劉亞軒,侯曉曉

學齡前兒童因父母口腔衛(wèi)生認知、飲食習慣、乳牙解剖等因素,導致齲病發(fā)生率較高,且個體間差異大,部分齲易感兒童患牙較多,可引起牙痛、頜面部疼痛、牙髓炎等,嚴重影響幼兒口腔健康與生長發(fā)育[1]。研究發(fā)現(xiàn),齲病是口腔環(huán)境與牙體硬組織中多種因素協(xié)同作用的結果,齲活性可反映這種進行性破壞的活躍性和危險性,評估患兒齲易感性,對齲病高危人群篩查和防治具有重要意義[2]。除已知的飲食、刷牙習慣、監(jiān)護人口腔衛(wèi)生重視度等主觀因素外,是否還有其他客觀原因影響了齲活性目前尚不明確。根據(jù)孫菲等[3]報道,白細胞介素-6(IL-6)是一種炎性因子,齦溝液IL-6水平與牙齦卟啉單胞菌數(shù)量升高有關。而牙齦卟啉單胞菌感染與齲病發(fā)生有關,所以推測IL-6可能與齲活性及齲病有關[4]。牙髓成纖維細胞誘導巨噬細胞分化為促炎形態(tài)是齲病前細菌感染的免疫調節(jié)機制,并引起腫瘤壞死因子-α(TNF-α)升高,影響齲齒形成與恢復[5]。單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)是一種免疫炎性細胞因子,在活動期牙周炎患者齦溝液中水平高于靜止期牙周炎患者、健康對照者,與牙周炎癥狀態(tài)有關[6]。多項研究表明,牙周炎與齲齒發(fā)生有關,故MCP-1升高可能是二者共享的一個細胞因子機制[7-8]。經檢索發(fā)現(xiàn)目前關于齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1在學齡前兒童齲病發(fā)生及進展中作用的報道較少,尚不清楚各指標是否參與齲病進展?；谝陨媳尘?本研究對此進行探討,以期為臨床防治學齡前兒童齲病提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月—2021年6月石家莊市第二醫(yī)院收治的480例3～6歲接受口腔檢查兒童作為研究對象進行前瞻性隊列研究。1)納入標準:符合齲齒診斷標準[9];年齡3～6歲;能配合采集齦溝液標本;監(jiān)護人自愿簽署知情同意書。2)排除標準:合并全身系統(tǒng)性疾病者;口腔黏膜疾病者;入組前2周有免疫抑制劑、抗菌藥物等相關藥物應用史者;入組前半年有牙周治療史者。480例根據(jù)是否發(fā)生齲齒分為發(fā)生組、未發(fā)生組。發(fā)生組124例,其中男59例,女65例;年齡3～6(5.01±0.48)歲;體質量10.60～28.30(18.75±4.03)kg。未發(fā)生組356例,其中男176例,女180例;年齡3～6(4.96±0.51)歲;體質量10.30～27.90(19.16±4.25)kg。2組一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究獲石家莊市第二醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核通過(批準號:2018018),監(jiān)護人充分知情同意。

1.2 研究方法

1)齲病活躍性試驗(CAT)[10]。于入院時評估,使用專用消毒棉簽采集口腔中一側上下后牙頰面頸1/3軟垢和菌斑混合體,置入CAT試劑1 mL中,充分混合后,放入37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)48 h,統(tǒng)計所有患兒CAT值對其進行齲病危險度評估。CAT值為0、0.5為低度風險,1.0、1.5為中度風險,2.0、2.5、3.0為高度風險,耗材購于山東愛維德生物科技有限公司。

2)齦溝液采集與檢測。入院時采集齦溝液標本,要求標本采集前不進食、不刷牙、不漱口,將2 mm×20 mm濾紙條垂直插入患牙齦溝,遇阻力停止,停留30 s,取出濾紙,將濾紙條置入微離心管,加入0.9%氯化鈉注射液300 μL,10 000 r/min離心15 min,分離上清。應用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測上清液IL-6、TNF-α、MCP-1水平,試劑盒購于上海信裕生物科技有限公司。

1.3 觀察指標

1)比較2組及不同齲病危險度患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1水平;2)應用Spearman相關性分析患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1與齲病危險度的相關性;3)統(tǒng)計發(fā)生組患兒6個月內發(fā)生慢性根尖周炎情況,慢性根尖周炎依據(jù)問診、叩診、X線攝片示根尖周圍有炎癥進行診斷,比較發(fā)生慢性根尖周炎(有慢性根尖周炎亞組)、未發(fā)生慢性根尖周炎(無慢性根尖周炎亞組)患兒入院時齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1水平。4)采用受試者工作特征(ROC)曲線分析患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1及CAT分度預測慢性根尖周炎的價值。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 2組齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1比較

發(fā)生組齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1高于未發(fā)生組(P<0.01)。見表1。

表1 2組學齡前齲病兒童齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1比較

2.2 不同齲病危險度患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1比較

全部患兒中,CAT值為0患兒63例,CAT值為0.5患兒109例,CAT值為1.0患兒84例,CAT值為1.5患兒79例,CAT值為2.0患兒38例,CAT值為2.5患兒60例,CAT值為3.0患兒47例。不同齲病危險度患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);隨著齲病危險度增加,患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1呈遞增趨勢(P<0.05)。見表2。

表2 不同危險度學齡前齲病兒童齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1比較

2.3 患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1與齲病危險度的相關性分析

相關性分析顯示,學齡前齲病患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1與齲病危險度呈正相關(r=0.711、0.675、0.621,P<0.01)。見圖1。

IL-6為白細胞介素-6,TNF-α為腫瘤壞死因子-α,MCP-1為單核細胞趨化蛋白-1,CAT為齲病活躍性試驗。

2.4 發(fā)生組有無慢性根尖周炎患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1水平比較

有慢性根尖周炎亞組齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1高于無慢性根尖周炎亞組(P<0.01)。見表3。

表3 有無慢性根尖周炎患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1水平比較

2.5 齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1及CAT分度預測慢性根尖周炎的價值分析

繪制學齡前齲病兒童齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1及CAT分度預測慢性根尖周炎的ROC曲線顯示,曲線下面積(AUC)依次為0.732、0.774、0.743、0.745,其中TNF-α預測敏感度最高,CAT分度預測特異度最高。見圖2、表4。

IL-6為白細胞介素-6,TNF-α為腫瘤壞死因子-α,MCP-1為單核細胞趨化蛋白-1,CAT為齲病活躍性試驗,ROC為受試者工作特征。

表4 學齡前齲病兒童齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1及CAT分度預測慢性根尖周炎ROC曲線分析結果

2.6 齦溝液各指標聯(lián)合CAT分度預測慢性根尖周炎的價值分析

利用Logistic回歸模型擬合學齡前齲病兒童齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1及CAT分度,以1-特異度為橫坐標,敏感度為縱坐標,繪制ROC曲線顯示,齦溝液各指標聯(lián)合CAT分度預測慢性根尖周炎的AUC為0.924,95%CI為0.896,0.946,敏感度為0.919,特異度為0.806,見圖3。

IL-6為白細胞介素-6,TNF-α為腫瘤壞死因子-α,MCP-1為單核細胞趨化蛋白-1,CAT為齲病活躍性試驗,ROC為受試者工作特征。

3 討論

嬰幼兒齲病具有發(fā)病早、波及牙數(shù)多、進展快、范圍大等特點,不僅影響患兒咀嚼和消化功能,還成為某些全身性疾病的危險因素[11]。國家衛(wèi)生健康委數(shù)據(jù)調查顯示,3歲兒童患齲率為50.8%,5歲兒童患齲率為71.9%,齲病成為危害我國兒童口腔健康的第一大口腔疾病[12]。齲病是乳牙慢性根尖周炎的首要病因,可導致膿腫、瘺管、根尖周骨吸收等,影響恒牙生長發(fā)育、萌出及牙根形態(tài)和走向,嚴重危害兒童口腔健康,所以早期預測其發(fā)生風險是必要的,且有積極的現(xiàn)實意義。

齲活性可反映兒童齲病的危險度與齲蝕波及范圍擴大的風險,是篩查齲病高危人群的一個重要參考。本研究發(fā)現(xiàn),隨著齲病危險度增加,學齡前齲病患兒齦溝液IL-6呈遞增趨勢,與齲病危險度呈正相關,表明齦溝液IL-6與兒童齲活性有關。IL-6可結合可溶性IL-6受體,通過反式信號通路發(fā)揮促炎作用,導致多種炎性疾病的發(fā)生和發(fā)展。近年來多項資料表明,IL-6與慢性牙周炎、口腔種植體周圍炎等口腔疾病發(fā)生、進展有關[13-14]。CHANG等[15]報道顯示,因齲病等導致的牙列缺損患者齦溝液IL-6水平升高。本研究亦發(fā)現(xiàn),發(fā)生組齦溝液IL-6高于未發(fā)生組,與乳牙慢性根尖周炎發(fā)生有關。根據(jù)紀瑩等[16]報道,與低齲患兒和健康對照兒童比較,高齲患兒唾液IL-6水平升高,且指出IL-6是通過影響口腔微生物群,增加齲活性,參與齲病的進展;同時高水平IL-6,可影響口腔局部微環(huán)境,通過慢性炎癥反應,導致牙釉質、牙本質脫礦質和破壞,誘發(fā)乳牙慢性根尖周炎[17]。本研究結果顯示IL-6預測慢性根尖周炎的AUC為0.732,可作為慢性根尖周炎的一個預測標志物。

TNF-α是由巨噬細胞等合成分泌的一種系統(tǒng)性炎性細胞因子。現(xiàn)階段關于TNF-α與兒童齲活性關系的研究較少。本研究發(fā)現(xiàn),隨著CAT分度增加,學齡前齲病患兒齦溝液TNF-α逐漸升高,且TNF-α與齲病危險度呈正相關,即齦溝液TNF-α越高,兒童齲活性越高。ALMARSHAD等[18]報道,齲齒的發(fā)生受基因調控,TNF-α基因多態(tài)性能通過影響免疫炎癥機制,影響兒童齲齒的易感性,證實TNF-α在兒童齲易感性中所起的作用。在以上研究基礎上,本研究還發(fā)現(xiàn),與無慢性根尖周炎患兒比較,有慢性根尖周炎患兒齦溝液TNF-α升高,與慢性根尖周炎發(fā)生密切相關。分析原因發(fā)現(xiàn),TNF-α可介導口腔局部炎癥反應,誘發(fā)牙齒侵蝕磨損、牙釉質破壞等,直接參與齲齒發(fā)生,且高水平TNF-α還能改變口腔局部微環(huán)境,增強齲活性,破壞牙釉質、牙本質,影響根尖健康,導致慢性根尖周炎發(fā)生[19-20]。本研究結果顯示TNF-α預測慢性根尖周炎的AUC為0.774,與IL-6預測價值相當,亦可作為慢性根尖周炎的一個預測標志物。

MCP-1是趨化因子家族成員,來源于成纖維細胞、血管內皮細胞、單核巨噬細胞等,可趨化和激活單核巨噬細胞[21-23]。本研究發(fā)現(xiàn),隨著CAT分度增加,學齡前齲病患兒齦溝液MCP-1呈遞增趨勢,且齦溝液MCP-1越高,齲活性越高;且發(fā)生組齦溝液MCP-1高于未發(fā)生組,提示齦溝液MCP-1與慢性根尖周炎發(fā)生有關。MCP-1可誘導白細胞趨化至炎癥部位,引起牙齒硬組織的慢性、進行性、破壞性改變,當牙釉質逐漸溶解,侵蝕牙齒內層后,即導致齲齒發(fā)生,并進一步造成慢性根尖周炎[24-25]。目前認為齲病及慢性根尖周炎發(fā)生需要同時存在細菌、飲食、宿主、時間四方面因素,本研究所觀察的齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1無論歸屬于宿主因素,還是歸屬于細菌、飲食因素間接導致的IL-6、TNF-α、MCP-1變化,最終均會影響齲活性和齲齒及慢性根尖周炎發(fā)生,因此初步推測,采用相關藥物或物理方法,降低齲病高危人群齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1水平,可降低齲活性,預防齲齒及其病情慢性進展。本研究結果顯示MCP-1預測慢性根尖周炎的AUC為0.743,與IL-6、TNF-α預測價值相當,且IL-6、TNF-α、MCP-1聯(lián)合CAT分度預測慢性根尖周炎的AUC最大,為0.924,能提高對慢性根尖周炎的預測價值,其預測敏感度為0.919,特異度為0.806,有望成為學齡前齲病患兒并發(fā)慢性根尖周炎的一個預測方案,可為臨床管理提供決策支持。

綜上,學齡前齲病患兒齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1與兒童齲活性及慢性根尖周炎發(fā)生密切相關,三者聯(lián)合CAT分度或可作為預測學齡前齲病患兒并發(fā)慢性根尖周炎的有效方案,可為臨床防治齲病提供參考。本研究不足之處在于,受限于研究經費、實際隨訪難度及患兒家長治療意愿等,未對比高齲活性及齲病患兒干預后齦溝液IL-6、TNF-α、MCP-1水平,有待后續(xù)進一步觀察探討。