摘要糖尿病是一組以持續(xù)性高血糖為特征的慢性代謝性疾病，糖尿病及其并發(fā)癥已成為嚴(yán)重的全球性公共衛(wèi)生問題，但目前仍缺乏有效的治療手段。血糖水平監(jiān)測(cè)是糖尿病病情監(jiān)測(cè)的一種有效手段。人血清白蛋白（HSA）與血液中的葡萄糖經(jīng)非酶促糖基化反應(yīng)的產(chǎn)物為糖化白蛋白（GA），因GA 可反映過去2～3 周內(nèi)的總體血糖水平，可作為血清標(biāo)志物，在糖尿病患者短期血糖控制評(píng)估、療效觀察以及治療方案調(diào)整等方面具有重要價(jià)值。因此， GA 的簡(jiǎn)便、快速、低成本、高靈敏和高選擇性檢測(cè)對(duì)糖尿病的治療和病情監(jiān)測(cè)意義重大。本文系統(tǒng)歸納總結(jié)了GA 的檢測(cè)方法，重點(diǎn)闡述了各種檢測(cè)方法的原理及優(yōu)缺點(diǎn)，對(duì)GA 檢測(cè)方法近年來的研究進(jìn)展進(jìn)行了評(píng)述，最后對(duì)其發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行了展望。

關(guān)鍵詞糖化白蛋白；糖化血紅蛋白；糖尿?。谎潜O(jiān)測(cè)；非酶促糖基化；評(píng)述

糖尿病是一組由多病因引起的以持續(xù)性高血糖為特征的代謝性疾病。糖尿病及其并發(fā)癥（如心臟病、中風(fēng)、腎衰竭、糖尿病足、白內(nèi)障、失明和神經(jīng)損傷等）嚴(yán)重影響全球數(shù)億人的健康及生活質(zhì)量，已成為嚴(yán)重的全球性公共衛(wèi)生問題[1]。國際糖尿病聯(lián)盟（IDF）的報(bào)告顯示[1]， 2019 年，我國20～79 歲成年人糖尿病患病人數(shù)約為1.16 億（患病率高達(dá)10.9%），已成為全球糖尿病患病人數(shù)最多的國家；同時(shí)，由于不健康的飲食習(xí)慣等因素，我國糖尿病患病人數(shù)仍在持續(xù)快速增長，預(yù)計(jì)到2030 年，該年齡段糖尿病患病人數(shù)將高達(dá)1.41 億。目前尚無根治糖尿病的方法，一經(jīng)確診，需終身治療?，F(xiàn)階段，血糖監(jiān)測(cè)是糖尿病管理的一種重要手段。

目前，臨床常用的血糖監(jiān)測(cè)指標(biāo)包括即刻血糖（包括指尖快速血糖和靜脈血糖）水平和糖化蛋白（如糖化血紅蛋白和糖化白蛋白）含量等。即刻血糖水平只能體現(xiàn)靜態(tài)的某一瞬時(shí)的血糖值，無法反映一段時(shí)間內(nèi)的血糖水平，并且檢測(cè)結(jié)果易受飲食、藥物和情緒等因素的影響[2]。糖化蛋白是血糖與蛋白質(zhì)發(fā)生非酶促糖基化反應(yīng)的產(chǎn)物[3]（糖化蛋白形成過程如圖1 所示）。非酶促糖基化是一種重要的翻譯后修飾，該過程始于還原糖（主要是葡萄糖）的羰基與賴氨酸（Lys）、精氨酸（Arg）或N 端氨基之間的親核加成反應(yīng)，且沒有糖基轉(zhuǎn)移酶的參與[3-4]。非酶促糖基化的過程為：還原糖的羰基與蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)發(fā)生縮合反應(yīng)，形成熱力學(xué)不穩(wěn)定的席夫堿，隨后轉(zhuǎn)變成相對(duì)穩(wěn)定的Amadori 產(chǎn)物；后者經(jīng)歷如脫水、氧化、重排和異構(gòu)化等一系列自發(fā)反應(yīng)可生成多種羰基化合物（如乙二醛、3-脫氧葡萄糖酮和脫氫抗壞血酸等），并最終形成晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）[3-4]。糖化蛋白的含量（即非酶促糖基化蛋白占該蛋白質(zhì)總量的百分?jǐn)?shù)）與血糖水平密切相關(guān)，一旦形成，與蛋白質(zhì)結(jié)合的葡萄糖分子將持續(xù)存在于該蛋白質(zhì)分子的整個(gè)生命周期中，因此可有效反映一段時(shí)間內(nèi)的血糖水平。其中，糖化血紅蛋白（GHb）是血糖與紅細(xì)胞中的血紅蛋白（Hb）結(jié)合的產(chǎn)物[5]，其含量能夠反映過去8～12 周內(nèi)的總體血糖水平，并且與抽血時(shí)間、患者是否空腹以及是否使用胰島素等因素?zé)o關(guān)。GHb 由HbA1a、HbA1b 和HbA1c 組成，其中，HbA1c 約占70%。HbA1c 結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，其含量是國際上公認(rèn)衡量長期血糖控制的“金標(biāo)準(zhǔn)”（正常范圍為4.0%～6.5%）。糖化白蛋白（GA）是血糖與人血清白蛋白（HSA）相結(jié)合的產(chǎn)物[5-6]，其含量能夠反映過去2～3 周內(nèi)的總體血糖水平（正常范圍為11%～17%）。因此，與HbA1c 相比， GA 在短期血糖控制評(píng)估、療效觀察以及治療方案調(diào)整等方面更具優(yōu)勢(shì)[6]。此外，在溶血性貧血等Hb 代謝異常的情況下， HbA1c 的含量無法準(zhǔn)確反映患者的真實(shí)血糖水平，而GA 含量的檢測(cè)結(jié)果則不受影響[7]。因此，探索建立操作簡(jiǎn)便、成本低廉、靈敏度高且選擇性好的GA 含量檢測(cè)方法，對(duì)于糖尿病患者短期血糖控制評(píng)估、療效觀察以及治療方案調(diào)整等均具有重要意義。

針對(duì)GA 的檢測(cè)，科研人員開展了大量的研究工作[8-10]。根據(jù)檢測(cè)原理的不同，現(xiàn)有的GA 檢測(cè)方法主要分為比色分析法[11–13]、熒光分析法[7，14]、液相色譜（LC）法[15-16]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）法[17-18]、拉曼光譜法[19-20]、電化學(xué)發(fā)光（ECL）法[21]和電化學(xué)生物傳感器[22–24]等。本文對(duì)GA 的檢測(cè)方法進(jìn)行了歸納與總結(jié)，重點(diǎn)闡述了各種檢測(cè)方法的原理及優(yōu)缺點(diǎn)，綜述了其在近年的研究進(jìn)展，并對(duì)GA檢測(cè)方法的未來發(fā)展趨勢(shì)進(jìn)行了展望。

1 GA的檢測(cè)方法

1.1 比色分析法

比色分析方法具有操作簡(jiǎn)便、成本低、快速、重現(xiàn)性好以及適合大批量樣品檢測(cè)等優(yōu)勢(shì)[25-27]，在分析檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛[28-30]。Mcfarland 等[11]報(bào)道了一種以硫代巴比妥酸（TBA）為顯色底物的比色分析方法，其檢測(cè)原理為在草酸等溶液中， GA 經(jīng)加熱水解釋放出5-羥甲基糠醛（HMF）， HMF 與TBA 發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)物吸收峰位于443 nm， 溶液呈黃色。然而，研究發(fā)現(xiàn)，臨床樣品中的葡萄糖等組分會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成嚴(yán)重干擾[12]。由于葡萄糖與蛋白質(zhì)上氨基酸側(cè)鏈結(jié)合所形成的酮胺結(jié)構(gòu)具有還原性，在堿性條件下能將硝基藍(lán)四唑（NBT）還原并生成紫色的甲臜（吸收峰位于546 nm）， 因而可將NBT 用作GA 比色分析的顯色底物[13]。然而，臨床血清樣品中的丙酮醛和抗壞血酸等還原性物質(zhì)會(huì)對(duì)該方法造成嚴(yán)重干擾。在加熱條件下， GA 中的酮胺結(jié)構(gòu)經(jīng)肼處理會(huì)轉(zhuǎn)變成2-酮基葡萄糖，其與苯肼反應(yīng)可生成淡黃色的葡萄糖苯脎（吸收峰位于390 nm）[31]。雖然該原理已被用于GA 的比色分析，但是臨床血清樣品中的膽紅素、Hb、抗壞血酸和葡萄糖等組分會(huì)導(dǎo)致假陽性。GA 經(jīng)蛋白酶水解產(chǎn)生的糖化氨基酸在酮胺氧化酶的作用下可產(chǎn)生過氧化氫（H2O2），其與N，N-雙（4-磺丁基）-3-甲基苯胺（TODB）在辣根過氧化物酶（HRP）的催化下反應(yīng)生成藍(lán)紫色的醌亞胺化合物（吸收峰位于546 nm）[32]。日本旭化成株式會(huì)社基于該方法已開發(fā)出商品化的Lucica?GA-L 產(chǎn)品[33]。然而，蛋白酶和過氧化物酶存在價(jià)格高、穩(wěn)定性差等不足。此外，上述比色分析方法均無法有效地區(qū)分GA 與GHb 以及其它糖綴合物（如糖蛋白、糖肽和糖類抗原等），因此，檢測(cè)前需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，以消除其它組分對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。

為實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 的高選擇性比色分析， Cohen 等[34]報(bào)道了一種基于雙抗體“夾心型”酶聯(lián)免疫吸附分析（ELISA）的方法，其檢測(cè)原理為將可與GA 發(fā)生特異性親和識(shí)別的捕獲抗體作為固定化的分子識(shí)別元件，與GA 發(fā)生免疫結(jié)合后，加入HRP 標(biāo)記的檢測(cè)抗體， HRP 催化H2O2 與顯色底物對(duì)苯二胺（pPDA）或3，3′，5，5′-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）反應(yīng)，引起檢測(cè)液顏色發(fā)生顯著變化，基于此實(shí)現(xiàn)GA 的檢測(cè)。上海酶聯(lián)生物等公司已基于該方法開發(fā)出可用于GA 檢測(cè)的商品化ELISA 試劑盒。類似地， Kim 研究組[35]構(gòu)建了一種基于雙抗體“夾心型”ELISA 的側(cè)流分析（LFA）裝置，通過分別檢測(cè)HSA 和GA 的濃度，實(shí)現(xiàn)了對(duì)GA 含量的直接檢測(cè)。基于抗原-抗體免疫識(shí)別的比色分析方法具有很高的選擇性。然而，抗體和酶標(biāo)抗體具有制備過程復(fù)雜、批間差異大、價(jià)格高以及穩(wěn)定性差等不足。為克服上述缺陷， Belsare 等[36]報(bào)道了一種基于核酸適配體的比色分析方法，將末端生物素化的適配體通過生物素-親和素相互作用修飾到鏈霉親和素包被的硝酸纖維素膜上，可特異性捕獲由GA 與適配體功能化的金納米粒子（AuNPs）探針結(jié)合形成的復(fù)合物，使該區(qū)域的顏色發(fā)生改變。與抗體相比，將適配體作為特異性分子識(shí)別元件具有可化學(xué)合成、易修飾、成本低及穩(wěn)定性好等優(yōu)勢(shì)[37-40]。但是，該方法需要使用生物素化的適配體以及鏈霉親和素，存在檢測(cè)成本高及穩(wěn)定性差等不足。

1.2 熒光分析法

相較于比色分析，熒光分析法具有檢測(cè)靈敏度高的優(yōu)勢(shì)[41]。研究者分別以丹?；谋脚鹚嵫苌顳nsPBA[42]和苯并噻唑-吩噻嗪偶聯(lián)物的氰基衍生物TCNP[43]為熒光探針，用于檢測(cè)GA 的濃度。這兩種方法盡管操作簡(jiǎn)便，但存在選擇性差等不足，無法區(qū)分GA 與GHb 等其它糖綴合物。Apiwat 等[7]報(bào)道了一種基于核酸適配體的熒光分析方法，以末端修飾有Cy5 的核酸適配體作為特異性分子識(shí)別元件，適配體在氧化石墨烯（GO）表面的非特異性吸附能使熒光信號(hào)淬滅；在GA 存在的情況下，其與適配體的結(jié)合引起后者從GO 表面脫離，從而使得熒光信號(hào)恢復(fù)，基于此實(shí)現(xiàn)了對(duì)GA 的高選擇性檢測(cè)，檢出限為50 μg/mL。Ghosh 等[14]將適配體的兩端分別修飾CdSe/ZnS 量子點(diǎn)與AuNPs，適配體與GA 的特異性結(jié)合使量子點(diǎn)與AuNPs 之間的距離增大，導(dǎo)致兩者之間的熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）效率下降，基于此實(shí)現(xiàn)了對(duì)GA 的熒光信號(hào)增強(qiáng)型檢測(cè)。上述基于核酸適配體的熒光方法雖然選擇性好，但是都只能檢測(cè)GA的濃度，無法直接確定樣品中GA 的含量（GA 占總HSA 的百分?jǐn)?shù)）。

1.3 LC及LC/MS法

LC 法具有分析速度快、重現(xiàn)性好和操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)，可用于GA 含量的直接檢測(cè)。Ducrocq 等[44]基于硼酸鹽親和色譜法，實(shí)現(xiàn)了對(duì)GA 的高選擇性檢測(cè)，并證實(shí)了GA 含量與平均血糖水平之間具有很好的關(guān)聯(lián)性。研究者報(bào)道了一種基于陰離子交換柱和硼酸鹽親和層析柱聯(lián)用的LC 法[15，45]。該方法利用填充含有二乙氨基的乙烯醇共聚物的陰離子交換柱（AsahipakES-502N）分離HSA 和GA，然后利用硼酸鹽親和柱選擇性吸附分離GA，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 含量的直接檢測(cè)。該方法具有分析速度快、準(zhǔn)確度高以及所需樣品量少等優(yōu)良特性。Koyama 等[16]利用苯硼酸（PBA）基團(tuán)功能化的多孔聚合物顆粒作為色譜交換柱的填充材料，用于GA 含量的直接檢測(cè)。由于可實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 含量的直接檢測(cè)， LC 法具有很好的臨床應(yīng)用價(jià)值，但是仍存在設(shè)備復(fù)雜、需要標(biāo)樣、成本高以及日常維護(hù)費(fèi)用較高等不足。Takei 等[18]將賴氨酸（Lys）和果糖基-Lys 的同位素標(biāo)記物作為內(nèi)標(biāo)加入到HSA 和GA 的混合樣品中，進(jìn)行氫化、水解處理，獲得脫氧果糖基-Lys（DOF-Lys）和Lys，利用LC/MS 檢測(cè)DOF-Lys 和Lys 的濃度，并根據(jù)同位素比例即可計(jì)算得到樣品中GA 的含量。該方法具有準(zhǔn)確度高和重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)，但需要對(duì)樣品進(jìn)行分離純化處理，并且操作復(fù)雜。Brede 等[46]利用胰蛋白酶同時(shí)消化HSA 與GA，得到非糖基化和糖基化的兩種短肽，采用基于質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式的LC/MS 分析這兩種短肽的濃度，實(shí)現(xiàn)了對(duì)GA 含量的直接檢測(cè)。在這兩種方法的基礎(chǔ)上， Shin 等[47]將同位素標(biāo)記的兩種短肽（RQIKKQTALV（D8）E 和RQIKK（fructosyl）QTALV（D8）E）作為內(nèi)標(biāo)加入到含有HSA 和GA 的樣品中，利用Glu-C 蛋白酶消化樣品得到非糖基化和糖基化的兩種短肽，采用LC/MS 檢測(cè)這兩種短肽的濃度，采用同位素內(nèi)標(biāo)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)GA 含量的直接檢測(cè)。但是，該方法存在操作復(fù)雜、成本高以及需要使用有放射性標(biāo)記試劑等不足。

1.4 拉曼光譜法

拉曼光譜法具有分析速度快、無損和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)[48-49]。由于HSA 的非酶促糖基化會(huì)導(dǎo)致其拉曼光譜特定振動(dòng)條帶發(fā)生細(xì)微的變化， Dingari 等[19]借助多變量分類技術(shù)，開發(fā)了一種基于滴涂沉積拉曼（DCDR）光譜的GA 檢測(cè)方法（圖2），線性檢測(cè)范圍為7～250 μmol/L， 檢出限為13.7 μmol/L。該方法幾乎不需要樣品制備過程，無需其它任何試劑，操作簡(jiǎn)單，具有良好的選擇性。Lin 等[20]報(bào)道了一種基于表面增強(qiáng)拉曼散射（SERS）的GA 含量檢測(cè)方法，將GA 與銀納米粒子（AgNPs）混合，并借助于“咖啡環(huán)效應(yīng)”對(duì)GA-AgNP 復(fù)合物進(jìn)行預(yù)濃縮，隨后通過測(cè)量酪氨酸雙峰區(qū)域面積比例實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 的直接檢測(cè)。為進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度， Paria 等[50]通過使用鍍銀無序硅納米線（Ag/SiNWs）對(duì)檢測(cè)信號(hào)進(jìn)行放大，實(shí)現(xiàn)了GA 含量的無標(biāo)記SERS 檢測(cè)，對(duì)GA 的檢出限為0.5 μmol/L。拉曼光譜法可實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 含量的直接檢測(cè)，但其抗干擾能力和重現(xiàn)性等方面有待進(jìn)一步提高。

1.5 電化學(xué)發(fā)光（ECL）法

ECL 法具有背景信號(hào)低、靈敏度高、響應(yīng)速度快和操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)[51-52]，但在GA 的檢測(cè)方面并未得到廣泛應(yīng)用，目前僅有少量報(bào)道。Tamiya 研究組[21]開發(fā)了一種基于酶促反應(yīng)的ECL 檢測(cè)方法（檢測(cè)原理如圖3 所示），將GA 經(jīng)蛋白酶水解釋放出N-果糖基-N-Z-賴氨酸（FZK）片段，在果糖基氨基酸氧化酶（FAOx）的作用下產(chǎn)生H2O2，以魯米諾作為ECL 試劑檢測(cè)生成的H2O2，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 的定量分析。在此基礎(chǔ)上，借助于蛋白酶解法檢測(cè)HSA 和GA 的總含量，即可實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 含量的檢測(cè)。該方法對(duì)GA 的檢出限低至0.1 μmol/L。實(shí)際唾液樣品中GA 濃度的檢測(cè)結(jié)果表明，樣品至少需要稀釋5 倍，以降低樣品基質(zhì)中某些組分對(duì)ECL 信號(hào)的猝滅效應(yīng)。由于需要使用FAOx 和蛋白酶，該方法存在成本高和操作復(fù)雜等不足。

1.6 電化學(xué)生物傳感器

電化學(xué)生物傳感器由于具有靈敏度高、設(shè)備簡(jiǎn)單、響應(yīng)快速、抗干擾能力強(qiáng)以及易小型化等優(yōu)勢(shì)[53-56]而備受關(guān)注[22-24]。Hatada 等[22]利用蛋白酶水解GA 產(chǎn)生ε-果糖基賴氨酸（ε-FK），在FAOx 催化作用下，[Ru（NH3）6]3+被還原為[Ru（NH3）6]2+，通過電化學(xué)氧化分析[Ru（NH3）6]2+，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 濃度的高靈敏電化學(xué)檢測(cè)。由于檢測(cè)信號(hào)強(qiáng)度與GA 的濃度呈正相關(guān)，因而這是一種“信號(hào)增強(qiáng)”型方法，可有效避免假陽性結(jié)果。然而，蛋白酶和FAOx 存在價(jià)格高和穩(wěn)定性差等不足，臨床血清樣品中的某些還原性物質(zhì)也會(huì)對(duì)該方法的檢測(cè)結(jié)果造成嚴(yán)重干擾，而且該方法無法有效區(qū)分GA 與GHb，因此檢測(cè)前需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，以消除GHb 對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。為實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 的高選擇性檢測(cè)， Bohli 等[23]以GA特異性抗體為固定化的分子識(shí)別元件，與GA 特異性結(jié)合，引起電極表面的電荷轉(zhuǎn)移阻抗發(fā)生變化，采用電化學(xué)阻抗譜（EIS）對(duì)GA 的含量進(jìn)行檢測(cè)，線性范圍為7.49%～15.79%。該方法操作簡(jiǎn)便、選擇性好，并且可有效避免假陽性結(jié)果，但是存在檢測(cè)靈敏度較低、抗體制備過程復(fù)雜、價(jià)格高和穩(wěn)定性差等不足。Attar 等[24]將可特異性識(shí)別GA 的親和肽通過其末端融合的組氨酸標(biāo)記的綠色熒光蛋白（His6-GFP）部分連接到電極表面，與GA 結(jié)合后，借助于PBA 基團(tuán)與GA 上的葡萄糖分子中的鄰位羥基位點(diǎn)的選擇性結(jié)合將PBA 標(biāo)記的二氫葉酸還原酶（DHFR）偶聯(lián)到電極表面， DHFR 能催化二氫葉酸（DHFA）還原生成四氫葉酸（THFA），通過對(duì)THFA 進(jìn)行電化學(xué)氧化分析，實(shí)現(xiàn)了對(duì)GA 濃度的高靈敏檢測(cè)，檢出限低至1.0 nmol/L；通過對(duì)HSA 濃度進(jìn)行免疫分析，即可確定樣品中GA 的含量。該方法盡管具有很高的選擇性，并且對(duì)假陽性結(jié)果具有較好的耐受性，但是存在傳感器制備過程復(fù)雜、檢測(cè)成本高、穩(wěn)定性差等不足。Farzadfard 等[57]將AuNPs 負(fù)載的還原氧化石墨烯（RGO）修飾到電極表面，然后通過金-硫鍵自組裝的方式固定適配體，其與GA 的特異性識(shí)別阻礙了[Fe（CN）6]4?與電極表面的電子傳遞，因此可利用EIS對(duì)GA 濃度進(jìn)行檢測(cè)，線性范圍為2～10 μg/mL， 檢出限為0.07 μg/mL。該方法選擇性好且檢測(cè)成本低，但只能單獨(dú)檢測(cè)GA 的濃度。為實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 含量的直接檢測(cè)， Bunyarataphan 等[58]將末端生物素化的核酸適配體通過生物素與親和素的相互作用修飾到經(jīng)鏈霉親和素功能化的絲網(wǎng)印刷碳電極（SPCE）表面，適配體與GA 或HSA 的特異性識(shí)別阻礙氧化還原探針[Fe（CN）6]3?與電極表面的電子傳遞，因此可通過測(cè)量氧化還原電流的大小實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品中GA 含量的檢測(cè)。

2 結(jié)論與展望

血糖水平過高會(huì)顯著促進(jìn)蛋白質(zhì)的非酶促糖基化，從而影響其結(jié)構(gòu)與功能，并導(dǎo)致一系列糖尿病并發(fā)癥。GA 是HSA 經(jīng)非酶促糖基化反應(yīng)的產(chǎn)物，其含量在糖尿病患者短期血糖控制評(píng)估、療效觀察以及治療方案調(diào)整等方面具有重要的參考價(jià)值。相較于單獨(dú)檢測(cè)血清樣品中GA 的濃度， GA 含量的檢測(cè)在臨床上更具應(yīng)用價(jià)值。然而，作為新型血糖監(jiān)測(cè)指標(biāo)，由于相關(guān)研究相對(duì)較少（與圍繞HbA1c 檢測(cè)相關(guān)研究相比），并且GA 含量會(huì)受到營養(yǎng)不良、腎病綜合征以及肝硬化等低蛋白血癥條件的影響[59]，國際上尚未對(duì)GA 含量的臨床檢測(cè)與應(yīng)用建立標(biāo)準(zhǔn)化共識(shí)。此外，現(xiàn)階段可用于GA 含量直接檢測(cè)的方法較少，并存在諸如檢測(cè)靈敏度低、操作復(fù)雜、抗干擾能力差和檢測(cè)成本高等不足。相較于其它方法，電化學(xué)生物傳感器具有靈敏度高、設(shè)備簡(jiǎn)單、響應(yīng)快速、抗干擾能力強(qiáng)以及易小型化等優(yōu)勢(shì)，在GA 的檢測(cè)研究中獲得了較多的關(guān)注。然而，實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品中GA 含量的簡(jiǎn)便、快速、低成本、高靈敏和高選擇性電化學(xué)檢測(cè)，仍是一個(gè)亟待解決的難題。為實(shí)現(xiàn)對(duì)HSA 和GA 的高選擇性電化學(xué)檢測(cè)，常用的分子識(shí)別元件為抗體和核酸適配體。核酸適配體除了具有與抗體同等的特異性與親和力之外，還具有可化學(xué)合成、批間差異小、易修飾、成本低和穩(wěn)定性好等優(yōu)勢(shì)，在GA 含量的直接電化學(xué)檢測(cè)方面具有很好的應(yīng)用前景。為實(shí)現(xiàn)對(duì)GA 含量的直接電化學(xué)適配體傳感，可采用陣列電極單獨(dú)檢測(cè)HSA 和GA 的濃度，再通過計(jì)算獲得相應(yīng)含量；為實(shí)現(xiàn)在單一基底上對(duì)GA 含量的直接電化學(xué)適配體傳感，則需要在傳感原理等方面有更大的突破。此外，具有高親和力、高特異性且可用作固定化分子識(shí)別元件的適配體的篩選，仍需要更多的研究與探索。

References

[1] International Diabetes Federation. IDF Diabetes Atlas 9th edition. 2019.

[2] LI Qing， JIA Wei-Ping. Drug Evaluat. ， 2009， 6： 99-101.

李青， 賈偉平. 藥品評(píng)價(jià)， 2009， 6： 99-101.

[3] ANGUIZOLA J， MATSUDA R， BARNABY O S， HOY K S， WA C， DEBOLT E， KOKE M， HAGE D S. Clin. Chim. Acta，2013， 425： 64-76.

[4] QIU H Y， HOU N N， SHI J F， LIU Y P， KAN C X， HAN F， SUN X D. World J. Diabetes， 2021， 12（7）： 1057-1069.

[5] SELVIN E， STEFFES M W， ZHU H， MATSUSHITA K， WAGENKNECHT L， PANKOW J， CORESH J， BRANCATI F L.N. Engl. J. Med. ， 2010， 362（9）： 800-811.

[6] ZENDJABIL M. Clin. Chim. Acta， 2020， 502： 240-244.

[7] APIWAT C， LUKSIRIKUL P， KANKLA P， PONGPRAYOON P， TREERATTRAKOON K， PAIBOONSUKWONG K，F(xiàn)UCHAROEN S， DHARAKUL T， JAPRUNG D. Biosens. Bioelectron. ， 2016， 82： 140-145.

[8] LI Y， LI F， YANG X， GUO L， HUANG F， CHEN Z， CHEN X， ZHENG S. Spectrochim. Acta， Part B， 2018， 201： 249-257.

[9] RESCALLI A， VARONI E M， CELLESI F， CERVERI P. Biosensors， 2022， 12（9）： 687.

[10] MURTAZA G， RIZVI A S， IRFAN M， LI L， QU F. J. Chromatogr. A， 2021， 1636： 461793.

[11] MCFARLAND K F， CATALANO E W， DAY J F， THORPE S R， BAYNES J W. Diabetes， 1979， 28（11）： 1011-1014.

[12] DOLHOFER R， WIELAND O H. Clin. Chim. Acta， 1981， 112（2）： 197-204.

[13] CAINES P S M， THIBERT R J， DRAISEY T F. Clin. Biochem. ， 1986， 19（1）： 26-30.

[14] GHOSH S， DATTA D， CHEEMA M， DUTTA M， STROSCIO M A. Nanotechnology， 2017， 28（43）： 435505.

[15] YASUKAWA K， ABE F， SHIDA N， KOIZUMI Y， UCHIDA T， NOGUCHI K， SHIMA K. J. Chromatogr. A， 1992， 597（1-2）：271-275.

[16] KOYAMA T， TERAUCHI K. J. Chromatogr. B， 1996， 679（1-2）： 31-40.

[17] GADGIL H S， BONDARENKO P V， TREUHEIT M J， REN D. Anal. Chem. ， 2007， 79（15）： 5991-5999.

[18] TAKEI I， HOSHINO T， TOMINAGA M， ISHIBASHI M， KUWA K， UMEMOTO M， TANI W， OKAHASHI M，YASUKAWA K， KOHZUMA T， SATO A. Ann. Clin. Biochem. ， 2016， 53（1）： 124-132.

[19] DINGARI N C， HOROWITZ G L， KANG J W， DASARI R R， BARMAN I. PLoS One， 2012， 7（2）： e32406.

[20] LIN J， LIN X， HU C， BAI P， YANG H， DAI Y， QIU H， LIN M， FENG S， PAN J， CHEN R， LIN J， ZHANG X. Laser Phys.Lett. ， 2018， 15（9）： 095703.

[21] INOUE Y， INOUE M， SAITO M， YOSHIKAWA H， TAMIYA E. Anal. Chem. ， 2017， 89（11）： 5909-5915.

[22] HATADA M， TSUGAWA W， KAMIO E， LOEW N， KLONOFF D C， SODE K. Biosens. Bioelectron. ， 2017， 88： 167-173.

[23] BOHLI N， MEILHAC O， RONDEAU P， GUEFFRACHE S， MORA L， ABDELGHANI A. Talanta， 2018， 184： 507-512.

[24] ATTAR A M， RICHARDSON M B， SPECIALE G， MAJUMDAR S， DYER R P， SANDERS E C， PENNER R M， WEISS G A. ACS Appl. Mater. Interfaces， 2019， 11（5）： 4757-4765.

[25] HU Q， ZHOU B， DANG P， LI L， KONG J， ZHANG X. Anal. Chim. Acta， 2017， 950： 170-177.

[26] FENG Y， WANG Y， YING Y. Coord. Chem. Rev. ， 2021， 446： 214102.

[27] HU Q， MA K， MEI Y， HE M， KONG J， ZHANG X. Talanta， 2017， 167： 253-259.

[28] ALKHAMIS O， CANOURA J， BUKHRYAKOV K V， TARIFA A， DECAPRIO A P， XIAO Y. Angew. Chem. Int. Ed. ，2022， 61（3）： e202112305.

[29] DUAN W， QIU Z， CAO S， GUO Q， HUANG J， XING J， LU X， ZENG J. Biosens. Bioelectron. ， 2022， 196： 113724.

[30] RAN B， ZHENG W， DONG M， XIANYU Y， CHEN Y， WU J， QIAN Z， JIANG X. Anal. Chem. ， 2018， 90（13）： 8234-8240.

[31] KOBAYASHI K， YOSHIMOTO K， HIRAUCHI K， UCHIDA K. Biol. Pharm. Bull. ， 1994， 17（3）： 365-369.

[32] KOUZUMA T， USAMI T， YAMAKOSHI M， TAKAHASHI M， IMAMURA S. Clin. Chim. Acta， 2002， 324（1-2）： 61-71.

[33] http：//www.asahi-kasei.co.jp/shindan/cn/lucica/ga-l/ability.html.

[34] COHEN M P， HUD E. J. Immunol. Methods， 1989， 122（2）： 279-283.

[35] KI H， OH J， HAN G R， KIM M G. Lab Chip， 2020， 20（4）： 844-851.

[36] BELSARE S， COTé G. Talanta， 2021， 223： 121728.

[37] TAN W， DONOVAN M J， JIANG J. Chem. Rev. ， 2013， 113（4）： 2842-2862.

[38] HU Q， HU S， LI S， LIU S， LIANG Y， CAO X， LUO Y， XU W， WANG H， WAN J， FENG W， NIU L. Anal. Chem. ， 2022，94（28）： 10206-10212.

[39] WU L， WANG Y， XU X， LIU Y， LIN B， ZHANG M， ZHANG J， WAN S， YANG C， TAN W. Chem. Rev. ， 2021， 121（19）：12035-12105.

[40] HU Q， WAN J， WANG H， CAO X， LI S， LIANG Y， LUO Y， WANG W， NIU L. Anal. Chem. ， 2022， 94（26）： 9481-9486.

[41] PUTNIN T， WAIWINYA W， PIMALAI D， CHAWJIRAPHAN W， SATHIRAPONGSASUTI N， JAPRUNG D. Analyst，2021， 146（13）： 4357-4364.

[42] HAYASHI Y， MAKINO M. Clin. Chim. Acta， 1985， 149（1）： 13-19.

[43] KUMAR A， DATTA L P， SAMANTA S， ARORA H， GOVINDARAJU T. Israel J. Chem. ， 2021， 61（3-4）： 222-230.

[44] DUCROCQ R， LE BONNIEC B， CARLIER O， ASSAN R， ELION J. J. Chromatogr. B， 1987， 419： 75-83.

[45] SHIMA K， ITO N， ABE F， HIROTA M， YANO M， YAMAMOTO Y， UCHIDA T， NOGUCHI K. Diabetologia， 1988， 31（8）：627-631.

[46] BREDE C， HOP B， J?RGENSEN K， SKADBERG ?. Scand. J. Clin. Lab. Invest. ， 2016， 76（3）： 195-201.

[47] SHIN A， CONNOLLY S， LITTLE R， KABYTAEV K. Clin. Chim. Acta， 2021， 521： 215-222.

[48] PéREZ-JIMéNEZ A I， LYU D， LU Z， LIU G， REN B. Chem. Sci. ， 2020， 11（18）： 4563-4577.

[49] ZONG C， XU M， XU L J， WEI T， MA X， ZHENG X S， HU R， REN B. Chem. Rev. ， 2018， 118（10）： 4946-4980.

[50] PARIA D， CONVERTINO A， MUSSI V， MAIOLO L， BARMAN I. Adv. Healthc. Mater. ， 2021， 10（3）： 2001110.

[51] LIU Z， QI W， XU G. Chem. Soc. Rev. ， 2015， 44（10）： 3117-3142.

[52] MA C， CAO Y， GOU X， ZHU J J. Anal. Chem. ， 2019， 92（1）： 431-454.

[53] HU Q， SU L， LUO Y， CAO X， HU S， LI S， LIANG Y， LIU S， XU W， QIN D， NIU L. Anal. Chem. ， 2022， 94（16）： 6200-6205.

[54] KONG L， LI H， ZHANG X， ZHUO Y， CHAI Y， YUAN R. Anal. Chem. ， 2022， 94（12）： 5167-5172.

[55] HU Q， SU L， CHEN Z， HUANG Y， QIN D， NIU L. Anal. Chem. ， 2021， 93（27）： 9602-9608.

[56] LI Z， ZHANG J， DAI G， LUO F， CHU Z， GENG X， HE P， ZHANG F， WANG Q. J. Mater. Chem. B， 2021， 9（45）： 9324-9332.

[57] FARZADFARD A， SHAYEH J S， HABIBI-REZAEI M， OMIDI M. Talanta， 2020， 211： 120722.

[58] BUNYARATAPHAN S， DHARAKUL T， FUCHAROEN S， PAIBOONSUKWONG K， JAPRUNG D. Electroanalysis， 2019，31（11）： 2254-2261.

[59] GALINDO R J， BECK R W， SCIOSCIA M F， UMPIERREZ G E， TUTTLE K R. Endocr. Rev. ， 2020， 41（5）： 756-774.