摘""要：為了提升鏈霉菌17-7菌株的抑菌活性，合理利用菌株的代謝產(chǎn)物，本研究以橡膠樹褐根病菌為靶標菌，采用正交試驗和單因子試驗相結合，在原培養(yǎng)基的基礎上對鏈霉菌17-7菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基配方進一步優(yōu)化，獲得該菌株最適宜產(chǎn)活性物質(zhì)的配方為：大豆粉25"g/L、玉米粉10"g/L、葡萄糖10"g/L、酵母粉2"g/L、K2HPO4"1"g/L、NaCl"0.5"g/L、CaCO3"0.5"g/L。發(fā)酵濾液稀釋500倍后對橡膠樹褐根病菌的相對抑菌活性為51.37%，較優(yōu)化前提高了17.66%，并且具有廣譜的抑菌活性。在此基礎上測定了溫度、紫外線輻射、蛋白酶、酸堿度和貯存條件對17-7菌株發(fā)酵濾液抗真菌物質(zhì)穩(wěn)定性的影響。結果表明：17-7菌株發(fā)酵濾液對高溫不敏感；紫外線照射1"h后發(fā)酵濾液的抑菌活性開始顯著下降，長時間紫外照射并不會喪失抑菌活性；17-7菌株發(fā)酵濾液還具有較好的酸堿耐受性，pH為3～10時其發(fā)酵濾液均能發(fā)揮較好的抑菌活性；并且對胰蛋白酶和胃蛋白酶不敏感；菌株發(fā)酵濾液在低溫（4"℃）和室溫（25"℃）條件下貯存120"d仍能保持較強生物活性。對17-7菌株無菌發(fā)酵濾液穩(wěn)定性和貯存條件的研究可為后續(xù)該菌株的開發(fā)利用提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。

關鍵詞：鏈霉菌17-7；發(fā)酵配方優(yōu)化；穩(wěn)定性；抑菌活性中圖分類號：S476""""""文獻標志碼：A

Optimization"of"Fermentation"Formula"and"Stability"of"Cultural"Filtrate"Produced"by"Streptomyces"samsunensi"17-7

LIU"Yixian，"Shi"Yuping，"Li"Lanlan，"DAI"Liming，"CAI"Zhiying*

Yunnan"Key"Laboratory"of"Sustainable"Utilization"Research"on"Rubber"Tree"/"Yunnan"Institute"of"Tropical"Crops，"Jinghong，"Yunnan"666100，"China

Abstract："In"order"to"enhance"the"antifungal"activity"of"Streptomyces"samsunensis"17-7"strain"and"effectively"utilize"its"secondary"metabolites，"this"study"focused"on"optimizing"the"fermentation"medium"formula."Orthogonal"and"single"factor"experiments"were"conducted"based"on"the"original"medium，"with"Phellinus"noxious"as"the"indicator."The"optimal"formulation"for"producing"active"substances"from"the"strain"was"determined"to"include"25"g/L"soy"powder，"10"g/L"corn"meal，"10"g/L"glucose，"2"g/L"yeastnbsp;extract，"1"g/L"K2HPO4，"0.5"g/L"NaCl，"and"0.5"g/L"CaCO3."Following"a"500"times"dilution，"the"relative"antifungal"activity"of"the"fermentation"solution"increased"to"51.37%，"a"17.66%"improvement"compared"to"the"previous"optimization，"demonstrating"a"broad"spectrum"of"antifungal"activity."The"stability"of"the"antifungal"substance"was"evaluated"in"response"to"various"conditions"such"as"temperature，"pH，"protease，"UV-irradiation，"and"storage."Results"indicated"that"the"fermentation"broth"of"strain"17-7"exhibited"high"temperature"resistance，"a"significant"decrease"in"antifungal"activity"after"one"hour"of"UV"irradiation，"but"retained"its"activity"after"long-term"exposure"to"UV"light."Furthermore，"the"broth"demonstrated"good"acid-base"tolerance，"effective"antibacterial"activity"in"the"pH"range"of"3-10，"and"resistance"to"trypsin"and"pepsin."The"fermentation"broth"of"strain"17-7"maintained"its"antifungal"activity"for"120"days"at"both"4"℃"and"room"temperature"（25"℃）."This"study"on"the"stability"and"storage"conditions"of"strain"17-7’s"fermentation"broth"offers"valuable"data"for"potential"future"applications"of"the"strain"as"a"biocontrol"agent.

Keywords："Streptomyces"samsunensi"17-7;"fermentation"medium"optimization;"stability;"antifungal"activity

DOI："10.3969/j.issn.1000-2561.2024.12.021

鏈霉菌（Streptomyces）是放線菌門中最為龐大且極具代表性的分支，具有強大的生態(tài)適應能力，廣泛分布于各種環(huán)境中[1]。并且鏈霉菌也是目前最大的新型次生代謝產(chǎn)物資源菌，是天然產(chǎn)物的重要工業(yè)生產(chǎn)菌[2]。鏈霉菌產(chǎn)生的活性物質(zhì)可用作農(nóng)用殺菌劑、殺蟲劑、除草劑和植物生長調(diào)節(jié)劑，因其具有高效、低毒和環(huán)境友好等特點在農(nóng)作物病蟲草害綠色防控中占據(jù)重要地位[3]。

鏈霉菌具有大量編碼天然產(chǎn)物的生物合成基因簇，然而大部分基因簇在常規(guī)條件下處于沉默狀態(tài)[4]。為了增強菌株代謝產(chǎn)物活性，激活鏈霉菌沉默基因表達，以獲得更多的活性天然產(chǎn)物，非定向激活策略是普遍使用的一種方法，即通過改變培養(yǎng)基的組成（碳源、氮源、無機鹽）等方式，誘導菌株產(chǎn)生更多的代謝產(chǎn)物[5-7]。

天然橡膠是我國熱區(qū)重要的農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)，也是國家重要的戰(zhàn)略物資。我國橡膠樹上已報道的病害有91種，局部或全面嚴重危害的有9種[8]，已成為制約橡膠產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素。運用微生物資源或其代謝產(chǎn)物進行生物防治已成為綠色農(nóng)業(yè)潮流下的主要趨勢。Streptomyces"samsunensi"17-7菌株是由本實驗室從橡膠樹根際土壤中分離到的一株具有巨大生防潛力的鏈霉菌，對橡膠樹褐根病菌具有較強抑制作用[9]。但近期試驗發(fā)現(xiàn)17-7菌株發(fā)酵濾液的抑菌活性有所下降，稀釋500倍后對橡膠褐根病菌的相對抑菌活性為33.71%，并且該菌株發(fā)酵濾液對外界環(huán)境條件的穩(wěn)定性仍不明確。為了提升17-7菌株的抑菌活性，獲得穩(wěn)定的活性物質(zhì)，并進一步研究其發(fā)酵濾液的穩(wěn)定性。本研究通過改變培養(yǎng)基組成，在原培養(yǎng)基的基礎上添加玉米粉和酵母粉，采用正交試驗和單因子試驗相結合，篩選出對橡膠褐根病菌具有最佳抑菌活性的培養(yǎng)基組成；并進一步通過單因子變量試驗研究外界環(huán)境對17-7菌株發(fā)酵濾液抑菌活性的影響，為更好地發(fā)揮菌株的生防潛力提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。

1""材料與方法

1.1""材料

1.1.1""供試菌株""17-7菌株（S."samsunensi）、橡膠樹白根病菌（Rigidoporus"lignosus）、橡膠樹褐根病菌（Phellinus"noxius）、云南鏈格孢（Alter naria"yunnanensis）、橡膠樹棒孢霉落葉病菌（Corynespora"cassiicola）、橡膠樹炭疽病菌（Colle totrichum"siamense、C."karstii、C."wanningense、C."plurivorum、C."fructicola、C."bannaense、C."brevisporum）均由云南省熱帶作物科學研究所植物保護與微生物利用研究中心分離保存。

1.1.2""培養(yǎng)基""種子液培養(yǎng)為液體高氏一號培養(yǎng)基（每升含可溶性淀粉20.0nbsp;g，KNO3"1.0"g，K2HPO4"0.5"g，MgSO4·7H2O"0.5"g，NaCl"0.5"g，F(xiàn)eSO4·7H2O"0.01"g，瓊脂20"g，pH為7.4～7.6）；發(fā)酵基礎培養(yǎng)基[9]（每升含葡萄糖20"g、大豆粉25"g、K2HPO4"1"g、NaCl"0.5"g、CaCO3"0.5"g）；馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）。

1.1.3""主要儀器""CLIMACELL培養(yǎng)箱（美國3M）；BSD-400博迅振蕩培養(yǎng)箱。

1.2""方法

1.2.1""放線菌發(fā)酵濾液的制備""種子液：挑取單個菌落接種于100"mL的液體高氏一號培養(yǎng)基中，于28"℃、140"r/min振蕩培養(yǎng)5"d，制成種子液。

發(fā)酵：發(fā)酵基礎培養(yǎng)基初始pH為8，培養(yǎng)基裝瓶量為150"mL/500"mL，搖床轉(zhuǎn)速為140"r/min，種子液的接種量為10%，在28"℃條件下培養(yǎng)5"d后，12"000"r/min離心15"min，經(jīng)0.22"μm濾膜過濾，獲得無菌發(fā)酵濾液。

1.2.2""菌絲生長速率法""以橡膠樹褐根病菌為指示菌，采用內(nèi)徑為5"mm的打孔器在活化的橡膠樹褐根病菌菌落周圍打取菌餅。將PDA培養(yǎng)基融化冷卻至50"℃左右，取1"mL濾液與99"mL"PDA培養(yǎng)基混勻，倒入無菌培養(yǎng)皿中制成帶毒培養(yǎng)基平板。在每個平板中接入1個菌餅，帶菌絲的一面貼在培養(yǎng)基表面，以無菌水與培養(yǎng)基混合的平板為對照。28"℃下暗培養(yǎng)4"d后，用十字交叉法測定供試菌生長直徑，計算抑制率，抑制率="[（對照菌直徑-處理菌直徑）/（對照菌直徑-菌餅直徑）]×100%。

1.2.3""雙碳源、雙氮源對17-7菌株抑菌物質(zhì)產(chǎn)生的影響""雙碳源和雙氮源正交試驗：基于發(fā)酵基礎培養(yǎng)基，選擇雙碳源（葡萄糖、酵母粉）和雙氮源（大豆粉、玉米粉）共4個因素，設置4個水平（表1），選用L16（44）正交表進行正交試驗，發(fā)酵試驗重復3次。將菌株發(fā)酵濾液稀釋5倍后取1"mL與99"mL"PDA培養(yǎng)基混勻，制成含毒平板。根據(jù)菌絲生長速率法測定抑菌率。

1.2.4""無機鹽篩選""以1.2.3中篩選出的雙碳源、雙氮源培養(yǎng)基為基礎，選擇CuSO4、ZnSO4、MnCl2、NaCl、FeSO4、K2HPO4、CaCO3、MgSO4、KCl等9種無機鹽，按質(zhì)量體積分數(shù)為0.1%加入雙碳氮源培養(yǎng)基，配成含不同無機鹽離子的培養(yǎng)基。測定不同無機鹽對17-7菌株產(chǎn)生抑菌物質(zhì)的影響，每個處理3次重復，選擇抑菌活性較好的3種無機鹽。根據(jù)菌絲生長速率法測定抑菌率。

1.2.5""優(yōu)化后培養(yǎng)基發(fā)酵濾液抑菌譜測定""分別取優(yōu)化后的菌株發(fā)酵濾液原液1"mL或稀釋5倍后取1"mL與99"mL"PDA培養(yǎng)基混勻，倒入無菌培養(yǎng)皿中分別制成含稀釋100倍與稀釋500倍發(fā)酵濾液的PDA平板，按照1.2.2的方法接種11株病原菌，并測定抑菌率，對比優(yōu)化后培養(yǎng)基不同稀釋倍數(shù)對供試病原菌的抑菌活性。

1.2.6""發(fā)酵濾液穩(wěn)定性測試""（1）溫度穩(wěn)定性。將發(fā)酵濾液分別于20、40、60、80、100"℃水浴處理30"min，取菌株發(fā)酵濾液1"mL與99"mL"PDA培養(yǎng)基混勻。每處理重復3次，根據(jù)菌絲生長速率法測定抑菌率。

（2）紫外穩(wěn)定性。將發(fā)酵濾液置于15"W紫外燈下約20"cm處，分別照射1、2、3、4、5、6"h。每處理重復3次，根據(jù)菌絲生長速率法測定抑菌率。

（3）蛋白酶穩(wěn)定性。在發(fā)酵濾液中分別加入終濃度為1"mg/mL的胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K，于37"℃處理2"h，以未添加蛋白酶處理的發(fā)酵濾液為對照。每處理重復3次，根據(jù)菌絲生長速率法測定抑菌率。

（4）酸堿穩(wěn)定性。采用1"mol/L"NaOH和1"mol/L"HCl調(diào)節(jié)發(fā)酵濾液pH為1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0，放置24"h后再次將pH調(diào)回中性。每處理重復3次，根據(jù)菌絲生長速率法測定抑菌率。

（5）儲藏穩(wěn)定性。將發(fā)酵濾液分別置于4"℃和25"℃下放置3、6、9、15、30、60、120"d。每處理重復3次，根據(jù)菌絲生長速率法測定抑菌率。

1.3""數(shù)據(jù)處理

利用Excel"2003和SASnbsp;9.4M6軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，利用GraphPad"Prism"8.0軟件作圖，并應用Duncan’s新復極差法進行差異顯著性檢驗。

2""結果與分析

2.1""17-7菌株碳、氮源正交試驗

選擇葡萄糖、酵母粉、大豆粉、玉米粉4個因素，進行4因素4水平正交試驗（表2），根據(jù)抑菌活性結果，確定最終發(fā)酵配方。正交試驗結果表明，4個因素對橡膠褐根病菌抑制率的影響順序為Bgt;Cgt;Agt;D，最佳水平組合為A4B4C2D1。根據(jù)方差分析的結果，主效因子B在2、3、4水平差異不顯著，出于成本考慮，最佳組合為A4B2C2D1，即大豆粉25"g，玉米粉10"g，葡萄糖10"g，酵母粉2"g。

2.2""不同無機鹽對17-7菌株抑菌活性的影響

供試的9種無機鹽對17-7菌株抑菌活性的影響具有顯著差異（圖1）。添加K2HPO4和CaCO3的抑菌活性顯著高于其他無機鹽離子，其次為NaCl，選取抑菌活性較高的3種無機鹽離子進行后續(xù)試驗。根據(jù)前期研究結果[9]，K2HPO4選擇添加量為1"g時，17-7菌株的抑菌活性最好，NaCl和CaCO3不同水平添加量的抑菌率無顯著差異，因此選擇NaCl和CaCO3添加量為0.05%，即1"L發(fā)酵培養(yǎng)基中含大豆粉25"g、玉米粉10"g、葡萄糖10"g、酵母粉2"g、K2HPO4"1"g、NaCl"0.5"g、CaCO3"0.5"g。

2.3""17-7菌株發(fā)酵濾液抑菌譜測定

采用優(yōu)化后17-7菌株的發(fā)酵濾液，對供試的11種橡膠樹病原菌進行抑菌活性測定，發(fā)現(xiàn)17-7菌株具有廣譜的抑菌活性。發(fā)酵濾液在稀釋100倍和500倍時均具有較強的抑菌活性，對橡膠褐根病菌的抑菌率分別為83.93%和51.37%，稀釋500倍時抑菌率較優(yōu)化前提高了17.66%。17-7菌株發(fā)酵濾液對炭疽病菌的抑菌效果較突出，稀釋500倍時其抑菌率仍能達到68.33%～78.89%（表3）。

2.4""發(fā)酵濾液的溫度穩(wěn)定性

由圖2可以看出，在20～100"℃范圍內(nèi)，17-7菌株發(fā)酵濾液熱處理30"min均具有較好的抑菌活性，抑菌率均在80%以上，其中，20～80"℃范圍內(nèi)的抑菌活性最佳，與CK發(fā)酵濾液抑菌活性無顯著性差異；100"℃時，17-7菌株發(fā)酵濾液的抑菌活性略有下降，其抑菌率為84.31%。發(fā)酵濾液在100"℃處理30"min后仍具有較好的抑菌活性，說明發(fā)酵濾液中的抑菌活性物質(zhì)對高溫不敏感，具有較好的熱穩(wěn)定性。121"℃處理30"min后，抑菌活性為56.53%，說明發(fā)酵濾液中存在部分抑菌活性物質(zhì)在高溫高壓條件下易失活。

2.5""發(fā)酵濾液的紫外穩(wěn)定性

不同紫外照射時間對17-7菌株發(fā)酵濾液抑菌活性的影響具有明顯差異（圖3）。紫外照射時間越長其抑菌活性越低，照射1"h后其抑菌率為87.81%，與CK無顯著差異，仍具有較好的抑菌活性。紫外照射2"h后其抑菌率下降至73.79%，照射4"h后抑菌率降至46.75%，并逐漸趨于穩(wěn)定。說明17-7菌株發(fā)酵濾液中可能存在對紫外敏感的活性物質(zhì)，或者由于發(fā)酵濾液中存在某種紫外保護劑延緩了紫外線對發(fā)酵濾液抑菌活性的影響。

2.6""發(fā)酵濾液的蛋白酶穩(wěn)定性

經(jīng)胃蛋白酶和胰蛋白酶處理后，17-7菌株發(fā)酵濾液的抑菌活性與CK發(fā)酵濾液無顯著差異，抑菌率均在80%以上，經(jīng)蛋白酶K處理的菌株發(fā)酵濾液抑菌率為78.98%，略有下降（圖4）。說明17-7菌株發(fā)酵濾液中，主要的抑菌活性物質(zhì)對蛋白酶不敏感，代謝產(chǎn)物中可能存在少量的抑菌蛋白，經(jīng)蛋白酶K處理后失活。

2.7""發(fā)酵濾液的酸堿穩(wěn)定性

在酸堿穩(wěn)定性試驗中，17-7菌株發(fā)酵濾液在pH為4～7時均具有較好的抑菌活性，其抑菌率與CK無顯著差異，發(fā)酵濾液對酸性環(huán)境更為耐受，pH為4時其抑菌率最大為78.98%。pH為2～12時，發(fā)酵濾液的抑菌活性變化趨緩，抑菌率仍能保持在57.00%以上，但強堿性環(huán)境下更容易使發(fā)酵濾液中的活性物質(zhì)失活。在強酸或強堿環(huán)境下發(fā)酵濾液抑菌活性下降趨勢明顯，pH為1和13時，抑菌率分別降至31.02%和21.16%（圖5）。

2.8""發(fā)酵濾液的儲藏穩(wěn)定性

在不同的儲藏溫度下，17-7菌株發(fā)酵濾液的抑菌活性具有一定差異（圖6）。儲藏30"d內(nèi)，4"℃環(huán)境下發(fā)酵濾液抑菌活性明顯高于25"℃環(huán)境下的抑菌活性，4"℃儲藏3"d時抑菌率為91.99%，而25"℃儲藏3"d時抑菌率降至53.36%，說明17-7菌株發(fā)酵濾液中存在一類活性物質(zhì)在水相中極不穩(wěn)定，低溫環(huán)境可以延緩其反應速度。值得注意的是，30"d后不同儲存溫度下的發(fā)酵濾液抑菌活性相當，抑菌率分別為49.18%、48.01%，到120"d時呈現(xiàn)逐漸上升趨勢，抑菌率分別上升至62.58%、61.91%，均顯著高于30"d時的抑菌率（Plt;0.05）。

3""討論

鏈霉菌能產(chǎn)生約10萬種抗生素化合物，占所有農(nóng)化應用天然產(chǎn)物的70%～80%，被稱為天然產(chǎn)物的儲存庫[10-12]。培養(yǎng)基組成（即碳源、氮源、無機鹽等）對次級代謝產(chǎn)物的影響非常復雜，且對不同微生物產(chǎn)生明顯差異[7，"13]。研究表明，營養(yǎng)組成的變化可激發(fā)鏈霉菌產(chǎn)生不同類型的活性物質(zhì)[14]。本研究以橡膠樹褐根病菌為靶標菌，在原培養(yǎng)基的基礎上添加了玉米粉和酵母粉，采用正交試驗和單因子試驗相結合，對鏈霉菌17-7菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基進行進一步優(yōu)化，獲得該菌株最適宜產(chǎn)活性物質(zhì)的配方為：大豆粉25"g/L、玉米粉10"g/L、葡萄糖10"g/L、酵母粉2"g/L、K2HPO4"1"g/L、NaCl"0.5"g/L、CaCO3"0.5"g/L，發(fā)酵濾液稀釋500倍后對橡膠樹褐根病菌的抑菌率為51.37%，較優(yōu)化前提高了17.66%。

微生物生物合成基因簇的激活通常與營養(yǎng)類型或濃度的變化有關，特別是碳、氮或無機鹽的變化能成功誘導微生物次生代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生[15]。SCHWARZ等[14]選擇5株具有豐富次生代謝產(chǎn)物基因簇背景的菌株，通過改變培養(yǎng)基組成和培養(yǎng)條件，在30種不同培養(yǎng)條件下，從發(fā)酵液中共檢測到590個新的化合物，編碼這些化合物的基因簇數(shù)量遠遠超過了所預測的次生代謝產(chǎn)物基因簇數(shù)量。大豆粉、玉米粉等農(nóng)副產(chǎn)品具有高蛋白質(zhì)含量，利用其作為氮源的放線菌能產(chǎn)生更多的活性物質(zhì)[16-17]。葡萄糖作為一種優(yōu)質(zhì)碳源，被廣泛應用于一些工業(yè)化生產(chǎn)的抗生素中，酵母粉也是卡那霉素鏈霉菌（S."kanamyceticus）等鏈霉菌產(chǎn)抗菌素的理想碳源[18]。本研究通過改變培養(yǎng)基組成和添加量，有效提升了菌株的抑菌活性，推測可能是由于營養(yǎng)成分的改變激活了一些沉默的次生代謝產(chǎn)物生物合成基因簇，增加了活性物質(zhì)的種類。

本研究對17-7菌株抑菌物質(zhì)穩(wěn)定性分析顯示，17-7菌株發(fā)酵濾液具有較好的熱穩(wěn)定性，100"℃處理30"min后的抑菌效果與CK無顯著差異，但121"℃處理30"min后抑菌率降至56.53%，說明17-7菌株發(fā)酵濾液中存在一部分耐高溫高壓的活性物質(zhì)。鏈霉菌發(fā)酵液普遍具有熱穩(wěn)定性，如黃麻鏈霉菌AUH-1菌株發(fā)酵液在60～80"℃熱處理下對水稻紋枯病菌的抑制率無顯著差異[19]，黃三素鏈霉菌15-6菌株發(fā)酵液在60"℃和80"℃不同時間處理后的抗菌效果也無明顯改變[20]，但是當溫度明顯高于80"℃時，其發(fā)酵液的抗菌活性均明顯降低。紫外線長時間照射會破壞17-7菌株發(fā)酵濾液的抑菌活性，隨著紫外線照射時間的延長抑菌活性逐漸降低，但紫外照射時間在1"h以內(nèi)的抑菌活性與CK無顯著差異。鏈霉菌能產(chǎn)生一些具有吸收紫外線、抗氧化活性的代謝產(chǎn)物，可以通過減輕紫外線輻射的有害影響來實現(xiàn)光保護作用[21]。SáNCHEZ-SUáREZ等[22]發(fā)現(xiàn)鏈霉菌代謝產(chǎn)生的生物堿是抗氧化化合物中最具代表性的一類，17-7菌株可能通過代謝產(chǎn)生該類物質(zhì)來實現(xiàn)光保護特性。17-7菌株發(fā)酵濾液還具有較好的酸堿耐受性，并且對胰蛋白酶和胃蛋白酶不敏感，具有較好的抑菌穩(wěn)定性。pH為3～10時發(fā)酵濾液均能發(fā)揮較好的抑菌活性，只有在強酸強堿（pH為1或13）環(huán)境下會顯著降低發(fā)酵濾液的抑菌活性。此外，值得注意的是17-7菌株發(fā)酵濾液在4"℃和25"℃的抑菌活性均呈先降后升的趨勢，儲藏120"d后其抑菌活性分別上升至62.58%、61.91%，顯示17-7菌株具有更廣泛的應用價值。

本研究以橡膠樹褐根病菌為生物活性指示菌，通過改變培養(yǎng)基組成提升17-7菌株發(fā)酵濾液的抑菌活性，并明確了菌株發(fā)酵濾液在不同溫度、酸堿度、紫外線照射、酶液處理等條件下的穩(wěn)定性，為17-7菌株的田間應用提供理論基礎。

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