特邀專家

涂 平

北京大學第一醫(yī)院皮膚科主任醫(yī)師、教授、博士研究生導師，中國醫(yī)師協(xié)會畢業(yè)后醫(yī)學教育皮膚科專業(yè)委員會主任委員，中華醫(yī)學會皮膚性病分會皮膚病理學組組長，北京醫(yī)學會皮膚性病分會主任委員。

從事皮膚腫瘤及皮膚病理研究，擅長復雜、重癥皮膚病的診治，注重臨床病理分析研究。

當今在我國的化妝品原料創(chuàng)新有四大風向，其中多肽類原料呈現(xiàn)出更加細分化趨勢。肽是一種可以調(diào)節(jié)細胞功能的活性物質(zhì)，而活性成分是化妝品中最核心的有效成分。根據(jù)其活性功能，多肽可以分為信號類、神經(jīng)遞質(zhì)抑制類、承載肽類等。作為化妝品的原料其具有抗皺、緊致、修復、亮膚等功效[1]。

在活性肽類中，藍銅勝肽以其源自人體血清，螯合銅離子，具有促進傷口愈合、組織修復[2]、抗炎、抗衰老等多重功效而引起醫(yī)療及化妝品行業(yè)的關注。本文就藍銅勝肽的生物學活性及在化妝品中的應用做一個簡要綜述。

Part 1

藍銅勝肽的生物學活性

藍銅勝肽是在1973年來自美國的Dr.Loren Pickart在人血清中發(fā)現(xiàn)的一種三肽，能夠促進正常肝細胞的再生和存活[3]。后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，這種三肽是 glycyl-L-histidyl-L-lysine（甘氨酰-L-組氨酸-L-賴氨酸）序列，簡稱GHK。GHK與銅離子有很強的親和力，形成 GHK-Cu復合物。GHK 是以與銅離子形成復合物的形式發(fā)揮功能。藍銅勝肽存在于人的血清、唾液和尿液中。藍銅勝肽在人們20歲時血漿濃度是200ng/mL（10-7M），到 60歲時濃度降低為80ng/mL。這種下降現(xiàn)象與人體器官再生能力隨年齡下降直接相關[3]。此后多項研究發(fā)現(xiàn)藍銅勝肽可以加速傷口愈合和收縮，提高皮膚移植效果，還具有抗炎、祛皺等多種作用。

1.促進皮膚組織修復

皮膚組織修復和再生是一個非常復雜的過程，涉及多種細胞及炎癥因子、信號通路、炎癥細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞等。GHK-Cu的傷口愈合作用早已在兔子、大鼠、小鼠和豬等動物實驗中得到證實。在損傷早期，GHK將免疫細胞和內(nèi)皮細胞驅化到損傷部位，啟動愈合過程[4，5，6]。Boral和Maquar等人研究證明藍銅勝肽在非常低的無毒濃度（1-10納摩爾）下刺激膠原蛋白合成及膠原與糖胺聚糖的分解；調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶（TIMP-1和TIMP-2）及其抑制劑的活性；刺激硫酸皮膚素、硫酸軟骨素和一種小的蛋白聚糖合成。促進傷口愈合和皮膚重塑過程[7，8]。通過減少TNF-α水平和刺激膠原合成，促進大鼠糖尿病和缺血性傷口的治療[9，10]。最新研究發(fā)現(xiàn)，含有藍銅勝肽的仿生納米纖維復合水凝膠基質(zhì)，外用增強內(nèi)皮細胞（EC）的粘附和增殖、新生血管形成，顯著加速了糖尿病小鼠的傷口閉合、膠原沉積和組織重塑。此外，免疫組織化學分析表明，在銅肽功能化的RADA16處理組中eNOS和CD31的表達上調(diào)[11]。2001年Mc Cormack等發(fā)現(xiàn)GHK-Cu使得抗癌放射治療后患者被損傷了DNA的成纖維細胞恢復了增殖活性[12]。

2.藍銅勝肽 和 IL-6 在皮膚修復中的作用

傷口愈合過程涉及皮膚細胞的炎癥、遷移、附著和成熟。包括成纖維細胞在內(nèi)的多種細胞產(chǎn)生的細胞因子在傷口愈合的所有階段都起作用[13]。通過調(diào)控各種細胞因子和生長因子，可能改變不同臨床狀態(tài)下的傷口愈合過程。研究發(fā)現(xiàn)，藍銅勝肽通過降低急性期炎癥細胞因子，如轉化生長因子β和TNF-α的水平來抑制炎癥[14]。在細胞培養(yǎng)中，藍銅勝肽在10-9mol/L時具有最大的生物學效應[15]。GHK還通過調(diào)節(jié)鐵水平和抑制脂肪酸過氧化的有毒產(chǎn)物來減少氧化損傷[16]。它是炎癥細胞和內(nèi)皮細胞的趨化因子，促進成纖維細胞增殖[17]。GHK-Cu的抗炎作用機制尚不清楚。研究發(fā)現(xiàn)GHK、GGH及其銅絡合物對成纖維細胞分泌TNF-α依賴性IL-6的影響。成纖維細胞和角質(zhì)形成細胞是皮膚組織中細胞因子的重要來源，例如IL-6，其分泌因TNF-α而增加。IL-6的多效性表現(xiàn)在其促炎和抗炎作用上。IL-6是組織對損傷和感染作出反應的各種炎癥過程中的關鍵介質(zhì)，無論是在急性炎癥反應中還是在慢性炎癥疾病中[18]。在皮膚中，表皮IL-6對正常傷口愈合至關重要，而IL-6-/-小鼠的傷口愈合受損[19]。與三肽及其銅復合物相比，低聚內(nèi)酯類酵母/銅發(fā)酵物對IL-6的分泌沒有影響。1mM GHK顯著抑制SZ95皮脂細胞中IL-6的表達[20]。

3.GHK與皮膚干細胞修復

皮膚再生取決于生存能力和增殖能力干細胞的潛力。皮膚增殖始于基底層的角質(zhì)形成細胞，其附著在基底膜。當一個細胞離開基底層時，它會進行終末分化。干細胞有無限的自我更新能力。然而，它們的增殖潛力隨著年齡的增長而下降。GHK-Cu濃度為0.1–10微摩爾，表皮干細胞表達增加基底角質(zhì)形成細胞中的整合素和p63等標志物在真皮皮膚中的表達，這表明增加了基底角質(zhì)形成細胞的干細胞和基底角質(zhì)形成細胞的增生潛力。因此，恢復健康干細胞的基因特征，導致激活整合素和p63細胞途徑可能是另一種GHK基因調(diào)控皮膚再生的活性靶點[21，22]。最近的一項研究表明GHK作用下的人骨髓間充質(zhì)干細胞/基質(zhì)細胞以可降解生物（藻酸鹽凝膠）為載體，增加血管皮內(nèi)細胞生長因子（VEGF）和堿性成纖維細胞生長因子的分泌，并且呈劑量依賴性。預先用抗整合素α1和β1的抗體處理后，人骨髓間充質(zhì)干細胞/基質(zhì)細胞不出現(xiàn)VEGF分泌增加，這表明GHK對人骨髓間充質(zhì)干細胞/基質(zhì)細胞分泌營養(yǎng)因子的影響涉及整合素途徑[21]。

4.GHK是體內(nèi)天然真皮修復調(diào)節(jié)因子

皮膚修復和皮膚的傷口愈合過程通過以下階段：止血（凝血）、炎癥、肉芽組織化和瘢痕重塑。每個階段都需要細胞之間很好地相互協(xié)調(diào)，因此需要不同來源的生物活性分子精確協(xié)同。例如，受傷后血小板立即脫顆粒釋放生長因子（如TGF-β），使免疫細胞移動并將其吸引到損傷部位。角質(zhì)形成細胞和成纖維細胞也產(chǎn)生大量生長因子。中性粒細胞、巨噬細胞和其他被募集到損傷部位的免疫細胞產(chǎn)生生長因子和細胞因子。GHK是一種罕見的人類蛋白質(zhì)序列，它在細胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)中更常見。GHK存在于I型膠原的α2（I）鏈中，可被位于傷口部位的蛋白酶分解[22]。含有蛋白的GHK，是位于重塑位點的糖蛋白SPARC。損傷后蛋白水解生成GHK-Cu[23]。經(jīng)過長期研究發(fā)現(xiàn)某些蛋白水解產(chǎn)物和細胞間質(zhì)蛋白的水解產(chǎn)物產(chǎn)生重要調(diào)節(jié)因子—間質(zhì)素[24]。這些分子激活和調(diào)節(jié)真皮修復過程。GHK將基因組重置為一種更健康的基因模式，可以更好地調(diào)節(jié)多種細胞路徑，修正真皮修復活動。由于GHK以氨基酸序列的形式存在于細胞外間質(zhì)蛋白中，并在受傷后釋放，可以作為體內(nèi)天然的真皮修復調(diào)節(jié)因子。

5.GHK與DNA修復

研究表明GHK能夠恢復放射線照射后成纖維細胞的活力。在培養(yǎng)的人宮頸組織成纖維細胞，一組未接觸射線，一組暴露于放射性處理（5000rad）。添加GHK（10-9 M）在無血清培養(yǎng)基中直接加入細胞培養(yǎng)物中。盡管經(jīng)輻照的成纖維細胞存活下來并在培養(yǎng)基中復制，它們的生長動力學與未照射細胞明顯不同。照射后的細胞在24小時和48小時檢測時有明顯生長延遲。然而，加入GHK后經(jīng)過輻照的成纖維細胞的生長速度比未加組要快得多，且與正常細胞（未照射的對照細胞）生長情況相同。此外，GHK經(jīng)處理的輻照成纖維細胞可產(chǎn)生更高的生長因子，這對傷口愈合至關重要[25]。

成纖維細胞是傷口愈合和組織更新的核心細胞。它們不僅合成了不同的真皮基質(zhì)的成分，還產(chǎn)生一些涉及多種細胞的生長因子，調(diào)節(jié)細胞遷移、增殖、血管生成、上皮化等。輻射損傷細胞DNA，從而損害其功能。由于GHK能夠恢復受輻射的成纖維細胞的功能，因此也能修復DNA損傷。使用基因關聯(lián)連圖進行的研究發(fā)現(xiàn)，當刺激47個基因和抑制5個基因時，GHK顯著增加了DNA修復基因的表達（大于或等于50%的增加或減少）[26]。

在人類衰老過程中，炎癥基因、促癌癥基因和組織破壞基因的活性增加，再生和修復基因的活性降低。雖然人體血液三肽GHK具有許多積極作用，但隨著年齡的增長而下降。有研究發(fā)現(xiàn)GHK對抑制纖維蛋白原合成有影響，并增加泛素蛋白酶體系統(tǒng)、DNA修復、抗氧化系統(tǒng)和TGF-β超家族愈合基因的激活[27]。

Part 2

藍銅勝肽的生物化學

GHK銅絡合物（GHK- Cu）的分子結構已經(jīng)使用X射線晶體學進行了廣泛的研究，包括使用EPR光譜、X射線吸收光譜和PMR光譜學以及諸如滴定的其他方法。在GHK-Cu絡合物里面，Cu（II）離子通過來與自組氨酸的咪唑側鏈的氮，來自甘氨酸的α-氨基的另一個氮和甘氨酸組氨酸的去質(zhì)子化酰胺氮肽鍵結合。Lau和Sarkar發(fā)現(xiàn)，在生理pH下，GHK-Cu絡合物可以形成二元和三元結構，其可能涉及氨基酸組氨酸和/或白蛋白分子的銅結合區(qū)。他們也觀察到GHK可以容易地結合到血漿白蛋白上的高親和力銅轉運位點（相對于GHK，白蛋白的結合常數(shù)log10=16.2 log10=16.44的結合常數(shù)）。這種銅與GHK三肽結合的離子，可以將無毒銅輸送到細胞中[28-30]。GHK最顯著的特點是它能夠形成與銅（II）的絡合物[31]。這一點非常重要，因為銅是體內(nèi)超過十幾種重要酶所必需的，這些在人體和皮膚內(nèi)的酶，包括那些參與結締組織形成、抗氧化防御和細胞呼吸點的酶。銅還具有信號傳導功能，影響細胞行為和新陳代謝。例如，足夠的銅對干細胞開始增殖和修復組織是必須的。GHK還有助于降低游離離子銅，從而防止氧化損傷。除了能夠與銅結合，GHK還可以淬滅一些毒素，特別是那些在脂質(zhì)過氧化過程中產(chǎn)生的毒素[32]。這使得GHK成為相當高效抗氧化劑。最后，GHK已被證明能夠作為細胞粘附分子，這意味著它幫助細胞附著在細胞外基質(zhì)上。在皮膚修復時，這有利于修復細胞的遷移、增殖和分化[33，34]。

Part 3

制劑和藥物滲透

GHK-Cu可以穿過皮膚的角質(zhì)層，其量足以激活再生效應。銅絡合物的磁導率隨著pH值的增加而增加。事實證明三肽GHK及其與銅的絡合物：GHK-Cu和（GHK）（2）-Cu能夠遷移通過膜角質(zhì)層模型[35， 36]。然而，因為它對蛋白水解酶作用的敏感性，重要的是確保其在制劑中有持續(xù)遞送濃度才能發(fā)揮生物活性作用。Arul等人提出使用生物素化（Boc-GHK）可以整合到真皮膠原基質(zhì)內(nèi)促進傷口愈合。他們觀察到與對照相比，Boc-GHK治療后，明顯促進傷口收縮，增加細胞增殖和抗氧化酶活性[37]。最近的一項研究調(diào)查了GHK的配方要求。已經(jīng)證實，該肽在氧化應激時容易被水解。在60℃下，pH范圍為4.5～7.4的緩沖液中至少穩(wěn)定兩周。辛醇中的分布系數(shù)，在磷酸鹽緩沖鹽水中具有高度親水性，在pH4.5～7.4范圍內(nèi)，GHK-Cu親水性 log值介于?2.38?2.49G之間。GHK-Cu可以加融入Span 60的基質(zhì)中。它在帶負電荷的脂質(zhì)磷酸二乙酰中不太穩(wěn)定[38]。

關于藍銅勝肽在產(chǎn)品中的穩(wěn)定性是一個需要關注的問題。國內(nèi)有一款含有0.2%藍銅勝肽的抗皺精華霜，含有肉蓯蓉、姜黃、玉米面胚芽提取物，經(jīng)過檢測，含有植物提取物產(chǎn)品和不含植物提取物的產(chǎn)品中藍銅勝肽的檢測曲線比較沒有區(qū)別，見圖1。說明在配方科學的情況下，藍銅勝肽是穩(wěn)定的[39]。

開發(fā)了纖維素（HPC）膠囊的甘氨酸-L-組氨酸-L-賴氨酸-Cu（II）（GHK-Cu（2+））負載羥丙基的果膠鋅微粒用于GHK的結腸輸送。GHK-Cu（2+）從果膠鋅微粒中釋放，明顯受到交聯(lián)劑濃度和藥物量影響，但不受表面活性劑影響。在4小時內(nèi)微粒釋放50%-80%的負荷量。在結腸遞送系統(tǒng)，最佳微粒制劑（F8）包有相對疏水的聚合纖維素。這樣可以制成包含GHK的具有多種健康促進作用的膳食補充劑，又無副作用。除了局部護理，可以使用這樣的配方口服以促進真皮愈合[40]。

Part 4

面部研究應用

多項安慰劑對照臨床研究發(fā)現(xiàn)GHK-Cu可以改善50歲左右女性的皮膚質(zhì)量。通過研究皮膚來確定膠原蛋白生成。在大腿上涂抹面霜1個月后，使用免疫組織化學技術檢查活性組織檢查樣本，GHK肽對膠原的產(chǎn)生有顯著影響。在接受GHK面部護理的女性中，70%的人出現(xiàn)了膠原增長，相比較，使用維生素C霜的只有 50%，用視黃酸的僅40%[41]。

GHK-Cu面霜明顯減少衰老跡象。71名女性有輕度至明顯的光老化跡象。面部應用12周后，老化表現(xiàn)有肉眼可見的改善。改善了皮膚外觀，減少了細紋和皺紋的深度，增加了皮膚緊致度和厚度[42]。

GHK-Cu眼霜，對41名有輕度至晚期光損傷女性，使用12周，與安慰劑和含有維生素K的眼霜對照。GHK-Cu眼霜的表現(xiàn)優(yōu)于兩個對照組，減少了細紋和皺紋，改善整體外觀，增加了皮膚緊致度和厚度[43]。

在另一項為期12周的面部研究中，67名年齡在50～59歲之間，有輕度至明顯光損傷的女性，GHK-Cu面霜每日兩次，改善皮膚松弛、清晰度、緊致度和外觀，減少細紋、粗糙皺紋和斑駁的色素沉著，并增加了皮膚緊致度和厚度。該研究還通過組織活檢及免疫組化檢測分析，證明該款GHK-Cu霜具有明顯刺激皮膚角質(zhì)形成細胞增殖的作用[44]。

國內(nèi)也有一些含有藍銅勝肽成分的產(chǎn)品。例如一款粉紅衛(wèi)士藍銅勝肽換顏抗皺精華霜，經(jīng)過30人為期4周的臨床研究，臨床護理結束后，在面部TEWL、紅斑、皺紋長度等指標均比使用前有明顯改善[45] 。（見下圖）。

受試者TEWL變化趨勢，見圖2 。

結果描述：

與使用測試樣品前相比，使用產(chǎn)品4周后的TEWL平均降低約13.9%，差異顯著

（P lt;0.05）。

受試者面部紅區(qū)評分變化趨勢，見圖3。

結果描述：

與使用測試樣品前相比，使用產(chǎn)品4周后的面部紅區(qū)評分平均值降低約5.3%，差異顯著（P lt;0.05）。

受試者皺紋長度變化趨勢，見圖4。

結果描述：

與使用測試樣品前相比，使用產(chǎn)品4周后的皺紋長度平均值降低約13.3%，差異極顯著（P lt;0.05）。

總之，目前臨床研究顯示，GHK-Cu護膚霜具有以下效果：

（1）緊致松弛肌膚，提高彈性；

（2）提高皮膚緊致度；

（3）減少細紋和深皺紋；

（4）提高皮膚光亮度；

（5）減少光損傷和斑駁的色素沉著；

（6）明顯增加角質(zhì)形成細胞增殖。

Part 5

結語

藍銅勝肽是一種人體內(nèi)自然產(chǎn)生的天然活性肽，具有強大的抗氧化能力，能夠抵御自由基損傷，保護肌膚細胞；它有助于促進膠原蛋白的生成，增強肌膚的彈性和緊致度；在修復肌膚損傷方面表現(xiàn)出色，能加速傷口愈合，改善肌膚質(zhì)地；還具有一定的抗炎作用，緩解肌膚炎癥。藍銅勝肽具有多重生物學活性?；蛟S它將成為護膚產(chǎn)品成分黨的下一個風口，可在護膚領域更廣泛的使用。含有有效濃度的藍銅勝肽成分的產(chǎn)品，在護膚領域將會大有作為。

[ 參考文獻]

[1] 孫笑笑. 2024 年化妝品原料創(chuàng)新四大風向[J]. 中國化妝品， 2024（1）：32-34.

[2] Pollard J.D.， Quan S.， Kang T.， Koch R.J. Effects of copper tripeptide on the growth and expression of growth factors by normal and irradiated fibroblasts. Archives of Facial Plastic Surgery， 2005， 7（1）： 27-31.

[3] Pickart L. A Tripeptide from Human Serum Which Enhances the Growth of Neoplastic Hepatocytes and the Survival of Normal Hepatocytes. University of California， San Francisco， Calif， USA， 1973.

[4] Wegrowski Y.， Maquart F.X.， Borel J.P. Stimulation of sulfated glycosaminoglycan synthesis by the tripeptide-copper complex Glycyl-L-histidyl-L-lysine-Cu2+. Life Sciences， 1992， 51（13）： 1049-1056.

[5] Simeon A.， Wegrowski Y.， Bontemps Y.， Maquart F.X. Expression of glycosaminoglycans and small proteoglycans in wounds： modulation by the tripeptide-copper complex glycyl-L-histidyl-L-lysine-Cu2+.Journal of Investigative Dermatology， 2000， 115（6）： 962-968.

[6] Pickart L. Review： The human tri-peptide GHK and tissue remodeling. J Biomater Sci Polym Ed， 2008， 19（8）： 969-988.

[7] Simeon A.， Emonard H.， Hornebeck W.， Maquart F.X. The tripeptidecopper complex glycyl-L-histidyl-L-lysine Cu2+ stimulates matrix metalloproteinase-2 expression by fibroblast cultures. Life Sciences，2000， 67（18）： 2257-2265.

[8] Ehrlich H. Stimulation of skin healing in immunosuppressed rats.In： Proceedings of the Symposium on Collagen and Skin Repair， Reims，F(xiàn)rance， September 1991.

[9] Arul V.， Kartha R.， Jayakumar R. A therapeutic approach for diabetic wound healing using biotinylated GHK incorporated collagen matrices.Life Sciences， 2007， 80（4）： 275-284.

[10] Canapp Jr. S.O.， Farese J.P.， Schultz G.S.， et al. The effect of topical tripeptide-copper complex on healing of ischemic open wounds.Veterinary Surgery， 2003， 32（6）： 515-523.

[11] Yang X.， Zhang Y.， Huang C.， et al. Biomimetic hydrogel scaffolds with copper peptide-functionalized RADA16 nanofiber improve wound healing in diabetes. Macromol Biosci， 2022， 22（8）： e2200019.

[12] McCormack M.C.， Nowak K.C.， Koch R.J. The effect of copper tripeptide and tretinoin on growth factor production in a serum-free fibroblast model. Archives of Facial Plastic Surgery， 2001， 3（1）： 28-32.

[13] Gruchlik A.， Jurzak M.， Chodurek E.W.， Dzierzewicz Z. Effect of Gly-Gly-His， Gly-His-Lys and their copper complexes on TNF-α-dependent IL-6 secretion in normal human dermal fibroblasts. Acta Poloniae Pharmaceutica， 2012， 69（6）： 1303-1306.

[14] Namjoshi S.， Caccetta R.， Benson H.A. J. Pharm. Sci.， 2008， 97：2524.

[15] Canapp S.O.， Farese J.P.， Schultz G.S.， et al. Vet. Surg.， 2003， 32：515.

[16] Beretta， G.， Artali， R.， Regazzoni， L.， Panigati， M.， Facino， R.M.Glycyl-histidyl-lysine （GHK） Is a Quencher of α，β-4-Hydroxy-trans-2-nonenal： A Comparison with Carnosine. Insights into the Mechanism of Reaction by Electrospray Ionization Mass Spectrometry， 1H NMR， and Computational Techniques. Chem. Res. Toxicol. 2007， 20：1309-1314.

[17] Beretta G.， Artali R.， Regazzoni L.， Panigati M.， Facino R.M. Chem.Res. Toxicol. 2007， 20， 1309.

[18] Gruchlik A.， Chodurek E.， Dzier?ewicz Z. Post. Dermatol. Alergol.2010， 27， 29.

[19] Rose-John S.， Scheller J.， Elson G.， Jones S.A. J. Leukoc. Biol. 2006，80， 227.

[20] Gallucci R.M.， Simeonova P.P.， Matheson J.M.， Kommineni C.，Guriel J.L.， Sugawara T.， Luster M.I. FASEB J. 2000， 14， 2525.

[21] Jose S.， Hughbanks M. L.， Binder B. Y. K.， Ingavle G. C.， Leach J. K.Acta Biomaterialia. 2014， 10（5）， 1955–1964.

[22] Maquart F.-X.， Pickart L.， Laurent M.， Gillery P.， Monboisse J.-C.，Borel J.-P. FEBS Letters. 1988， 238（2）， 343-346.

[23] Lane T. F.， Iruela-Arispe M. L.， Johnson R. S.， Sage E. H. Journal of Cell Biology. 1994， 125（4）， 929-943.

[24] Schultz G. S.， Wysocki A. Wound Repair and Regeneration. 2009， 17（2）， 153-162.

[25] Pollard J. D.， Quan S.， Kang T.， Koch R. J. Archives of Facial Plastic Surgery. 2005， 7（1）， 27-31.

[26] Pickart L.， Vasquez-Soltero J. M.， Margolina A. BioMed Research International. 2014， Article ID 151479.

[27] Pickart L.， Vasquez-Soltero J. M.， Margolina A. Biomed Res Int. 2014：2014：151479. Epub 2014 Sep 11.

[28] Lau S. J.， Sarkar B. Biochemical Journal. 1981， 199（3）， 649-656.

[29] Perkins C. M.， Rose N. J.， Weinstein B.， Stenkamp R. E.， Jensen L. H.， Pickart L. Inorganica Chimica Acta. 1984， 82（1）， 93-99.

[30] Freedman J. H.， Pickart L.， Weinstein B.， Mims W. B.， Peisach J. Biochemistry. 1982， 21（19）， 4540-4544.

[31] Pickart L.， Lovejoy S. Methods in Enzymology. 1987， 147， 314-328.

[32] Beretta G.， Arlandini E.， Artali R.， Anton J. M. G.， Facino R. M. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2008， 47（3）， 596-602.

[33] Godet D.， Marie P. J. Cellular and Molecular Biology （Noisy-le-Grand， France）. 1995， 41（8）， 1081-1091.

[34] Kawase M.， Miura N.， Kurikawa N.， et al. Biological and Pharmaceutical Bulletin. 1999， 22（9）， 999-1001.

[35] Mazurowska， L.， amp; Mojski， M. （2008）. Biological activities of selected peptides： skin penetration ability of copper complexes with peptides. Journal of Cosmetic Science， 59（1）， 59-69.

[36] Hostynek， J. J.， Dreher， F.， amp; Maibach， H. I. （2010）. Human skin retention and penetration of a copper tripeptide in vitro as function of skin layer towards anti-inflammatory therapy. Inflammation Research， 59（11）， 983-988.

[37] Hostynek， J. J.， Dreher， F.， amp; Maibach， H. I. （2011）. Human skinpenetration of a copper tripeptide in vitro as a function of skin layer. Inflammation Research， 60（1）， 79-86.

[38] Arul， V.， Gopinath， D.， Gomathi， K.， amp; Jayakumar， R. （2005）. Biotinylated GHK peptide incorporated collagenous matrix： a novel biomaterial for dermal wound healing in rats. Journal of Biomedical Materials Research B： Applied Biomaterials， 73（2）， 383-391.

[39] 山東濟肽生物有限公司（2022.11.22）.粉紅衛(wèi)士化妝品檢測信息報告. 檢驗依據(jù)：JT-SP-PS-016.

[40] Ugurlu， T.， Turkoglu， M.， amp; Ozaydin， T. （2011）. In vitro evaluation of compression-coated glycyl-L-histidyl-L-lysine–Cu（II） （GHK– Cu2+）-loaded microparticles for colonic drug delivery. Drug Development and Industrial Pharmacy， 37（8）， 1282-1289.

[41] Abdulghani， A. A.， Sherr， A.， Shirin， S.， et al. （1998）. Effects of topical creams containing vitamin C， a copper-binding peptide cream and melatonin compared with tretinoin on the ultrastructure of normal skin—a pilot clinical， histologic， and ultrastructural study. Disease Management and Clinical Outcomes， 1（4）， 136-141.

[42] Leyden， J.， Stephens， T.， Finkey， M.， Appa， Y.， amp; Barkovic， S. （2002）. Skin care benefits of copper peptide containing facial cream. In Proceedings of the American Academy of Dermatology Meeting， New York， NY， USA， February.

[43] Leyden， J.， Stephens， T.， Finkey， M.， amp; Barkovic， S. （2002）. Skin Care Benefits of Copper Peptide Containing Eye Creams. University of Pennsylvania.

[44] Finkley， M.， Appa， Y.， amp; Bhandarkar， S. （2005）. Copper peptide and skin. In Cosmeceuticals and Active Cosmetics： Drugs vs. Cosmetics （P. Elsner amp; H. Maibach， Eds.）， pp. 549-563. Marcel Dekker， New York， NY， USA.

[45] 東方美谷功能護膚品研究院. （2023年05月19日）. 化妝品研究報告. 報告編號：R-LBIVT-2023-032.