鄧宛心，李 鯤，黃 藝，彭箬巖，王高玉，賈毅博，牛 毅，尹飛飛

（1.海南醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)院，海南 ?？?571199；2.海南醫(yī)學(xué)院-香港大學(xué)熱帶傳染病聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，海南 ?？?71199；3.中國(guó)疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所，北京 102206）

蜱蟲(chóng)是一種專性吸血的體外節(jié)肢動(dòng)物，能夠從各種宿主身上吸取血液，包括哺乳動(dòng)物、鳥(niǎo)類和爬行動(dòng)物，從而傳播各種疾病，被認(rèn)為是僅次于蚊子的重要傳播媒介［1］。在我國(guó)目前已發(fā)現(xiàn)的蜱共有10個(gè)屬，119 種，包括軟蜱13 種，硬蜱100 余種［2］。蜱可傳播多種病原，包括病毒、立克次體、原蟲(chóng)等［3，4］。其中微小扇頭蜱（Rhipicephalus microplus）在全球范圍普遍存在，特別是在熱帶與亞熱帶地區(qū)更為常見(jiàn)［5］。此類蜱蟲(chóng)被認(rèn)為是最主要的牛體外寄生蟲(chóng)之一，對(duì)乳制品和肉類產(chǎn)業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)影響［6］。無(wú)形體（Anaplasma）屬于立克次體目（Rickettsiales）無(wú)形體科（Anaplasmataceae）無(wú)形體屬（Anaplasma），是經(jīng)由蜱媒傳播的一種革蘭氏陰性、專性細(xì)胞內(nèi)寄生的細(xì)菌。無(wú)形體主要感染動(dòng)物，但偶爾也會(huì)感染人類，因此在獸醫(yī)學(xué)和人類公共衛(wèi)生領(lǐng)域均具有重要的研究意義。目前常見(jiàn)的無(wú)形體有7 種，分別是嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體（Anaplasma phagocytophilum）、牛無(wú)形體（Anaplasma bovis）、綿羊無(wú)形體（Anaplasma ovis）、扁平無(wú)形體（Anaplasma platys）、邊緣無(wú)形體（Anaplasma marginale）及中央無(wú)形體（Anaplasma centrale）和新發(fā)現(xiàn)的山羊無(wú)形體（Anaplasma capra）。具有人畜共患的特征，而其他類型的無(wú)形體則表現(xiàn)出明顯的宿主特異性，它們主要侵染動(dòng)物血細(xì)胞，引發(fā)無(wú)形體病。其主要臨床表征包括發(fā)熱、貧血、黃疸、流產(chǎn)、體弱和消瘦等，且在急性期可能導(dǎo)致動(dòng)物死亡［7］。

候選博萊無(wú)形體（Candidatus Anaplasma boleense）是一種新發(fā)現(xiàn)的暫定無(wú)形體種，最早于2014年中國(guó)新疆的亞洲璃眼蜱（Hyalommma asiaticum）中發(fā)現(xiàn)［8］，目前已有研究證明在我國(guó)牛和山羊體表的微小扇頭蜱中發(fā)現(xiàn)該無(wú)形體［9-11］。邊緣無(wú)形體是牛無(wú)形體病的病原體，在熱帶和亞熱帶地區(qū)廣泛存在，它能夠引起牛的流產(chǎn)、減產(chǎn)、溶血性貧血和死亡［12］。研究表明，牛體表蜱蟲(chóng)中普遍存在無(wú)形體病原，對(duì)牛體表蜱蟲(chóng)中的無(wú)形體病原感染情況進(jìn)行深入研究是至關(guān)重要的，然而，關(guān)于海南地區(qū)牛體表蜱蟲(chóng)中無(wú)形體病原的研究還相對(duì)不足。因此，本研究旨在調(diào)查海南牛體表蜱蟲(chóng)中的無(wú)形體屬病原體感染情況，以期為無(wú)形體的防治提供理論支持，減少其對(duì)畜牧業(yè)及公共衛(wèi)生所造成的經(jīng)濟(jì)損失和健康風(fēng)險(xiǎn)。

海南作為我國(guó)唯一全域位于熱帶的島嶼省份，全年高溫多雨植被茂盛，為蜱類的生長(zhǎng)提供了理想環(huán)境。迄今為止，海南省已報(bào)告發(fā)現(xiàn)6 屬20 種硬蜱，并且被認(rèn)為是斑點(diǎn)熱群立克次體的流行源地［13］。然而，關(guān)于海南地區(qū)牛體表蜱蟲(chóng)攜帶的病原體研究仍然較少。鑒于人們對(duì)牛肉及其制品的廣泛消費(fèi)，牛的養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，導(dǎo)致人接觸牛體表蜱蟲(chóng)攜帶的病原體風(fēng)險(xiǎn)增高，因此，研究海南地區(qū)牛體表蜱種及其攜帶的無(wú)形體病原體顯得尤為重要。本研究在海南中北部地區(qū)9 個(gè)縣市采集牛體表蜱蟲(chóng)，首先對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)鑒定，隨后采用PCR 方法對(duì)蜱攜帶的無(wú)形體屬病原體進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)獲得的陽(yáng)性樣本進(jìn)行病原體核酸片段測(cè)序和序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析，旨在為該地區(qū)無(wú)形體病的防控提供科學(xué)的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 樣本來(lái)源

2020～2022 年，在海南屯昌、臨高、?？?、儋州、瓊中、定安、萬(wàn)寧、瓊海、澄邁9 個(gè)縣市的牛體表進(jìn)行蜱蟲(chóng)樣本采集，共采集335 只蜱蟲(chóng)。樣本采集過(guò)程主要采用宿主體表檢查法，著重檢查牛體易被蜱蟲(chóng)叮咬的部位，如頸部、腋下、腹部、腳踝下方等部位，發(fā)現(xiàn)蜱蟲(chóng)后，用鑷子夾住蜱蟲(chóng)的頭部取下后，放置于2 mL 凍存管，記錄蜱蟲(chóng)采集時(shí)間和地點(diǎn)等信息，并存于-80 ℃冰箱中。

1.2 主要試劑

Go Taq?colorless MasterMix 購(gòu) 自 美 國(guó)Promega 公 司；E.Z.N.A.Mollusc DNA Kit 試 劑 盒 購(gòu) 自美國(guó)Omega 公司；GoodViewTM核酸染料購(gòu)自北京賽百盛公司；瓊脂糖購(gòu)自上海Baygene Biotechnnlogy 公 司；6×PCR Loading Buffer、D2000 DNA Marker 購(gòu)自北京天根生化科技有限公司。

1.3 蜱的形態(tài)學(xué)鑒定

借助體視顯微鏡，根據(jù)蜱蟲(chóng)的形態(tài)學(xué)差異，參照《醫(yī)學(xué)蜱螨學(xué)》鑒定蜱蟲(chóng)種類并拍攝相應(yīng)照片。

1.4 DNA 提取

根據(jù)形態(tài)學(xué)的鑒定結(jié)果，將蜱蟲(chóng)樣本單只放入1.5 mL 離心管中，加入500 μL PBS 進(jìn)行漂洗，每只蜱蟲(chóng)漂洗3 次，以確保將蜱蟲(chóng)的體表清洗干凈，加入300 μL PBS 進(jìn)行破碎，5 000 r/min 離心5 min 后，取上清后使用Omega E.Z.N.A.Mollusc DNA Kit 試劑盒提取樣本的DNA，并以其作為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)。

1.5 PCR 檢測(cè)

蜱種鑒定參照參考文獻(xiàn)［14］ITS2基因的引物序列，委托北京擎科生物科技股份有限公司海南分公司進(jìn)行引物合成。PCR 反應(yīng)體系（25.0 μL）：Go Taq?colorless Master Mix 12.5 μL，上、下 游 引 物（10 μmol/L）各1 μL，模板DNA 2 μL，用ddH2O 補(bǔ)足體系體積。PCR 反應(yīng)程序： 94 ℃ 預(yù)變性 5 min；94 ℃ 變性 30 s，58 ℃ 退火 1 min，72 ℃ 延伸 1 min，35 個(gè)循環(huán)；最后72 ℃延伸10 min。PCR 產(chǎn)物經(jīng) 1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，陽(yáng)性樣本取10 μL PCR 產(chǎn)物送至北京擎科生物科技股份有限公司海南分公司進(jìn)行Sanger 測(cè)序。

為檢測(cè)蜱蟲(chóng)樣本中無(wú)形體屬病原攜帶情況，首先用nest-PCR 擴(kuò)增16S rRNA基因的部分保守區(qū)，以檢測(cè)蜱樣品中的無(wú)形體，檢測(cè)無(wú)形體屬病原所用引物參照參考文獻(xiàn)［10，15］。為進(jìn)步鑒定無(wú)形體的種，將nest-PCR 檢測(cè)到的陽(yáng)性樣本用16S rRNA基因（1 278 bp）、gltA基因（745 bp）和groEL基因（1 080 bp）保守區(qū)引物進(jìn)行擴(kuò)增。經(jīng)瓊脂糖凝膠上電泳分析，陽(yáng)性結(jié)果克隆到pMD19-T 克隆載體（Ta-KaRa）中，進(jìn)行克隆和Sanger 測(cè)序。本研究使用的引物信息見(jiàn)表1。

表1 相關(guān)引物信息Tab 1 The information of relevant primers

1.6 系統(tǒng)發(fā)育分析

從NCBI 基因庫(kù)中下載蜱蟲(chóng)和無(wú)形體屬病原的參考株序列，與本實(shí)驗(yàn)中獲得的樣本序列一起構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。使用MEGA Ⅹ軟件的Clustal W 進(jìn)行比對(duì)，使用最大似然法（maximum likelihood， ML），LG Model，1 000 次重復(fù)構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)，以分析海南牛體表蜱蟲(chóng)攜帶無(wú)形體病原的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 樣本分布及蜱種鑒定

2020～2022 年，在海南9 個(gè)縣市的牛體表采集蜱蟲(chóng)335 只，其中臨高40 只、澄邁35 只、?？?0 只、定 安25 只、屯 昌70 只、瓊 中65 只、萬(wàn) 寧45 只、瓊 海20 只、儋州15 只。經(jīng)過(guò)形態(tài)學(xué)鑒定，所采集蜱種為血紅扇頭蜱（Rhipicephalus sanguineus）和微小扇頭蜱，蜱蟲(chóng)外部形態(tài)如圖1 所示。基于蜱蟲(chóng)ITS2 基因設(shè)計(jì)引物，進(jìn)行PCR 擴(kuò)增，血紅扇頭蜱和微小扇頭蜱獲得擴(kuò)增條帶大小均為1 414 bp，與預(yù)期符合。PCR 產(chǎn)物測(cè)序后在NCBI 數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行BLAST 比對(duì)，與形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果相符。本研究在澄邁、?？?、瓊中、萬(wàn)寧、瓊海、儋州采集的蜱蟲(chóng)均為微小扇頭蜱，臨高、定安、屯昌采集的蜱蟲(chóng)包括血紅扇頭蜱和微小扇頭蜱2 種。335 只蜱蟲(chóng)中血紅扇頭蜱為44只，占13.13%，微小扇頭蜱為291 只，占86.87%。

圖1 蜱種形態(tài)學(xué)鑒定Fig 1 Morphological of tick sample

基于ITS2 基因用MEGA-X 軟件選擇本實(shí)驗(yàn)中獲得的代表性蜱種基因序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)見(jiàn)圖2。分析結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)的蜱種鑒定序列處于兩個(gè)大分支上面，其中樣本QZLH-T101 與DAHLT177、CM-T170 與QZLD-T197、GLY-T51 與TCT6、DZ-T73 與TCXFX-T131 的親緣關(guān)系較近，與已知的來(lái)自中國(guó)河南的微小扇頭蜱（JF758640.1）處于同一分支上面；LG-T27 與LG-T42、LG-T134 與DAHL-T182 親緣關(guān)系較近，與已知來(lái)自中國(guó)浙江的血紅扇頭蜱（JQ625707.1）處于同一分支上。

圖2 海南蜱類之間的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系Fig 2 Phylogenetic relationships between ticks found in Hainan

2.2 無(wú)形體屬病原的檢測(cè)結(jié)果

針對(duì)本項(xiàng)目采集的335 只蜱蟲(chóng)，利用無(wú)形體屬病原16S rRNA、groEL和gltA基因的特異性引物進(jìn)行PCR 檢測(cè)，陽(yáng)性樣本進(jìn)行Sanger 測(cè)序，并對(duì)獲得的基因序列在NCBI 數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行blast 比對(duì)分析。結(jié)果表明，在定安采集的11 只微小扇頭蜱中有2 只蜱蟲(chóng)攜帶候選博萊無(wú)形體，陽(yáng)性率為18.18%；在儋州采集的15 只微小扇頭蜱中有3 只攜帶邊緣無(wú)形體，陽(yáng)性率為20.00%；在臨高、澄邁、?？凇⑼筒?、瓊中、萬(wàn)寧、瓊海中的蜱蟲(chóng)中均未檢測(cè)到無(wú)形體屬病原。335 只蜱蟲(chóng)中檢測(cè)到候選博萊無(wú)形體、邊緣無(wú)形體兩種無(wú)形體屬病原，陽(yáng)性率分別為0.60%（2/335），0.90%（3/335）。 各 縣 市 陽(yáng) 性 率 情 況見(jiàn)表2。

表2 各縣市蜱蟲(chóng)攜帶無(wú)形體屬病原檢測(cè)結(jié)果Tab 2 Detection results of Anaplasma pathogens carried by ticks in various counties and cities

2.3 系統(tǒng)發(fā)育分析

通過(guò)NCBI 下載基于16S rRNA、groEL和gltA3 個(gè)基因的參考株序列，與從蜱蟲(chóng)篩查到的陽(yáng)性樣本序列一起放在MEGA X 中制作進(jìn)化樹(shù)。基于16S rRNA基因序列的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析與比對(duì)分析結(jié)果表明，在定安微小扇頭蜱中檢測(cè)到的2 條候選博萊無(wú)形體的核苷酸相似度達(dá)到99.8%，與在中國(guó)武漢微小扇頭蜱中發(fā)現(xiàn)的兩條序列C.Anaplasma boleensestrain WHBMXZ-139（KX987335.1）和C.Anaplasma boleensestrain WHBMXZ - 151（KX987333.1）在同一支上，而與在中國(guó)武漢牛體表微小扇頭蜱C.Anaplasma boleenseisolate 126（OP748985.1）序列親緣關(guān)系較遠(yuǎn)；在儋州微小扇頭蜱中檢測(cè)到的3 條邊緣無(wú)形體的核酸相似度在99.99%～100%之間，與在烏干達(dá)地區(qū)牛中發(fā)現(xiàn)的A.marginalestrain Uganda MT27（KU686794.1）在同一支上，與在中國(guó)浙江三帶喙庫(kù)蚊中發(fā)現(xiàn)的A.marginale（KU586072.1）序列親緣關(guān)系較遠(yuǎn)（圖3）。

圖3 基于無(wú)形體16S rRNA 基因核苷酸序列的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig 3 Phylogenetic tree based on the nucleotide sequences of 16S rRNA genes of Anaplasma strains

基于gltA基因序列的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析結(jié)果表明，在定安微小扇頭蜱中檢測(cè)到的2 條候選博萊無(wú)形體的核苷酸相似度達(dá)到97.6%，與在中國(guó)武漢白腹叢蚊（Armigeres subalbatus）中發(fā)現(xiàn)的C.Anaplasma boleenseisolate WHARSP-38（KU586324.1）在同一支上，并且核酸相似度99.58%，與在中國(guó)江西白腹叢蚊中發(fā)現(xiàn)的C.Anaplasma boleenseisolate JXARSA-5（KU586314.1）序列親緣關(guān)系較遠(yuǎn)（圖4）。基于groEL基因序列的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析結(jié)果表明，在儋州微小扇頭蜱中檢測(cè)到的3 條邊緣無(wú)形體的核酸相似度在100%，與在中國(guó)武漢微小扇頭蜱中發(fā)現(xiàn)的A.marginale strainWHBMXZ-130（KX987398.1）在同一支，并且核酸相似度100%，與在中國(guó)武漢微小扇頭蜱中的A.marginalestrain WHBMXZ-90-2（KX987395.1）序列親緣關(guān)系較遠(yuǎn)；在定安微小扇頭蜱中檢測(cè)到的1 條候選博萊無(wú)形體的核苷酸序列，與中國(guó)武漢微小扇頭蜱中發(fā)現(xiàn)的兩條序列C.Anaplasma boleensestrain WHBMXZ-139（KX987392.1）和C.Anaplasma boleensestrain WHBMXZ-151（KX987390.1）在同一支上（圖5）。

圖4 基于無(wú)形體gltA 基因核苷酸序列的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig 4 Phylogenetic tree based on the nucleotide sequences of gltA genes of Anaplasma strains

圖5 基于無(wú)形體groEL 基因核苷酸序列的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig 5 Phylogenetic tree based on the nucleotide sequences of groEL genes of Anaplasma strains

3 討論

3.1 牛體表蜱種

蜱蟲(chóng)是牛體表的常見(jiàn)寄生蟲(chóng)。多項(xiàng)研究表明，牛蜱屬、扇頭蜱屬、血蜱屬、璃眼蜱屬等多種蜱類可在牛體表寄生［16］，并且，不同地理環(huán)境下的優(yōu)勢(shì)蜱種存在顯著差異。對(duì)泰國(guó)東北部牛體表蜱種的研究發(fā)現(xiàn)，微小扇頭蜱是優(yōu)勢(shì)種［17］。同樣，在中國(guó)的廣東、廣西、云南、陜西漢中市、福建龍巖地區(qū)的研究中，也發(fā)現(xiàn)微小扇頭蜱是牛體表的主要寄生蜱種［18-22］，而在青海、新疆、東北三省份的牛體表并未發(fā)現(xiàn)微小扇頭蜱［23-26］。呼倫貝爾地區(qū)牛體表優(yōu)勢(shì)蜱種為草原革蜱［27］，而新疆牛優(yōu)勢(shì)蜱種為璃眼蜱屬、扇頭蜱屬和血蜱屬［28］。在海南澄邁地區(qū)，牛體表采集的蜱為微小扇頭蜱［29］。本研究采用形態(tài)學(xué)結(jié)合分子生物學(xué)的方法，準(zhǔn)確鑒定出海南中北部地區(qū)牛體表寄生蜱為血紅扇頭蜱和微小扇頭蜱，并且發(fā)現(xiàn)微小扇頭蜱是該地區(qū)的優(yōu)勢(shì)種，與國(guó)內(nèi)廣東、廣西、云南、陜西漢中市、福建龍巖地區(qū)的研究發(fā)現(xiàn)一致。本研究基于ITS2 基因構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析表明，本研究所獲得的蜱蟲(chóng)序列處于兩個(gè)大分支上，與已知的序列高度相似，揭示了它們之間較為緊密的親緣關(guān)系。前期研究報(bào)道，微小扇頭蜱攜帶包括牛巴貝斯蟲(chóng)（Babesia bovis）、邊緣無(wú)形體、反芻埃立克體（E.ruminantium）和普氏立克次體（Rickettsia parkeri）等多種病原體，顯示其在人畜共患病病原傳播中的關(guān)鍵作用［30-32］。該種蜱蟲(chóng)在華中和西南地區(qū)廣泛分布，在中國(guó)多達(dá)665 個(gè)縣區(qū)有記錄，尤其適應(yīng)南部氣候溫暖潮濕、季節(jié)性溫度變化小的環(huán)境［33］。海南島炎熱的氣候條件為微小扇頭蜱提供了良好的生存環(huán)境，因此，對(duì)海南微小扇頭蜱進(jìn)行深入研究具有重要的實(shí)際意義。

本研究中采集的樣本僅限于海南島中北部的9個(gè)縣市，這可能在一定程度上影響了研究結(jié)果的普遍性和代表性。為全面掌握海南省內(nèi)牛體表蜱蟲(chóng)的種類分布，未來(lái)研究應(yīng)當(dāng)擴(kuò)展采樣范圍，增加樣本量。同時(shí)，對(duì)不同牛種體表蜱蟲(chóng)種類的差異性分析也是獲得更全面數(shù)據(jù)的關(guān)鍵，對(duì)于有效防控蜱蟲(chóng)傳播的疾病具有重大意義。

3.2 牛體表蜱蟲(chóng)攜帶無(wú)形體屬病原體

國(guó)內(nèi)外關(guān)于蜱蟲(chóng)攜帶無(wú)形體屬病原的報(bào)道有很多。Hosseini-Chegeni 等［34］從伊朗3 個(gè)地區(qū)采集130只蜱蟲(chóng)，包括亞洲璃眼蜱、單峰駝璃眼蜱（Hyalomma dromedarii）、血紅扇頭蜱和牛蜱（Rhipicephalus/Boophilus），并在牛蜱和血紅扇頭蜱中分別獲得一條邊緣無(wú)形體序列和2 條綿羊無(wú)形體序列。對(duì)泰國(guó)東北部的12 個(gè)省采集的牛體表蜱蟲(chóng)的研究表明，微小扇頭蜱是優(yōu)勢(shì)蜱種，此外還有血紅扇頭蜱和Haemaphysalis bispinosa等蜱種，在微小扇頭蜱中發(fā)現(xiàn)邊緣無(wú)形體、扁平無(wú)形體、和未鑒定的無(wú)形體，陽(yáng)性率分別為19.08%、1.97%和0.66%［17］。Xu 等［6］在湖南岳陽(yáng)牛體表采集465 只蜱蟲(chóng)均為微小扇頭蜱，經(jīng)過(guò)PCR 檢測(cè)發(fā)現(xiàn)邊緣無(wú)形體、候選博萊無(wú)形體、立克次體暫定種（C.Rickettsia xinyangensis）、扁平無(wú)形體和牛無(wú)形體，陽(yáng)性率分別為0.6%，1.9%，1.5%，1.3%，1.17%。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)海南9 個(gè)縣市牛體表采集的蜱蟲(chóng)進(jìn)行無(wú)形體屬病原16S rRNA和gltA和groEL基因的PCR 檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)候選博萊無(wú)形體和邊緣無(wú)形體陽(yáng)性率分別為0.60%（2/335），0.90%（3/335），并未檢測(cè)到嗜吞噬細(xì)胞無(wú)形體，與現(xiàn)有研究相一致。研究報(bào)道，邊緣無(wú)形體能夠引起牛無(wú)形體病，導(dǎo)致牛的溶血性貧血、流產(chǎn)、減產(chǎn)和死亡等［12，35］。本次研究中攜帶邊緣無(wú)形體的微小扇頭蜱均采自牛體表，目前尚不確定這些牛的感染和致病情況。因此，未來(lái)工作中我們需要加強(qiáng)對(duì)牛攜帶的病原體及其致病情況進(jìn)行更加深入的研究。

微小扇頭蜱雖然通常被視為牛的主要寄生蜱種，然而，研究顯示其同樣能夠寄生于多種家畜和野生動(dòng)物，包括羊、狗、豬、鵝、兔子、貓、馬、鹿等［9，30，36-40］。值得注意的是，一些研究報(bào)告還提到，在特定情況下，微小扇頭蜱可能會(huì)叮咬人類［41］。特別是在牧區(qū)，由于牧民與家畜間存在頻繁的接觸，人類被微小扇頭蜱叮咬的風(fēng)險(xiǎn)相應(yīng)增加。這意味著微小扇頭蜱作為病原體的潛在傳播者，其影響范圍不僅局限于家畜，還可能擴(kuò)展至人類。鑒于此，為有效降低蜱蟲(chóng)叮咬及蜱傳疾病的風(fēng)險(xiǎn)，牧民應(yīng)采取更為嚴(yán)格的衛(wèi)生管理措施，包括加強(qiáng)牛圈的衛(wèi)生條件，定期對(duì)牛群進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)處理，以及實(shí)施有效的防蜱滅蜱等策略。通過(guò)這些措施，可以在一定程度上減少微小扇頭蜱與牲畜及人類的接觸機(jī)會(huì)，從而降低病原體傳播的可能性。最后，加強(qiáng)對(duì)蜱種及其攜帶病原體的監(jiān)測(cè)和控制，對(duì)于保障公共衛(wèi)生安全和動(dòng)物健康具有重要意義。

在海南中北部縣市的牛體表采集蜱蟲(chóng)，通過(guò)形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)鑒定發(fā)現(xiàn)，微小扇頭蜱為優(yōu)勢(shì)種，其次為血紅扇頭蜱。此外，采用PCR 方法對(duì)蜱蟲(chóng)進(jìn)行無(wú)形體屬病原體的檢測(cè)，結(jié)果顯示牛體表蜱蟲(chóng)攜帶候選博萊無(wú)形體和邊緣無(wú)形體，陽(yáng)性率分別為0.60%（2/335），0.90%（3/335）。

作者貢獻(xiàn)度說(shuō)明：

鄧宛心：實(shí)驗(yàn)操作并撰寫(xiě)論文；李鯤：負(fù)責(zé)論文審閱與修改；黃藝、彭箬巖、王高玉、賈毅博、牛毅：負(fù)責(zé)樣本收集、分裝及數(shù)據(jù)整理；尹飛飛：全程參與、指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)操作并修改論文。

所有作者聲明不存在利益沖突關(guān)系。