摘要：為了探究添加不同水平的益生菌制劑對肉牛腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響。試驗(yàn)選擇健康的體重為（500±5）kg、日齡相近及體況相近的科爾沁肉牛60頭隨機(jī)分成4組，每個組15個重復(fù)組，每1頭科爾沁肉牛為一個重復(fù)組，在基礎(chǔ)日糧中添加0（1組）、1.0%（2組）、2.0%（3組）、3.0%（4組）益生菌制劑，試驗(yàn)飼養(yǎng)的預(yù)試驗(yàn)為10d，整個試驗(yàn)期為60 d。試驗(yàn)期結(jié)束（第60天），采集糞便測定每個重復(fù)組中科爾沁肉牛的大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌等主要腸道菌的組成。結(jié)果表明：試驗(yàn)2、3、4組肉牛的直腸糞便的pH均低于1組（P gt;0.05），試驗(yàn)3、4組直腸糞便中乳酸桿菌、雙歧桿菌的含量較1組比分別顯著提高18.2%、18.9%、13.6%、14.8% （Plt;0.05），其直腸糞便中大腸桿菌較1組比分別顯著降低17.7%、20.4%（Plt;0.05）。綜上所述，不同水平的益生菌株可以提高科爾沁肉牛直腸糞便中乳酸桿菌、雙歧桿菌的含量，降低其直腸糞便中大腸桿菌，有效改善腸道健康水平，改善其菌群結(jié)構(gòu)，以2.0%益生菌添加較適宜。

關(guān)鍵詞：益生菌；肉牛；糞便；菌群結(jié)構(gòu)；腸道健康

相關(guān)研究表明，畜牧業(yè)已經(jīng)成為我國農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中主要產(chǎn)業(yè)之一，牛養(yǎng)殖業(yè)作為畜牧業(yè)中增長最快的產(chǎn)業(yè)之一，尤其是我國肉牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速，在我國不同地區(qū)均有養(yǎng)殖，主要分布在內(nèi)蒙古、山東、河南、安徽、河北及東北三省等多個地區(qū)，我國肉牛業(yè)迅速發(fā)展，其養(yǎng)殖數(shù)量呈現(xiàn)逐年上升的趨勢[1]。在肉牛養(yǎng)殖過程中，抗生素及含有抗生素的添加劑使用，出現(xiàn)耐藥性問題和藥物在肉中殘留等公共衛(wèi)生問題，嚴(yán)重危害著人們的健康[2]。隨著我國相關(guān)政策實(shí)施，禁止抗生素及含有促生長類抗生素在飼料中添加后，益生菌制劑、中草藥制劑、抗菌肽制劑等多種替抗性添加劑的研發(fā)已經(jīng)成為新的研究方向和熱點(diǎn)問題[3]。國內(nèi)外相關(guān)研究表明，益生菌制劑主要在動物胃腸道內(nèi)維持腸道菌群平衡，通過相關(guān)試驗(yàn)研究，益生菌制劑具有提高動物消化能力、采食量和生長性能，免疫調(diào)節(jié)、抗病原菌及維持腸道菌群平衡多種優(yōu)勢，在雞、豬、牛、羊、驢等多種動物被廣泛應(yīng)用[4]。相關(guān)研究表明，酵母菌是益生菌制劑中主要的菌種之一，具有多種優(yōu)勢，作為添加劑綠色添加劑廣泛被應(yīng)用于動物養(yǎng)殖中。臨床中的益生菌制劑在制作工藝中主要包括活性益生菌制劑和益生菌發(fā)酵產(chǎn)物制劑2種，其中益生菌發(fā)酵產(chǎn)物制劑中主要由益生菌菌種在培養(yǎng)過程中的代謝產(chǎn)物組成，代謝產(chǎn)物主要含有生物活性物質(zhì)和多種營養(yǎng)物質(zhì)（酶類、寡糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、小肽等）及多種的未知生長因子等，在動物養(yǎng)殖過程中被廣泛應(yīng)用[5]。本研究將不同水平的酵母菌發(fā)酵菌液應(yīng)用于科爾沁肉牛，探討其對科爾沁肉牛直腸中主要微生物含量的影響，為今后益生菌發(fā)酵飼料在科爾沁肉牛養(yǎng)殖業(yè)中應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

科爾沁肉牛試驗(yàn)用的復(fù)合益生菌制劑，購自山東寶來利來生物工程股份有限公司，該制劑主要包括酵母菌（活菌含量≥5.0×109 CFU/mL）、枯草芽孢桿菌（活菌含量≥1.0×108 CFU/mL）、乳酸菌（活菌含量≥1.0×108 CFU/mL）、糞球菌（活菌含量≥1.0×108 CFU/mL）及酶類（粗纖維消化酶）、氨基酸等。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與管理

在內(nèi)蒙古通遼地區(qū)科爾沁肉牛規(guī)模化養(yǎng)殖場進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)，按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，試驗(yàn)選擇健康的體重為（500±5） kg、日齡相近及體況相近的科爾沁肉牛60頭隨機(jī)分成4組，每個組15個重復(fù)組，每1頭科爾沁肉牛為一個重復(fù)組，在基礎(chǔ)日糧中添加0（1組）、1.0%（2組）、2.0%（3組）、3.0%（4組）益生菌制劑，試驗(yàn)飼養(yǎng)的預(yù)試驗(yàn)為10 d，整個試驗(yàn)期為60 d。在科爾沁肉牛飼養(yǎng)試驗(yàn)期間，每個重復(fù)組單獨(dú)飼養(yǎng)，自由飲水，定時飼喂，按照該規(guī)?；B(yǎng)殖場飼養(yǎng)管理對試驗(yàn)用科爾沁肉牛進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)，定期免疫、消毒及糞便清理?？茽柷呷馀Ｔ囼?yàn)用基礎(chǔ)日糧見表1。

1.3 肉牛糞便中腸道菌群結(jié)構(gòu)的測定

參考文獻(xiàn)楊尚霖等[6]報(bào)道的方法，在試驗(yàn)結(jié)束時（第60天），每個試驗(yàn)組隨機(jī)抽取10個重復(fù)組的科爾沁肉牛，分別采集直腸糞便樣品，對每個重復(fù)組的科爾沁肉牛采集糞便樣品4份，分別裝入離心管內(nèi)，并進(jìn)行編號。對采集樣品使用酸度計(jì)及測定每個重復(fù)組科爾沁肉牛直腸糞便樣品的pH，同時對每個重復(fù)組科爾沁肉牛直腸糞便樣品的每克直腸內(nèi)容物（糞便）中大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，測定每克直腸糞便樣品中大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌的含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

每個試驗(yàn)組的科爾沁肉牛測定試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)后，用Duncan's 法對每個重復(fù)組數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素多重比較，數(shù)據(jù)表示為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”，Plt;0.05表示結(jié)果差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 益生菌制劑對肉牛直腸糞便中主要微生物的影響

結(jié)果由表2可知，試驗(yàn)2、3、4組科爾沁肉牛直腸糞便樣品的pH與1組比無差異顯著性（Pgt;0.05）；試驗(yàn)2組科爾沁肉牛直腸糞便樣品中乳酸桿菌、雙歧桿菌的含量均高于1組，但無差異顯著性（Pgt;0.05）； 試驗(yàn)2組科爾沁肉牛直腸糞便樣品中大腸桿菌均低于1組，但無差異顯著性（Pgt;0.05）；試驗(yàn)3、4組科爾沁肉牛直腸糞便樣品中乳酸桿菌、雙歧桿菌的含量較1組比分別顯著提高18.2%、18.9%、13.6%、14.8% （Plt;0.05），試驗(yàn)3、4組科爾沁肉牛直腸糞便樣品中大腸桿菌較1組比分別顯著降低17.7%、20.4%（Plt;0.05）。

3 討論

國內(nèi)許多研究表明，動物腸道中含有多種益生菌菌群，如乳酸桿菌、雙歧桿菌等，這些菌群在維持腸道健康中起著重要的作用，如乳酸桿菌和雙歧桿菌在腸道中可以有效抑制致病菌（大腸桿菌和沙門菌）生長和減少致病菌在腸細(xì)胞上定殖，可以有效調(diào)控動物腸道菌群平衡和維持腸道的健康[7-8]。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)2、3、4組肉牛的直腸糞便的pH均低于1組（Pgt;0.05），試驗(yàn)3、4組直腸糞便中乳酸桿菌、雙歧桿菌的含量較1組比分別顯著提高18.2%、18.9%、13.6%、14.8%（Plt;0.05），其直腸糞便中大腸桿菌較1組比分別顯著降低17.7%、20.4%（Plt;0.05），以2.0%益生菌添加效果較好。與楊東吉等[9]報(bào)道的益生菌可以有效調(diào)控腸道一致，可能由于酵母菌發(fā)酵菌液含有多種乳酸、乙酸等活性物質(zhì)，調(diào)控其腸道營養(yǎng)物質(zhì)的pH，可以有效抑制腸道中致病菌（大腸桿菌）生長與繁殖，同時增加科爾沁肉牛腸道中乳酸桿菌、雙歧桿菌等益生菌的含量。因此，益生菌制劑可以有效調(diào)控科爾沁肉牛腸道菌群結(jié)構(gòu)，起到改善腸道健康的作用。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)的飼養(yǎng)條件下，不同水平的益生菌制劑可以提高科爾沁肉牛腸道中乳酸桿菌、雙歧桿菌等益生菌的含量，降低其致病菌（大腸桿菌）含量，同時有效調(diào)控其腸道pH值，改善腸道健康水平，以2.0%添加量較適宜。

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