摘 要：首次在中國報(bào)道1例由長頸囊尾蚴（Cysticercus longicollis）引起的5歲雄性圈養(yǎng)環(huán)尾狐猴（Lemur catta）皮下囊尾蚴病，患病動(dòng)物表現(xiàn)為明顯的臀部囊腫，但無其他異常體征。該病例就診于四川農(nóng)業(yè)大學(xué)第二教學(xué)動(dòng)物醫(yī)院。在就診期間，采用細(xì)針穿刺對囊腫內(nèi)容物進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢查。結(jié)果顯示：囊腫內(nèi)含有大量囊尾蚴，典型囊尾蚴呈橢圓形，具有長而可伸縮的頸部和單個(gè)頭節(jié)，頭節(jié)上有4個(gè)吸盤和16個(gè)（單排）小鉤。通過對囊尾蚴DNA進(jìn)行nad1 和cox1 基因擴(kuò)增及測序，進(jìn)一步確定該囊尾蚴為肥頭絳蟲（Taenia crassiceps）的幼蟲形態(tài)，即長頸囊尾蚴，研究結(jié)果可為該寄生蟲在國內(nèi)的流行病學(xué)調(diào)查及防控提供參考。

關(guān)鍵詞：肥頭絳蟲；環(huán)尾狐猴；長頸囊尾蚴

中圖分類號：S858. 9

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：2310 - 1490（2024）- 03 - 0648 - 05

DOI：10.12375/ysdwxb.20240321

肥頭絳蟲（Taenia crassiceps）屬于扁型動(dòng)物門（Platyhelminthes）多節(jié)絳蟲亞綱（Cestoda）帶絳蟲科（Taeniidae）帶絳蟲屬（Taenia）。該寄生蟲主要以赤狐（Vulpes vulpes）和其他犬科（Canidae）動(dòng)物為終末宿主，流行于北美洲、亞洲和歐洲等地［1?2］。肥頭絳蟲的傳播途徑為糞口傳播，食用被蟲卵污染的食物和水可導(dǎo)致以嚙齒動(dòng)物為主的中間宿主感染。蟲卵在體內(nèi)隨后發(fā)育成長頸囊尾蚴（Cysticercus longicol?lis），其體態(tài)透明，呈橢圓形，長度可達(dá)3 mm，頭節(jié)有4個(gè)吸盤和28～34個(gè)小鉤［3］，并定殖于皮下、肌肉和胸膜腹腔內(nèi)等部位形成囊腫。當(dāng)終末宿主捕食受感染的中間宿主后，長頸囊尾蚴通過吸盤附著在腸道內(nèi)棲息，并發(fā)育成絳蟲成蟲。

據(jù)報(bào)道，肥頭絳蟲在德國、斯洛文尼亞、西班牙和法國的赤狐中感染率較高，為19. 9%～29. 0%［4?7］。相比之下，該寄生蟲在伊比利亞半島、意大利、瑞士和中國的赤狐中流行率相對較低，為0. 7%～8. 0%［8?11］。目前，全球范圍內(nèi)有多例環(huán)尾狐猴（Lemur catta）感染長頸囊尾蚴的病例報(bào)道［12?14］，其中一例未見明顯癥狀即突發(fā)死亡［14］。人類也有多例感染長頸囊尾蚴的病例報(bào)道［15?16］，主要是免疫力低下的人食用了被蟲卵污染的食物或水所致。盡管長頸囊尾蚴感染健康人類較為少見，但仍應(yīng)考慮其潛在的人獸共患風(fēng)險(xiǎn)。

首次在中國報(bào)道1例圈養(yǎng)環(huán)尾狐猴感染肥頭絳蟲囊尾蚴病，以期為長頸囊尾蚴蟲在國內(nèi)的流行病學(xué)調(diào)查及防控提供參考。

1 材料與方法

1. 1 病例描述與囊尾蚴樣品采集

研究對象為2019年從捷克共和國引入四川雅安碧峰峽動(dòng)物園的1只5歲成年雄性環(huán)尾狐猴。該猴為開放式飼養(yǎng)，食物包括紅棗、花生、蘋果、胡蘿卜、窩窩頭、瓜子以及一些游客私自喂食的食品。2021 年5 月，飼養(yǎng)員發(fā)現(xiàn)該猴臀部有皮下囊腫（圖1），但沒有其他異常癥狀，園區(qū)獸醫(yī)使用氨芐西林（批準(zhǔn)文號：獸藥字154416286，濰坊鴻盛生物科技有限公司）對其進(jìn)行治療。給藥方式為口服給藥，劑量為50 mg/kg，給藥周期為1 次/d，總給藥時(shí)間為12 d。治療結(jié)束后，患病環(huán)尾狐猴囊腫未見消退。

2022年10月20日，患病環(huán)尾狐猴被送往雅安市四川農(nóng)業(yè)大學(xué)第二教學(xué)動(dòng)物醫(yī)院接受治療。值班醫(yī)師接診后，首先使用電動(dòng)剃刀剃除該猴患病部位周圍毛發(fā)，確保采樣區(qū)域清潔無毛；而后使用碘伏溶液徹底消毒并采用23G針頭及注射器進(jìn)行細(xì)針抽吸，抽取的樣本立即轉(zhuǎn)移到載玻片上，確保樣本均勻分布；最后，使用光學(xué)顯微鏡對載玻片上的樣本進(jìn)行觀察，并拍攝圖像記錄樣本特征。通過鏡檢確定該猴為寄生蟲感染后，值班醫(yī)師采用抗寄生蟲藥阿苯達(dá)唑（批準(zhǔn)文號：獸藥生產(chǎn)證字15295號，河南南華千牧生物科技有限公司）進(jìn)行保守治療。給藥方式為口服給藥，劑量為20 mg/kg，給藥周期為1次/d，總給藥時(shí)間為30 d。在治療過程中，囊腫在第10天開始明顯縮小，到第25天時(shí)基本消退，該猴無不良反應(yīng)。治療結(jié)束后，環(huán)尾狐猴恢復(fù)健康，未再發(fā)現(xiàn)其他異常癥狀。

1. 2 囊尾蚴基因組DNA 提取及線粒體nad1 和cox1 基因的擴(kuò)增

參照糞便DNA 提取試劑盒（OMEGA，美國）說明書從單個(gè)囊尾蚴中提取DNA。合成Samorek-Pieróg等［13］報(bào)道的引物，對提取DNA的線粒體細(xì)胞色素c氧化酶第Ⅰ亞基（cox1）基因和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶第Ⅰ亞基（nad1）基因的部分序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增，引物信息見表1。

1. 3 測序和系統(tǒng)發(fā)育分析

擴(kuò)增片段的測序工作由生工生物工程（上海）股份有限公司完成，測序方式為Sanger 雙脫氧測序。使用SeqMan Pro軟件對擴(kuò)增的正反向序列進(jìn)行比對和拼接。隨后利用BLAST在GenBank中搜索拼接序列的同源序列，并使用BLAST核苷酸算法進(jìn)行物種鑒定。利用MEGA11軟件中的UPGMA法對拼接序列及部分同源序列構(gòu)建進(jìn)化樹，模型為“Kimura 2-parameter”，Bootstrap設(shè)置為1 000。

2 結(jié)果

2. 1 鏡檢結(jié)果

顯微鏡下觀察到大量存活的囊尾蚴，典型囊尾蚴呈橢圓形囊體，具有長而可伸縮的頸部和單個(gè)頭節(jié)（圖2A），頭節(jié)上有4 個(gè)吸盤和16 個(gè)（單排）小鉤（圖2B）。

2. 2 PCR 擴(kuò)增及進(jìn)化樹

利用合成的引物成功擴(kuò)增囊尾蚴的DNA片段，兩個(gè)PCR反應(yīng)產(chǎn)物均符合預(yù)期大小。使用GenBank數(shù)據(jù)庫對擴(kuò)增子的測序結(jié)果進(jìn)行分析和比較，結(jié)果證實(shí)該寄生蟲為肥頭絳蟲。

擴(kuò)增的nad1和cox1基因序列均已上傳至GenBank數(shù)據(jù)庫，登錄號分別為OP991968. 1和OP831183. 1?；趎ad1 基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹（圖3A）顯示，本研究的肥頭絳蟲與波蘭某環(huán)尾狐猴感染的肥頭絳蟲（OM992098. 1）親緣關(guān)系最近，置信度為100%。基于cox1 基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹（圖3B）顯示，本研究的肥頭絳蟲與捷克共和國某地松鼠（Xerus in?auris）感染的肥頭絳蟲（KY321320. 1）親緣關(guān)系最近，置信度為62%。

3 討論

首次在中國報(bào)道圈養(yǎng)環(huán)尾狐猴感染肥頭絳蟲囊尾蚴病，雖然該病的感染源和傳播方式尚不清楚，但系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果顯示本研究的病原與波蘭和捷克共和國的病原親緣關(guān)系最近，而本病例環(huán)尾狐猴正是從捷克共和國引進(jìn)，波蘭和捷克共和國為鄰國關(guān)系，所以初步推測該猴在引入前就已感染病原，并在碧峰峽動(dòng)物園發(fā)病。

阿苯達(dá)唑作為一種苯并咪唑類的廣譜抗寄生蟲藥物，可有效治療蛔蟲、絳蟲、蟯蟲和鉤蟲等多種寄生蟲感染［17］，所以該藥物對本病例有較好的治療效果。除阿苯達(dá)唑外，藥物吡喹酮和硝唑沙奈也可用于治療絳蟲引起的疾?。?8?19］。

肥頭絳蟲及其幼蟲能夠感染狐貍、非人靈長類、鼠、犬甚至人，其中非人靈長類動(dòng)物對帶絳蟲科物種高度敏感。在各種圈養(yǎng)的非人靈長類動(dòng)物中，已有多例多房棘球絳蟲（Echinococcus multilocularis）、奧氏棘球絳蟲（E. ortleppi）、肥頭絳蟲和馬帶絳蟲（Tae?nia martis）引起的感染病例報(bào)道［12?13，20?23］。所以應(yīng)充分考慮肥頭絳蟲的人獸共患潛力，在監(jiān)測、診斷和治療等多個(gè)方面進(jìn)行深入研究，以減少該寄生蟲的公共衛(wèi)生危害。

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