王榮　鄭瑞瑞　馬力　郄杏桃　閆喜中　郝赤

摘要：植物源殺蟲(chóng)劑相較于化學(xué)農(nóng)藥，具有源于自然易分解、生物活性多樣、害蟲(chóng)不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)。為研制高效低毒的植物源殺蟲(chóng)劑，為開(kāi)發(fā)研究新型植物殺蟲(chóng)劑提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)，從已報(bào)道的具有殺蟲(chóng)活性的5 個(gè)科中選取丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角5 種植物，并在室內(nèi)測(cè)定5 種植物水醇提取物對(duì)小菜蛾3 種蟲(chóng)態(tài)的生物活性。采用浸卵法、浸葉法和非選擇葉盤(pán)法測(cè)定5 種植物提取物對(duì)小菜蛾卵觸殺、幼蟲(chóng)胃毒、成蟲(chóng)產(chǎn)卵忌避效果；并通過(guò)高倍顯微鏡觀(guān)察5 種植物提取物處理后小菜蛾卵的外部形態(tài)。結(jié)果表明，5 種植物提取物對(duì)小菜蛾卵和幼蟲(chóng)均有顯著的殺蟲(chóng)活性，對(duì)成蟲(chóng)具有產(chǎn)卵忌避活性，生物活性與劑量基本呈正相關(guān)；在植物提取物質(zhì)量濃度為100 mg/mL時(shí)，對(duì)小菜蛾卵和幼蟲(chóng)的校正死亡率以及成蟲(chóng)產(chǎn)卵忌避率均在85% 以上。丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角提取物對(duì)小菜蛾卵的毒力LC50 分別為9.57、16.16、20.42、9.00、7.57 mg/mL，對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的毒力LC50 分別為7.46、13.49、21.31、54.67、9.87 mg/mL。其中，丁香提取物對(duì)小菜蛾卵和幼蟲(chóng)的毒力最高；5 種植物提取物處理后的小菜蛾卵發(fā)育受到影響，卵內(nèi)組織器官發(fā)育受阻或蟲(chóng)體畸形。丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角提取物具有作為植物源殺蟲(chóng)劑材料來(lái)源用于防控小菜蛾的潛在價(jià)值。

關(guān)鍵詞：小菜蛾；植物提取物；觸殺活性；產(chǎn)卵忌避；卵形態(tài)

中圖分類(lèi)號(hào)：S482.3+9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1002?2481（2024）01?0115?09

小菜蛾P(guān)lutella xylostella L. 是為害十字花科蔬菜最重要的害蟲(chóng)之一[1]，每年在全球造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)40～50 億美元，我國(guó)每年對(duì)小菜蛾的防治費(fèi)用就超過(guò)7.7 億美元[2]。為追求防效，長(zhǎng)期濫用化學(xué)農(nóng)藥導(dǎo)致小菜蛾幾乎對(duì)所有化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生了不同水平的抗性[3]。因此，尋求新型高效、低毒、低殘留的殺蟲(chóng)劑防治小菜蛾刻不容緩。植物源殺蟲(chóng)劑源于自然，具有易降解、無(wú)殘留污染、殺蟲(chóng)活性的成分種類(lèi)多等優(yōu)點(diǎn)，是天然的混配劑，可以有效控制害蟲(chóng)的發(fā)生為害，且不易產(chǎn)生抗藥性，受到科學(xué)研究者的關(guān)注和重視[4]。

近年來(lái)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)230 余種植物提取物具有殺卵[5]、殺蟲(chóng)[6]、拒食[7]、驅(qū)避[8]等生物活性。因此，植物提取物對(duì)害蟲(chóng)具有防控作用，具有開(kāi)發(fā)為植物源殺蟲(chóng)劑的潛力。50 g/L 八角茴香精油在空倉(cāng)條件下對(duì)赤擬谷盜Tribolium castaneum 成蟲(chóng)具有熏蒸毒殺作用[9]；有研究結(jié)果顯示，八角茴香精油24 h 內(nèi)對(duì)斑翅果蠅Drosophila suzukii 的熏蒸死亡率達(dá)80% 以上[10]；張惠麗等[11]研究結(jié)果表明，丹參丙酮提取物對(duì)小菜蛾具有致死和拒食作用，其濃度與致死效果及拒食效果呈負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.973和-0.976。許多研究表明，植物提取物對(duì)小菜蛾有滅殺活性以及殺卵作用，如穿心蓮Andrographispaniculate 的乙酸乙酯及乙醇提取物對(duì)小菜蛾具有滅殺活性[12]；油桐Vernicia fordii 桐籽粕乙酸乙酯及石油醚提取物對(duì)小菜蛾具有強(qiáng)毒性[13]；4 種茼蒿素類(lèi)似物對(duì)小菜蛾的卵孵化具有抑制作用以及殺卵活性[14]；印楝Azadirachta indica 和煙草Nicotianatabacum 水提物對(duì)小菜蛾卵具有毒殺活性[15]。

目前，植物的次生代謝產(chǎn)物已被廣泛應(yīng)用于食品加工、醫(yī)療保健、美妝等多個(gè)領(lǐng)域，其中生物堿、類(lèi)黃酮、萜類(lèi)、固醇類(lèi)化合物已被證明具有廣譜的殺蟲(chóng)活性[16]。此外，大量的植物代謝產(chǎn)物對(duì)小菜蛾具有生物活性已被證實(shí)[16-18]。但是國(guó)內(nèi)外對(duì)此類(lèi)藥劑的研究主要集中在精油成分對(duì)小菜蛾的生物活性測(cè)定，關(guān)于植物的水醇提取物對(duì)小菜蛾卵期、幼蟲(chóng)、成蟲(chóng)的生物活性研究較少。

據(jù)報(bào)道，桃金娘科植物的枝、葉等部位的乙醇提取液對(duì)黃曲跳甲均有明顯的驅(qū)避效果[19]。豆科植物紫穗槐果實(shí)對(duì)多種害蟲(chóng)具有觸殺、胃毒、拒食等生物活性[20]。傘形科當(dāng)歸提取物對(duì)棉貪葉蛾（Spodoptera littoralis）的幼蟲(chóng)具有殺蟲(chóng)和抑制生長(zhǎng)活性[21]。毛茛科中的黃連屬和白頭翁屬中部分種提取物被證實(shí)具有殺線(xiàn)蟲(chóng)活性[22]。木蘭科植物中的小花八角（Illicium micranthum）對(duì)4 齡韭蛆幼蟲(chóng)具有毒殺活性[23]。因此，它們作為植物源殺蟲(chóng)劑應(yīng)用于害蟲(chóng)綜合管理具有很大的潛力。

在前期的中藥材料生物活性篩選試驗(yàn)中，篩選出丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角5 種植物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)具有胃毒活性。本研究測(cè)定5 種植物提取物質(zhì)量濃度在6.25～100 mg/mL 范圍內(nèi)，對(duì)小菜蛾卵的毒殺、幼蟲(chóng)的胃毒及成蟲(chóng)的產(chǎn)卵忌避活性，并通過(guò)25 倍顯微鏡觀(guān)察記錄不同植物提取物處理后小菜蛾卵外部形態(tài)變化，旨在為后續(xù)植物源殺蟲(chóng)劑的研發(fā)與應(yīng)用提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

1材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試蟲(chóng)源

小菜蛾幼蟲(chóng)采集自山西省太谷縣（37°25 ′N(xiāo)、112°34 ′E）甘藍(lán)種植地。在山西農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院昆蟲(chóng)神經(jīng)行為與感官生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中連續(xù)飼養(yǎng)多代，飼養(yǎng)溫度為（25±1）℃、相對(duì)濕度為70%±5%、光周期16 L∶8 D。幼蟲(chóng)取食甘藍(lán)葉片。成蟲(chóng)以15% 蜂蜜水補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，以甘藍(lán)葉片為產(chǎn)卵基底，1 d 后收取甘藍(lán)葉片[24]。選取產(chǎn)后2 d 的卵（由鮮嫩黃色變?yōu)榈S色的卵）、3 齡幼蟲(chóng)（頭部由黑色變?yōu)楹稚?，體長(zhǎng)約為1.0～1.2 mm）以及羽化2 d 成蟲(chóng)（蛹分裝到指型管中，觀(guān)察到羽化24 h 后的成蟲(chóng)）作為供試蟲(chóng)源。

1.1.2 供試植物

甘藍(lán)（Brassica oleracea）于實(shí)驗(yàn)室中種植，未施用農(nóng)藥，品種為改良慶豐。待成熟后，選擇新鮮且大小均勻的甘藍(lán)，取其外層較平整且厚薄一致的葉片制得直徑為6 cm 的葉盤(pán)供試。

1.1.3 供試試劑

丁香（Eugenia caryophyllata）（花蕾）、甘草（Glycyrrhiza uralensis）（根莖）、獨(dú)活（Angelica pubescens）（根部）、赤芍（Paeonia lacti?flora）（根部）、八角（Illicium verum）（種子）5 種植物材料購(gòu)自河北安國(guó)藥材市場(chǎng)。無(wú)水乙醇、曲拉通（Triton-X100）、二甲基亞砜（DMSO）購(gòu)自上海麥克林生物有限公司。

1.2 植物提取物的提取方法

將供試藥材用粉碎機(jī)（FS180-4）將其粉碎，并過(guò)0.037 mm 篩。稱(chēng)取300 g 粉末，加入600 mL 提取液（蒸餾水、乙醇、異丙醇按1∶2∶1 混合），攪拌均勻后室溫放置24 h。超聲波破碎30 min，設(shè)置溫度為30 ℃，10 min 攪拌一次。利用真空抽濾儀真空抽濾，并保留藥渣。超聲波破碎及真空抽濾各重復(fù)5 次。合并提取液，使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（溫度55 ℃，轉(zhuǎn)速150 r/min）進(jìn)行減壓濃縮，將濃縮液收集至棕色瓶中，在4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆肹25]。

使用含有0.5% Triton-X100 和0.5% DMSO的20% 乙醇溶液配制待測(cè)提取液，其質(zhì)量濃度分別為100、50、25、12.5、6.25 mg/mL。

1.3 小菜蛾生物活性測(cè)定

1.3.1 植物提取物對(duì)小菜蛾卵的觸殺活性

采用浸漬法[26]測(cè)定殺卵活性。收集新鮮的小菜蛾卵20 個(gè)，分別浸入100、50、25、12.5、6.25 mg/mL 丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角提取物溶液30 s，以含有0.5%Triton-X100 和0.5% DMSO 的20% 乙醇溶液和10 mg/mL 的苦參堿為對(duì)照。自然揮發(fā)干燥后放置于底部鋪有葉盤(pán)的培養(yǎng)皿中，置于溫度為（25±1）℃、相對(duì)濕度為70%±5%、光周期16 L∶8 D 的光照培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)，處理48 h 觀(guān)察卵孵化數(shù)，如果卵正常孵化，視為活卵；如果卵未孵化，記為死卵，直至對(duì)照組卵全部孵化，計(jì)算孵化率。每個(gè)處理重復(fù)3 次。

1.3.2 植物提取物對(duì)小菜蛾卵的外部形態(tài)影響

小菜蛾卵形態(tài)發(fā)育觀(guān)察：取產(chǎn)后48 h 小菜蛾卵，分別浸入100、50、25、12.5、6.25 mg/mL 丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角提取物溶液中，以含有0.5% Triton-X100 和0.5% DMSO 的20% 乙醇溶液為對(duì)照。每個(gè)處理20 粒卵。使用高倍體視顯微鏡（奧林巴斯SZX16，上海，中國(guó)）觀(guān)察記錄卵的形態(tài)，放大倍數(shù)為40 倍。

1.3.3 植物提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的毒殺活性

毒殺活性試驗(yàn)采用濾紙保濕浸葉法[27]。將直徑為6 cm葉盤(pán)分別浸入100、50、25、12.5、6.25 mg/mL 丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角提取物溶液中，浸漬60 s，以含有0.5% Triton-X100 和0.5% DMSO 的20% 乙醇溶液和10 mg/mL 的苦參堿對(duì)照。自然揮發(fā)干燥后放入墊有保濕濾紙的培養(yǎng)皿（d=6 cm）中。每皿接入20 頭饑餓4 h 的體質(zhì)量大小相近的3 齡小菜蛾幼蟲(chóng)，將培養(yǎng)皿置于溫度為（25±1）℃、相對(duì)濕度為70%±5%、光周期16 L∶8 D 的光照培養(yǎng)箱中飼養(yǎng)，24 h 和48 h 后統(tǒng)計(jì)死亡率。每個(gè)處理重復(fù)3 次。

1.3.4 植物提取物對(duì)小菜蛾成蟲(chóng)的產(chǎn)卵忌避活性

采用楊科[28]的非選擇葉盤(pán)法測(cè)定植物提取物的產(chǎn)卵忌避活性。將5 對(duì)羽化2 d 的未交配的雌、雄性小菜蛾置入養(yǎng)蟲(chóng)籠（60 cm×60 cm×60 cm）進(jìn)行試驗(yàn)。在處理組和對(duì)照組中，葉盤(pán)被放置在養(yǎng)蟲(chóng)籠的對(duì)角線(xiàn)端。將6 cm 葉盤(pán)置于待測(cè)溶液中浸漬60 s，以含有0.5%Triton-X100 和0.5% DMSO 的20% 乙醇溶液和10 mg/mL 的苦參堿作為對(duì)照。每個(gè)處理重復(fù)3 次。24 h 后，計(jì)算養(yǎng)蟲(chóng)籠中葉盤(pán)上的落卵量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

使用SPSS 26.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，圖表利用Origin 2019 進(jìn)行繪制。數(shù)據(jù)用校正死亡率± 標(biāo)準(zhǔn)誤差（SE）的方法表示，利用Tukey 檢驗(yàn)（P<0.05）分析校正死亡率、產(chǎn)卵忌避率的差異顯著性。利用PROBIT 擬合校正死亡率與供試藥劑劑量的關(guān)系，計(jì)算毒力回歸方程、致死中濃度（LC50）及95% 置信區(qū)間[29]。

校正死亡率=（處理組死亡率-對(duì)照組死亡率）/（1-對(duì)照組死亡率）×100% （2）

產(chǎn)卵忌避率=（對(duì)照組產(chǎn)卵數(shù)-處理組產(chǎn)卵數(shù)）/對(duì)照組產(chǎn)卵數(shù)×100% （3）

2結(jié)果與分析

2.1 植物提取物對(duì)小菜蛾卵的觸殺效果

丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角5 種植物提取物對(duì)小菜蛾產(chǎn)后48 h 卵的孵化均具有抑制作用，且校正死亡率與質(zhì)量濃度呈正相關(guān)。在質(zhì)量濃度為100 mg/mL 時(shí)，丁香、甘草、赤芍、八角提取物對(duì)小菜蛾卵的校正死亡率均達(dá)到100%，獨(dú)活提取物在100 mg/mL 時(shí)，小菜蛾卵的校正死亡率為88.3%。當(dāng)質(zhì)量濃度為6.25 mg/mL 時(shí)，丁香提取物對(duì)小菜蛾卵具有觸殺活性，校正死亡率為46.7%，其次為赤芍提取物、獨(dú)活提取物、八角提取物、甘草提取物，校正死亡率分別為41.7%、31.7%、23.3%、23.3%（表1）。5 種植物提取物對(duì)小菜蛾卵的毒力大小依次為八角>赤芍>丁香>甘草>獨(dú)活，LC50分別為7.57、9.00、9.57、16.16、20.42 mg/mL（表2）。陰性對(duì)照處理（0.5% Triton-X100 和0.5% DMSO的20% 乙醇溶液）的小菜蛾卵的校正死亡率為0%；陽(yáng)性對(duì)照（10 mg/mL 的苦參堿）處理后，卵的校正死亡率為100%。

2.2 5 種植物提取物對(duì)小菜蛾卵的形態(tài)發(fā)育影響

比較不同提取物對(duì)小菜蛾卵發(fā)育的影響。對(duì)照組：卵飽滿(mǎn)，呈橢圓形，卵內(nèi)器官開(kāi)始形成，卵內(nèi)黑點(diǎn)為頭部結(jié)構(gòu)，且頭部發(fā)育正常（圖1-A）；赤芍提取物處理：卵殼內(nèi)部出頭部變大，呈畸形（圖1-B）。獨(dú)活提取物處理：可隱約看到卵內(nèi)組織大量黑色物質(zhì)，無(wú)法分清頭部結(jié)構(gòu)（圖1-C）。甘草提取物處理：卵殼不飽滿(mǎn)，部分卵殼有凹陷現(xiàn)象（圖1-D）。丁香提取物處理：卵殼均有凹陷，無(wú)法觀(guān)察到小菜蛾頭部，發(fā)育受阻（圖1-E）。八角提取物處理：卵干癟不飽滿(mǎn)，可以觀(guān)察到幼蟲(chóng)的黑色頭部（圖1-F）

2.3 5 種植物提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的毒殺效果

丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角5 種植物提取物對(duì)小菜蛾3 齡幼蟲(chóng)具有顯著的毒殺作用，殺蟲(chóng)活性隨提取物質(zhì)量濃度的升高而增強(qiáng)。植物提取物質(zhì)量濃度在6.25 mg/mL 時(shí)，5 種植物提取物的殺蟲(chóng)效果與對(duì)照相比差異顯著，丁香提取物殺蟲(chóng)效果較好，校正死亡率為36.7%，LC50為7.46 mg/mL；赤芍提取物的校正死亡率為1.7%，LC50為54.67 mg/mL。植物提取物質(zhì)量濃度為100 mg/mL 時(shí)，5 種植物提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的殺蟲(chóng)效果顯著，校正死亡率均在90% 以上（表3-4）。以含有0.5% Triton-X100和0.5% DMSO 的20% 乙醇溶液為陰性對(duì)照，其對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的校正死亡率為0%；以10 mg/mL 的苦參堿作為陽(yáng)性對(duì)照，校正死亡率為95.0%。

2.4 5 種植物提取物對(duì)小菜蛾成蟲(chóng)的產(chǎn)卵忌避活性

丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角5 種植物的提取物均對(duì)小菜蛾成蟲(chóng)產(chǎn)卵有很強(qiáng)的忌避作用。當(dāng)提取物質(zhì)量濃度為100 mg/mL 時(shí)，對(duì)小菜蛾成蟲(chóng)的產(chǎn)卵忌避效果依次為丁香>八角>獨(dú)活>甘草>赤芍，產(chǎn)卵忌避率分別為99.7%、99.3%、97.0%、89.6%、87.2%。

3結(jié)論與討論

許多植物提取物具有殺卵、殺蟲(chóng)、驅(qū)避等多種作用，能夠延緩害蟲(chóng)抗藥性的發(fā)展，可用于害蟲(chóng)綜合治理[8]。本研究測(cè)定了丁香、甘草、獨(dú)活、赤芍、八角5 種植物提取物對(duì)小菜蛾卵、幼蟲(chóng)以及成蟲(chóng)的生物活性，結(jié)果表明，5 種提取物對(duì)小菜蛾均有較強(qiáng)的觸殺、胃毒、驅(qū)避活性。相比于已報(bào)道的植物源農(nóng)藥對(duì)小菜蛾的防治，如100 g/L 半夏Pinellia ternate無(wú)水乙醇提取物[30]、250 g/L 溫州蜜桔Citrus unshiu桔皮的乙醇提取物[31]、50 g/L 青花椒Zanthoxylumbungeanume 水提取物[32]均對(duì)小菜蛾卵孵化具有抑制作用。本試驗(yàn)使用的丁香、赤芍、甘草、獨(dú)活、八角提取物對(duì)小菜蛾卵孵化的抑制和毒殺活性顯著，可作為小菜蛾綠色防控劑的材料來(lái)源。

丁香提取物和其主要成分丁香酚可能具有廣譜、多模式的殺蟲(chóng)活性[33]。本試驗(yàn)中，丁香提取物對(duì)小菜蛾的卵、幼蟲(chóng)以及成蟲(chóng)均有顯著的毒殺和產(chǎn)卵忌避效果，在5 種提取物中效果最好。在100 mg/mL質(zhì)量濃度處理下，卵和幼蟲(chóng)的校正死亡率均高達(dá)100%，對(duì)成蟲(chóng)的產(chǎn)卵忌避率為99.7%。此前研究表明，丁香提取物及其主要成分丁香酚（5 mg/mL）對(duì)斜紋夜蛾Spodoptera litura 的3 齡幼蟲(chóng)具有毒殺作用[33]；對(duì)綠豆象Callosobruchus chinensis 和玉米象Sitophilus zeamais 具有觸殺、驅(qū)避作用[34]；對(duì)赤擬谷盜卵的孵化有抑制作用，對(duì)赤擬谷盜成蟲(chóng)和幼蟲(chóng)具有毒殺作用[35]，與本研究中6.25 mg/mL 丁香提取物對(duì)小菜蛾的卵、幼蟲(chóng)及成蟲(chóng)均有殺蟲(chóng)和驅(qū)避活性的結(jié)果一致，由此可以推測(cè)丁香提取物對(duì)害蟲(chóng)的卵、幼蟲(chóng)有殺蟲(chóng)活性、對(duì)成蟲(chóng)具有忌避活性，表明丁香提取物對(duì)害蟲(chóng)具有多作用模式。丁香提取物處理小菜蛾卵后，觀(guān)察到卵殼表面干癟并向內(nèi)凹陷，卵表面覆蓋油狀物質(zhì)，卵內(nèi)未見(jiàn)器官形成，胚胎死亡。與CORREIA 等[36]研究表明，印楝素可以干擾草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda 胚胎發(fā)育，使其發(fā)育不完整的結(jié)果一致。此外，有研究報(bào)道，用滅幼脲處理黏蟲(chóng)卵后發(fā)現(xiàn)滅幼脲導(dǎo)致卵不能孵化的主要原因在于幼蟲(chóng)體壁及氣管系統(tǒng)的形成受到嚴(yán)重抑制[37-38]。小菜蛾卵被丁香提取物浸漬后，卵表面覆蓋的油狀物質(zhì)可能使卵的氣孔受到抑制，從而導(dǎo)致小菜蛾卵未能正常發(fā)育孵化。

八角提取物對(duì)小菜蛾的毒殺也有顯著效果，在質(zhì)量濃度為100 mg/mL 處理下，八角提取物對(duì)小菜蛾的卵、幼蟲(chóng)的校正死亡率均為100%，對(duì)小菜蛾成蟲(chóng)的產(chǎn)卵忌避率為99.3%。研究發(fā)現(xiàn)，八角茴香正己烷、二氯甲烷浸提液對(duì)白背飛虱（Sogatellafurcifera）有較好的殺蟲(chóng)活性，72 h 致死中濃度（LC50）分別為0.59、0.46 μL/mL[39]，八角茴香油對(duì)赤擬谷盜成蟲(chóng)具有熏蒸活性，發(fā)現(xiàn)熏蒸24 h 的校正死亡率可達(dá)到100%[10]。本試驗(yàn)中的小菜蛾也為咀嚼式口器，而白背飛虱為刺吸式口器，由此猜測(cè)，八角提取物可能對(duì)刺吸式口器和咀嚼式的害蟲(chóng)均具有防治效果。八角揮發(fā)油中的主要成分反式茴香腦的熏蒸殺卵效果顯著，它對(duì)黃粉蟲(chóng)（Tenebriomolitor）、螺旋蠅（Cochliomyia hominivorax）、白腹皮蠹（Dermestes maculatus）的卵顯現(xiàn)出強(qiáng)烈的熏蒸毒殺活性[13，40-42]。因此，反式茴香腦通過(guò)熏蒸殺卵具有抑制種群擴(kuò)大的作用。本研究表明，八角提取物對(duì)小菜蛾具有觸殺、胃毒、驅(qū)避等活性，其主要活性成分是否為反式茴香腦有待進(jìn)一步研究。八角提取物處理小菜蛾卵后，雖然未能中斷卵胚胎發(fā)育，出現(xiàn)蟲(chóng)體輪廓，但直至死亡蟲(chóng)體也未能突破卵膜。與趙士文等[26]發(fā)現(xiàn)高效氯氟氰菊酯處理黏蟲(chóng)Mythimna separata 卵的現(xiàn)象一致，他觀(guān)察到黏蟲(chóng)卵內(nèi)有蟲(chóng)體形成，但是頭部畸形，與胸、腹部分節(jié)不明顯，卵不能正常孵化，這可能因?yàn)樘幚韺?dǎo)致卵對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率低下。

甘草和赤芍提取物對(duì)小菜蛾的毒殺效果僅次于丁香和八角提取物，對(duì)小菜蛾的卵、幼蟲(chóng)的LC50 值分別為16.16、9.00 mg/mL（卵）和13.49、54.67 mg/mL（幼蟲(chóng)），對(duì)成蟲(chóng)的產(chǎn)卵忌避率分別為89.6%、87.2%。有研究表明，苦豆子Sophoraalopecuroides 水醇提取物對(duì)南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)和花生根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)具有殺滅活性，質(zhì)量濃度為3 000 mg/L 苦豆子水醇提取物處理48 h 后，線(xiàn)蟲(chóng)校正死亡率可達(dá)94.4%，LC50 達(dá)510.38 mg/L[43]。毛茛科植物多數(shù)為藥用植物和有毒植物，含有多種生物堿[44]，研究發(fā)現(xiàn)，0.15% 的烏頭乳油防治菜青蟲(chóng)（Pieris rapae）稀釋1 000、900、800 倍液施藥1 d 后校正防效分別為71.7%、74.4%、79.1%[45]，表明了豆科植物甘草以及毛茛科植物赤芍可以作為防控害蟲(chóng)的植物材料。本研究明確了甘草和赤芍對(duì)小菜蛾具有殺蟲(chóng)活性，但其中殺蟲(chóng)成分對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的殺蟲(chóng)機(jī)理尚未明確，需要進(jìn)一步研究。在本研究中，觀(guān)察到赤芍提取物處理后小菜蛾卵有蟲(chóng)體形成，但無(wú)法突破卵膜，卵殼表面有黃色油膜，這種表現(xiàn)可能是由赤芍提取物覆蓋在卵表面使蟲(chóng)體缺氧死亡導(dǎo)致的。

本試驗(yàn)中，獨(dú)活提取物對(duì)小菜蛾卵和幼蟲(chóng)的LC50 值為20.42、21.31 mg/mL。有研究表明，獨(dú)活精油對(duì)斜紋夜蛾有拒食活性[46]；短毛獨(dú)活對(duì)黏蟲(chóng)有拒食活性，其丙酮提取物對(duì)黏蟲(chóng)3 齡幼蟲(chóng)24 h 的拒食率為100%[47]；對(duì)二斑葉螨Tetranychus urticae 卵的LC50 值為1.53 μL/L[48]，相較于本試驗(yàn)中獨(dú)活水醇提取物對(duì)小菜蛾的觸殺結(jié)果，獨(dú)活精油對(duì)斜紋夜蛾以及獨(dú)活的丙酮提取物對(duì)二斑葉螨的拒食、觸殺活性更加顯著，可能由于精油活性更好或是提取物的溶劑不同。獨(dú)活提取物處理后發(fā)現(xiàn)小菜蛾卵內(nèi)物質(zhì)出現(xiàn)溶解，無(wú)胚胎發(fā)育現(xiàn)象。推測(cè)可能由于獨(dú)活提取物滲入卵內(nèi)導(dǎo)致的。由此可見(jiàn)，獨(dú)活提取物也可作為防治小菜蛾的植物源殺蟲(chóng)劑的材料。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，丁香、赤芍、甘草、獨(dú)活、八角提取物在小菜蛾防治中具有重要應(yīng)用潛力，下一步將篩選丁香、赤芍、甘草、獨(dú)活、八角提取物中對(duì)小菜蛾有生物活性的化合物，優(yōu)化防治技術(shù)，以期開(kāi)發(fā)出更加安全高效的植物源殺蟲(chóng)劑。

參考文獻(xiàn)：

［1］ FURLONG M J，WRIGHT D J，DOSDALL L M. Diamond?back moth ecology and management：problems，progress，andprospects[J]. Annual Review of Entomology，2013，58：517-541.

［2］ DOLMA S K，SURESH P S，SINGH P P，et al. Insecticidal ac?tivity of the extract，fractions，and pure steroidal saponins of Tril?lium govanianum Wall. ex D. Don for the control of diamond?back moth（Plutella xylostella L.） and aphid（Aphis craccivoraKoch）[J]. Pest Management Science，2021，77（2）：956-962.

［3］ JOURAKU A，KUWAZAKI S，MIYAMOTO K，et al. Ryano?dine receptor mutations（G4946E and I4790K） differentially re?sponsible for diamide insecticide resistance in diamondbackmoth，Plutella xylostella L.[J]. Insect Biochemistry and Molecu?lar Biology，2020，118：103308.

［4］ 劉靜怡，袁瑞雪，劉呈瀚，等. 植物源殺蟲(chóng)劑在儲(chǔ)糧害蟲(chóng)防治上的研究現(xiàn)狀及展望[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2022，38（23）：121-128.

LIU J Y，YUAN R X，LIU C H，et al. Status quo and prospectof research on botanical insecticides against stored grain pests[J].Chinese Agricultural Science Bulletin，2022，38（23）：121-128.

［5］ LEGWAILA M M，MUNTHALI D C，OBOPILE M，et al. Ef?fectiveness of spinosad against diamondback moth（Plutella xy?lostella L.） eggs and larvae on cabbage under Botswana condi?tions[J]. International Journal of Insect Science，2014，6：IJIS.S12531.

［6］ SOONWERA M，COTCHAKAEW N. Toxicity of several bo?tanical essential oils and their combinations against females ofAedes albopictus（Skuse） and Anopheles minimus（Theobald）：oviposition deterrent，ovicidal and adulticidal efficacies[J]. AsianPacific Journal of Tropical Biomedicine，2019，9（1）：29.

［7］ WIDIYANINGRUM P，INDRIYANTI D R，PRIYONO B，etal. Antifeedant effect of some medicinal plant extracts againstrice weevil[J]. Pakistan Journal of Biological Sciences，2020，23（7）：953-958.

［8］ FERREIRA E A，F(xiàn)ACA E C，DE SOUZA S A，et al. Anti?feeding and oviposition deterrent effect of Ludwigia spp.（Ona?graceae）against Plutella xylostella（Lepidoptera：Plutellidae）[J].Plant，2022，11（19）：2656.

［9］ 徐漢虹，趙善歡，周俊，等. 八角茴香精油的殺蟲(chóng)活性與化學(xué)成分研究[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，1996，23（4）：338-342.

XU H H，ZHAO S H，ZHOU J，et al. Studies on insecticidal ac?tivity of the anise oil and analysis of its components[J]. Journalof Plant Protection，1996，23（4）：338-342.

［10］ 陸馳宇，史家浩，李紹勤. 13 種植物精油和茴香腦對(duì)赤擬谷盜成蟲(chóng)熏蒸活性研究[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào)，2014，29（2）：72-75，88.

LU C Y，SHI J H，LI S Q. Fumigation activities of 13 kinds ofessential oils and anethole against the adult of Tribolium casta?neum（herbst）[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Asso?ciation，2014，29（2）：72-75，88.

［11］ 張惠麗，楊雨娟，李曉軍. 丹參丙酮提取物對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)的致死和拒食作用[J]. 山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（10）：1682-1685.

ZHANG H L，YANG Y J，LI X J. Study on the repellent andantifeedant effects of Salvia miltirrhiza acetone extract towardthe larvae of Plutella xylostella[J]. Journal of Shanxi Agricul?tural Sciences，2017，45（10）：1682-1685.

［12］ YANG Y T，SU Q，SHI L L，et al. Electrophysiological andbehavioral responses of Bradysia odoriphaga（Diptera：Sciari?dae） to volatiles from its host plant，Chinese chives（Allium tu?berosum Rottler ex Spreng）[J]. Journal of Economic Entomol?ogy，2019，112（4）：1638-1644.

［13］ ZHANG H，CHEN G L，L? S Y，et al. Insecticidal activitiesagainst Odontotermes formosanus and Plutella xylostella andcorresponding constituents of tung meal from Vernicia fordii[J]. Insects，2021，12（5）：425.

［14］ 徐漢虹，張志祥，程?hào)|美，等. 茼蒿素類(lèi)似物對(duì)小菜蛾生物活性[J]. 天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2000，12（5）：17-22.

XU H H，ZHANG Z X，CHENG D M，et al. Studies on bioac?tives of spiro enol ether analogues against plutella xylostella[J].Natural Product Research and Development，2000，12（5）：17-22.

［15］ RUIZ C G L，COSTA M S，SEABRA S，et al. Production ofnatural insecticide on management of Plutella xylostella（Lin?naeus，1758）（Lepidoptera：Plutellidae） in family farming[J].Journal of Agricultural Science，2021，13（7）：47.

［16］ 張興，馬志卿，馮俊濤，等. 植物源農(nóng)藥研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào)，2015，31（5）：685-698.

ZHANG X，MA Z Q，F(xiàn)ENG J T，et al. Review on researchand development of botanical pesticides[J]. Chinese Journal ofBiological Control，2015，31（5）：685-698.

［17］ 高全. 韭菜提取物殺蟲(chóng)活性及化學(xué)成分研究[D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)；2018.

GAO Q. The insecticidal activity and chemical composition ofChinese chive（Allium tuberosum Rottl. ex Spreng） extract[D].Hefei：Anhui Agricultural University，2018.

［18］ 吳蘭軍，李霜，謝佼昕，等. 綠薄荷莖和葉的乙醇提取物對(duì)小菜蛾拒食和產(chǎn)卵忌避活性的影響[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2016，43（6）：1007-1013.

WU L J，LI S，XIE J X，et al. Effects of stem and leaf ethanolextracts from Mentha spicata L.on antifeeding and antioviposi?tion of diamondback moth Plutella xylostella（L.）[J]. Journalof Plant Protection，2016，43（6）：1007-1013.

［19］ 王靜，劉賢武，李潤(rùn)唐，等. 幾種桃金娘科植物提取液對(duì)黃曲跳甲趨避效果初探[J]. 南方農(nóng)業(yè)，2018，12（30）：37-38.

WANG J，LIU X W，LI R T，et al. Preliminary study on the re?pellent effect of extracts from several Myrtaceae plants on fleabeetle[J]. South China Agriculture，2018，12（30）：37-38.

［20］ 梁亞萍. 紫穗槐果實(shí)殺蟲(chóng)活性物質(zhì)及其作用機(jī)理研究[D]. 沈陽(yáng)：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.

LIANG Y P. Research on insecticidal active substance fromthe seeds of Amorpha fruticosa and mechanism of action[D].Shenyang：Shenyang Agricultural University，2015.

［21］ PAVELA R，VRCHOTOV? N. Insecticidal effect of furano?coumarins from fruits of Angelica archangelica L. against lar?vae Spodoptera littoralis Boisd[J]. Industrial Crops and Prod?ucts，2013，43：33-39.

［22］ 周利娟，田延琴，何江濤. 毛茛科植物的農(nóng)藥活性及成分[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，39（2）：261-271.

ZHOU L J，TIAN Y Q，HE J T. Pesticidal activities and ac?tive ingredients of Ranunculaceae plants[J]. Acta AgriculturaeUniversitatis Jiangxiensis，2017，39（2）：261-271.

［23］ 其木格. 環(huán)境友好型植物源農(nóng)藥的探索：有毒植物小花八角化學(xué)成分及其殺蟲(chóng)活性的研究[D]. 北京：中央民族大學(xué)，2016.

QI M G. Exploration of environmentally friendly botanical pes?ticides- study on chemical constituents and insecticidal activityof Illicium verum，a poisonous plant[D]. Beijing：Central Uni?versity for Nationalities，2016.

［24］ 郭兆將，康師，吳青君，等. 小菜蛾飼養(yǎng)技術(shù)與規(guī)范[J]. 應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2015，52（2）：492-497.

GUO Z J，KANG S，WU Q J，et al. Technical specificationsfor the mass-rearing of the diamondback moth，Plutella xylo?stella（L.）[J]. Chinese Journal of Applied Entomology，2015，52（2）：492-497.

［25］ RONGAI D，PULCINI P，PESCE B，et al. Antifungal activityof pomegranate peel extract against fusarium wilt of tomato[J].European Journal of Plant Pathology，2017，147（1）：229-238.

［26］ 趙士文，李梅梅，李伯遼，等. 五種藥劑對(duì)黏蟲(chóng)卵的室內(nèi)觸殺效果及胚胎發(fā)育的影響[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2019，46（5）：1045-1056.

ZHAO S W，LI M M，LI B L，et al. Contact toxicity of five in?secticides against oriental armyworm eggs and their effects onembryonic development of the armyworm[J]. Journal of PlantProtection，2019，46（5）：1045-1056.

［27］ 李楊，韓君，于春雷，等. 七種殺蟲(chóng)劑對(duì)暗黑鰓金龜成蟲(chóng)和幼蟲(chóng)的毒力及田間防控效果[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2012，39（2）：147-152.

LI Y，HAN J，YU C L，et al. Toxicity and control effect ofseven insecticides to Holotrichia parallela[J]. Journal of PlantProtection，2012，39（2）：147-152.

［28］ YANG K，GONG X L，LI G C，et al. A gustatory receptortuned to the steroid plant hormone brassinolide in Plutella xylo?stella（Lepidoptera：Plutellidae）[J]. eLife，2020，9：e64114.

［29］ SAKUMA M. Probit analysis of preference data[J]. AppliedEntomology and Zoology，1998，33（3）：339-347.

［30］ 李進(jìn)步，方麗平，薛建平，等. 半夏提取物對(duì)小菜蛾產(chǎn)卵忌避和殺卵作用[J]. 中國(guó)中藥雜志，2010，35（9）：1108-1111.

LI J B，F(xiàn)ANG L P，XUE J P，et al. Effects of Pinellia ternataextracts on inhibiting of oviposition and ovicidal action againstPlutella xylostella[J]. China Journal of Chinese MateriaMedica，2010，35（9）：1108-1111.

［31］ 施英利，施祖華. 溫州蜜桔桔皮提取物對(duì)小菜蛾成蟲(chóng)產(chǎn)卵忌避及殺卵作用[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2004，16（2）：88-91.

SHI Y L，SHI Z H. Effects of orange peel extracts on inhibit?ing oviposition and ovicidal action against diamondback moth，Plutella xylostella L[J]. Acta Agriculturae Zhejiangensis，2004，16（2）：88-91.

［32］ 劉順，何運(yùn)轉(zhuǎn)，趙媛，等. 青花椒提取物對(duì)小菜蛾的生物活性[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2007，23（9）：427-430.

LIU S，HE Y Z，ZHAO Y，et al. Bioactivity of extracts fromZanthoxylum bungeanum against Plutella xylostella[J]. Chi?nese Agricultural Science Bulletin，2007，23（9）：427-430.

［33］ 曲曉，金啟安，溫海波，等. 丁香酚對(duì)斜紋夜蛾的殺蟲(chóng)活性研究[J]. 熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，31（3）：17-19，37.

QU X，JIN Q A，WEN H B，et al. IInsecticidal activity of euge?nol against Spodoptera litura fab[J]. Chinese Journal of Tropi?cal Agriculture，2011，31（3）：17-19，37.

［34］ 劉丹. 丁香殺蟲(chóng)活性的初步研究[D]. 保定：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

LIU D. Preliminary study on insecticidal activity of clove[D].Baoding：Hebei Agricultural University，2009.

［35］ 韓群鑫，羅俏華，陳幗儀，等. 丁香對(duì)赤擬谷盜卵和幼蟲(chóng)的致死作用[J]. 植物保護(hù)，2006，32（3）：60-63.

HAN Q X，LUO Q H，CHEN G Y，et al. Lethal effects ofSyzygium aromaticum on the eggs and larvae of Tribolium cas?taneum[J]. Plant Protection，2006，32（3）：60-63.

［36］ CORREIA A A，WANDERLEY–TEIXEIRA V，TEIXEIRA? A C，et al. Microscopic analysis of Spodoptera frugiperda（Lepidoptera：Noctuidae） embryonic development before andafter treatment with azadirachtin，lufenuron，and deltamethrin[J]. Journal of Economic Entomology，2013，106（2）：747-755.

［37］ 崔峰，徐洪富，宋紅梅，等. 甜菜夜蛾胚胎發(fā)育的研究（Ⅰ）：卵裂、胚盤(pán)、胚帶的形成及胚層分化[J]. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2004，35（2）：213-216.

CUI F，XU H F，SONG H M，et al. Studies on the embryonicdevelopment of Spodoptera exigua（hübner）（ⅰ）：cleavage，formation of blastederm and germ band，and differentiation ofgerminal layers[J]. Journal of Shandong Agricultural Univer?sity，2004，35（2）：213-216.

［38］ 陳霈，弓惠芬，王進(jìn)忠，等. 滅幼脲對(duì)粘蟲(chóng)不育作用的機(jī)理[J].昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，1993，36（4）：396-408，513-516.

CHEN P，GONG H F，WANG J Z，et al. Mechanism of che?mosterilization by diflubenzuron in armyworm[J]. Acta Ento?mologica Sinica，1993，36（4）：396-408，513-516.

［39］ 王諄靜，項(xiàng)楚一，金路，等. 八角茴香浸提液對(duì)白背飛虱的取食、產(chǎn)卵選擇性及殺蟲(chóng)活性的影響[J]. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2021，48（4）：907-913.

WANG Z J，XIANG C Y，JIN L，et al. Effects of star anise Il?licium verum extracts on feeding and ovipositional selectivity of white-backed rice planthopper Sogatella furcifera and their in?secticidal activities[J]. Journal of Plant Protection，2021，48（4）：907-913.

［40］ CHANG K S，AHN Y J. Fumigant activity of（E）-anetholeidentified in Illicium verum fruit against Blattella germanica[J].Pest Management Science，2002，58（2）：161-166.

［41］ CHANG C L，CHO I K，LI Q X. Insecticidal activity of basiloil，trans-anethole，estragole，and linalool to adult fruit flies ofCeratitis capitata，Bactrocera dorsalis，and Bactrocera cucurbi?tae[J]. Journal of Economic Entomology，2009，102（1） ：203-209.

［42］ PAVELA R. Acute，synergistic and antagonistic effects ofsome aromatic compounds on the Spodoptera littoralis Boisd.（Lep.，Noctuidae） larvae[J]. Industrial Crops and Products，2014，60：247-258.

［43］ 郭云云. 苦豆子醇水提取物與甲維鹽混配對(duì)南方根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的生物活性[D]. 泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

GUO Y Y. The joint-toxicity measurement and bioactivity ofthe extracts collected by methyl alcohol from Sophora alope?curoides with emamectin benzoate on Meloidogyne incognita[D]. Taian：Shandong Agricultural University，2012.

［44］ 陳小平，崔永三，趙博光. 毛茛科殺蟲(chóng)植物——烏頭[J]. 中國(guó)森林病蟲(chóng)，2006，25（6）：26-28.

CHEN，S P，CUI，Y S，ZHAO，B G. Ranunculaceae pesticideplants-Aconitum carmichaeli[J]. Forest Pest and Disease，2006，25（6）：26-28.

［45］ 蔣宏華，王小平，張德詠. 兩種新型殺蟲(chóng)劑對(duì)菜青蟲(chóng)的防治效果[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2001（2）：37-39.

JIANG H H，WANG X P，ZHANG D Y. Control effect oftwo new insecticides on Pieris rapae[J]. Hunan AgriculturalSciences，2001（2）：37-39.

［46］ MANZOOMI N，GANBALANI G N，DASTJERDI H R，etal. Fumigant toxicity of essential oils of Lavandula officinalis，artemisia dracunculus and Heracleum persicum on the adults ofCallosobruchus maculatus（Coleoptera：Bruchidae）[J]. MunisEntomology and Zoology，2010，5：118-122.

［47］ IZAKMEHRI K，SABER M，MEHRVAR A，et al. Lethaland sublethal effects of essential oils from Eucalyptus camaldu?lensis and Heracleum persicum against the adults of Callosobru?chus maculatus[J]. Journal of Insect Science，2013，13（1）：152.

［48］ SEDAGHAT M，DEHKORDI A S，ABAI M，et al. Larvici?dal activity of essential oils of Apiaceae plants against malariavector，Anopheles stephensi[J]. Iranian Journal of Arthropod-Borne Diseases，2011，5（2）：51-59.