摘要：為持續(xù)加強(qiáng)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室能力建設(shè)，提高獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力和水平，2022年7—8月，四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心組織開展了全省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作，全省共20個(gè)市級(jí)，151個(gè)縣級(jí)動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室參加比對(duì)。結(jié)果顯示：市級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室非洲豬瘟病毒核酸鑒別、禽流感病毒核酸H5/H7亞型鑒定、口蹄疫A型抗體檢測(cè)結(jié)果正確率分別為88.33%、95.00%、94.17%，整體結(jié)果正確率為92.50%；縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室非洲豬瘟病毒核酸、禽流感病毒核酸、口蹄疫病毒抗體、豬瘟病毒抗體、禽流感病毒抗體檢測(cè)結(jié)果正確率分別為98.26%、97.50%、100.00%、98.26%、90.83%，整體結(jié)果正確率為95.76%。比對(duì)結(jié)果表明四川省各級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力仍維持在較好的水平，建議部分實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步提高檢測(cè)人員水平，加強(qiáng)基礎(chǔ)設(shè)施設(shè)備建設(shè)，不斷提升全省動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)和預(yù)警預(yù)報(bào)能力。

關(guān)鍵詞：獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室；檢測(cè)能力；分析

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室承擔(dān)著動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)、診斷、流行病學(xué)調(diào)查研究等任務(wù)，是獸醫(yī)行政管理和執(zhí)法監(jiān)督的重要技術(shù)支撐，同時(shí)在動(dòng)物疫病防控體系中發(fā)揮重要作用[1]。為保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和檢測(cè)報(bào)告的公正性，要求實(shí)驗(yàn)室維持穩(wěn)定的檢測(cè)能力和水平。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)是農(nóng)業(yè)農(nóng)村部加強(qiáng)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室管理的主要抓手，也是評(píng)價(jià)和提高實(shí)驗(yàn)室管理水平和檢測(cè)能力的重要手段[2]。按照農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳關(guān)于檢測(cè)能力比對(duì)的工作要求[3-4]，四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心多年來一直堅(jiān)持組織開展全省市、縣級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室能力比對(duì)，并于2022年7—8月完成2022年檢測(cè)能力比對(duì)工作。通過能力水平的評(píng)估，指導(dǎo)市、縣級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室查找問題，推動(dòng)完善了四川省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室體系建設(shè)，不斷提升監(jiān)測(cè)和預(yù)警預(yù)報(bào)能力。

1 材料和方法

1.1 比對(duì)項(xiàng)目

市級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室共設(shè)置3個(gè)檢測(cè)比對(duì)項(xiàng)目，分別為非洲豬瘟病毒核酸鑒別、禽流感病毒核酸H5/H7亞型鑒定、口蹄疫病毒A型抗體檢測(cè)。

縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)項(xiàng)目包括非洲豬瘟病毒核酸、禽流感病毒核酸、口蹄疫病毒抗體、禽流感病毒抗體、豬瘟抗體，由各市動(dòng)物疫控機(jī)構(gòu)自行確定不少于3個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目，同時(shí)兼顧不同試驗(yàn)方法，對(duì)轄區(qū)內(nèi)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室開展比對(duì)。

1.2 比對(duì)樣品、采用試劑及方法

市級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)樣品由四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心統(tǒng)一制備發(fā)放，各比對(duì)項(xiàng)目各設(shè)置6份盲樣；其中非洲豬瘟病毒核酸鑒別和口蹄疫A型抗體檢測(cè)項(xiàng)目所需試劑為四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心統(tǒng)一采購、驗(yàn)證后發(fā)放，禽流感病毒核酸H5/H7亞型鑒定所需試劑為參加比對(duì)實(shí)驗(yàn)室自行準(zhǔn)備。

縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)樣品和所需試劑由各市動(dòng)物疫控機(jī)構(gòu)自行準(zhǔn)備和發(fā)放，各比對(duì)項(xiàng)目針對(duì)每個(gè)比對(duì)實(shí)驗(yàn)室盲樣不少于5份。

比對(duì)項(xiàng)目采用的方法包括熒光RT-PCR、熒光PCR、HA/HI、ELISA，均采用相應(yīng)的國(guó)家現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。詳見表1、表2。

1.3 比對(duì)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

口蹄疫病毒抗體檢測(cè)、禽流感病毒抗體檢測(cè)項(xiàng)目判定標(biāo)準(zhǔn)為：盲樣檢測(cè)值與參考值的偏差不超過1個(gè)滴度，判為正確，否則判為錯(cuò)誤；其余項(xiàng)目判定標(biāo)準(zhǔn)為：盲樣檢測(cè)值與參考值完全一致判為正確，否則判為錯(cuò)誤。

2.1 市級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果

全省20個(gè)市級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室參與檢測(cè)能力比對(duì)，非洲豬瘟病毒核酸是鑒別檢測(cè)、禽流感病毒核酸H5/H7亞型鑒定、口蹄疫A型抗體檢測(cè)結(jié)果正確率分別為88.33%、95.00%、94.17%；結(jié)果完全正確實(shí)驗(yàn)室比率分別為70.00%、90.00%、85.00%。詳見表3。

2.2 縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果

全省共151個(gè)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室參與了檢測(cè)能力比對(duì)，各實(shí)驗(yàn)室比對(duì)項(xiàng)目不完全相同。非洲豬瘟病毒核酸、禽流感病毒核酸、口蹄疫病毒抗體、豬瘟抗體、禽流感病毒抗體檢測(cè)結(jié)果正確率分別為98.26%、97.50%、100.00%、98.26%、90.83%；結(jié)果完全正確實(shí)驗(yàn)室比率分別為93.13%、87.50%、100.00%、93.94%、74.77%。詳見表4。

3 分析與討論

1）四川省開展獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)工作以來，連續(xù)多年整體結(jié)果正確率在90%以上[5]，表明四川省各級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力處于較高的水平。同時(shí)也反映出一些問題，市級(jí)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果與2021年相比，非洲豬瘟病毒核酸檢測(cè)項(xiàng)目的結(jié)果正確率（88.33%）和結(jié)果完全正確實(shí)驗(yàn)室比率（70.00%）較去年（100.00%、100.00%）有所下降、口蹄疫抗體檢測(cè)項(xiàng)目的結(jié)果完全正確實(shí)驗(yàn)室比率（85.00%）較去年（90.48%）也有所下降?？赡茉颍孩儋|(zhì)量控制不到位，非洲豬瘟病毒核酸檢測(cè)項(xiàng)目中陽性樣本為強(qiáng)陽性，在檢測(cè)過程中操作不規(guī)范極易交叉污染，出現(xiàn)假陽性；②對(duì)檢測(cè)方法和結(jié)果判定不熟悉，口蹄疫抗體檢測(cè)采用液相阻斷ELISA方法，部分檢測(cè)人員對(duì)該方法不熟悉，對(duì)說明書結(jié)果判定理解不到位；③比對(duì)項(xiàng)目較往年難度有所增加，如非洲豬瘟病毒檢測(cè)項(xiàng)目中增加了不同毒株的鑒別，禽流感病毒檢測(cè)項(xiàng)目中增加了不同亞型的鑒別，都是造成正確率下降和正確率不高的因素。

2）縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果與2021年相比，禽流感病毒抗體檢測(cè)項(xiàng)目的結(jié)果正確率（90.83%）與結(jié)果完全正確實(shí)驗(yàn)室比率（74.77%）較去年（96.68%、87.22%）均有所下降，實(shí)驗(yàn)過程（如1%紅細(xì)胞的配置、4HAU配置）和實(shí)驗(yàn)人員對(duì)結(jié)果判定的主觀性都會(huì)影響禽流感病毒抗體效價(jià)的結(jié)果。禽流感病毒核酸檢測(cè)項(xiàng)目的結(jié)果正確率（97.50%）和結(jié)果完全正確實(shí)驗(yàn)室比率（87.50%）較去年（100.00%、100.00%）下降，實(shí)驗(yàn)過程中，如核酸提取效果的不穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)室的污染、操作的不規(guī)范都會(huì)造成分子生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果的不穩(wěn)定。

3）實(shí)驗(yàn)室間能力比對(duì)包括對(duì)場(chǎng)地、人員、設(shè)備及試劑等多因素的檢驗(yàn)，是整個(gè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系的綜合評(píng)價(jià)，是檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室能力差別的重要手段。隨著疫控機(jī)構(gòu)改革，各級(jí)疫控系統(tǒng)人才流失及老齡化情況日益嚴(yán)重。只有進(jìn)一步穩(wěn)定和強(qiáng)化獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室人員隊(duì)伍和能力建設(shè)，加強(qiáng)技術(shù)培訓(xùn)和規(guī)范化建設(shè)，同時(shí)完善實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理和生物安全管理體系，才能不斷提升實(shí)驗(yàn)室能力和管理水平。

4）四川省于2021年開展了縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力提升項(xiàng)目，已完成了全省132個(gè)生豬調(diào)出大縣的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室非洲豬瘟檢測(cè)能力提檔升級(jí)，有力提升了全省縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力。未來四川省還將繼續(xù)逐步完善更新各級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)設(shè)施設(shè)備，持續(xù)提升檢測(cè)能力和水平，推動(dòng)構(gòu)建全省體系完備、分工明確、功能互補(bǔ)的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)支撐體系。

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