李果 葉海軍 徐至開 李文濤 徐承雷 李江

摘要： 原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石 （PIS） 是我國西南地區(qū)高發(fā)和難治性疾病， 對患者的生活造成極大的影響。膽道系統(tǒng)慢性感染產(chǎn)生的β-葡萄糖醛酸酶等代謝產(chǎn)物， 在色素性結(jié)石的形成中起著重要作用， 除細菌產(chǎn)生的外源性β-葡萄糖醛酸酶， 肝內(nèi)膽管細胞產(chǎn)生的內(nèi)源性β-葡萄糖醛酸酶在結(jié)石的形成中亦扮演重要角色。本文就PIS發(fā)病機制中β-葡萄糖醛酸酶的作用研究進展予以分析， 以期為PIS的防治提供可能的方式。

關(guān)鍵詞： ?膽石； ?葡萄糖醛酸酶； ?病理過程

基金項目： ?云南省科技廳-高校聯(lián)合基金項目 （202101AY070001-129）

Role of β-glucuronidase in the formation of primary intrahepatic stones

LI Guo， ?YE Haijun， ?XU Zhikai， ?LI Wentao， ?XU Chenglei， ?LI Jiang. ?（Department of Hepatobiliary Surgery， ?The First Affiliated

Hospital of Kunming Medical University， ?Kunming 650032， ?China）

Corresponding author： ?LI Jiang， ?13888836057@163.com ?（ORCID： ?0000-0002-6872-9434）

Abstract： Primary intrahepatic stones （PIS） is a refractory disease with a high incidence rate in Southwest China， which greatly affects the life of patients. Metabolites， such as β-glucuronidase produced by chronic biliary tract infection， play an important role in the formation of pigmented stones. In addition to exogenous β-glucuronidase produced by bacteria， endogenous β-glucuronidase produced by intrahepatic bile duct cells also plays an important role in the formation of stones. This article analyzes the research advances in the role of β-glucuronidase in the pathogenesis of PIS， in order to provide a possible method for the prevention and treatment of PIS.

Key words： Gallstones； Glucuronidase； Pathologic Processes

Research funding： Yunnan Province Department of Science and Technology-University Joint Fund Project （202101AY070001-129）

原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石（primary intrahepatic stones，PIS）， 區(qū)別于膽總管結(jié)石和膽囊結(jié)石， 特指原發(fā)于膽總管分叉以上， 肝內(nèi)膽管近端的結(jié)石， 占膽石癥患者的10%～20%［1］ 。該病在歐美地區(qū)較少見， 在我國長江流域西南地區(qū)較為高發(fā)。該病本身為良性疾病， 但其發(fā)病極其隱匿、 遷延， 能對肝內(nèi)膽管及肝組織造成嚴重破壞， 當出現(xiàn)癥狀就醫(yī)時大多已經(jīng)伴隨多次膽道感染、 肝細胞損傷、肝纖維化、 增殖性膽管炎甚至癌變。對患者的生活質(zhì)量和醫(yī)療資源的利用效率造成極大的負面影響。該病發(fā)病機制的研究目前國內(nèi)外僅見零星報道， 其中膽道感染后產(chǎn)生的內(nèi)、 外源性β-葡萄糖醛酸酶 （β-glucuronidase，GUS） 在結(jié)石的形成中具有重要作用。本文就GUS在PIS形成中的作用進行綜述， 以期為GUS在PIS發(fā)病機制方面的研究探索方向。

1 PIS發(fā)病機制及膽道感染與PIS的關(guān)系

根據(jù)結(jié)石成分的不同， PIS可以分為膽色素性、 膽固醇性以及混合性結(jié)石， 比例上， PIS絕大多數(shù)為膽色素性結(jié)石［2］ ， 而形成機制較為明確的膽囊結(jié)石則主要為膽固醇結(jié)石［3］ ， 提示PIS與膽囊結(jié)石形成機制存在差異。一般認為， 感染、 膽汁淤積、 膽管解剖以及膽汁代謝異常是該病發(fā)病的主要危險因素［4-5］ ， 此外， 膽道及胃腸道寄生蟲感染、 腸道菌群失調(diào)、 飲食習慣、 飲水條件等也被認為和該病相關(guān)［6］ 。在病理學上， PIS主要的表現(xiàn)為病變肝內(nèi)膽管上皮慢性炎癥， 膽管上皮腺體增生， 膽管壁纖維化［7］。近來研究［8］發(fā)現(xiàn)， 健康膽道系統(tǒng)內(nèi)并非無菌環(huán)境， 可能存在常規(guī)菌群定植， 通常認為膽道微環(huán)境對大多數(shù)細菌都是不利的， 感染治療中不可避免的抗生素應用可能會對正常生理的膽道微生物群檢測產(chǎn)生偏差。但PIS患者膽道內(nèi)菌群和健康人膽道菌群種類和構(gòu)成比例存在差異［9］ ， 因而， 很可能存在致石菌群， 其導致結(jié)石形成的機制亦將是研究的重點。

膽道感染主要由細菌和寄生蟲引起。其中， 寄生蟲導致肝內(nèi)膽管結(jié)石的病例相對較少， 華支睪吸蟲和棘口吸蟲可寄生在膽道內(nèi)， 引起持續(xù)性慢性炎癥， 導致膽管的機械性梗阻、 炎癥和膽管周圍纖維化， 而膽管內(nèi)蠕蟲及其蟲卵通常是炎癥形成的基礎病灶， 刺激上皮細胞增生引起機械性梗阻和杯狀細胞增生引起黏蛋白過表達，成為結(jié)石形成的理想條件［10］ 。在細菌檢測中， PIS患者膽道樣本主要檢出微生物主要為大腸桿菌、 糞腸球菌、肺炎克雷伯菌、 銅綠假單胞菌［11-12］。Clemente等［13］在73例復雜肝內(nèi)膽管結(jié)石患者的膽汁中分離出上百種微生物， 其中多重耐藥腸球菌、 假單胞菌和大腸桿菌的檢出率分別為43. 9%、 41. 2和20. 6%， 表明細菌感染與結(jié)石的形成密切相關(guān)， 且常合并多種微生物感染。腸道細菌可通過血行和淋巴管傳播， 也可通過Oddi括約肌進入膽道并引起感染［4］ 。在上述3種途徑中， 通過Oddi括約肌上行感染最為重要， 一旦Oddi括約肌的 “門戶” 功能異?；蛳В?帶菌小腸液逆流入膽道， 感染膽管黏膜引起膽管炎及一系列下游病理變化。早期的Maki學說［14］ 指出膽道感染后細菌分泌的GUS可將結(jié)合膽紅素水解成非結(jié)合膽紅素和葡萄糖醛酸， 非結(jié)合膽紅素再與鈣離子結(jié)合而形成膽紅素鈣， 從而在膽汁中析出成為肝內(nèi)膽管結(jié)石的成石核心。而此后的研究發(fā)現(xiàn)， 膽道系統(tǒng)內(nèi)的GUS可分為2類， 一類為腸道菌群微生物分泌， 主要為大腸桿菌， 其次包括脆弱類桿菌和梭形桿菌屬等， 也是肝內(nèi)致石菌群的主要構(gòu)成物種［8-9］ ， 此類菌群直接產(chǎn)生并釋放入膽道的GUS， 稱為外源性或細菌性GUS； 另一類則由機體自身組織細胞受內(nèi)毒素等刺激后產(chǎn)生釋放的GUS， 主要由肝內(nèi)膽管上皮細胞合成分泌， 稱為內(nèi)源性或組織學GUS［15］ 。外源性和內(nèi)源性GUS在肝內(nèi)膽管結(jié)石的形成中扮演重要角色， 尤其是內(nèi)源性GUS存在時間長， 與結(jié)石的復發(fā)關(guān)系更為密切， 但其具體調(diào)控機制尚待研究。

2 GUS的功能及作用

2. 1 維持內(nèi)源性成分的代謝穩(wěn)態(tài) GUS屬于兩個糖基水解酶家族2和家族79， 廣泛分布于人和多種腸道細菌中 （人GUS∶hGUS； 腸道細菌GUS∶BGUS）。hGUS主要存在于肝臟、 脾臟、 腸黏膜及胃黏膜上， BGUS主要存在于厚壁菌門、 變形菌門、 疣微菌門和擬桿菌門中［16］ 。作為水解酶， GUS可以特異性催化O-或S-糖苷基部分水解，并從糖苷中分離出糖苷元。葡萄糖醛酸化是消除機體內(nèi)、 外源性生物活性分子的最重要途徑之一， 例如， 甾體激素 （雌、 雄激素）、 神經(jīng)遞質(zhì) （血清素、 兒茶酚胺等）、 膽紅素、 炎性介質(zhì)等生物活性分子， 通過結(jié)合內(nèi)源性葡萄糖醛酸分子， 生成極性更強、 水溶性更高的代謝物， 促進其從尿液或膽汁中排泄［17］ 。

膽紅素作為葡萄糖醛酸化程度最高的內(nèi)源性分子之一， 分別以單 （約16%）、 雙葡萄糖醛酸結(jié)合物 （約80%） 形式存在于健康人膽汁中［18］ 。膽紅素葡萄糖醛酸酯被腸道菌群大量代謝為膽色素和尿膽原， 通過腸道上皮細胞重新吸收并進入腸肝循環(huán)［19］ 。在某些新生兒中， GUS表達增加， 膽紅素被顯著地循環(huán)利用， 從而導致高膽紅素血癥［20］ 。膽紅素也可以調(diào)節(jié)腸道微生物群的結(jié)構(gòu)和代謝， 例如， 膽紅素對革蘭陽性菌具有潛在毒性， 可能是對膽紅素的敏感性破壞了細菌膜的完整性、 呼吸代謝和碳水化合物代謝。與革蘭陽性菌相比， 革蘭陰性菌外膜的結(jié)構(gòu)或組成 （內(nèi)膜和外膜） 可能賦予其抵抗膽紅素嵌入作用的能力， 從而抵抗膽紅素的毒性作用［21］ 。另外， BGUS的糖化過程不僅是生物轉(zhuǎn)化的重要途經(jīng)， 其產(chǎn)生的葡萄糖醛酸 （glucuronic acid， GlcA） 是維持腸道微生物群生長的碳源。多種腸道細菌已被證實可代謝GlcA， 但利用能力有所差別， 提示GlcA可影響腸道菌群及微環(huán)境［17］ 。

2. 2 介導外源性成分的體內(nèi)處置 人類接觸的許多藥物和外源性物質(zhì) （如膳食、 環(huán)境和工業(yè)化學品） 是非極性的親脂化合物。雖然這些化合物的親脂性促進了生物膜的擴散并隨后進入其作用部位， 但同樣的特性阻礙了它們通過腎臟、 腸道從體內(nèi)消除， 因此利用高極性的GlcA形成親水的葡萄糖醛酸鹽， 轉(zhuǎn)化為更極性的親水化合物是一種消除途徑和清除機制［17］ 。而腸道BGUS的水解可能會增加外源性成分在腸道的重新釋放， 增加胃腸炎癥或癌癥的發(fā)生風險。比如晚期結(jié)直腸癌患者接受伊立替康治療后發(fā)生遲發(fā)性腹瀉［22］ ， 這種毒性是由于其代謝物SN-38葡萄糖醛酸綴合物被BGUS分解而被重新激活而導致， 使其臨床療效受到嚴重限制。與單獨接受伊立替康治療的小鼠相比， BGUS抑制劑具有顯著的抗腹瀉保護作用而不影響療效， 還可以增加腸道微生物的豐富度， 減少變形桿菌水平［23］ 。非甾體抗炎藥酮洛芬和吲哚美辛的胃腸道損傷也可以通過選擇性抑制細菌GUS來改善［24］ 。目前確定了超過100種藥物經(jīng)BGUS參與循環(huán)。這些藥物包括嗎啡、 雌激素、 布洛芬、 咪達唑侖及其結(jié)構(gòu)類似物［25］ 。因此開發(fā)有效的、 特異性的、 無細胞毒性的GUS抑制劑對于提高治療藥物的臨床療效和有效的疾病管理是必不可少的。

3 GUS在PIS形成中作用

3. 1 外源性GUS在PIS形成中作用 膽道菌群失調(diào)是結(jié)石形成的關(guān)鍵因素， Chen等［26］ 分析了16例復發(fā)性膽總管結(jié)石患者和44例原發(fā)性膽總管結(jié)石患者的膽道微生物群， 16S rRNA測序顯示， 在原發(fā)性膽總管結(jié)石組中普遍存在變形菌門、 厚壁菌門、 擬桿菌門和放線菌門 （均為腸道細菌）。這些數(shù)據(jù)表明， 膽道微生物群可能起源于腸道微生物群， 并通過十二指腸乳頭進入膽道?？傮w上， PIS的致石菌群以革蘭陰性桿菌為主， 和腸道菌群有大量重合。感染膽汁中產(chǎn)生大量的BGUS， 促使葡萄糖醛酸綴合物釋放游離膽紅素， 并與鈣進一步沉淀， 形成色素性結(jié)石。而結(jié)石的形成又使得膽道中大腸桿菌、 克雷伯菌、 屎腸球菌、 擬桿菌等細菌容易聚集繁殖， 導致膽汁中BGUS活性升高［27］ ， 形成惡性循環(huán)。此外， 當某些外源性代謝生物增加 （如伊利替康）， 會使腸道內(nèi)產(chǎn)生更多腸桿菌科細菌， 導致腸道外源性GUS的表達增加［28］ ，是否參與色素性結(jié)石的形成， 仍需進一步研究。GUS抑制劑能減少膽紅素的腸肝循環(huán)［29］ ， 通過口服GUS抑制劑D-葡萄糖二酸-1， 4-內(nèi)酯， 檢測發(fā)現(xiàn)膽汁中GUS的活性顯著降低。在體外實驗中， 膽紅素鈣在人感染膽汁中孵育的蛔蟲卵表面顯著沉淀， 而加入D-葡萄糖二酸-1， 4-內(nèi)酯后， 通過抑制BGUS的活性來控制膽汁中膽紅素鈣的分離， 從而明顯減少膽紅素在人膽汁中培養(yǎng)的蛔蟲卵表面的沉淀［14］ 。

另外， 腸道細菌產(chǎn)生的脂多糖（LPS）通過 TACE/TGF-α/EGFR和EP4/p38MAPK途徑， 上調(diào)黏蛋白 （Mucin，MUC） 基因， 誘導的MUC過表達使膽汁中黏液蛋白的分泌增加， 可能協(xié)同GUS的成石作用［30］ 。Li等［31］ 發(fā)現(xiàn)增殖細胞核抗原 （PCNA shRNA） 處理動物膽管炎模型能有效抑制增殖相關(guān)基因： PCNA、 Ki-67的mRNA和蛋白表達， 抑制病變膽管壁膽道上皮、 黏膜下腺和膠原纖維的增生行為， 同時酸性黏液腺、 MUC3 RNA的表達和內(nèi)源性GUS的分泌也被有效抑制。黏蛋白加重膽道梗阻促進結(jié)石， 是否需要GUS誘導膽色素鈣形成為結(jié)石提供材料； 而GUS致石作用提供的材料， 是否也需要黏蛋白加重膽道梗阻從而才能聚集成石？MUC與GUS是否存相同或相關(guān)的調(diào)節(jié)通路有待進一步研究。

3. 2 內(nèi)源性GUS在PIS形成中作用 隨著研究的深入，內(nèi)源性GUS在PIS形成中的作用正逐漸被認識。1987年Oyabu等［32］ 發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性GUS在結(jié)合膽紅素的分解過程中有重要作用， 促進色素性結(jié)石的產(chǎn)生， HO等［33］ 發(fā)現(xiàn)肝內(nèi)色素性結(jié)石患者肝臟組織內(nèi)源性GUS水平較無結(jié)石者高約12倍， 同時， 當pH為4. 6時， 檢測液中有活性的GUS為內(nèi)源性GUS， 這可能是膽汁感染， 肝細胞受損時，周圍組織pH降低， 激活了內(nèi)源性GUS的表達來加速生物活性物質(zhì)的清除。腸道存在大量產(chǎn)生LPS的細菌， 當膽汁反流或細菌移位， 外源性GUS在早期迅速升高， 參與結(jié)石的形成。若膽道系統(tǒng)通暢性好， 其內(nèi)并無致石菌群長期定植， 在致石菌群感染中產(chǎn)生的GUS也可在細菌清除后12 h內(nèi)隨膽汁排泄清除［34］ 。張西波等［35］ 通過動物模型發(fā)現(xiàn)膽道感染后， 首先外源性GUS增高， 但隨著感染控制和膽汁排空， 外源性GUS活性逐漸下降， 而內(nèi)源性GUS活性持續(xù)增高并維持較長時間， 提示內(nèi)源性GUS可能在色素結(jié)石形成過程中發(fā)揮長期作用， 研究內(nèi)源性GUS的表達、 分泌和活性調(diào)控可能對揭示PIS的發(fā)生和復發(fā)機制更有意義。Yao等［36］ 通過免疫組化染色評估了PIS膽管黏膜標本中內(nèi)源性GUS、 c-myc、 p-p65和p-PKC的表達， 發(fā)現(xiàn)與正常肝標本相比PIS區(qū)域的膽管黏膜上述分子表型顯著增加。同時， 姚晨輝［37］ 通過建立膽管上皮細胞損傷細胞模型研究， 發(fā)現(xiàn) LPS 可通過TLR4/NF-κB/c-myc信號級聯(lián)， 誘導肝內(nèi)膽管上皮細胞表達及分泌內(nèi)源性GUS。NF-κB通過調(diào)節(jié)淋巴細胞和淋巴器官的發(fā)育和存活， 從而控制免疫應答、 惡性轉(zhuǎn)化、 細胞凋亡等多個過程， 在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮核心作用。當膽道發(fā)生感染時， 可能存在多種炎癥因子參與， 多條以NF-κB為中心的信號通路串擾， 從而調(diào)控GUS的表達。此外， LPS激活肝竇內(nèi)的巨噬細胞 （Kupffer細胞）， 促進循環(huán)單核細胞向巨噬細胞的轉(zhuǎn)化， 參與并放大炎癥反應［38-39］ 。在結(jié)石飲食喂養(yǎng)的小鼠試驗中， 肝內(nèi)巨噬細胞浸潤明顯增加［40］ 。Yang等［41］ 發(fā)現(xiàn)肝內(nèi)膽管結(jié)石患者肝臟標本中巨噬細胞標志物CD68、 CD206以及TNF-α、 內(nèi)源性GUS的表達均較正常肝臟標本明顯升高， 且呈正相關(guān)。在LPS的刺激下具有抗炎和免疫調(diào)節(jié)的M2型巨噬細胞及其分泌產(chǎn)物TNF-α可能通過NF-κB/PCNA的信號級聯(lián)通路增加膽管上皮細胞內(nèi)源性GUS的表達。通過使用NF-κB抑制劑有效抑制炎癥介質(zhì)表達后， TNF-α和GUS的表達均下降， 表明巨噬細胞浸潤可能參與了肝內(nèi)膽管細胞分泌GUS。肝臟巨噬細胞對肝損傷和修復過程有重要調(diào)控作用， 可能是通過去除細菌病原體、 抑制肝臟炎癥反應， 從而減少內(nèi)源性GUS的表達。以上內(nèi)源性GUS可能的信號通路見圖1。內(nèi)源性GUS參與結(jié)石形成的調(diào)控機制尚不明確， 可能涉及多條信號通路偶聯(lián)，對相關(guān)信號通路的研究， 可能為干預PIS的形成或復發(fā)提供新的潛在治療靶點。

4 小結(jié)

PIS成因復雜， 其完整、 確切的發(fā)病機制尚不明確。外源性GUS在肝內(nèi)膽管結(jié)石的形成中作用已得到肯定，內(nèi)源性GUS在結(jié)石形成中的面紗在逐漸被揭開。近年來， 內(nèi)源性GUS在肝內(nèi)膽管結(jié)石形成中的作用逐漸得到重視， 但目前尚未有系統(tǒng)研究。對內(nèi)源性GUS抑制的相關(guān)研究雖然取得一定成果， 但大多在體外或動物模型中進行， 缺乏臨床相關(guān)性。另外， GUS參與了人腦含葡萄糖醛酸的糖胺聚糖的降解， 若缺乏GUS可能引起Ⅶ型黏多糖病， 導致腦內(nèi)溶酶體儲存功能障礙。如果GUS被抑制， 是否會發(fā)生相關(guān)嚴重副作用尚不清楚。因此揭示內(nèi)源性GUS表達的調(diào)控機制， 研究其信號通路， 可能更有意義， 將為干預肝內(nèi)結(jié)石的形成提供新的治療思路。

利益沖突聲明： 本文不存在任何利益沖突。

作者貢獻聲明： 李果、 葉海軍、 李江負責課題設計， 資料分析， 撰寫論文； 徐至開、 李文濤、 徐承雷、 李江參與收集數(shù)據(jù)， 修改論文； 李江負責擬定寫作思路， 指導撰寫文章并最后定稿。

參考文獻：

[1] HUANG ZQ， LIU YX. Surgical treatment of intrahepatic bile duct stones[J]. Chin J Pract Surg， 1997， 17（3）： 14-18.黃志強， 劉永雄. 肝內(nèi)膽管結(jié)石的外科治療（40年回顧）[J]. 中國實用外科雜志， 1997， 17（3）： 14-18.

[2] TAZUMA S. Gallstone disease： Epidemiology， pathogenesis， and clas?sification of biliary stones （common bile duct and intrahepatic） [J]. Best Pract Res Clin Gastroenterol， 2006， 20（6）： 1075-1083. DOI： 10.1016/j.bpg.2006.05.009.

[3] SUZUKI Y， MORI T， YOKOYAMA M， et al. Hepatolithiasis： Analysis of Japanese nationwide surveys over a period of 40 years[J]. J Hepato Biliary Pancreat， 2014， 21（9）： 617-622. DOI： 10.1002/jhbp.116.

[4] RAN X， YIN BB， MA BJ. Four major factors contributing to intrahe?patic stones[J]. Gastroenterol Res Pract， 2017， 2017： 7213043. DOI： 10.1155/2017/7213043.

[5] XIA H， ZHANG H， XIN X， et al. Surgical management of recurrence of primary intrahepatic bile duct stones[J]. Can J Gastroenterol Hepatol， 2023： 5158580. DOI： 10.1155/2023/5158580.

[6] TANAKA Y， TAINAKA T， SUMIDA W， et al. The efficacy of resection of intrahepatic bile duct stenosis-causing membrane or septum for preventing hepatolithiasis after choledochal cyst excision[J]. J Pe?diatr Surg， 2017， 52（12）： 1930-1933. DOI： 10.1016/j.jpedsurg.2017.08.056.

[7] TSUI WMS， LAM PWY， LEE WK， et al. Primary hepatolithiasis， recur?rent pyogenic cholangitis， and oriental cholangiohepatitis： A tale of 3 countries[J]. Adv Anat Pathol， 2011， 18（4）： 318-328. DOI： 10.1097/PAP.0b013e318220fb75.

[8] MOLINERO N， RUIZ L， MILANI C， et al. The human gallbladder micro?biome is related to the physiological state and the biliary metabolic profile[J]. Microbiome， 2019， 7（1）： 100. DOI： 10.1186/s40168-019-0712-8.

[9] REN JP， QIU JF， ZOU Y， et al. Research advances in the formation mechanism of primary intrahepatic stones caused by biliary flora[J]. J Clin Hepatol， 2022， 38（2）： 477-482. DOI： 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.045.

任江平， 邱錦飛， 鄒楊， 等. 膽道菌群導致原發(fā)性肝內(nèi)膽管結(jié)石形成機理的研究進展[J]. 臨床肝膽病雜志， 2022， 38（2）： 477-482. DOI： 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.02.045.

[10] LIM JH. Liver flukes： The malady neglected[J]. Korean J Radiol， 2011， 12（3）： 269-279. DOI： 10.3348/kjr.2011.12.3.269.

[11] CHEN AN， WANG H， ZHOU YN， et al. Supervision of the main patho?genic bacteria resistance rates and rationality analysis of antibacterial drugs usage in hepatolithiasis with biliary tract infection[J]. J Guang?dong Pharm Univ， 2017， 33（3）： 388-392. DOI： 10.16809/j.cnki.2096-3653.2017011204.

陳安妮， 王慧， 周燕妮， 等. 肝內(nèi)膽管結(jié)石病原菌監(jiān)測及抗菌藥物使用合理性分析[J]. 廣東藥學院學報， 2017， 33（3）： 388-392. DOI： 10.16809/j.cnki.2096-3653.2017011204.

[12] WU ZQ. Bacterial spectrum of bile in hepatolithiasis patients and it s relationship with the infection after operation[D]. Fuzhou： Fujian Medical University， 2017.

吳樟強. 肝內(nèi)膽管結(jié)石患者膽汁細菌譜與術(shù)后感染的關(guān)系[D]. 福州： 福建醫(yī)科大學， 2017.

[13] CLEMENTE G， de ROSE AM， MURRI R， et al. Liver resection for pri?mary intrahepatic stones： Focus on postoperative infectious complica?tions[J]. World J Surg， 2016， 40（2）： 433-439. DOI： 10.1007/s00268-015-3227-x.

[14] MAKI T. Pathogenesis of calcium bilirubinate gallstone： Role of E. coli， beta-glucuronidase and coagulation by inorganic ions， poly?electrolytes and agitation[J]. Ann Surg， 1966， 164（1）： 90-100. DOI： 10.1097/00000658-196607000-00010.

[15] HUANG ZQ， YANG KZ， MENG XJ， et al. The significance of bile β- glucuronidase activity[J]. Chin J Surg， 1982， 20（1）： 49-52， 64.

黃志強， 楊可楨， 孟憲鈞， 等. 膽汁β-葡萄糖醛酸酶活性的意義[J]. 中華外科雜志， 1982， 20（1）： 49-52， 64.

[16] WANG PP， JIA YF， WU RR， et al. Human gut bacterial β-glucuroni?dase inhibition： An emerging approach to manage medication therapy[J]. Biochem Pharmacol， 2021， 190： 114566. DOI： 10.1016/j.bcp.2021.114566.

[17] CHEN ZQ， TANG S， ZHANG CX， et al. Research progress on the in?teraction between gut bacterial β-glucuronidase and Chinese herbal medicine[J]. Acta Pharm Sin B， 2022， 57（12）： 3465-3479. DOI： 10.16438/j.0513-4870.2022-1091.

陳智強， 湯帥， 張暢煊， 等. 腸道菌群β-葡萄糖醛酸苷酶與中草藥的互作關(guān)系研究進展[J]. 藥學學報， 2022， 57（12）： 3465-3479. DOI： 10.16438/j.0513-4870.2022-1091.

[18] FEVERY J， BLANCKAERT N， LEROY P， et al. Analysis of bilirubins in biological fluids by extraction and thin-layer chromatography of the in?tact tetrapyrroles： Application to bile of patients with gilbert s syn?drome， hemolysis， or cholelithiasis[J]. Hepatology， 2007， 3（2）： 177-183. DOI： 10.1002/hep.1840030207.

[19] V?TEK L， OSTROW JD. Bilirubin chemistry and metabolism; harmful and protective aspects[J]. Curr Pharm Des， 2009， 15（25）： 2869-2883. DOI： 10.2174/138161209789058237.

[20] TANG W， LU HY， SUN Q， et al. Characteristics of gut microbiota and its association with the activity of β-glucuronidase in neonates with hyperbilirubinemia[J]. Chin J Contemp Pediatr， 2021， 23（7）： 677-683. DOI： 10.7499/j.issn.1008-8830.2102039.

唐煒， 盧紅艷， 孫勤， 等. 高膽紅素血癥新生兒腸道菌群特點及與β-葡萄糖醛酸苷酶活性的相關(guān)性[J]. 中國當代兒科雜志， 2021， 23（7）： 677-683. DOI： 10.7499/j.issn.1008-8830.2102039.

[21] NIE YF， HU J， YAN XH. Cross-talk between bile acids and intestinal microbiota in host metabolism and health[J]. J Zhejiang Univ Sci B， 2015， 16（6）： 436-446. DOI： 10.1631/jzus.B1400327.

[22] ROUGIER P， BUGAT R， DOUILLARD JY， et al. Phase II study of irinote?can in the treatment of advanced colorectal cancer in chemotherapy-naive patients and patients pretreated with fluorouracil-based che?motherapy[J]. J Clin Oncol， 1997， 15（1）： 251-260. DOI： 10.1200/jco.1997.15.1.251.

[23] BHATT AP， PELLOCK SJ， BIERNAT KA， et al. Targeted inhibition of gut bacterial β-glucuronidase activity enhances anticancer drug effi?cacy[J]. Proc Natl Acad Sci USA， 2020， 117（13）： 7374-7381. DOI： 10.1073/pnas.1918095117.

[24] SAITTA KS， ZHANG C， LEE KK， et al. Bacterial β-glucuronidase inhibi?tion protects mice against enteropathy induced by indomethacin， keto?profen or diclofenac： Mode of action and pharmacokinetics[J]. Xeno?biotica， 2014， 44（1）： 28-35. DOI： 10.3109/00498254.2013.811314.

[25] ELMASSRY MM， KIM S， BUSBY B. Predicting drug-metagenome in?teractions： Variation in the microbial β-glucuronidase level in the hu?man gut metagenomes[J]. PLoS One， 2021， 16（1）： e0244876. DOI： 10.1371/journal.pone.0244876.

[26] CHEN BR， FU SW， LU LG， et al. A preliminary study of biliary micro?biota in patients with bile duct stones or distal cholangiocarcinoma[J]. Biomed Res Int， 2019， 2019： 1092563. DOI： 10.1155/2019/1092563.

[27] SHEN HZ， YE FQ， XIE L， et al. Metagenomic sequencing of bile from gallstone patients to identify different microbial community patterns and novel biliary bacteria[J]. Sci Rep， 2015， 5： 17450. DOI： 10.1038/srep17450.

[28] STRINGER AM， GIBSON RJ， LOGAN RM， et al. Faecal microflora and beta-glucuronidase expression are altered in an irinotecan-in?duced diarrhea model in rats[J]. Cancer Biol Ther， 2008， 7（12）： 1919-1925. DOI： 10.4161/cbt.7.12.6940.

[29] CHEN KW， YUAN TM. The role of microbiota in neonatal hyperbiliru?binemia[J]. Am J Transl Res， 2020， 12（11）： 7459-7474.

[30] LI Y， SONG JM， YU H， et al. PGE（2） induces MUC2 and MUC5AC expression in human intrahepatic biliary epithelial cells via EP4/p38MAPK activation[J]. Ann Hepatol， 2013， 12（3）： 479-486.

[31] LI FY， CHENG NS， CHENG JQ， et al. Proliferating cell nuclear anti?gen shRNA treatment attenuates chronic proliferative cholangitis in rats[J]. J Gastro And Hepatol， 2009， 24（5）： 920-926. DOI： 10.1111/j.1440-1746.2008.05688.x.

[32] OYABU H， TABATA M， NAKAYAMA F. Nonbacterial transformation of bilirubin in bile[J]. Dig Dis Sci， 1987， 32（8）： 809-816. DOI： 10.1007/BF01296701.

[33] HO KJ， HSU SC， CHEN JS， et al. Human biliary β -glucuronidase： Correlation of its activity with deconjugation of bilirubin in the bile[J]. Eur J Clin Investigation， 1986， 16（5）： 361-367. DOI： 10.1111/j.1365-2362.1986.tb01010.x.

[34] WAUTERS L， CEULEMANS M， LAMBAERTS M， et al. Association be?tween duodenal bile salts and gastric emptying in patients with func?tional dyspepsia[J]. Gut， 2021， 70（11）： 2208-2210. DOI： 10.1136/gutjnl-2020-323598.

[35] ZHANG XB， CUI NQ， LI DH. Effect of clearing heat and removing dampness method on formation of pigment gallstones in rabbits[J]. Chin J Integr Trad West Med， 2007， 27（3）： 241-243. DOI： 10.3321/j.issn：1003-5370.2007.03.014.

張西波， 崔乃強， 李東華. 清熱利濕方防治兔膽色素結(jié)石形成的實驗研究[J]. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志， 2007， 27（3）： 241-243. DOI： 10.3321/j.issn：1003-5370.2007.03.014.

[36] YAO DB， DONG QZ， TIAN Y， et al. Lipopolysaccharide stimulates endogenous β -glucuronidase via PKC/NF- κB/c-myc signaling cas?cade： A possible factor in hepatolithiasis formation[J]. Mol Cell Bio?chem， 2018， 444（1）： 93-102. DOI： 10.1007/s11010-017-3234-3.

[37] YAO CH. The role of LINC00311 in LPS-induced human intrahepatic bile duct epithelial cells to activate TLR4/NF- κB/c-myc signaling pathway to up-regulate the expression of endogenous β-glucuroni?dase[D]. Shenyang： China Medical University， 2019.

姚晨輝. LINC00311在LPS誘導人肝內(nèi)膽管上皮細胞激活TLR4/NF-κB/c-myc信號通路從而上調(diào)內(nèi)源性β-葡萄糖醛酸酶表達過程中的作用[D]. 沈陽： 中國醫(yī)科大學， 2019.

[38] DONG XT， LIU JQ， XU YP， et al. Role of macrophages in experimen?tal liver injury and repair in mice （Review）[J]. Exp Ther Med， 2019： 3835-3847. DOI： 10.3892/etm.2019.7450.

[39] TACKE F. Targeting hepatic macrophages to treat liver diseases[J]. J Hepatol， 2017， 66（6）： 1300-1312. DOI： 10.1016/j.jhep.2017.02.026.

[40] JIN CG， JIANG FR， ZHANG J， et al. Role of osteopontin in diet-in?duced brown gallstone formation in rats[J]. Chin Med J， 2021， 134（9）： 1093-1100. DOI： 10.1097/CM9.0000000000001519.

[41] YANG Y， WANG Y， WANG CF， et al. Macrophages and derived-TNF-α promote lipopolysaccharide-induced upregulation of endogenous β-glucuronidase in the epithelial cells of the bile duct： A possible facili?tator of hepatolithiasis formation[J]. Clin Res Hepatol Gastroen?terol， 2023， 47（1）： 102062. DOI： 10.1016/j.clinre.2022.102062.

收稿日期：2023-08-23； 錄用日期：2023-10-07

本文編輯：王亞南