關(guān)鍵詞：4′-N，N-二乙氨基-3-羥基苯并黃酮；激發(fā)態(tài)分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移；密度泛函理論/含時密度泛函理論；溶劑極性效應(yīng)；熒光動力學(xué)

1 引言

激發(fā)態(tài)分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移（ESIPT）是一種在化學(xué)和生物體系中重要的基礎(chǔ)光化學(xué)反應(yīng)，它主要發(fā)生在具有分子內(nèi)氫鍵的發(fā)色團中。ESIPT可以用如示意Scheme 1所示的四能級模型描述：當(dāng)分子被光激發(fā)后，通過Frank-Condon躍遷迅速生成分子構(gòu)型不變的“Normal”激發(fā)態(tài)（N*態(tài)），N*態(tài)隨后會通過激發(fā)態(tài)分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移（ESIPT）過程轉(zhuǎn)化為N*態(tài)的“Tautomer”激發(fā)態(tài)（T*態(tài)）。通常情況下，N*和T*態(tài)可以通過雙熒光發(fā)射的方式回到各自基態(tài)，而處于Tautomer基態(tài)（T態(tài)）的分子又可以通過基態(tài)分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移（GSIPT）反應(yīng)回到Normal基態(tài)（N態(tài)） 1，最終完成四能級循環(huán)。

在具有ESIPT特性的分子中，3-羥基黃酮衍生物（3-HFs）因其來自天然，且具有對周圍環(huán)境（主要是各種溶劑）變化敏感的熒光性質(zhì)而引起人們廣泛關(guān)注2，3。對3-HFs熒光特性的溶劑效應(yīng)研究已被應(yīng)用于各種領(lǐng)域，如：激光材料4、監(jiān)測生物柴油中甲醇含量的比率型熒光探針5、監(jiān)測脂滴形貌的動態(tài)熒光成像探針6等。

自20世紀(jì)90年代以來，對3-HFs的ESIPT機制的溶劑效應(yīng)研究已廣泛開展7–9。在非質(zhì)子乙腈/苯混合溶劑中，研究者開展了對4′-N，N-二烷基氨基-3-羥基黃酮的ESIPT動力學(xué)的實驗和理論研究10。Chou等人報道了從正庚烷轉(zhuǎn)變?yōu)榧状紩r，4′-N，N-二乙氨基-3-HF的N*態(tài)發(fā)射峰強度顯著增加且大幅紅移（gt; 3000 cm?1） 11，他們提出：在強極性、質(zhì)子型溶劑乙醇中，4′-二乙氨基向羰基氧原子發(fā)生了分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移，從而導(dǎo)致N*態(tài)具有兩性離子構(gòu)型。Shynkar等人研究揭示了4′-N，N-二乙氨基-3-HF的ESIPT反應(yīng)（在兩個激發(fā)態(tài)之間的快速可逆反應(yīng)）在幾十皮秒的尺度上發(fā)生12。Roshal等人探索了溶劑效應(yīng)對4′-二甲基氨基-3-HF中ESIPT速率的影響，該分子可以在超快時間尺度上形成分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移（ICT）態(tài)13。Douhal等人則在同一個化合物的研究中觀察到其ICT與質(zhì)子轉(zhuǎn)移的競爭關(guān)系14：非極性溶劑中，ICT不會發(fā)生，只在2 ps時間內(nèi)發(fā)生質(zhì)子轉(zhuǎn)移過程；極性溶劑中，ICT發(fā)生在100–200fs內(nèi)，而質(zhì)子轉(zhuǎn)移則在幾皮秒到幾十皮秒內(nèi)發(fā)生。此外，Chou等人使用飛秒熒光上轉(zhuǎn)換技術(shù)并結(jié)合從頭算，提出：不同溶劑導(dǎo)致4′-N，N-二乙氨基-3-HF的電子態(tài)勢壘不同，從而使其N*和T*態(tài)之間存在很大平衡極化差異，最終影響正向和反向ESIPT速率15。Rumble等人使用飛秒時間分辨克爾門發(fā)射光譜技術(shù)研究4′-N，N-二乙氨基-3-HF在碳酸丙烯酯/乙腈混合溶劑中的ESIPT動力學(xué)，也得到類似結(jié)論16。Ghosh等人研究發(fā)現(xiàn)，在氫鍵溶劑中，由于4′-N，N-二甲基氨基-3-HF與溶劑會形成分子間氫鍵，從而導(dǎo)致激發(fā)態(tài)分子較慢的溶劑弛豫過程，測得～100 ps的ESIPT時間常數(shù)17。另一項研究表明，該化合物在三種不同烷基鏈長的正-烷基醇中也存在非常慢的ESIPT過程，并且ESIPT和N*溶劑化時間常數(shù)均隨著烷基鏈長單調(diào)增加18。Kuang等人使用‘pump-dump-probe’光譜技術(shù)，揭示了4′-N，N-二乙氨基-3-HF存在超快的基態(tài)分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移（GSIPT）動力學(xué)過程，同時證明該過程是一個溶劑依賴的不可逆過程1。Chen等人使用DFT和TDDFT方法對4′-甲氧基-3-HF 3和4′-二甲基氨基-6，7-二甲氧基-3-HF 19的ESIPT溶劑效應(yīng)進行了理論研究，發(fā)現(xiàn)隨著溶劑極性增加，ESIPT逐漸變得困難，這與早期實驗結(jié)果相一致。

已有研究表明苯并-3羥基黃酮（苯并-3HF）衍生物是一類在生物體系中具有潛在應(yīng)用價值的一氧化碳釋放分子（CORM） 20，21。4′-N，N-二乙氨基-3-羥基黃酮（D-HBF）則被最近的研究確認(rèn)是一種高效的脂滴成像熒光探針6，因其具有與3-HF相似的ESIPT溶劑效應(yīng)。此外，由于該衍生物在結(jié)構(gòu)上具有擴展的π電子云體系，從而使其光譜響應(yīng)范圍變大。然而，關(guān)于D-HBF詳細(xì)的ESIPT溶劑調(diào)節(jié)機制研究尚未見諸報道。

本研究采用多種光譜技術(shù)并結(jié)合理論計算，系統(tǒng)探討了溶劑極性對D-HBF的ESIPT的調(diào)控機制。首先選擇了三種極性依次增大、極化率基本相似的非質(zhì)子型有機溶劑，分別為：環(huán)己烷（CYH）、乙醚（DEE）和四氫呋喃（THF）。實驗和理論研究均表明溶劑極性會影響D-HBF的ESIPT反應(yīng)平衡。4′-N，N-二乙氨基的引入導(dǎo)致N*態(tài)具有ICT特性，從而增強了其ESIPT動力學(xué)對溶劑極性的敏感性。溶劑極性增加會導(dǎo)致D-HBF正向和反向ESIPT反應(yīng)能壘變大，從而導(dǎo)致相應(yīng)的質(zhì)子轉(zhuǎn)移速率降低。此外，溶劑極性增加會降低N* T*吉布斯自由能變化的絕對值，最終導(dǎo)致平衡向N*態(tài)移動。本研究從實驗和理論上系統(tǒng)地研究了溶劑極性對苯并黃酮衍生物的ESIPT機制影響，為其作為熒光探針的開發(fā)奠定了理論基礎(chǔ)。

2 實驗與理論計算

2.1 試劑

4-二乙氨基苯甲醛（98%）購于北京伊諾凱科技有限公司（中國北京），1-（3-羥基萘-2-基）乙酮（95%）來自藥明康德（中國上海）。其他所有試劑和溶劑（gt; 99%）均來自北京通廣精細(xì)化工公司（中國北京）。所有試劑均未經(jīng)純化，直接使用。

D-HBF 的合成和結(jié)構(gòu)表征參考SupportingInformation 6。

2.2 實驗方法

1H NMR使用Bruker AM 600 MHz譜儀（德國，卡爾斯魯厄，布魯克公司）測試。紫外-可見吸收光譜采用Carry 60 UV-Vis （美國，加利福尼亞州，安捷倫公司）分光光度計測試，熒光光譜使用FS5熒光光譜儀測量（英國，愛丁堡，愛丁堡儀器公司）。熒光發(fā)射光譜的激發(fā)波長（λex）為430 nm，測量時將λex處吸光度調(diào)至lt; 0.1。絕對熒光量子產(chǎn)率（ΦFL）使用FLS 980熒光光譜儀（英國，愛丁堡，愛丁堡儀器公司）測得（積分球）。D-HBF在三種溶劑中的熒光壽命（τ，0–50 ns范圍）使用FLS980-STM熒光光譜儀（英國，愛丁堡，愛丁堡儀器公司）的時間相關(guān)單光子計數(shù)（TCSPC）模塊結(jié)合愛丁堡儀器公司的EPL-405 ps脈沖二極管激光器作為激發(fā)光源測得。其中，待測樣品的在420 nm處吸光度為0.02。儀器響應(yīng)函數(shù)（IRF）用30%的硅膠-水懸濁液作為散射體，采用與樣品相同的測試方法測得（120ps）。

D-HBF在0–600 ps時間尺度的熒光壽命（τ）使用條紋相機測定。通過鈦藍寶石放大器（Mira-900Coherent，美國）獲得工作頻率為76 MHz且脈沖持續(xù)時間約為100 fs的830 nm脈沖激光。該激光被分成兩束光：一束用于觸發(fā)條紋相機；另一束先經(jīng)過BBO晶體倍頻到415 nm，再通過脈沖選擇器將其降低到3.8 MHz，用來激發(fā)樣品。樣品發(fā)出的熒光由條紋相機（C5680，濱松，日本）收集。其中，條紋相機IRF ～10 ps。

2.3 計算部分

所有理論計算均使用Gaussian 16程序22，采用密度泛函理論（DFT）和時間依賴的密度泛函理論（TD-DFT）方法，結(jié)合B3LYP-D3/6-311+g（d，p）基組進行計算。為更準(zhǔn)確地計算弱靜電力相互作用，使用DFT-D3進行色散校正。此外，采用自洽反應(yīng)場（SCRF）中的極化連續(xù)介質(zhì)模型（PCM）對相應(yīng)的溶劑環(huán)境進行模擬。在構(gòu)象優(yōu)化過程中，分子的鍵長、鍵角或二面角沒有施加任何限制。分別計算了D-HBF的N、N*、T和T*態(tài)紅外振動頻率和偶極矩，計算結(jié)果沒有虛頻存在，表明優(yōu)化的結(jié)構(gòu)代表能量最小值。為了研究ESIPT反應(yīng)與氫鍵之間的關(guān)系，計算了D-HBF在S0和S1態(tài)下勢能曲線，O―H鍵長以0.05 ? （1 ? = 0.1 nm）每步的增量變化了26步。

吉布斯自由能的值是根據(jù)數(shù)學(xué)公式G = E +ΔGcorr + ZPE進行矯正，其中ΔGcorr吉布斯自由能校正項，ZPE是零點能項22。

3 結(jié)果與討論

3.1 UV-Vis吸收光譜和熒光光譜

圖1給出了室溫下D-HBF在三種溶劑中的穩(wěn)態(tài)吸收和發(fā)射光譜（結(jié)果歸一化）。相應(yīng)的光譜信息在總結(jié)于表1中。三種溶劑分別為：環(huán)己烷（CYH）、乙醚（DEE）和四氫呋喃（THF）；它們具有相似的極化率，但極性有顯著差異，Table S1中分別用溶劑的極化因子R（η）和極性因子P（ε）表示它們的差異，該表中另一個溶劑極性參數(shù)Δf 23，是基于溶劑的介電常數(shù)（ε）和折射率（η）計算得出。

三種溶劑中，D-HBF在350–470 nm范圍內(nèi)都呈現(xiàn)典型的π–π*躍遷吸收峰。其中，在CYH中的吸收光譜表現(xiàn)出清晰的振動結(jié)構(gòu)，而在DEE和THF中，由于溶劑的極性效應(yīng)導(dǎo)致精細(xì)結(jié)構(gòu)消失。隨著溶劑極性的增加，吸收峰逐漸展寬和紅移。在所有溶劑中都觀察到D-HBF的雙熒光發(fā)射峰。450–600nm和600–750 nm范圍內(nèi)的發(fā)射帶可分別歸屬為N*和T*發(fā)射（如示意圖1所示）。隨著溶劑極性的增加，N*和T*發(fā)射帶均發(fā)生紅移，其中N*發(fā)射比T*發(fā)射紅移更為顯著。有趣的是，溶劑極性的增加導(dǎo)致N*的斯托克斯位移相比于T*顯著增加（見表1），表明N*能級對溶劑極性變化更加敏感。T*在三種溶劑中斯托克斯位移（約7000 cm?1）都異常大，結(jié)合雙熒光發(fā)射現(xiàn)象，表明D-HBF發(fā)生了ESIPT反應(yīng)16。

圖S1展示了N*和T*態(tài)斯托克斯位移與溶劑極性因子P（ε）和Δf之間的相關(guān)性。N*發(fā)射的斯托克斯位移與兩種溶劑極性因子都顯示良好的線性關(guān)系。線性擬合的斜率表明，溶劑極性對N*的斯托克斯位移有顯著影響，而對T*的斯托克斯位移影響則不明顯。其中，N*和T*態(tài)的相對發(fā)射強度比（IN*/IT*）隨著溶劑極性的增加而逐漸變大，表明DHBF發(fā)生的ESIPT反應(yīng)對溶劑的極性具有一定的依賴關(guān)系。

3.2 熒光動力學(xué)研究

圖2給出D-HBF在不同溶劑中測得的、在N*和T*特征發(fā)射波長下的熒光動力學(xué)衰減曲線（采用TCSPC技術(shù)），內(nèi)插圖顯示了條紋相機測量得的lt;600 ps的熒光動力學(xué)。在405 nm激發(fā)下，N*態(tài)在儀器響應(yīng)函數(shù)時間內(nèi)生成，呈現(xiàn)二指數(shù)過程衰減：發(fā)生在數(shù)百皮秒內(nèi)的快過程和發(fā)生在幾個納秒內(nèi)的慢過程。N*的快速衰減伴隨著T*快生成，表明兩者之間存在動力學(xué)相關(guān)性（圖2內(nèi)插圖所示）。當(dāng)T*的生成達到最大值后，又在15 ns內(nèi)衰減完全，相應(yīng)的動力學(xué)分析結(jié)果總結(jié)于表2中。

動力學(xué)擬合結(jié)果表明：溶劑極性增加導(dǎo)致N*快衰減過程（～數(shù)百皮秒內(nèi)）時間常數(shù)變長而相對占比減少，該過程對應(yīng)于N*通過ESIPT轉(zhuǎn)移到T*的時間常數(shù)；N*態(tài)的慢衰減過程時間常數(shù)與T*態(tài)的衰減時間常數(shù)相似（范圍在2.27–3.47 ns），且隨溶劑極性增加而減小。T*和N*衰減時間常數(shù)的相同表明它們之間存在快速ESIPT動態(tài)平衡9。

根據(jù)示意圖1中所示的反應(yīng)模型，可使用公式（1）和（2）來計算ESIPT的正向（kpt）和反向（k?pt）質(zhì)子轉(zhuǎn)移（PT）速率24，25。其中，A1和A2分別代表N*態(tài)的快速和慢速衰減物種的占比，τ1是表2中N*快速衰減物種壽命。最后，計算得到的速率常數(shù)以倒數(shù)的形式展示在表3中。

結(jié)果表明：隨著溶劑極性增加，kpt和k?pt都減少，但kpt的變化比k?pt更明顯。所以，ESIPT平衡常數(shù)Keq隨溶劑極性增加而降低，表明ESIPT平衡向N*態(tài)移動16。

3.3.1 幾何結(jié)構(gòu)信息（氫鍵參數(shù)：長度、角度和O―H伸縮模式的IR振動頻率）

4-羰基與3-羥基之間的分子內(nèi)氫鍵強度是ESIPT發(fā)生的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。本文分別計算了3-羥基的鍵長、鍵角以及紅外（IR）振動頻率進行驗證2。使用DFT 和TD-DFT 理論結(jié)合的B3LYP-D3/6-311+g（d，p）方法，分別對D-HBF在三種溶劑中處于N、N*、T和T*態(tài)的構(gòu)象進行優(yōu)化，優(yōu)化過程中沒有對鍵長、鍵角或二面角施加任何限制。同時，獲得了D-HBF在N、N*、T和T*態(tài)的振動頻率且沒有虛頻，證實優(yōu)化結(jié)構(gòu)都處于局部能量極小點。

D-HBF在光激發(fā)過程中，3-OH鍵長（dO―H）從N態(tài)躍遷到N*態(tài)時變長而氫鍵距離（dHB）縮短（如表4所示）。以上結(jié)果表明，在N*態(tài)下氫鍵的強度增長，比N態(tài)更易發(fā)生質(zhì)子轉(zhuǎn)移，所以在這些溶劑中N*態(tài)存在ESIPT反應(yīng)。此外，N*態(tài)下的O―H???O鍵角（δO―H???O）比N態(tài)更接近180°，進一步證實N*態(tài)下氫鍵增強。而且，從N態(tài)到N*態(tài)的轉(zhuǎn)變過程中3-OH伸縮振動模式的紅外振動頻率向低頻移動，也支持了上述觀點。在計算結(jié)果中可以看到溶劑極性對分子內(nèi)氫鍵的影響顯而易見。隨著溶劑極性的增加，N態(tài)下的氫鍵長度（dHB）從2.01827 ?增加到2.02724 ?，而在N*態(tài)下從1.87741 ?增加到1.89952?。盡管兩種態(tài)下的鍵長都隨著溶劑極性的增加而逐漸變長，但N*態(tài)下的變化更為顯著。同樣，3-OH伸縮模式的紅外振動頻率隨著溶劑極性的增加向高頻移動，在N*態(tài)下頻率的變化更為明顯。其中，N態(tài)，從3598 cm?1增加到3606 cm?1，N*態(tài)從3372cm?1增加到3404 cm?1。

總結(jié)來說，N*態(tài)相對于N態(tài)對溶劑極性變化更為敏感。當(dāng)溶劑極性增加時，激發(fā)態(tài)下的分子內(nèi)氫鍵減弱。所以，ESIPT過程逐漸變困難。T*的溶劑極性依賴性方面與N相似，而T則與N*相似。以上結(jié)構(gòu)變化最終反應(yīng)在熱力學(xué)上的變化，影響到系統(tǒng)內(nèi)部的動態(tài)變化。

3.3.2 前線分子軌道分析

圖3展示了D-HBF在CYH、DEE和THF中的前線分子軌道（FMOs）的電子密度圖，包括最高占據(jù)分子軌道（HOMO，對應(yīng)于N）和最低未占據(jù)分子軌道（LUMO，對應(yīng)于N*）。通過對比討論分子骨架上的電子分布以及電子轉(zhuǎn)移行為。D-HBF的T和T*對應(yīng)的FMOs作為參考，在Supporting Information中以圖S2展示。光激發(fā)后，HOMO中的電子到躍遷到LUMO，導(dǎo)致電子分布不平衡進行重組。根據(jù)圖3中所示的電子密度分布發(fā)現(xiàn)D-HBF從HOMO到LUMO的躍遷呈現(xiàn)π–π*特征。為了詳細(xì)討論和分析電子分布和電子轉(zhuǎn)移行為，分子骨架被劃分為兩個部分（Part1和Part2），使用Hirshfeld方法26計算了兩部分的電子密度百分比。D-HBF在三種溶劑中從HOMO到LUMO的躍遷時，Part1的電子密度從68%減少到14%，而Part2的電子密度從32%增加到86%，發(fā)生了明顯的電荷轉(zhuǎn)移。造成羰基上的氧原子電子密度增加，而羥基上的氧原子電子密度減少，氫鍵強度顯著增強，為ESIPT過程的發(fā)生提供了可能性。其中，隨著溶劑極性的增加，LUMO軌道上Part1上的電子強度百分比增加，Part2上的電子強度百分比減少。表明溶劑極性的增加，N*態(tài)的相應(yīng)氫鍵強度降低，ESIPT過程變得更加困難。

3.3.3 ESIPT反應(yīng)機理分析

圖4使用B3LYP-D3/6-311+g（d，p）方法計算了三種溶劑中ESIPT反應(yīng)的勢能曲線及其相應(yīng)的勢壘。在基態(tài)下，質(zhì)子轉(zhuǎn)移反應(yīng)是吸熱過程，它們正向質(zhì)子轉(zhuǎn)移的勢壘（14.10 kcal?mol?1 ， 1 cal =4.1868 J） 遠(yuǎn)大于逆向質(zhì)子轉(zhuǎn)移勢壘（3.35kcal?mol?1）。相比之下，S1態(tài)下的正向ESIPT反應(yīng)是放熱過程，正向質(zhì)子轉(zhuǎn)移的勢壘（～6.61 kcal?mol?1）小于且接近逆向質(zhì)子轉(zhuǎn)移勢壘（～7.85 kcal?mol?1）。所以，質(zhì)子轉(zhuǎn)移反應(yīng)傾向于S1態(tài)，由N*向T*轉(zhuǎn)移。此外，溶劑極性的增加導(dǎo)致質(zhì)子轉(zhuǎn)移勢壘升高，正向ESIPT反應(yīng)變困難。圖4d中計算得到的正向ESIPT 反應(yīng)的吉布斯自由能（CYH ， ?0.9457kcal?mol?1；DEE，?0.7226 kcal?mol?1；THF，?0.6363kcal?mol?1）隨著溶劑極性增大而變大，也進一步驗證了正向ESIPT反應(yīng)變困難。從圖4的計算結(jié)果上，溶劑極性的增加導(dǎo)致逆向ESIPT反應(yīng)（從T*回到N*）能壘也在增加，質(zhì)子轉(zhuǎn)移變困難。以上計算得到的熱力學(xué)結(jié)果與實驗測量的動力學(xué)結(jié)果一致。

D-HBF與之前對4’-N，N-二乙氨基-3-羥基黃酮的ESIPT機制研究16結(jié)論相似，從N態(tài)激發(fā)到N*態(tài)時偶極矩存在顯著差異（如表5所示）。N*態(tài)相比于N態(tài)和T*態(tài)經(jīng)歷溶劑穩(wěn)定化作用，溶劑極性的增加導(dǎo)致N*態(tài)能量相比于T*態(tài)降低更顯著，有利于ESIPT化學(xué)平衡向N*態(tài)移動。

綜上，氫鍵強度是決定不同溶劑中ESIPT反應(yīng)驅(qū)動力的關(guān)鍵因素。在第一激發(fā)態(tài)中，氫鍵相互作用的程度隨著溶劑極性的增加而減弱，導(dǎo)致激發(fā)態(tài)下正向和反向質(zhì)子轉(zhuǎn)移的能壘都增加。其中，N*態(tài)具有ICT特征，對溶劑極性更為敏感。隨著溶劑極性的增加，ESIPT反應(yīng)平衡向N*態(tài)移動。最終，溶劑極性的增加導(dǎo)致D-HBF的雙重?zé)晒鈴姸缺菼N*/IT*降低，ESIPT反應(yīng)被抑制。

4 結(jié)論

本研究采用實驗與理論計算相結(jié)合的方法，探討了溶劑環(huán)境對D-HBF的ESIPT影響。研究結(jié)果表明，D-HBF具有ESIPT行為，且具有雙發(fā)射峰的特征，其強度比受溶劑調(diào)控。為了進闡明ESIPT機制，我們采用了DFT和TDDFT方法結(jié)合B3LYP泛函和6-311+g（d，p）基組進行理論計算。通過比較DHBF在不同溶劑中的基態(tài)（S0）和激發(fā)態(tài)（S1）之間的分子內(nèi)氫鍵的鍵長和鍵角，確定ESIPT反應(yīng)通過激發(fā)態(tài)氫鍵增強機制發(fā)生。此外，溶劑極性的增加，計算得到的S1狀態(tài)下O–H伸縮模式的紅外吸收頻率變大，也進一步證明了激發(fā)態(tài)下氫鍵強度再減弱。前線分子軌道（FMOs）也顯示了D-HBF具有電荷轉(zhuǎn)移特征，表明ESIPT通過激發(fā)態(tài)氫鍵增強機制發(fā)生。為了進一步確認(rèn)ESIPT發(fā)生機制，分別計算了D-HBF在S0和S1態(tài)下的勢能曲線。計算結(jié)果表面，質(zhì)子轉(zhuǎn)移過程更傾向于在S1態(tài)發(fā)生，而溶劑的極性導(dǎo)致ESIPT勢壘升高，質(zhì)子轉(zhuǎn)移變困難。綜上所述，溶劑極性可以調(diào)控D-HBF的雙發(fā)射熒光強度比（IN*/IT*），為D-HBF作為環(huán)境極性敏感的生物熒光探針的潛在應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。