溫海成 蘇永精 謝澳 李燦 韋威

摘要：采用顯微鑒別和薄層色譜鑒別方法對(duì)不同產(chǎn)地壯藥廣西鵝掌柴進(jìn)行鑒定研究，按照《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部通則中規(guī)定的方法對(duì)不同產(chǎn)地藥材進(jìn)行水分含量、灰分含量和浸出物含量的測(cè)定。結(jié)果表明，壯藥廣西鵝掌柴顯微鑒別特征性強(qiáng)；薄層色譜鑒別方法以環(huán)己烷∶丙酮∶甲酸（8.5∶1.5∶0.4）為展開(kāi)系統(tǒng)，此展開(kāi)系統(tǒng)分離度較好，斑點(diǎn)清晰，以15 cm為展距，斑點(diǎn)分離度最佳；以10%硫酸乙醇溶液作為顯色劑，紫外燈（365 nm）下檢視；擬定壯藥廣西鵝掌柴水分含量不超過(guò)12.00%，總灰分含量不超過(guò)6.00%，酸不溶性灰分含量不超過(guò)0.50%，水溶性浸出物含量不低于9.50%。其方法操作簡(jiǎn)單易行、穩(wěn)定可靠、重復(fù)性較好、擬定范圍合理，可為壯藥廣西鵝掌柴質(zhì)量控制提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：壯藥；廣西鵝掌柴；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；薄層色譜

中圖分類號(hào)：R29? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2024）04-0154-04

Establishment of quality standards for Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis

Abstract： Microscopic identification and thin-layer chromatography identification methods were used to identify and study the Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis from different regions. The moisture content， ash content， and extract content of the medicinal materials from different regions were determined according to the methods specified in the 2020 edition of the "Pharmacopoeia of the Peoples Republic of China". The results showed that the microscopic identification characteristics of the Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis were strong； the thin-layer chromatography identification method used cyclohexane∶acetone∶formic acid of 8.5∶1.5∶0.4 as the unfolding system， which had good separation and clear spots. The best spot separation was achieved with a spreading distance of 15 cm；using a 10% sulfuric acid ethanol solution as the chromogenic agent， the examination was conducted under a UV lamp （365 nm）； the moisture content of Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis shall not exceed 12.00%， the total ash content should not exceed 6.00%， the acid insoluble ash content should not exceed 0.50%， and the water-soluble extract content should not be less than 9.50%. The method was easy to operate， stable and reliable， with good reproducibility and reasonable scope， which could provide a theoretical basis for the quality control of Zhuang medicine Schefflera kwangsiensis.

Key words： Zhuang medicine； Schefflera kwangsiensis； quality standards； thin-layer chromatography

壯藥廣西鵝掌柴為五加科植物廣西鵝掌柴（Schefflera kwangsiensis Merr. ex Li.）的莖枝或帶葉莖枝［1］，別名白花鵝掌柴［2］、廣西鴨腳木、漢桃葉、七葉蓮、七多（廣西壯語(yǔ)）［3，4］等。廣西鵝掌柴主要分布于廣西壯族自治區(qū)、廣東省、臺(tái)灣省等地［5］。壯醫(yī)將其歸為通龍路、火路藥，具有祛風(fēng)毒、除濕毒、通龍路、活血止痛的功效，常用于治療風(fēng)濕骨痛、跌打腫痛、外傷出血、骨折等疾病［2］。經(jīng)現(xiàn)代藥理［6，7］和化學(xué)成分［8-10］研究，廣西鵝掌柴莖枝中主要含有氧倍半萜烯、β-石竹烯等揮發(fā)油成分，具有抗菌、抗炎和鎮(zhèn)痛的作用［11，12］。

現(xiàn)行的廣西壯族自治區(qū)壯藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中只有廣西鵝掌柴莖枝的性狀鑒別和橫切面顯微鑒別［1］，為完善壯藥廣西鵝掌柴的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，本試驗(yàn)參考《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部通則中的方法，對(duì)壯藥廣西鵝掌柴進(jìn)行顯微鑒別和薄層色譜鑒別，并對(duì)不同產(chǎn)地的廣西鵝掌柴進(jìn)行水分測(cè)定、總灰分與酸不溶性灰分測(cè)定、浸出物含量測(cè)定等。

1 材料與儀器

1.1 試藥與試劑

廣西鵝掌柴藥材于2020年采自廣西壯族自治區(qū)，采集信息如表1所示。經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)韋松基教授鑒定為五加科植物廣西鵝掌柴的莖，選定EZC-11為對(duì)照藥材。石油醚、乙酸乙酯、丙酮等試劑購(gòu)買(mǎi)于成都市科隆化學(xué)品有限公司，均為分析純。

1.2 試驗(yàn)儀器

DMB-1223型Motic生物顯微鏡（麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司）；EL204型電子天平［梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司］；HWS-24型電熱恒溫水浴鍋（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）；DHG-9203A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（泰州市蘇京實(shí)驗(yàn)儀器科技有限公司）；UPK-Ⅱ型優(yōu)普系列超純水機(jī)（成都超純科技有限公司）；12-10A型SX2系列箱式電阻爐（上海齊欣科學(xué)儀器有限公司）；KQ5200DE型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；一聯(lián)型電子萬(wàn)用爐（上?？坪銓?shí)業(yè)發(fā)展有限公司）；DFY-500型搖擺式粉碎機(jī)（溫嶺市林大機(jī)械有限公司）；ZF-7型暗箱式三用紫外分析儀（上海嘉鵬科技有限公司）。

2 試驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 廣西鵝掌柴的性狀鑒別

廣西鵝掌柴為長(zhǎng)圓柱形，挺直或稍彎曲，長(zhǎng)9～18 cm，直徑0.4～3.0 cm，表面灰白色至淡黃褐色，有縱皺紋和點(diǎn)狀皮孔，有時(shí)可見(jiàn)新月?tīng)钊~痕（圖1）。體輕、質(zhì)較硬，斷面黃白色，較平坦，木部略顯放射狀紋理，中心有髓白色或中空。氣微、味甘、微苦。

2.2 廣西鵝掌柴莖橫切面的顯微鑒別

取壯藥廣西鵝掌柴的莖制成永久石蠟切片，置于顯微鏡下觀察，拍照，并描述其顯微構(gòu)造特征。①莖橫切面類圓形，木栓層為多列細(xì)胞構(gòu)成，外部多破裂，并與韌皮部有石細(xì)胞環(huán)帶間隔。②韌皮部外部有裂隙，與皮層界限不明顯，裂隙中常有石細(xì)胞散在，內(nèi)側(cè)薄壁細(xì)胞排列較緊密，可見(jiàn)樹(shù)脂道分布。③維管束外韌型，木部中有一裂隙將其分成不對(duì)稱的兩部分，射線寬廣，導(dǎo)管單個(gè)散在或數(shù)個(gè)相聚，徑向稀疏排列成放射狀。④髓部較小，偏向一側(cè)，如圖2所示。

2.3 廣西鵝掌柴莖粉末顯微鑒別

廣西鵝掌柴莖切段干燥后，打粉機(jī)粉碎，取足夠顯微鑒別用量過(guò)五號(hào)篩（80目）。用稀甘油制片和水合氯醛液制片，置于顯微鏡下觀察拍照并記錄數(shù)據(jù)。本品莖粉末黃灰色或淺灰色。①薄壁細(xì)胞多邊形，單個(gè)或多個(gè)存在，偶爾含有淀粉粒。②木栓細(xì)胞多角形或長(zhǎng)方形，紅棕色或無(wú)色。③草酸鈣簇晶直徑15～50 μm，草酸鈣方晶長(zhǎng)17～35 μm、寬12～33 μm，晶體數(shù)量眾多，四處散落或包于細(xì)胞中。④石細(xì)胞多，呈類方形或不規(guī)則形，四面增厚。⑤淀粉粒少，單粒，偶見(jiàn)復(fù)粒，橢圓形或類圓形。⑥纖維常成束存在，單纖維少見(jiàn)，多破裂，長(zhǎng)12～26 μm。⑦導(dǎo)管以網(wǎng)紋導(dǎo)管、具緣紋孔導(dǎo)管為主，偶見(jiàn)環(huán)紋導(dǎo)管和梯紋導(dǎo)管。⑧薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶、草酸鈣簇晶，如圖3所示。

2.4 廣西鵝掌柴的薄層色譜鑒別

按照《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部通則中規(guī)定的薄層鑒別方法，以EZC-11為對(duì)照藥材，分別稱取EZC-1～EZC-10藥材粉末1 g放入50 mL磨口錐形瓶中，加入95%乙醇10 mL，超聲波滲透處理45 min，過(guò)濾，濾液水浴蒸干，加入甲醇1 mL溶解，制備供試品藥材溶液。另取對(duì)照藥材（EZC-11）1 g，按上述方法制備對(duì)照藥材溶液。依據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部通則中規(guī)定的薄層色譜法，吸取供試品藥材溶液、對(duì)照藥材溶液各10 μL，分別在同一薄層硅膠G板點(diǎn)樣，以環(huán)己烷∶丙酮∶甲酸=8.5∶1.5∶0.4（體積比）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，展至15 cm處取出，晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，在100～105 ℃下加熱至顯色，紫外燈（365 nm）下檢視［13］。

從廣西鵝掌柴的薄層鑒別圖譜（圖4）可以看出，各批次廣西鵝掌柴與EZC-11對(duì)照藥材在相同的位置顯示相同顏色斑點(diǎn)。

2.5 檢查項(xiàng)測(cè)定

考慮到壯藥材不同采收期、不同產(chǎn)地、不同生長(zhǎng)環(huán)境差異性較大，以及生長(zhǎng)在潮濕多雨的南方，因此，將本品水分含量、灰分含量檢查值適當(dāng)提高。

2.5.1 水分測(cè)定 按《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部通則0832項(xiàng)中第二法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。11批廣西鵝掌柴藥材水分含量為8.29%～8.58%，各批次水分含量平均值差異較小，但考慮到廣西鵝掌柴為南方植物，生長(zhǎng)環(huán)境濕度較大，因此，將本品水分含量適當(dāng)提高，初步擬定廣西鵝掌柴藥材水分含量不超過(guò)12.00%。

2.5.2 灰分測(cè)定 按《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部通則2302項(xiàng)灰分測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表3。11批廣西鵝掌柴總灰分含量為3.33%～4.59%，酸不溶性灰分含量為0.07%～0.34%，考慮實(shí)際應(yīng)用，初步擬定總灰分含量不超過(guò)6.00%，酸不溶性灰分含量不超過(guò)0.50%。

2.5.3 浸出物測(cè)定 按《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部通則2201項(xiàng)浸出物測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定。以EZC-4為考察樣品，分別采用冷浸法和熱浸法，篩選水和不同濃度乙醇溶液（30%、50%、70%、95%）作為提取或浸出溶劑的最優(yōu)提取方法，測(cè)定本品浸出物含量。對(duì)每種提取方法的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)廣西鵝掌柴熱浸出物含量較冷浸出物的含量高，水浸出物含量較醇浸出物含量高，故本試驗(yàn)選擇水為溶劑，按照水溶性浸出物測(cè)定方法中的熱浸法依次測(cè)定本品11批藥材的浸出物，結(jié)果如表4所示。11批廣西鵝掌柴水溶性浸出物含量為9.79%～11.34%，均超過(guò)9.50%。從實(shí)際應(yīng)用角度出發(fā)，擬定本品水溶性浸出物含量不低于9.50%。

3 小結(jié)與討論

3.1 顯微鑒別特征

廣西鵝掌柴莖橫切面類圓形，木栓層為多列細(xì)胞構(gòu)成，外部多破裂，韌皮部外部有裂隙，與皮層界限不明顯，裂隙中常有石細(xì)胞散在，維管束外韌型，有樹(shù)脂道分布，髓小并偏向一側(cè)，薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶、草酸鈣簇晶。以上顯微鑒別特征可作為壯藥廣西鵝掌柴藥材顯微鑒別依據(jù)。

3.2 限量檢查

依據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》2020年版四部通則中藥材水分測(cè)定方法、灰分測(cè)定方法及浸出物測(cè)定法中的相關(guān)規(guī)定要求，測(cè)定不同產(chǎn)地壯藥廣西鵝掌柴的水分含量、總灰分含量、酸不溶性灰分含量、浸出物含量，廣西鵝掌柴水分含量為8.29%～8.58%，總灰分含量為3.33%～4.59%，酸不溶性灰分含量為0.07%～0.34%，水溶性浸出物含量為9.79%～11.34%。本品11批廣西鵝掌柴均采自廣西，雖然采集時(shí)間不同，但生長(zhǎng)環(huán)境相似，因此11批廣西鵝掌柴藥材含水量差異較小。試驗(yàn)藥材的前處理較好，未混入泥沙等雜質(zhì)。依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果最終擬定廣西鵝掌柴藥材水分含量不超過(guò)12.00%，總灰分含量不超過(guò)6.00%，酸不溶性灰分含量不超過(guò)0.50%，熱浸法測(cè)定水溶性浸出物含量不低于9.50%。

3.3 薄層鑒別

通過(guò)比較11批壯藥廣西鵝掌柴薄層色譜不同極性展開(kāi)系統(tǒng)，如石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮（8.0∶1.0∶1.0）、石油醚∶乙酸乙酯∶丙酮（8.5∶3.0∶1.5）、環(huán)己烷∶丙酮∶甲醇（8.5∶1.5∶0.4）等，最終確定以環(huán)己烷∶丙酮∶甲酸（8.5∶1.5∶0.4）為展開(kāi)系統(tǒng)，此展開(kāi)系統(tǒng)分離度較好，斑點(diǎn)清晰。以15 cm為展距，斑點(diǎn)分離度最佳，以10%硫酸乙醇溶液作為顯色劑，紫外燈（365 nm）下檢視。本試驗(yàn)建立的薄層色譜方法具有操作簡(jiǎn)單、可行性高、重復(fù)性好、斑點(diǎn)清晰等特點(diǎn)，因而可作為壯藥廣西鵝掌柴薄層鑒別的方法。

綜上所述，本研究建立的性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別及檢查項(xiàng)測(cè)定方法操作簡(jiǎn)單易行、穩(wěn)定可靠、重現(xiàn)性好、專屬性強(qiáng)、擬定范圍合理，可為提升壯藥廣西鵝掌柴藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供試驗(yàn)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 廣西壯族自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局.廣西壯族自治區(qū)壯藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（第1卷）［M］.南寧：廣西科學(xué)技術(shù)出版社，2008. 86-87.

［2］ 中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志（第54卷）［M］.北京：科學(xué)出版社， 2016. 38-39.

［3］ 蔡永敏.中藥藥名辭典［M］.北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，1996.34-35.

［4］ 鄭小吉，饒 軍，林偉波.嶺南中草藥圖譜［M］ .北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2016.163-164.

［5］ 朱 華，田 慧，蔡 毅.壯藥學(xué)［M］.南寧：廣西科學(xué)技術(shù)出版社，2015.71-72.

［6］ 章立華，劉 力，林小鳳，等.七葉蓮揮發(fā)油的GC/MS分析和抗炎鎮(zhèn)痛作用研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014， 42（23）：7732-7735.

［7］ 朱玲玲，陳寶軍.七葉蓮總皂苷體內(nèi)外降尿酸作用及對(duì)高尿酸血癥小鼠尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的影響［J］.新中醫(yī)，2018，50（5）：41-44.

［8］ NGOC T D，NGUYEN T L.Chemical composition and antimicrobial activity of essential oils from the leaves and stems of schefflera arboricola （Hayata） Merr. collected in Vietnam［J］.Journal of essential oil bearing plants， 2019，22（5）：1401-1406.

［9］ 洪佳妮，徐先祥，何定峰，等.大孔樹(shù)脂純化七葉蓮總?cè)乒に囇芯浚跩］.中華中醫(yī)藥雜志，2016，31（11）：4811-4814.

［10］ 龐素秋，孫愛(ài)靜，王國(guó)權(quán)，等.鵝掌柴的化學(xué)成分研究［J］.中藥材，2016， 39（2）：334-336.

［11］ 潘超美.中國(guó)民間生草藥原色圖譜（下冊(cè)）［M］.廣州：廣東科技出版社，2015.70-71.

［12］溫海成，劉華鋼，韋松基，等.壯藥盒果藤的鑒別特征研究［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2018，33（2）：737-740.

［13］ 謝澤碧，洪影雯，梁子寧，等.艷山姜果實(shí)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2022，61（21）：142-146.