫環(huán)境,測(cè)定10個(gè)與高溫相關(guān)的形態(tài)和生理指標(biāo),應(yīng)用主成分分析、隸屬函數(shù)、聚類分析、逐步回歸分析法綜合評(píng)價(jià)辣椒材料的耐熱性。結(jié)果表明,在10個(gè)指標(biāo)中,有8個(gè)單項(xiàng)指標(biāo)受高溫影響顯著,其可轉(zhuǎn)化為3個(gè)相互獨(dú)立的綜合指標(biāo),累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)76.474%;基于綜合評(píng)價(jià)值(D 值)的系統(tǒng)聚類將20份材料分為抗、中抗、中感和敏感4大類;通過逐步回歸分析構(gòu)建了預(yù)測(cè)方程,并以此方程對(duì)驗(yàn)證組10份材料的耐熱性進(jìn)行預(yù)測(cè),結(jié)果與D 值極顯著相關(guān),表明此方程對(duì)辣椒苗期耐熱性的預(yù)測(cè)具有較好的可靠性,可用于辣椒苗期耐熱性評(píng)價(jià)。通過比較熱害指數(shù)法和綜合評(píng)價(jià)法鑒定辣椒苗期耐熱性,發(fā)現(xiàn)2種方法的鑒定結(jié)果總體相似,熱害指數(shù)法對(duì)于中等抗性材料的鑒定區(qū)分度不夠,但其更直觀、便捷,可作為耐熱性鑒定的可靠指標(biāo)和進(jìn)行耐熱性初步評(píng)價(jià)。
關(guān)鍵詞:辣椒;苗期耐熱性;綜合評(píng)價(jià)體系;預(yù)測(cè)方程;熱害指數(shù)
doi:10.13304/j.nykjdb.2023.0391
中圖分類號(hào):S641.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):10080864(2025)03006011
溫室氣體排放引起的全球變暖日益嚴(yán)重,局部地區(qū)極端高溫出現(xiàn)的頻率、強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間均呈增加趨勢(shì)[12]。我國長江中下游及以南地區(qū)夏季日最高氣溫常超過35 ℃,極端的可超過40 ℃ [34]。辣椒適宜生長的溫度是20~30 ℃,當(dāng)氣溫超過35℃,辣椒生長發(fā)育受阻,表現(xiàn)為植株矮小,葉色變淡,畸形花、果等[56]。
遭受高溫脅迫時(shí),辣椒葉片蒸騰速率增加以降低葉溫,當(dāng)細(xì)胞內(nèi)水分蒸騰消耗量超過根系吸水量時(shí),植株出現(xiàn)萎蔫甚至死亡。衡量高溫脅迫下植株萎蔫程度的熱害指數(shù)(heat injury index,HII)常直接用于植物耐熱性評(píng)價(jià)[7-10]。高溫脅迫打破活性氧(reactive oxygen specie,ROS)與清除系統(tǒng)之間的平衡,導(dǎo)致辣椒植株中的ROS含量急劇增加,造成核酸、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等的氧化損傷,觸發(fā)非程序性細(xì)胞死亡[11]。細(xì)胞中的ROS清除系統(tǒng)響應(yīng)脅迫,通過調(diào)控過氧化物酶(peroxidase,POD)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、過氧化氫酶(catalase,CAT)等的活性變化來維持細(xì)胞內(nèi)氧化還原穩(wěn)態(tài)[1213];同時(shí),細(xì)胞內(nèi)非酶ROS清除物質(zhì),如脯氨酸(proline,Pro)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)等也迅速積累來清除多余的ROS[14]。此外,高溫脅迫還影響細(xì)胞滲透性,一些滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)如可溶性糖(soluble sugar,SS)[15]和Pro含量增加以保持細(xì)胞內(nèi)外滲透平衡,提高自身抗逆性??扇苄缘鞍祝╯oluble protein,SP)作為滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),其積累對(duì)細(xì)胞膜系統(tǒng)和細(xì)胞內(nèi)生命物質(zhì)起保護(hù)作用,在植物應(yīng)答高溫脅迫過程中有重要作用[1617]。因此,這些表型、生理生化特征常作為辣椒耐熱性評(píng)價(jià)、鑒定的指標(biāo)。
植物遭受高溫脅迫后的外觀形態(tài)、生理生化指標(biāo),甚至基因、蛋白的表達(dá)都因基因型的不同而有所差異,不同基因型對(duì)高溫脅迫的應(yīng)答方式不同。因此,根據(jù)單項(xiàng)指標(biāo)不能準(zhǔn)確評(píng)判材料的耐熱性。本研究選擇10個(gè)單項(xiàng)指標(biāo),利用主成分分析結(jié)合隸屬函數(shù)對(duì)20份辣椒材料的耐熱性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià),構(gòu)建苗期耐熱性預(yù)測(cè)方程,篩選可用于辣椒苗期耐熱性鑒定的指標(biāo),以期為辣椒耐熱性種質(zhì)篩選提供科學(xué)依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 供試材料
以田間觀察具有耐熱性差異的30份辣椒種質(zhì)資源為材料,所用試驗(yàn)材料均由江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所茄果類蔬菜研究室提供。其中,第1組20份材料用于構(gòu)建耐熱性預(yù)測(cè)模型,第2組10份材料用于預(yù)測(cè)方程的檢驗(yàn)。
1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
選取飽滿的辣椒種子播于50孔育苗穴盤中,每個(gè)材料常溫(normal temperature,NT)對(duì)照和高溫(high temperature,HT)處理各10穴,設(shè)3次重復(fù),播種后置于人工氣候室常規(guī)培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為:白天28 ℃ /14 h、光照12 000 lx,夜間23 ℃/10 h,濕度均設(shè)置為70%。待幼苗長至4片真葉完全展開時(shí)進(jìn)行溫度試驗(yàn)。高溫處理:白天38 ℃/14 h,光照12 000 lx,夜間28 ℃ /10 h,濕度均為70%;常溫對(duì)照:條件設(shè)置同常規(guī)培養(yǎng)。連續(xù)處理48 h后取同一部位的葉片進(jìn)行各生理指標(biāo)測(cè)定。
用于調(diào)查熱害指數(shù)(HII)、株高(plant height,PH)和莖粗(stem diameter,SD)的每個(gè)材料播20穴,管理同上。待幼苗長至6葉1心時(shí)移至人工氣候箱,高溫處理參照陳文超等[18]的方法。
1.3 指標(biāo)測(cè)定
1.3.1 生理指標(biāo)的測(cè)定 POD、CAT活性和Pro、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的測(cè)定分別采用POD Activity Assay Kit、CAT Activity AssayKit、Pro Content Assay Kit 和MDA Content AssayKit試劑盒(BOXBIO,北京),按照操作說明進(jìn)行。參照李合生[19]的方法,采用蒽酮比色法測(cè)定可溶性糖(SS)含量,采用BCA法測(cè)定可溶性蛋白(SP)含量,采用分光光度法測(cè)定葉綠素含量(chlorophyll content,CC),并測(cè)定相對(duì)電導(dǎo)率(relative electrical conductivity,REC)。