許涌捷，劉衛(wèi)震，袁延佩，王冠華，伍昌軍，隋文杰*

（1.天津科技大學(xué) 食品營(yíng)養(yǎng)與安全國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，食品科學(xué)與工程學(xué)院，天津 300457；2.天津科技大學(xué) 輕工科學(xué)與工程學(xué)院，天津 300457；3.湖北百特威生物科技有限公司，湖北 仙桃 433099）

奶渣是牦牛乳提取酥油后留下的一種副產(chǎn)物，由提制酥油后的脫脂乳經(jīng)加熱后凝固沉淀、過(guò)濾、曬干制得，呈淡黃色塊狀[1-2]。奶渣作為一種副產(chǎn)品，產(chǎn)量高并且價(jià)格低，營(yíng)養(yǎng)豐富，富含蛋白質(zhì)、乳糖、礦物質(zhì)及多種維生素[3-4]。目前，奶渣相關(guān)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)有限，奶渣的利用附加值較低。

酪蛋白酸鈣是一種較好的補(bǔ)鈣物質(zhì)，其中鈣離子與酪蛋白中絲氨酸的磷酸殘基穩(wěn)定結(jié)合[5]，可以被人體更好地吸收利用，并且含有豐富的賴氨酸[6]。一般純度較低的酪蛋白酸鈣產(chǎn)品主要用于工業(yè)制造，如造紙工業(yè)、皮革工業(yè)、乳膠工業(yè)等[7]；而純度較高的酪蛋白酸鈣因具有特定的功能性質(zhì)，如增稠性、乳化性、起泡性等，故可應(yīng)用于食品加工中[8]。目前，酪蛋白酸鈣的制備主要以牛奶酪蛋白為原料，國(guó)內(nèi)外鮮有以奶渣為原料的制備實(shí)例，并且缺乏對(duì)酪蛋白酸鈣的理化性質(zhì)及其乳化性的研究和相關(guān)應(yīng)用實(shí)例的報(bào)道。因此，本文以奶渣為原料，探究奶渣酪蛋白酸鈣制備的條件、理化性質(zhì)和以其作為乳化劑制備植脂末產(chǎn)品的穩(wěn)定性，旨在為食品工業(yè)開(kāi)發(fā)成本低、乳化性好的植脂末產(chǎn)品提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

奶渣：四川甘孜藏族自治州理塘縣；酪蛋白酸鈣：市售；谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶（120 U/g）：江蘇一鳴生物股份有限公司；椰子油：文昌純椰食品有限公司；葡萄糖漿：億隆生物科技有限公司；十二烷基硫酸鈉（sodium lauryl sulfate，SDS）、8-苯胺-1-萘磺酸（8-anilino-1-naphthalenesulfonic acid，ANS）、鄰苯二甲醛、Tris-甘氨酸：北京索萊寶科技有限公司；Tris-鹽酸緩沖溶液：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。以上試劑均為分析純。

高速離心機(jī)（H1850）：湖南湘儀有限公司；凱氏定氮儀（Kjeltec）：福特（中國(guó)）有限公司；高壓均質(zhì)機(jī)（AHBASIC）：安拓思納米技術(shù)（蘇州）有限公司；紫外分光光度計(jì)（UV-6100 型）：美國(guó)尼高利儀器公司；激光粒度分析儀（C 型）：美國(guó)Sequoia Scientific 公司。

1.2 奶渣酪蛋白酸鈣的制備

參考許涌捷等[9]的方法，通過(guò)脫脂、堿溶酸沉從奶渣中提取酪蛋白，將奶渣酪蛋白與蒸餾水按照一定比例混合，不斷攪拌，水浴加熱至43 ℃，緩慢加入濃氨水至奶渣酪蛋白溶解，然后加入Ca（OH）2懸濁液攪拌，2 h后過(guò)濾除去不溶解的奶渣酪蛋白，最后經(jīng)過(guò)干燥得到奶渣酪蛋白酸鈣。

1.3 單因素試驗(yàn)

以pH 值、料液濃度及Ca（OH）2添加量為因素，以鈣含量為指標(biāo)，分別進(jìn)行單因素試驗(yàn)。探究溶液pH值（6.0、6.5、7.0、7.5、8.0）、料液濃度（0.50%、0.75%、1.00%、1.50%、2.00%）、Ca（OH）2添加量（1.0%、1.2%、1.6%、2.0%、2.4%）對(duì)奶渣酪蛋白酸鈣中鈣含量的影響。

1.4 奶渣酪蛋白酸鈣理化性質(zhì)的測(cè)定

1.4.1 奶渣酪蛋白酸鈣基本組分的測(cè)定

粗蛋白的測(cè)定參照GB 5009.5—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》；粗脂肪的測(cè)定參照GB 5009.6—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測(cè)定》；乳糖的測(cè)定參照GB 5009.8—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測(cè)定》；水分的測(cè)定參照GB 5009.3—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測(cè)定》；灰分的測(cè)定參照GB 5009.4—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測(cè)定》；鈣含量的測(cè)定參照GB 5009.268—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中多元素的測(cè)定》。

1.4.2 奶渣酪蛋白酸鈣乳化性的測(cè)定

參考Nishimura 等[10]的方法并稍作改動(dòng)，取5 mL花生油與15 mL 待測(cè)樣品溶液，混合后均質(zhì)2 min，取均質(zhì)后的液體100 μL，其余液體靜置10 min，在靜置前后的液體中加入0.1% SDS 溶液稀釋，并在500 nm下測(cè)定吸光度。靜置前后的液體吸光度分別記為A0和A1，樣品乳化活力指數(shù)（emulsification activity index，EAI）和乳化液穩(wěn)定系數(shù)（end system identifier，ESI）計(jì)算公式如下。

式中：X為乳化活力指數(shù)；A為樣品在500 nm 下的吸光度；C為樣品的濃度，g/mL；L為比色杯直徑，1 cm；N為稀釋倍數(shù)；Φ為油相體積分?jǐn)?shù)；Y為乳化液穩(wěn)定系數(shù)，%；A0為靜置前液體吸光度；A1為靜置后液體吸光度。

1.4.3 奶渣酪蛋白酸鈣交聯(lián)度的測(cè)定

參考閆爽等[11]的方法并稍作修改，稱取2 g 谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶溶于水中，定容至50 mL 容量瓶中，在37 ℃下保溫30 min。取20 mL 濃度為5 mg/mL 的樣品溶液，添加3 mL 谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶溶液，在47 ℃的恒溫水浴中反應(yīng)120 min。反應(yīng)結(jié)束后，在85 ℃的水中滅活5 min 后，稀釋至0.5 mg/mL。分別取2 mL 交聯(lián)前后的樣品溶液，各加入2 mL 鄰苯二甲醛溶液，靜置反應(yīng)2 min 后，在336 nm 下測(cè)定吸光度，稀釋至0.5 mg/mL。依據(jù)公式計(jì)算樣品中游離氨基的含量和交聯(lián)度。

式中：V為游離氨基酸含量，μg/mg；Ai為樣品的吸光度；C為樣品的濃度，mg/mL；N為交聯(lián)度，%；M1為樣品交聯(lián)前游離氨基含量，μg/mg；M2為樣品交聯(lián)后游離氨基含量，μg/mg。

1.4.4 奶渣酪蛋白酸鈣起泡性和泡沫穩(wěn)定性的測(cè)定

參考Wang 等[12]的方法測(cè)定起泡性，測(cè)定3 種樣品的起泡性。取1 g 奶渣酪蛋白酸鈣，加入100 mL 蒸餾水，在攪拌機(jī)中攪拌1 min，出現(xiàn)大量泡沫，將攪拌后的溶液移入200 mL 量筒中，泡沫體積記為V0，隨后放置30 min，再次記錄泡沫體積，記為V1。起泡性（W，%）和泡沫穩(wěn)定性（S，%）的計(jì)算公式如下。

式中：V為液體總體積，mL；V0為泡沫所占的體積，mL；V1為泡沫的殘留體積，mL。

1.5 植脂末的制備

參考王濤等[13]的方法并稍作修改，分別以市售酪蛋白酸鈣、奶渣酪蛋白酸鈣、實(shí)驗(yàn)室自制奶渣酪蛋白酸鈉為原料，加入椰子油、葡萄糖漿和去離子水，攪拌后經(jīng)過(guò)高壓均質(zhì)機(jī)均質(zhì)，最后進(jìn)行冷凍干燥。奶渣酪蛋白酸鈣、市售酪蛋白酸鈣和奶渣酪蛋白酸鈉制備的植脂末，分別命名為植脂末1、植脂末2 和植脂末3。

1.6 植脂末特性測(cè)定

1.6.1 貯藏穩(wěn)定性測(cè)定

參考Zhang 等[14]的方法測(cè)定植脂末的粒徑和ζ-電位，考察貯藏時(shí)間對(duì)植脂末穩(wěn)定性的影響。將制備的植脂末溶于水中，配制植脂末溶液，分別測(cè)定樣品于4 ℃條件下放置0、6、12、24 h 后的粒徑和ζ-電位。

1.6.2 pH 穩(wěn)定性測(cè)定

參考Zhang 等[14]的方法測(cè)定植脂末的粒徑和ζ-電位，考察pH 值對(duì)植脂末穩(wěn)定性的影響。將制備的植脂末溶于水中，配制植脂末溶液，取等量的植脂末溶液，分別調(diào)節(jié)pH 值至2、4、9，用激光粒度分析儀分別測(cè)定植脂末溶液在不同pH 值下的粒徑及ζ-電位。

1.6.3 溫度穩(wěn)定性測(cè)定

參考Zhang 等[14]的方法測(cè)定植脂末的粒徑和ζ-電位，考察溫度對(duì)植脂末穩(wěn)定性的影響。將制備的植脂末溶于水中，配制植脂末溶液，分別調(diào)整溶液的溫度為4、25、45 ℃，采用激光粒度分析儀分別測(cè)定植脂末溶液在不同溫度下的粒徑及ζ-電位。

1.7 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)均重復(fù)3 次，試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 軟件的方差分析進(jìn)行顯著性分析，利用Origin Pro 9.0 進(jìn)行制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 奶渣酪蛋白酸鈣制備單因素試驗(yàn)結(jié)果

酪蛋白單體組分含有多個(gè)磷酸絲氨酸殘基的磷酸基團(tuán)，可與鈣離子結(jié)合[5]，通過(guò)加入氨水使氨根離子與酪蛋白形成水溶性鹽，然后再加入堿性較強(qiáng)的氫氧化鈣進(jìn)行反應(yīng)，形成酪蛋白酸鈣，同時(shí)保證了鈣離子與酪蛋白的充分結(jié)合，提高了鈣的結(jié)合率。

2.1.1 溶液pH 值對(duì)奶渣酪蛋白酸鈣中鈣含量的影響奶渣酪蛋白酸鈣制備時(shí)，pH 值對(duì)奶渣酪蛋白酸鈣中鈣含量的影響見(jiàn)圖1。

圖1 溶液pH 值對(duì)鈣含量的影響Fig.1 Effect of solution pH on calcium content

由圖1 可知，當(dāng)pH 值為7.0 時(shí)，奶渣酪蛋白酸鈣中的鈣含量最高，隨著pH 值升高或降低均會(huì)造成鈣含量的損失，這可能是由于酸性條件下酪蛋白溶解度降低，而在堿性條件下，由于羧酸鹽與質(zhì)子化氨基的靜電作用以及酪氨酸的羥基與羧基之間的氫鍵結(jié)合使得蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)消失，降低了酪蛋白的穩(wěn)定性[15]，從而不利于鈣離子與酪蛋白的結(jié)合，因此溶液pH 值選擇7.0。此結(jié)果與葛靜微等[7]探究pH 值對(duì)酪蛋白酸鈣中鈣含量影響的研究結(jié)果一致。

2.1.2 酪蛋白料液濃度對(duì)奶渣酪蛋白酸鈣中鈣含量的影響

酪蛋白料液濃度對(duì)奶渣酪蛋白酸鈣中鈣含量的影響見(jiàn)圖2。

圖2 料液濃度對(duì)鈣含量的影響Fig.2 Effect of feed solution concentration on calcium content

由圖2 可知，料液濃度為0.50%～1.00% 時(shí)，奶渣酪蛋白酸鈣中的鈣含量逐漸增加，料液濃度為1.00%時(shí)，奶渣酪蛋白酸鈣中的鈣含量最高，料液濃度大于1.00% 時(shí)，鈣含量逐漸降低。這可能是由于料液濃度過(guò)高時(shí)，會(huì)使原料的黏稠度過(guò)高，不利于其與鈣離子結(jié)合[7]，因此料液濃度選擇1.00%。

2.1.3 Ca（OH）2添加量對(duì)奶渣酪蛋白酸鈣中鈣含量的影響

Ca（OH）2添加量對(duì)奶渣酪蛋白酸鈣中鈣含量的影響見(jiàn)圖3。

圖3 Ca（OH）2 添加量對(duì)鈣含量的影響Fig.3 Effect of Ca（OH）2 addition on calcium content

由圖3 可知，隨著Ca（OH）2添加量的增加，酪蛋白酸鈣中鈣含量呈先升高后降低的趨勢(shì)。當(dāng)Ca（OH）2添加到一定量時(shí)，鈣離子與酪蛋白結(jié)合達(dá)到飽和狀態(tài)，當(dāng)Ca（OH）2添加量為1.6% 時(shí)，酪蛋白酸鈣中的鈣含量最高，達(dá)到1.35%，這與葛靜微等[7]探究Ca（OH）2對(duì)酪蛋白酸鈣中鈣含量影響的研究結(jié)果一致。

2.2 奶渣酪蛋白酸鈣理化性質(zhì)的測(cè)定結(jié)果

2.2.1 奶渣酪蛋白酸鈣基本組分測(cè)定結(jié)果

奶渣酪蛋白酸鈣基本組分測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 奶渣酪蛋白酸鈣基本組分Table 1 Basic components of calcium caseinate from milk residues

由表1 可知，奶渣各組分中含量最高的為粗蛋白，為64.09%。由奶渣制備的酪蛋白和酪蛋白酸鈣中的粗蛋白含量均較高，分別達(dá)到91.41%和93.76%，奶渣酪蛋白酸鈣未檢出乳糖，奶渣酪蛋白酸鈣中的粗脂肪含量低于奶渣酪蛋白，為1.37%，乳糖未檢測(cè)出，鈣含量為1.35%，奶渣酪蛋白酸鈣的粗蛋白含量和鈣含量均高于市售酪蛋白酸鈣，因此由奶渣酪蛋白制備的酪蛋白酸鈣粗蛋白含量高、純度較高。

2.2.2 奶渣酪蛋白酸鈣乳化性分析

蛋白質(zhì)的乳化性質(zhì)是指能使油和水形成穩(wěn)定乳化液的性質(zhì)[16]。由于酪蛋白分子具有親水基和親油基，在油水混合液中，酪蛋白的疏水部分偏向脂質(zhì)，親水部分朝向水相，使表面張力降低，油水混合液形成穩(wěn)定的體系[17-18]。奶渣酪蛋白酸鈉、奶渣酪蛋白酸鈣和市售酪蛋白酸鈣的乳化性見(jiàn)圖4。

由圖4 可知，由奶渣酪蛋白制備的酪蛋白酸鈣具有優(yōu)異的乳化能力，ESI 高于奶渣酪蛋白酸鈉和市售酪蛋白酸鈣，ESI 達(dá)到70% 以上。這可能是由于酪蛋白與鈣離子結(jié)合，形成更穩(wěn)定的膠束體系，并且由于奶渣加工過(guò)程的影響，奶渣酪蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性相較市售酪蛋白增強(qiáng)[9]，蛋白分子使得油-水界面穩(wěn)定的時(shí)間延長(zhǎng)，使得乳液在一定時(shí)間內(nèi)保持其結(jié)構(gòu)和狀態(tài)的能力提高[19]，因此奶渣酪蛋白酸鈣可作為性能優(yōu)異的乳化劑應(yīng)用于食品領(lǐng)域[20]。同時(shí)，奶渣酪蛋白酸鈣的乳化活力指數(shù)顯著低于市售酪蛋白酸鈣（P<0.05），這可能是由于奶渣加工過(guò)程中溫度升高，使得酪蛋白膠束內(nèi)部的疏水基部分轉(zhuǎn)移到表面，從而蛋白質(zhì)在油-水界面吸附形成乳狀液的能力減弱[21]。

2.2.3 奶渣酪蛋白酸鈣交聯(lián)度分析

交聯(lián)是常見(jiàn)蛋白改性技術(shù)之一，可改善其功能性質(zhì)，從而發(fā)揮更廣泛的作用。谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶可使蛋白質(zhì)發(fā)生交聯(lián)，引起蛋白質(zhì)分子聚集，形成更加致密的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，對(duì)外界有更強(qiáng)的抵抗能力，能夠改善蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性[22]。兩種酪蛋白酸鈣和奶渣酪蛋白酸鈉的交聯(lián)度見(jiàn)圖5。

圖5 奶渣酪蛋白酸鈉、奶渣酪蛋白酸鈣和市售酪蛋白酸鈣的交聯(lián)度Fig.5 Cross-linking degree of sodium caseinate and calcium caseinate from milk residues as well as commercially available calcium caseinate

由圖5 可知，奶渣酪蛋白酸鈣的交聯(lián)度顯著低于奶渣酪蛋白酸鈉和市售酪蛋白酸鈣（P<0.05），可能是由于奶渣加工過(guò)程中對(duì)酪蛋白結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響，導(dǎo)致蛋白質(zhì)側(cè)鏈的賴氨酸及谷氨酰胺殘基發(fā)生分子內(nèi)及分子間交聯(lián)時(shí)，產(chǎn)生的游離氨基較少。

2.2.4 奶渣酪蛋白酸鈣起泡性分析

起泡性與蛋白質(zhì)能產(chǎn)生的界面面積的量和穩(wěn)定性有關(guān)[23]，在蛋糕、面包和冰淇淋等食品加工中具有重要作用[24]。奶渣酪蛋白酸鈉、奶渣酪蛋白酸鈣和市售酪蛋白酸鈣的起泡性結(jié)果見(jiàn)圖6。不同大寫字母表示泡沫穩(wěn)定性差異顯著（P<0.05）；不同小寫字母表示起泡能力差異顯著（P<0.05）。

圖6 奶渣酪蛋白酸鈉、奶渣酪蛋白酸鈣和市售酪蛋白酸鈣的起泡性Fig.6 Foaming properties of sodium caseinate and calcium caseinate from milk residues as well as commercially available calcium caseinate

由圖6 可知，奶渣酪蛋白酸鈣的起泡能力顯著高于奶渣酪蛋白酸鈉和市售酪蛋白酸鈣（P<0.05），達(dá)到43%，這可能是由于奶渣酪蛋白酸鈣中的蛋白質(zhì)含量最高，蛋白質(zhì)在經(jīng)過(guò)均質(zhì)后，會(huì)吸附到水-空氣界面，蛋白質(zhì)分子部分展開(kāi)，使得更多的空氣進(jìn)入，從而在氣-液界面形成一層薄膜，并形成氣泡[25]。因此，奶渣酪蛋白酸鈣可應(yīng)用于面包、啤酒等食品的加工過(guò)程中[24]。而奶渣酪蛋白酸鈣的泡沫穩(wěn)定性顯著低于奶渣酪蛋白酸鈉與市售酪蛋白酸鈣（P<0.05），可能是由于奶渣加工過(guò)程中酪蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)會(huì)影響氣-液薄膜的穩(wěn)定性，并且鈣離子使得游離酪蛋白含量減少，從而減慢在泡沫體系中形成界面膜，泡沫體系的黏度降低[5]。

2.3 植脂末穩(wěn)定性分析

2.3.1 植脂末貯藏穩(wěn)定性分析

3 種植脂末粒徑隨貯藏時(shí)間的變化見(jiàn)圖7。

圖7 3 種植脂末粒徑隨貯藏時(shí)間變化Fig.7 Variation of particle size of the three non-dairy creamers with storage time

由圖7 可知，3 種植脂末在放置24 h 后粒徑分布發(fā)生變化，粒徑均變大，奶渣酪蛋白酸鈣制備的植脂末1 在放置12 h 和24 h 后粒徑變化最小，穩(wěn)定性最好。

3 種植脂末乳液ζ-電位隨儲(chǔ)藏時(shí)間的變化見(jiàn)圖8。

圖8 3 種植脂末ζ-電位隨儲(chǔ)藏時(shí)間變化Fig.8 Variation of ζ-potential of the three non-dairy creamers with storage time

由圖8 可知，隨儲(chǔ)藏時(shí)間的延長(zhǎng)，3 種植脂末的ζ-電位在24 h 時(shí)出現(xiàn)小范圍下降，由奶渣酪蛋白酸鈣制備的植脂末1 乳液電位值變化最小，且ζ-電位最高，粒子間排斥力越大[26]。這是由于奶渣酪蛋白酸鈣的ESI高于奶渣酪蛋白酸鈉和市售酪蛋白酸鈣，當(dāng)其作為乳化劑制備植脂末時(shí)，酪蛋白酸鈣分子在油-水界面的吸附性增強(qiáng)，可以更充分地與油相結(jié)合，同時(shí)由于附近蛋白可以在溶液表面形成薄膜[5]，使得界面張力降低，乳濁液更穩(wěn)定[27]。

2.3.2 植脂末pH 穩(wěn)定性分析

植脂末1、植脂末2 和植脂末3 在不同pH 值下隨時(shí)間的延長(zhǎng)粒徑和ζ-電位變化見(jiàn)圖9。

圖9 3 種植脂末粒徑和ζ-電位值變化Fig.9 Variation of particle size and ζ-potential of the three non-dairy creamers with pH

由圖9A～圖9C 可知，3 種植脂末在pH2 和pH4時(shí)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，植脂末乳液的粒徑變化較大，在pH9 時(shí)，植脂末乳液的粒徑變化較小，乳液最穩(wěn)定，這可能是由于酸性條件下會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，液滴之間發(fā)生聚集，因此粒徑變化較大，而在堿性條件下蛋白質(zhì)溶解度高，乳液較穩(wěn)定，粒徑變化小。由圖9D～圖9F可知，在放置24 h 后，在pH2 和pH4 時(shí)，3 種植脂末的ζ-電位變化較大，在pH9 時(shí)，3 種植脂末的ζ-電位變化較小，且電位的絕對(duì)值最大，乳液最穩(wěn)定。因此酸性條件對(duì)乳液的穩(wěn)定性影響較大，這可能是由于乳液中液滴表面的靜電荷量增大時(shí)，液滴之間的靜電斥力增大，從而乳液液滴之間會(huì)處于平衡狀態(tài)[28]。在強(qiáng)酸性條件下蛋白質(zhì)與液滴之間相互排斥作用小，易發(fā)生聚集，使ζ-電位電勢(shì)下降，進(jìn)而造成乳液不穩(wěn)定[29]。

2.3.3 植脂末溫度穩(wěn)定性分析

在不同溫度條件下，植脂末乳液的粒徑、ζ-電位隨時(shí)間的變化見(jiàn)圖10。

圖10 3 種植脂末粒徑和ζ-電位隨溫度的變化Fig.10 Variation of particle size and ζ-potential of the three non-dairy creamers with temperature

由圖10 可知，在4 ℃時(shí)，由奶渣酪蛋白酸鈣制備的植脂末乳液粒徑和電位變化較小，在24 h 時(shí)沒(méi)有出現(xiàn)大幅度的波動(dòng)，且粒徑最小，電位的絕對(duì)值最大，說(shuō)明其在低溫狀態(tài)下乳液液滴之間的靜電斥力較高[30]，因此穩(wěn)定性最好。在45 ℃條件下，3 種植脂末的粒徑和ζ-電位的變化最明顯，這是由于熱處理使蛋白結(jié)構(gòu)展開(kāi)，暴露出更多帶電基團(tuán)，液滴之間的斥力勢(shì)能較小，蛋白聚集程度增加，穩(wěn)定性變差[31]。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)通過(guò)單因素試驗(yàn)確定了奶渣酪蛋白酸鈣制備的最優(yōu)條件為溶液pH 值為7、料液濃度為1.00%、Ca（OH）2添加量為1.6%時(shí)，奶渣酪蛋白酸鈣中蛋白質(zhì)含量為93.76%，鈣含量為1.35%。奶渣酪蛋白酸鈣具有優(yōu)異的乳化能力，ESI 高于奶渣酪蛋白酸鈉，可達(dá)到70%以上，起泡能力也高于奶渣酪蛋白酸鈉。由奶渣酪蛋白酸鈣為原料制備的植脂末穩(wěn)定性好，也進(jìn)一步證明了奶渣酪蛋白酸鈣優(yōu)異的ESI，為奶渣酪蛋白酸鈣在植脂末產(chǎn)品的應(yīng)用上提供了一定的參考。