高麗 李文華 谷麗麗

作者單位?河南省直第三人民醫(yī)院（鄭州 450000），E-mail：gaoliqm1985@163.com

引用信息?高麗，李文華，谷麗麗.急性腦梗死病人血清miR-25表達水平及其對近期預后的預測價值［J］.中西醫(yī)結合心腦血管病雜志，2024，22（7）：1327-1330.

摘要?目的：探討急性腦梗死病人血清miR-25表達及其對近期預后不良的預測價值。方法：將2020年5月—2022年1月本院收治的179例急性腦梗死病人設為研究組，另將同期在本院體檢的163例健康體檢者設為對照組，均行血清miR-25表達水平檢測并對比。隨訪3個月，根據(jù)改良Rankin量表（mRS）評分將研究組分為預后良好組（mRS評分≤2分）和預后不良組（mRS評分＞2分），對比預后良好組與預后不良組血清miR-25表達水平。采用Logistic回歸分析法分析急性腦梗死病人近期預后不良的影響因素；采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清miR-25表達水平對急性腦梗死病人近期預后不良的預測價值。結果：研究組血清miR-25表達水平低于對照組（P＜0.05）。急性腦梗死病人近期預后不良的發(fā)生率為42.46%，預后不良組年齡、心房顫動比例、入院美國國立衛(wèi)生院卒中量表（NIHSS）評分、梗死體積、發(fā)病至治療時間、血清胱抑素C（CysC）水平均高于預后良好組，血清miR-25表達水平低于預后良好組（P＜0.05）。年齡、心房顫動、入院NIHSS評分、梗死體積、發(fā)病至治療時間、血清CysC水平、血清miR-25表達水平均是急性腦梗死病人近期預后不良的影響因素（P＜0.05）。血清miR-25表達水平預測急性腦梗死病人近期預后不良的最佳截斷值、敏感度、特異度、ROC曲線下面積（AUC）分別是0.640、72.37%、65.05%、0.731。結論：急性腦梗死病人血清miR-25表達水平降低，且為急性腦梗死病人近期預后不良的影響因素，對近期預后不良有一定的預測價值。

關鍵詞?急性腦梗死；血清miR-25；預后不良；影響因素；預測價值

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.07.032

急性腦梗死是指因腦血流減少或中斷所導致的腦組織缺血性壞死，臨床多表現(xiàn)為頭痛、頭暈、吞咽困難、言語不清等癥狀，且隨著病情的進一步發(fā)展，可引起偏癱、意識障礙、呼吸驟停等，嚴重威脅著病人的生命安全［1］。急性腦梗死起病突然且病情進展較快，若不能及時診治，則預后較差，后期病死率、致殘率較高［2］。因此，尋找能有效預測急性腦梗死病人近期預后不良的相關指標以指導臨床干預具有重要意義。微小RNA（miRNA）因其檢測精準、不易降解的特點已作為多種疾病的生物標志物被廣泛研究，既往報道顯示，miR-409-3p、miR-133等miRNA已應用到急性腦梗死的相關研究中［3-4］。miR-25作為miRNA家族中的一員，已有研究證實，其在心腦血管中發(fā)揮著重要作用［5］。Guo等［6］研究發(fā)現(xiàn)缺血皮質中miR-25的增加能促進腦缺血后成人神經(jīng)干細胞的增殖，提示miR-25能修復腦神經(jīng)損傷；Kuang等［7］研究顯示，miR-25能提高自噬通量，進而誘導臨床腦卒中模型的神經(jīng)保護。以上研究均表明，miR-25對腦損傷病人的神經(jīng)功能有保護及修復的功能，但miR-25在急性腦梗死病人體內的表達情況及其對病人近期預后不良的預測效能相關研究較少。鑒于此，本研究選取179例急性腦梗死病人，通過檢測血清miR-25表達水平，探討其與急性腦梗死近期預后不良的關系，并分析其預測價值，以為臨床預防急性腦梗死病人近期預后不良提供參考依據(jù)。

1?資料與方法

1.1?一般資料

選取2020年5月—2022年1月本院收治的179例急性腦梗死病人設為研究組，另選取同期在本院體檢的163名健康體檢者設為對照組。研究組，男102例，女77例；年齡42～78（64.92±9.26）歲。對照組，男85名，女78名；年齡38～76（63.15±8.75）歲。兩組性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。研究組納入標準：1）符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》［8］中的相關診斷標準：急性起病；一側面部或肢體無力、語言障礙等局灶性神經(jīng)功能缺損，少數(shù)表現(xiàn)為全面性神經(jīng)功能缺損；入院后影像學檢查顯示責任病灶或癥狀/體征持續(xù)超過24 h；排除非血管性病因；頭部CT/磁共振成像（MRI）排除腦出血；2）初次發(fā)作；3）于發(fā)病后24 h內就診；4）病人知曉本研究并簽署知情同意書。排除標準：1）合并有惡性腫瘤或心血管疾病；2）存在顱內感染、腦出血、顱內腫瘤等其他顱內疾?。?）存在嚴重的器官功能不全；4）入院前1周使用過抗凝藥物；5）既往有意識障礙或精神病史；6）妊娠或哺乳期婦女。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過。

1.2?方法

1.2.1?一般資料收集

1）收集病人的年齡、吸煙史、飲酒史、高血壓病史、心房顫動病史等資料，詢問記錄病人的發(fā)病至治療時間，并在病人入院時行神經(jīng)功能缺損［美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）］［9］評定：量表共11項評估項目，評分范圍0～42分，分數(shù)越高表示神經(jīng)功能受損越嚴重。2）根據(jù)病人的頭部CT計算梗死體積：梗死體積＝長×寬×層數(shù)×π/6。3）抽取病人入院后第2天空腹靜脈血5 mL，室溫下靜置30 min后用離心機離心，轉速3 000 r/min，時間10 min，取上清液置于－20 ℃環(huán)境中低溫保存待測，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中的空腹血糖（FBG）、血肌酐（Scr）、胱抑素C（CysC）水平，試劑盒由上海機純實業(yè)有限公司提供。

1.2.2?血清miR-25表達水平檢測

采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應（qRT-PCR）法檢測兩組受試者的血清miR-25表達水平。提取待測血清中的總RNA，測定RNA的濃度及純度；反應體系：PrimeScript RT Enzyme Mix 1 μL，5×PrimeScript Buffer 7 μL，RNA模板6 μL，無RNA酶水2 μL，總反應體積25 μL，反應條件為40 ℃ 60 min，85 ℃ 4 min；以U6為內參，正向引物0.8 μL，反向引物0.8 μL，合成的cDNA為模板，反應體系為SYRR Green Mix 9 μL，cDNA模板2 μL，無RNA酶水7 μL，Rox Reference Dye 0.4 μL，反應總體積20 μL，反應條件為95 ℃ 10 min，95 ℃ 5 s，60 ℃ 60 s，共40個循環(huán)，進行聚合酶鏈反應。U6正向引物序列為5′-TGACTTACGTGTACTCCGTG-3′，反向引物序列為5′-GGCTAGCGTGCATAGGAGTC-3′；miR-25正向引物序列為5′-GCGGCACGTGATATCCCGTG-3′，反向引物序列為5′-CCGCTGATCACGTACATGCA-3′。采用2－△△CT法計算血清miR-25相對表達量。

1.2.3?研究方法

依據(jù)《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》中的治療流程統(tǒng)一給予入院病人吸氧、心電監(jiān)護、血壓及血糖控制等基礎治療，并給予改善腦循環(huán)、降脂及神經(jīng)保護等特異性治療。于病人入院后90 d應用改良Rankin（mRS）量表［10］評價病人的預后情況，≤2分者納入預后良好組，＞2分者納入預后不良組。比較研究組與對照組、預后不良組與預后良好組血清miR-25表達水平。

1.3?統(tǒng)計學處理

采用SPSS 25.0軟件進行統(tǒng)計分析。符合正態(tài)分布的定量資料以均數(shù)±標準差（x±s）描述，采用t檢驗進行統(tǒng)計分析；定性資料以例數(shù)、百分比（%）表示，采用χ2檢驗進行統(tǒng)計分析；采用Logistic多元回歸分析急性腦梗死病人近期預后不良的影響因素；采用受試者工作特征（ROC）曲線分析血清miR-25表達水平對急性腦梗死病人近期預后不良的預測價值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2?結?果

2.1?研究組與對照組血清miR-25表達水平比較

研究組血清miR-25表達水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1?研究組與對照組血清miR-25表達水平比較（x±s）

組別樣本量miR-25

研究組1790.64±0.05

對照組1630.88±0.12

注：兩組比較，t＝－24.525，P＜0.05。

2.2?預后不良組與預后良好組一般資料及血清miR-25表達水平比較

179例急性腦梗死病人中，預后不良76例，發(fā)生率為42.46%。預后不良組年齡、心房顫動比例、入院NIHSS評分、梗死體積、發(fā)病至治療時間、血清CysC水平均高于預后良好組，血清miR-25表達水平低于預后良好組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

2.3?急性腦梗死病人近期預后不良的影響因素

以年齡、性別、吸煙史、飲酒史、高血壓、心房顫動、入院NIHSS評分、梗死體積、發(fā)病至治療時間、FBG、CysC、Scr、miR-25為自變量，以近期預后不良為因變量，變量賦值見表3。Logistic回歸分析結果顯示：年齡、心房顫動、入院NIHSS評分、梗死體積、發(fā)病至治療時間、血清CysC水平、血清miR-25表達水平均是急性腦梗死病人近期預后不良的影響因素（P＜0.05）。詳見表4。

2.4?血清miR-25表達水平對急性腦梗死病人近期預后不良的預測價值

血清miR-25表達水平預測急性腦梗死病人近期預后不良的最佳截斷值為0.640，敏感度為72.37%，特異度為65.05%，AUC為0.731［95%CI（0.659，0.794］。詳見圖1。

3?討?論

近年來，隨著生活習慣、社會環(huán)境等變化，急性腦梗死在40～80歲的中老年人群中呈高發(fā)狀態(tài)。既往調查發(fā)現(xiàn)，急性腦梗死難以治愈且病情發(fā)展較快，若不及時診治，病死率可達25%左右，且多數(shù)病人預后不良，致殘率較高［11］。本研究中急性腦梗死病人近期預后不良的發(fā)生率為42.46%，與段慶希等［12］報道的41.67%相當，提示急性腦梗死病人近期預后不良比例較高，探討其影響因素及相關預測因子十分必要。

本研究中，研究組血清miR-25表達水平低于對照組，提示急性腦梗死病人miR-25含量降低。miRNA是一類長度在21～25個核苷酸之間的非編碼微小RNA，其通過控制轉錄和翻譯參與了機體內幾乎所有的生物過程，既往研究顯示，miRNA在腦動脈的生理和病理調節(jié)中發(fā)揮著重要作用［13］，因此，miRNA可能為急性腦梗死的生物標志物。miR-25是常見的癌癥相關調節(jié)因子，在胃癌、肺癌、食管癌、乳腺癌等多種癌癥的發(fā)展中均起著促進作用［14］。miR-25在急性腦梗死中的作用機制尚不明確，但Cao等［15］通過體外實驗，用大黃素升高了miR-25的表達水平，從而減弱了因缺氧引發(fā)的細胞損傷，推測miR-25對腦組織具有保護作用。此外，本研究發(fā)現(xiàn)預后不良組血清miR-25表達水平低于預后良好組，且經(jīng)進一步Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，血清miR-25表達水平為急性腦梗死病人近期預后不良的影響因素。急性腦梗死預后不良主要為腦組織損傷所致，而Zhou等［16］研究報道，miR-25可通過抑制組蛋白去乙?；?（HDAC3）和Ataxin-3（ATXN3）來預防腦卒中模型大鼠的神經(jīng)元損傷并能促進神經(jīng)功能恢復，所以miR-25有助于改善急性腦梗死病人預后。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)血清miR-25表達水平預測急性腦梗死病人近期預后不良的敏感度為72.37%，特異度為65.05%，AUC為0.731，提示血清miR-25表達水平對急性腦梗死病人近期預后不良具有一定的預測價值。因此，對于急性腦梗死病人，臨床可采用生物標志物預測的方式對其病情進行監(jiān)測，及時診治，降低其預后不良的風險。

此外，本研究發(fā)現(xiàn)，年齡、心房顫動、入院NIHSS評分、梗死體積、發(fā)病至治療時間、CysC均是急性腦梗死病人近期預后不良的影響因素。機體各項功能隨著年齡的增加逐漸減退，使得病人在發(fā)生急性腦梗死后恢復所需時間更長且預后較差。心房顫動易產(chǎn)生房內血栓，血栓通過血液循環(huán)進入腦血管造成血管阻塞，發(fā)生腦梗死，既往調查顯示，心房顫動病史的人群發(fā)生急性腦梗死的概率更高且易復發(fā)［17］。NIHSS評分能反映急性腦梗死病人神經(jīng)功能的受損程度，NIHSS評分越高，說明受損越嚴重，預后越差。梗死體積越大的病人在急性期越易出現(xiàn)腦水腫、顱壓升高、梗死后出血等癥狀，病人死亡率較高且預后較差［18］。急性腦梗死病情進展迅速，病人預后情況與是否能接受及時診治關系密切，發(fā)病至治療時間間隔越長，病人病情越嚴重，預后效果越差。CysC可通過促進炎癥反應和血管損傷來參與急性腦梗死的發(fā)生發(fā)展，已有研究顯示

，重癥急性腦梗死病人體內CysC水平升高［19］。因此，建議臨床加強上述影響因素中可調控因素的監(jiān)控，以降低急性腦梗死病人近期預后不良的比例。

綜上所述，急性腦梗死病人的血清miR-25表達水平低于健康者，對于近期預后不良的病人其水平更低，且為急性腦梗死病人近期預后不良的影響因素，并對急性腦梗死病人近期預后不良有一定的預測價值，可作為臨床監(jiān)控指標，指導預后不良的判斷和治療。

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（收稿日期：2022-08-10）

（本文編輯王麗）