城市濕地公園不同含水量的土壤中，細(xì)菌等微生物含量會(huì)有什么差異？本實(shí)驗(yàn)以念壇公園（北京市大興區(qū)新城濱河森林公園北園區(qū)）為例，通過對(duì)公園內(nèi)濕地不同區(qū)域的土樣進(jìn)行適當(dāng)采樣、處理、科學(xué)測定，以探究其中細(xì)菌等微生物數(shù)量的差異。

實(shí)驗(yàn)材料及用具

瓊脂、氯化鈉、酵母浸出粉、蛋白胨（dòng）、蒸餾水、涂布器、封口膜、酒精燈、錐形瓶、皮筋、一次性無菌培養(yǎng)皿、移液槍及槍頭

實(shí)驗(yàn)步驟1土壤取樣

分別對(duì)念壇公園靠近水域的土壤及遠(yuǎn)離水域的土壤進(jìn)行取樣。由于絕大多數(shù)細(xì)菌等微生物分布在距地表3～8厘米深的土壤層中，因此，在取樣時(shí)要適度鏟去表層土。

實(shí)驗(yàn)步驟2：樣品稀釋（需在超凈工作臺(tái)內(nèi)操作）

1.制備土壤樣液 兩種土壤樣品分別稱取10克，置于90毫升無菌水（經(jīng)滅菌處理后的蒸餾水）中，充分搖勻，得到土壤樣液，分別標(biāo)記為“遠(yuǎn)”“近”。

2.對(duì)土壤樣液進(jìn)行梯度稀釋 將土壤樣液靜置，吸取100微升的上清液置于900微升的無菌水中，獲得10倍稀釋的土壤樣品稀釋液。從該稀釋液中取100微升，再置于900微升的無菌水中，獲得1x102倍稀釋的土壤樣品稀釋液。隨后步驟以此類推，得到1x104、1x105和1x106倍稀釋的土壤樣品稀釋液（這些濃度的稀釋液菌落較為客觀，且易計(jì)數(shù)）。

實(shí)驗(yàn)步驟3：微生物的培養(yǎng)與觀察

1.制備培養(yǎng)基并滅菌 制作培養(yǎng)基：蛋白胨（蛋白質(zhì)可溶性水解產(chǎn)物的通稱，是培養(yǎng)基的常用氮源）10克、酵母提取物5克、氯化鈉10克、瓊脂粉15～20克、蒸餾水適量（不超過1000毫升）。將該混合物加熱，溶化成透明狀態(tài)，定容至1000毫升，分裝進(jìn)不同的錐形瓶中。將錐形瓶包上封口膜，用皮筋勒緊，再放入高壓蒸汽滅菌鍋中，與兩個(gè)300毫升空的錐形瓶、300毫升蒸餾水等一起在壓力100千帕、溫度121攝氏度的條件下滅菌15～30分鐘。

注：本步驟也可按比例縮減用量，不經(jīng)加熱，直接置于錐形瓶中定容。

2.倒平板并涂布接種（在超凈工作臺(tái)內(nèi)操作）待培養(yǎng)基冷卻至不燙手時(shí)，在將培養(yǎng)基倒至一次性無菌培養(yǎng)皿中。分別吸取100微升的1x104、1x105和1x106倍稀釋的土壤樣品稀釋液，置于培養(yǎng)皿中，用涂布器涂布均勻。

注：涂布器應(yīng)浸泡于酒精中，使用前需將其放在火焰上灼燒，待酒精燃盡、冷卻后，用涂布器將菌液涂均勻。

3.培養(yǎng) 將已經(jīng)接種好細(xì)菌等微生物的培養(yǎng)基倒置（防止水滴落入平板引起雜菌污染）于30～37攝氏度的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)1～2天，觀測實(shí)驗(yàn)結(jié)果，過程中請(qǐng)勿打開。因菌種生長速度有差異，也可在室內(nèi)定時(shí)追蹤觀測結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

分別在第2天、第3天、第4天進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)靠近水域的土壤中細(xì)菌等微生物的種類和數(shù)量遠(yuǎn)高于遠(yuǎn)離水域的土壤。土壤中細(xì)菌等微生物的數(shù)量龐大，其種類與數(shù)量受多種因素的影響。距離水域較近的地方，有水分含量較高、營養(yǎng)物質(zhì)較為豐富、氧氣的擴(kuò)散相對(duì)較慢、溫度變化較為緩和等特點(diǎn)，這一切因素都更有利于微生物的生長。

我們對(duì)微生物“繁華都市”的探索之旅并未結(jié)束，在此留下兩個(gè)思考問題供大家深入探究：一、不同季節(jié)交替輪轉(zhuǎn)，土壤中的細(xì)菌等微生物又會(huì)呈現(xiàn)怎樣不同的風(fēng)貌？是春日復(fù)蘇的蓬勃，還是冬日蟄伏的寧靜？二、除了文中提及的因素，還會(huì)有哪些神秘力量在影響著微生物們的“生活”？是未曾留意的土壤酸堿度，還是微妙的動(dòng)植物共生關(guān)系？希望這些問題能如星星之火，點(diǎn)燃大家繼續(xù)探索的熱情。

（責(zé)任編輯 / 牛一名 美術(shù)編輯 / 周游）