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        基于Python的手印熒光顯現(xiàn)質(zhì)量的量化評估

        2024-09-11 00:00:00于卓弘徐致澤王猛范文卓李杰李明袁傳軍
        分析化學(xué) 2024年7期
        關(guān)鍵詞:選擇性靈敏度熒光

        關(guān)鍵詞潛在手印;手印顯現(xiàn);熒光;對比度;靈敏度;選擇性

        手印顯現(xiàn)是指通過物理和化學(xué)等方法使手印與客體之間形成肉眼可見或儀器可辨的對比反差,進而將潛在手印轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢娛钟〉倪^程[1-3]。迄今為止,手印顯現(xiàn)領(lǐng)域研究主要集中于手印顯現(xiàn)質(zhì)量的提升[4-6],而對手印顯現(xiàn)質(zhì)量的評估研究鮮有涉及。然而,對手印顯現(xiàn)質(zhì)量進行準(zhǔn)確和全面地評價有助于顯現(xiàn)方法的合理選擇和證據(jù)價值的客觀評估,因此,構(gòu)建手印顯現(xiàn)質(zhì)量定量評估體系具有重要的理論意義和廣闊的應(yīng)用前景。近年來,手印顯現(xiàn)質(zhì)量的評估問題已經(jīng)逐漸引起研究人員的重視。2017 年, Wang 等[7]針對手印顯現(xiàn)中信號與噪聲反差程度、各級特征的清晰程度以及試劑特異性結(jié)合程度對應(yīng)提出了對比度、靈敏度和選擇性等指標(biāo),作為手印顯現(xiàn)質(zhì)量的評估指標(biāo)。2021 年,李明等[8]從對比度、靈敏度、選擇性和毒害性等方面對手印顯現(xiàn)質(zhì)量的評估研究進行了詳細介紹。

        2008 年, Humphreys 等[9]首次提出了相對對比指數(shù)的評估指標(biāo),將其定義為乳突紋線與客體的反射光譜峰值之比的對數(shù)值,并利用該指標(biāo)定量評估捺印手印及顯現(xiàn)手印的質(zhì)量。2011 年, Vanderwee 等[10]優(yōu)化了上述質(zhì)量評估體系,并驗證了該體系的可靠性和重現(xiàn)性。2013 年, Matuszewski 等[11]提出了對比度的評估指標(biāo),將其定義為乳突紋線與小犁溝的像素平均灰度值差異。以上文獻報道為定量評估手印顯現(xiàn)的早期研究,采用的方法不具備普適性,僅適用于白色客體表面的深色手印或黑色客體表面的淺色手印。2019 年,沈敦璞等[12]建立了基于灰度分析的非熒光手印顯現(xiàn)對比度評估體系,并于2020 年建立了基于光譜分析的熒光手印顯現(xiàn)對比度評估體系[13]。這兩項研究解決了非熒光和熒光方法顯現(xiàn)手印的對比度定量評估問題,方法具有普適性,但前者的計算結(jié)果誤差較大,后者極其依賴表征設(shè)備。目前,手印顯現(xiàn)對比度的評估研究大多停留在定性評價層面,即使深入到定量計算層面,也存在缺陷。2012年, Li等[14]首次考察了聚集誘導(dǎo)發(fā)光材料顯現(xiàn)手印的總體特征及細節(jié)特征,但該研究未涉及汗孔特征。2015 年,Wang 等[15]考察了稀土發(fā)光納米材料顯現(xiàn)手印的總體特征、細節(jié)特征及汗孔特征,但僅達到定性評價層面。因此,手印顯現(xiàn)靈敏度的評估研究基本停留在定性評價層面,尚未深入到定量計算層面。2014 年,He 等[16]首次考察了納米金顯現(xiàn)手印的選擇性,利用乳突紋線與小犁溝所對應(yīng)灰度曲線的峰谷高低衡量兩者之間的差異,但僅限于定性評價層面。2019 年,于海峰等[17]提出了利用乳突紋線與小犁溝所對應(yīng)灰度曲線的積分面積的比值計算手印顯現(xiàn)選擇性的方法。同年,智曉晨等[18]提出了利用乳突紋線與小犁溝所對應(yīng)灰度曲線的峰谷強度之差計算手印顯現(xiàn)選擇性的方法。以上研究解決了顯現(xiàn)手印的選擇性定量計算問題,但是所得數(shù)值只能反映手印中有限區(qū)域的選擇性,缺乏代表性和準(zhǔn)確性。因此,手印顯現(xiàn)選擇性的評估研究大多停留在定性評價層面,即使深入到定量計算層面,也存在缺陷。綜上所述,手印顯現(xiàn)質(zhì)量的量化評估方法在不同程度上存在以下亟需解決的問題:(1)定性評價方法相對較多、定量計算方法有限;(2)評價指標(biāo)分散單一、全面多維評價欠缺;(3)評價方法難以統(tǒng)一、評價結(jié)果可靠性低。因此,建立一種簡單易行、準(zhǔn)確可靠、客觀全面以及普適性強的手印顯現(xiàn)質(zhì)量的定量評估體系至關(guān)重要。

        作為一種新興的完全面向?qū)ο蟮木幊陶Z言, Python 集成了能夠滿足多種需求的第三方庫(如OpenCV和PIL),可以有效實現(xiàn)圖像的灰度轉(zhuǎn)換、二值化和圖像增強等,因此在圖像處理領(lǐng)域廣泛應(yīng)用[19]。本研究提出了手印熒光顯現(xiàn)對比度、靈敏度和選擇性的定量計算公式,建立了一種基于Python 的手印熒光顯現(xiàn)質(zhì)量評估體系,從對比度、靈敏度和選擇性3 個角度評估了手印熒光顯現(xiàn)的質(zhì)量,驗證了此評估體系的可行性和可靠性,討論了顯現(xiàn)試劑的性質(zhì)對手印顯現(xiàn)質(zhì)量的影響,提出了提高手印顯現(xiàn)質(zhì)量的有效策略。

        1 實驗部分

        1.1 儀器與試劑

        Cary Eclipse 熒光分光光度計(FS,美國Agilent 公司);H-7650 透射電子顯微鏡(TEM,日本Hitachi公司);JSM-IT200 掃描電子顯微鏡(SEM,日本JEOL 公司);TENSOR 27 傅里葉變換紅外光譜儀(FT-IR,德國Bruker 公司)。

        Y(NO3)3·6H2O、La(NO3)3·6H2O、Ce(NO3)3·6H2O、Yb(NO3)3·5H2O、Eu(NO3)3·6H2O、Tb(NO3)3·6H2O和Er(NO3)3·6H2O,純度為99.99%;Na3VO4·12H2O、Na3PO4·12H2O、NaF、對苯二甲酸(p-PTA)、鄰菲咯啉(o-Phen)、聚乙烯亞胺50%水溶液(PEI, MW 10000)、乙二醇、二乙三胺五乙酸(DTPA)、硬脂酸(SA)、油酸(OA)、NaOH、無水乙醇、95%乙醇、N,N-二甲基甲酰胺(DMF),純度均為分析純。以上試劑均購自上海阿拉丁生化科技股份有限公司。

        1.2 實驗方法

        1.2.1 顯現(xiàn)材料的合成

        YVO4∶Eu 納米發(fā)光材料的合成參照文獻[15]的方法合成Y0.85VO4∶Eu0.15 納米發(fā)光材料。將3.26 gY(NO3)3·6H2O 和0.67 g Eu(NO3)3·6H2O 溶解于200 mL 水中,加入5 mL PEI 溶液,配制溶液A;將4.00 gNa3VO4·12H2O 溶解于200 mL 水中,配制溶液B。電動攪拌下,將溶液B 緩慢滴入溶液A 中,調(diào)節(jié)體系pH=8.0。將混合物在不同加熱條件下反應(yīng)2 h,離心分離、洗滌,于50 ℃真空干燥,即得到Y(jié)VO4∶Eu 納米粉末。若將加熱條件設(shè)定為90 ℃水浴反應(yīng),可得到發(fā)光較弱的納米材料;若將加熱條件設(shè)定為180 ℃水熱反應(yīng),可得到發(fā)光較強的納米材料。

        LaPO4∶Ce,Tb 納米發(fā)光材料的合成參照文獻[15]的方法合成La0.60PO4∶Ce0.25,Tb0.15 納米發(fā)光材料。將2.60 g La(NO3)3·6H2O、1.09 g Ce(NO3)3·6H2O 和0.68 g Tb(NO3)3·6H2O 溶解于水或水-乙二醇混合溶劑中,配制溶液A;將3.80 g Na3PO4·12H2O 溶解于100 mL 水中,配制溶液B。電動攪拌下,將溶液B 緩慢滴入溶液A 中,調(diào)節(jié)體系pH=8.0。將混合物在180 ℃條件下水熱反應(yīng)2 h,離心分離、洗滌,于50 ℃真空干燥,得到LaPO4∶Ce,Tb 納米粉末。若溶液A 中使用的溶劑為300 mL 水,可得到表面無有機分子修飾的納米材料;若溶液A 中使用的溶劑為100 mL 水與200 mL 乙二醇的混合物,可得到表面有乙二醇分子修飾的納米材料。

        NaYF4∶Yb,Er 上轉(zhuǎn)換發(fā)光微/納米材料的合成參照文獻[20]的方法合成NaY0.78F4∶Yb0.20, Er0.02 微米發(fā)光材料。將2.99 g Y(NO3)3·6H2O、0.90 g Yb(NO3)3·5H2O 和0.09 g Er(NO3)3·6H2O 溶于100 mL 水中,加入3.93 g DTPA,配制溶液A;將1.68 g NaF 溶解于100 mL 水中,配制溶液B。電動攪拌下,將溶液B緩慢滴入溶液A 中,調(diào)節(jié)體系pH=6.0,常溫反應(yīng)1 h。將產(chǎn)物離心分離、洗滌,于50 ℃真空干燥形成粉末,在500 ℃、Ar 氣氛中煅燒5 h, 得到NaYF4∶Yb,Er 微米粉末。

        NaYF4∶Yb,Er 納米材料的合成參照文獻[21]的方法合成NaY0.78F4∶Yb0.20,Er0.02 納米發(fā)光材料。將2.99 g Y(NO3)3·6H2O、0.90 g Yb(NO3)3·5H2O、0.09 g Er(NO3)3·6H2O、8.53 g SA 與100 mL 95%乙醇混合,升溫至75 ℃使其溶解,配制溶液A;將1.20 g NaOH 溶解于20 mL 水中,配制溶液B。電動攪拌下,將溶液B 緩慢滴入溶液A 中,調(diào)節(jié)體系pH=7.0, 75 ℃恒溫反應(yīng)40 min。將產(chǎn)物抽濾、洗滌,在50 ℃真空干燥,得到稀土硬脂酸鹽前驅(qū)體。將此前驅(qū)體與1.68 g NaF、50 mL OA、100 mL 水和150 mL 無水乙醇混合均勻后, 180 ℃水熱反應(yīng)24 h。產(chǎn)物離心分離、洗滌,于50 ℃真空干燥,得到NaYF4∶Yb,Er 納米粉末。

        Eu(p-PTA)3(o-Phen)納米材料的合成參照文獻[22]的方法合成Eu(p-PTA)3(o-Phen)納米配合物。配制濃度均為0.25 mol/L 的Eu(NO3)3 乙醇溶液、p-PTA DMF 溶液及o-Phen 乙醇溶液。將60 mLp-PTA 溶液與20 mL o-Phen 溶液混合,升溫至50 ℃,調(diào)節(jié)體系pH=7.0,配制溶液A。電動攪拌下,將20 mL Eu(NO3)3 溶液緩慢滴入溶液A 中, 50 ℃下反應(yīng)5 h。將產(chǎn)物離心分離、洗滌,于50 ℃真空干燥,得到Eu(p-PTA)3(o-Phen)納米粉末。

        1.2.2 手印納米顯現(xiàn)

        采用經(jīng)典的粉末法顯現(xiàn)手印。使用下轉(zhuǎn)換及上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料顯現(xiàn)后的手印,分別搭配254 nm 紫外光源及980 nm 紅外光源對手印進行熒光增強,并置于暗場下拍照。拍攝參數(shù)為:光圈值f/4、曝光時間1.6 s、感光度200。

        1.2.3 手印顯現(xiàn)質(zhì)量的定量評估

        手印顯現(xiàn)圖像的處理過程如圖1 所示。步驟Ⅰ:通過灰度處理(Grayscale processing)將彩色圖像轉(zhuǎn)化為灰度圖像。步驟Ⅱ~Ⅶ從兩個層面將灰度圖像進一步處理。一方面是乳突紋線、小犁溝、客體背景的識別與提取。步驟Ⅱ:通過圖像分割(Image segmentation)處理將灰度圖像轉(zhuǎn)化為圖像切片;步驟Ⅲ:通過灰度方差圖像分割(Grayscale variance segmentation)算法將所得圖像識別為手印(Fingerprint,F(xiàn)P)區(qū)域和背景(Background, B)區(qū)域;步驟Ⅳ:通過最大類間方差(OTSU)算法將所得圖像二值化處理并識別為乳突紋線(Ridge, R)和小犁溝(Furrow, F)區(qū)域;最終,分別計算出B、R 和F 區(qū)域的灰度均值。另一方面為乳突紋線細節(jié)特征點的識別與提取。步驟Ⅴ:通過圖像增強(Image enhancement)處理將灰度圖像的紋線結(jié)構(gòu)清晰化;步驟Ⅵ:通過骨架化(Skeletonization)算法將乳突紋線細化;步驟Ⅶ:通過細節(jié)特征點識別(Minutiae recognition)算法將所得圖像識別為交點(Bifurcation)和端點(Termination);最終,以特征點為中心建立切片,并利用步驟Ⅳ方法計算各細節(jié)特征點切片中R、F 區(qū)域的灰度均值。

        手印顯現(xiàn)對比度(Contrast)的計算公式如式(1)所示:

        其中, GR 表示乳突紋線的灰度均值;GB 表示客體背景的灰度均值;GRi 和GBj 分別表示乳突紋線和客體背景區(qū)域內(nèi)單個像素點的灰度值;x 和y 分別表示乳突紋線和客體背景區(qū)域所包含像素點的總數(shù)。

        手印顯現(xiàn)靈敏度(Sensitivity)的計算公式如式(2)所示:

        其中, GRl 和GFl 分別表示每個被識別細節(jié)特征點切片中乳突紋線和小犁溝的灰度均值;n 表示被識別細節(jié)特征點切片的總數(shù);GRli 和GFlk 分別表示每個切片中乳突紋線和小犁溝區(qū)域內(nèi)單個像素點的灰度值;x 和z 分別表示每個切片中乳突紋線、小犁溝區(qū)域所包含像素點的總數(shù)。

        手印顯現(xiàn)選擇性(Selectivity)的計算公式如式(3)所示:

        其中, GR、GB 和GF 分別表示乳突紋線、背景和小犁溝的灰度均值;GF *表示修正后小犁溝的灰度均值;GRi、GBj 和GFk 分別表示乳突紋線、背景和小犁溝區(qū)域內(nèi)單個像素點的灰度值;x、y 和z 分別表示乳突紋線、背景和小犁溝區(qū)域所包含像素點的總數(shù)。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 手印顯現(xiàn)對比度的量化評估

        2.1.1 對比度的量化原理

        手印顯現(xiàn)對比度是指顯現(xiàn)手印信號與客體背景噪聲之間的對比反差程度[7]。手印顯現(xiàn)對比度的定義參考了分析化學(xué)領(lǐng)域的信噪比,將顯現(xiàn)手印和客體背景分別歸為分析信號和干擾噪聲。其中,分析信號來源于乳突紋線(R)部位所產(chǎn)生的熒光,干擾噪聲來源于客體背景(B)部位所產(chǎn)生的熒光。因此,可利用分析信號與干擾噪聲之間的灰度均值之比(GR/GB)定量評估手印顯現(xiàn)對比度。

        2.1.2 對比度的影響因素

        選用較弱發(fā)光的YVO4∶Eu 納米材料[YVO(W)]和較強發(fā)光的YVO4∶Eu 納米材料[YVO(S)]分別顯現(xiàn)大理石表面的潛在手印,研究材料的發(fā)光強度對顯現(xiàn)對比度的影響。由圖2A 和圖2B 可見,在254 nm紫外光激發(fā)下, YVO(W)與YVO(S)在618.0 nm 處均產(chǎn)生了最強熒光發(fā)射峰,對應(yīng)于Eu3+的5D0→7F2 能級躍遷[15],并且前者的強度較低(404.5,圖2A),后者的強度較高(692.2,圖2B)。從視覺效果的角度定性判斷,如圖2A′和圖2B′所示, YVO(S)具有較高的發(fā)光強度,使其顯現(xiàn)的乳突紋線與客體背景之間的視覺反差更明顯。Python 計算結(jié)果如表1 所示,兩次顯現(xiàn)的背景噪聲強度未產(chǎn)生顯著差異,而使用YVO(S)顯現(xiàn)手印的顯現(xiàn)信號強度更高,使對應(yīng)的對比度數(shù)值更大。綜上所述,提高材料的發(fā)光強度有利于增強手印顯現(xiàn)的對比度。

        選用紅色發(fā)光的YVO4∶Eu 納米材料[YVO(R)]和綠色發(fā)光的LaPO4∶Ce, Tb 納米材料[LPO(G)]分別顯現(xiàn)紅便箋紙表面的潛在手印,研究材料的發(fā)光顏色對顯現(xiàn)對比度的影響。由圖3A 和圖3B 可見,在254 nm 紫外光激發(fā)下,背景在(0.48, 0.33)處產(chǎn)生了紅色熒光, YVO(R)、LPO(G)分別在(0.63, 0.37)和(0.29, 0.61)處產(chǎn)生了紅光和綠光,并且YVO(R)的發(fā)光顏色與背景熒光顏色相似(圖3A), LPO(G)的發(fā)光顏色與背景熒光顏色相異(圖3B)。從視覺效果的角度定性判斷,如圖3A′和圖3B′所示, LPO(G)具有綠色發(fā)光性能,其產(chǎn)生的綠色顯現(xiàn)信號與紅色背景噪聲之間的視覺反差更明顯。Python 計算結(jié)果見表2,兩次顯現(xiàn)的背景噪聲強度未產(chǎn)生顯著差異,而使用LPO(G)顯現(xiàn)手印的顯現(xiàn)信號強度更高,使對應(yīng)的對比度數(shù)值更大。綜上所述,調(diào)諧材料的發(fā)光顏色有利于增強手印顯現(xiàn)的對比度。另外,相比調(diào)諧材料的發(fā)光顏色,提高材料的發(fā)光強度對顯現(xiàn)對比度的增強效果更明顯,這與文獻[23]的結(jié)果一致。

        2.2 手印顯現(xiàn)靈敏度的量化評估

        2.2.1 靈敏度的量化原理

        手印顯現(xiàn)靈敏度是指顯現(xiàn)手印中細節(jié)特征的清晰程度和總體數(shù)量[7]。手印顯現(xiàn)靈敏度的定義中包含兩方面信息:(1)細節(jié)特征的質(zhì)量,細節(jié)特征切片中乳突紋線與小犁溝之間的灰度均值的比值(GRl/GFl)越大,體現(xiàn)出細節(jié)特征的清晰程度越高;(2)細節(jié)特征的數(shù)量,將切片中GRl/GFl 進行累加,該累加值越大,則體現(xiàn)出細節(jié)特征的總體數(shù)量越多。因此,可利用細節(jié)特征點切片中乳突紋線與小犁溝之間的灰度均值的比值的累加值[Σ(GRl/GFl)]定量評估手印顯現(xiàn)靈敏度。

        2.2.2 靈敏度的影響因素

        選用微米尺度的NaYF4∶Yb, Er 材料[NYF(M)]和納米尺度的NaYF4∶Yb, Er 材料[NYF(N)]分別顯現(xiàn)玻璃表面的潛在手印,考察材料的粒徑尺寸對顯現(xiàn)靈敏度的影響。由圖4A 和圖4B 可見,煅燒法合成的NYF(M)材料出現(xiàn)明顯的團聚現(xiàn)象,其粒徑尺寸為微米級(242.1 nm×862.5 nm, 圖4A);水熱法合成的NYF(N)材料具有良好的單分散性,其粒徑尺寸為納米級(30.7 nm×45.1 nm, 圖4B)。從視覺效果的角度定性判斷,如圖4A1′和圖4B1′所示, NYF(M)的粒徑尺寸較大,容易粘連甚至覆蓋細節(jié)特征;NYF (N)的粒徑尺寸較小,容易清晰精細地反映細節(jié)特征。Python 識別的細節(jié)特征數(shù)量如圖4A2′和圖4B2′所示,使用NYF(M)和NYF(N)顯現(xiàn)的手印分別被標(biāo)記出32 和53 個細節(jié)特征;兩者所對應(yīng)的靈敏度數(shù)值依次為60.258 和100.742。綜上所述,選用粒徑較小的材料有利于增強手印顯現(xiàn)的靈敏度。

        2.3 手印顯現(xiàn)選擇性的量化評估

        2.3.1 選擇性的量化原理

        手印顯現(xiàn)選擇性是指顯現(xiàn)試劑與手印物質(zhì)之間的特異結(jié)合程度[7]。通常,背景部位較光滑且不易遺留手印物質(zhì),因此背景與顯現(xiàn)試劑之間的吸附作用微弱,背景的灰度均值(GB)較?。恍±鐪喜课皇艿较噜徣橥患y線的阻擋且容易沾染手印物質(zhì),小犁溝與顯現(xiàn)試劑之間可能產(chǎn)生非特異性吸附,所以小犁溝的灰度均值(GF)偏大。但是,考慮到顯現(xiàn)試劑的熒光強度通常較高,少量沾染即可引起GF 顯著增加,進而影響計算結(jié)果的客觀性,所以需要對GF 進行修正。乳突紋線與顯現(xiàn)試劑之間的吸附作用最強,故乳突紋線的灰度均值GR 最高,可抵消并修正GF。因此,可將GF/GR 作為修正系數(shù),并將GF 與GF/GR 的乘積作為修正后小犁溝的灰度均值(GF *),進而客觀評估手印顯現(xiàn)的選擇性。

        2.3.2 選擇性的影響因素

        選用片狀形貌的Eu(p-PTA)3(o-Phen)納米材料(EPP)和球狀形貌的YVO4∶Eu 納米材料(YVO)分別顯現(xiàn)玻璃表面的潛在手印,研究材料的微觀形貌對顯現(xiàn)選擇性的影響。從圖5A 和5B 可以看出, EPP 的微觀形貌呈現(xiàn)為片狀(圖5A), YVO 的微觀形貌為球狀(圖5B)。從視覺效果角度定性判斷,如圖5A1′和5B1′所示, EPP 的微觀形貌為納米片,其較大的接觸面積和過強的吸附性能極易在小犁溝處產(chǎn)生吸附;而YVO 的微觀形貌為納米球,其較小的接觸面積和適中的吸附性能不易產(chǎn)生非特異性吸附。Python 統(tǒng)計的選擇性質(zhì)量分布圖如圖5A2′和5B2′所示,使用YVO 顯現(xiàn)的手印被統(tǒng)計出高選擇性區(qū)域的比例較大;Python 統(tǒng)計的選擇性數(shù)值如表3 所示,使用EPP 和YVO 顯現(xiàn)的手印所對應(yīng)的選擇性數(shù)值分別為0.927 和1.287。綜上所述,選用接觸面積較小和吸附性能適中的材料有利于增強手印顯現(xiàn)的選擇性。

        選用表面乙二醇修飾的LaPO4∶Ce,Tb 納米材料[LPO (E)]和表面無有機分子修飾的LaPO4∶Ce,Tb 納米材料[LPO(N)]分別顯現(xiàn)玻璃表面的潛在手印,研究材料的表面性質(zhì)對顯現(xiàn)選擇性的影響。由圖6A 和6B 可見,位于1047 cm–1(圖6A)和1041 cm–1(圖6B)處的吸收峰對應(yīng)于PO4 3– 離子的非對稱伸縮振動,位于953 cm–1(圖6A)和955 cm–1(圖6B)處的吸收峰對應(yīng)于P—O—P 的對稱伸縮振動,位于623 cm–1(圖6A)、619 cm–1(圖6B)及565 cm–1(圖6A 和圖6B)處的吸收峰對應(yīng)于O—P—O 鍵的彎曲振動,說明以上兩種LPO 納米材料均為稀土的正磷酸鹽。此外,位于3383 cm–1(圖6A)處的強吸收峰對應(yīng)于乙二醇羥基的伸縮振動,位于2976 cm–1(圖6A)處的吸收峰對應(yīng)于乙二醇亞甲基的反對稱伸縮振動,說明LPO(E)的表面被乙二醇修飾;而LPO (N)在對應(yīng)位置并未出現(xiàn)亞甲基的伸縮振動峰,僅在3385 cm–1(圖6B)處出現(xiàn)弱吸收峰(來源于水分子),說明LPO(N)的表面無有機分子修飾。從視覺效果的角度定性判斷,如圖6A1′和圖6B1′所示, LPO (E)的表面被乙二醇修飾,具有很強的吸附性能,極易在小犁溝處產(chǎn)生吸附;而LPO(N)表面無有機分子修飾,具有適中的吸附性能,不易產(chǎn)生非特異性吸附。Python 統(tǒng)計的選擇性質(zhì)量分布圖(圖6A2′和6B2′)表明,使用LPO(N)顯現(xiàn)的手印被統(tǒng)計出高選擇性區(qū)域的比例較大。Python統(tǒng)計的選擇性數(shù)值如表4 所示,使用LPO(E)和LPO(N)顯現(xiàn)的手印所對應(yīng)的選擇性數(shù)值分別為0.367 和0.549。綜上所述,選用吸附能力適中的材料有利于增強手印顯現(xiàn)的選擇性。

        2.4 量化評估方法的重現(xiàn)性研究

        通過對主觀視覺判斷和客觀評估數(shù)值的比較,驗證了此量化評估方法的準(zhǔn)確性。為驗證本方法的重現(xiàn)性,將手印樣本數(shù)量增加為10 組,平行重復(fù)2.1~2.3 節(jié)的實驗操作,手印顯現(xiàn)照片及對應(yīng)的量化評估結(jié)果見電子版文后支持信息圖S1~S10 及表S1~S10,對量化評估方法重現(xiàn)性的統(tǒng)計結(jié)果見圖7。手印顯現(xiàn)對比度(圖7A)、靈敏度(圖7B 和7C)和選擇性(圖7D)的平均值與視覺效果(圖2~圖6)及Python 計算結(jié)果一致,表明本方法具有良好的準(zhǔn)確性;另外,統(tǒng)計結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差較小,表明本方法具有良好的重現(xiàn)性。雖然統(tǒng)計結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差較小,但也不盡相同,這與手印顯現(xiàn)操作造成的不可避免的細微差別(如手印遺留物質(zhì)、手印捺印質(zhì)量、手印顯現(xiàn)方法和手印著粉數(shù)量等)有關(guān),說明此量化評估方法具有較好的靈敏響應(yīng)性。

        3 結(jié)論

        以對比度、靈敏度和選擇性作為評估手印熒光顯現(xiàn)質(zhì)量的具體指標(biāo),建立了基于Python 的定量評估手印熒光顯現(xiàn)質(zhì)量的方法。提出了上述3 個評估指標(biāo)的定量計算公式,并驗證了由Python 計算出的客觀評估數(shù)值與視覺效果的主觀判斷結(jié)論的一致性。詳細討論了影響手印熒光顯現(xiàn)質(zhì)量的主要因素,即材料的發(fā)光強度和材料的發(fā)光顏色主要決定顯現(xiàn)的對比度,材料的粒徑尺寸主要決定顯現(xiàn)的靈敏度,材料的微觀形貌和表面性質(zhì)主要決定顯現(xiàn)的選擇性。同時,提出了增強手印熒光顯現(xiàn)質(zhì)量的有效途徑,即提高材料的發(fā)光強度和調(diào)諧材料的發(fā)光顏色有利于增強顯現(xiàn)的對比度,降低材料的粒徑尺寸有利于增強顯現(xiàn)的靈敏度,調(diào)整材料的微觀形貌和改變材料的表面性質(zhì)利于增強顯現(xiàn)的選擇性。本研究對象僅為顯現(xiàn)手印(檢材),并未涉及捺印手?。颖荆?,后續(xù)研究將借助Python 定量評估檢材與樣本相似程度,將物證價值由定性判斷水平提升到定量評估水平。

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