孔繁榮 李海平 郭文忠 武月勝 郭建林 周可杰
摘要:本試驗(yàn)以西葫蘆‘農(nóng)園1 號(hào)為材料,設(shè)置7 個(gè)處理,分別是對(duì)照(CK,無(wú)干旱低溫脅迫且不澆灌黃腐酸鉀)、DL(干旱低溫脅迫下不澆灌黃腐酸鉀)和T1、T2、T3、T4、T5(干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀澆灌濃度分別為0.020%、0.035%、0.05%、0.065%、0.08%),研究干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀對(duì)西葫蘆幼苗生長(zhǎng)和生理生化特性的影響。 結(jié)果表明:干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗的干鮮重、脯氨酸含量和SOD、POD、CAT 活性以及光合能力均受到抑制,不同濃度黃腐酸鉀處理均可緩解干旱低溫對(duì)西葫蘆幼苗生長(zhǎng)和生理生化指標(biāo)的抑制作用。 其中T3 處理效果最佳,其幼苗葉面積、全株鮮重、全株干重、脯氨酸含量和SOD、POD、CAT 活性與DL 相比分別顯著增加13.89%、16.20%、17.43%、19.43%和13.48%、7.13%、16.28%,MDA 含量降低14.37%,葉綠素總量、凈光合速率顯著增加19.66%和17.95%,葉片的Fv/ Fm、ΦPSⅡ、ETR、qP 顯著升高4.25%、17.57%、14.85%和14.01%,Fo、NPQ 分別降低5.30%、15.79%,即減輕了干旱低溫脅迫對(duì)葉片光合器官的損傷。 綜上看出,黃腐酸鉀可以在一定程度上緩解干旱低溫脅迫對(duì)西葫蘆幼苗生長(zhǎng)和生理生化指標(biāo)的抑制作用,以0.05%黃腐酸鉀處理(T3)效果較為顯著。
關(guān)鍵詞:西葫蘆;黃腐酸鉀;干旱;低溫;幼苗生理
中圖分類號(hào):S642.6文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào):A文章編號(hào):1001-4942(2024)01-0074-07
西葫蘆(Cucurbita pepo L.) 在我國(guó)栽培普遍,節(jié)能日光溫室的引進(jìn)和發(fā)展更使冬春季日光溫室西葫蘆栽培面積迅速增加[1] 。 盡管日光溫室西葫蘆種植面積不斷增加,但在水、肥和光照管理等方面仍按照露地模式進(jìn)行,導(dǎo)致病害發(fā)生嚴(yán)重、品質(zhì)變差、產(chǎn)量下降、經(jīng)濟(jì)效益不佳[1] 。 北方設(shè)施栽培中,低溫也會(huì)導(dǎo)致作物生長(zhǎng)不良,降低作物產(chǎn)量[2]。
應(yīng)用外源物質(zhì)緩解或者減輕逆境給作物帶來(lái)的傷害已有研究[3] :鹽脅迫下,水楊酸溶液處理的種子發(fā)芽率提高,對(duì)根和莖的抑制效應(yīng)減輕,提高黃瓜的耐鹽性[4] ;噴施海藻酸鈉寡糖和赤霉素復(fù)配劑,可快速恢復(fù)亞低溫逆境下的番茄生長(zhǎng),促進(jìn)養(yǎng)分吸收和光合作用,增加有機(jī)物的積累量,提高果實(shí)產(chǎn)量和品質(zhì)[5] ;噴施適量濃度的脫落酸可以減輕鉛脅迫對(duì)植株的毒害作用,增強(qiáng)其對(duì)鉛脅迫的抵御能力,增強(qiáng)植物的光合作用[6] ;噴施甜菜堿可以提高干旱脅迫下茄子幼苗的生長(zhǎng),降低MDA 含量,提高茄子的耐旱性[7] ;外源褪黑素通過(guò)提高清除活性氧的能力和增強(qiáng)光合作用,緩解低溫脅迫對(duì)茄子幼苗的傷害[8] 。
黃腐酸(fulvic acid,FA) 具有分子量小、容易被植物吸收利用、生理活性強(qiáng)、易溶于水等特點(diǎn)[9] 。 劉玉豐等[10] 研究發(fā)現(xiàn),黃腐酸鉀可以增加鹽堿脅迫下甜瓜幼苗的生物量、凈光合速率,緩解鹽堿脅迫對(duì)甜瓜幼苗的抑制作用。 劉彩娟等[11]研究表明,黃腐酸顯著增加干旱脅迫下溫室黃瓜的葉綠素含量、凈光合速率,促進(jìn)干物質(zhì)積累,提高黃瓜的抗旱性。 張彩鳳等[12] 研究發(fā)現(xiàn),低溫脅迫下黃腐酸鉀能夠增強(qiáng)植物的抗氧化酶活性,抑制MDA 含量升高,提高凈光合速率,增強(qiáng)植物的抗寒性。 可以看出,外源物質(zhì)在作物抗逆性方面已有較多研究,但在干旱低溫共同脅迫下外源物質(zhì)對(duì)作物生長(zhǎng)和生理影響的研究還鮮見(jiàn)報(bào)道。 為此,本試驗(yàn)以西葫蘆為試材,研究不同濃度黃腐酸鉀對(duì)干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗生長(zhǎng)和生理生化指標(biāo)的影響,以期為生產(chǎn)中提高西葫蘆幼苗非生物抗性提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
供試西葫蘆品種為‘農(nóng)園1 號(hào)。 黃腐酸鉀由山西林海腐植酸科技有限公司提供,腐植酸含量≥50%、黃腐酸≥47%、K2O≥12%。
1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
試驗(yàn)于2021 年9—10 月在山西省晉中市東陽(yáng)鎮(zhèn)(37°32′N,112°40′E) 日光溫室(晝溫23 ~28 ℃,夜溫13 ~16 ℃,自然光照)中進(jìn)行。 將發(fā)芽一致的種子播種于草炭∶珍珠巖(V/ V)= 7∶2 的21 孔穴盤中,待幼苗長(zhǎng)至一葉一心時(shí),將長(zhǎng)勢(shì)一致的幼苗分為7 組,每組21 株。 試驗(yàn)設(shè)置7 個(gè)處理,見(jiàn)表1。 T1—T5 處理每天澆灌相應(yīng)濃度的黃腐酸鉀溶液,連續(xù)澆灌5 天,之后干旱(田間持水量的60%±5%)脅迫5 天,再低溫脅迫5 天。 低溫結(jié)束后緩苗3 天取樣測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。干旱處理:用稱重法控制水分,參考李建明等[13] 的方法進(jìn)行。 通過(guò)稱重記錄幼苗的蒸騰蒸發(fā)量,對(duì)照(CK)按照處理前一天100%蒸發(fā)量補(bǔ)充水分,DL、T1~T5 處理按照60%±5%蒸發(fā)量補(bǔ)充水分。
低溫處理:參考董緒兵等[14] 的方法在人工氣候室進(jìn)行。 其條件為:晝溫(7±1) ℃,12 h;夜溫(5±1) ℃,12 h,光照400 μmol/ (m2s)。
1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法
1.3.1 生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定 用直尺測(cè)量株高(莖基部到生長(zhǎng)點(diǎn)的距離)、葉長(zhǎng)、葉寬;游標(biāo)卡尺測(cè)量莖粗(基部粗度);電子天平(0.01 g)稱量西葫蘆幼苗全株鮮重,然后置于烘箱105 ℃ 殺青30 min、75 ℃烘干至恒重稱干重。 葉面積計(jì)算公式[15]為:S=0.578 1+0.774 8LB。 式中,S 是單片葉葉面積,L 是葉長(zhǎng),B 是最大葉寬。
1.3.2 生理指標(biāo)測(cè)定 參考高俊鳳等[16] 的方法測(cè)定。 其中,乙醇提取法測(cè)葉綠素含量,酸性茚三酮比色法、蒽酮比色法和考馬斯亮藍(lán)法分別測(cè)定脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量;采用氮藍(lán)四唑還原法、愈創(chuàng)木酚比色法、紫外吸收法、硫代巴比妥酸比色法分別測(cè)定SOD、POD、CAT 活性和MDA 含量。
1.3.3 光合指標(biāo)測(cè)定 于9∶00—11∶00 用LI-6800 光合儀在自然光下測(cè)量各處理幼苗自上向下數(shù)第二片葉的凈光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)、氣孔導(dǎo)度(Gs)、胞間二氧化碳濃度(Ci),測(cè)定時(shí)設(shè)置光量子通量密度為500 μmolm-2s-1,濕度為50%。
1.3.4 葉片熒光指標(biāo)測(cè)定 用LI-6800 光合儀熒光葉室測(cè)定光適應(yīng)下每株幼苗自上向下第二片葉的熒光參數(shù):PSⅡ?qū)嶋H光化學(xué)效率(ΦPSⅡ)、電子傳遞效率(ETR)、光化學(xué)猝滅系數(shù)(qP)和非光化學(xué)猝滅系數(shù)(NPQ)等;暗適應(yīng)1 h 后,用LI-6800 光合儀熒光葉室測(cè)定暗適應(yīng)下熒光參數(shù):初始熒光(Fo)、PSⅡ最大光化學(xué)量子產(chǎn)量(Fv/ Fm)。
1.4 數(shù)據(jù)處理與分析
用Microsoft Excel 2016 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,SPSS25.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
2 結(jié)果與分析
2.1 干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀對(duì)西葫蘆幼苗生物量的影響
由表2 可見(jiàn),干旱低溫脅迫(DL)下西葫蘆幼苗株高、莖粗、葉面積、全株鮮重和全株干重與對(duì)照(CK) 相比分別降低12.56%、12.07%、25.97%、20.00%、25.57%(P<0.05),說(shuō)明干旱低溫脅迫抑制西葫蘆幼苗生長(zhǎng)。 干旱低溫脅迫下不同濃度黃腐酸鉀處理西葫蘆幼苗株高、莖粗、葉面積、全株鮮重和全株干重與DL 相比均有不同程度的提高,且隨黃腐酸鉀濃度升高呈現(xiàn)先升高再降低趨勢(shì),其中T3 處理增幅最大,與DL 相比分別增加9.77%、10.46%、13.89%、16.20%和17.43%。 表明黃腐酸鉀可以一定程度上減輕干旱低溫脅迫對(duì)西葫蘆幼苗生長(zhǎng)的抑制,濃度0.05%處理(T3)的效果最好。
2.2 干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀對(duì)西葫蘆幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響
由表3 可知,對(duì)照(CK)相比,干旱低溫脅迫(DL)下幼苗葉片的脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量分別提高10.61%、20.67%、14.63%,且后兩者達(dá)顯著水平。 干旱低溫脅迫下不同濃度黃腐酸鉀處理西葫蘆幼苗葉片的脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量較DL 處理均有不同幅度的提高,并且隨黃腐酸鉀濃度增加表現(xiàn)為先升高再降低趨勢(shì),其中T3 處理的脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白含量最高,與DL 相比分別提高19. 43%、19.02%、15.95%(P <0.05)。 說(shuō)明黃腐酸鉀在一定程度上增加干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗葉片的脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白積累,濃度0.05%處理(T3)的效果最顯著。
2.3 干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀對(duì)西葫蘆幼苗丙二醛含量和抗氧化酶活性的影響
由表4 可見(jiàn),干旱低溫脅迫處理(DL)西葫蘆幼苗葉片的丙二醛(MDA)含量與對(duì)照(CK)相比顯著升高,說(shuō)明干旱和低溫條件對(duì)西葫蘆造成傷害,膜脂過(guò)氧化產(chǎn)物積累。 干旱低溫脅迫下不同濃度黃腐酸鉀處理西葫蘆幼苗葉片的MDA 含量與DL 相比均有不同程度的降低,并隨黃腐酸鉀濃度增加表現(xiàn)為先降低再升高趨勢(shì),其中T3 處理的MDA 含量最低,比DL 降低14.37%(P<0.05)。表明黃腐酸鉀可以降低葉片MDA 含量,減輕干旱低溫脅迫對(duì)西葫蘆幼苗的傷害,最適濃度為0.05%(T3)。
由表4 可見(jiàn),干旱低溫脅迫(DL)下西葫蘆幼苗葉片的SOD、POD、CAT 活性顯著高于對(duì)照(CK),分別高11.79%、9.89%和5.79%。 干旱低溫脅迫下不同濃度黃腐酸鉀處理西葫蘆幼苗葉片的SOD、POD、CAT 活性均不同程度高于DL 處理,其中濃度0.05%處理最高,分別比DL 處理增加13.48%、7.13%、16.28%。 表明黃腐酸鉀可以提高西葫蘆幼苗的抗氧化酶活性,緩解干旱低溫脅迫造成的傷害。
2.4 干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀對(duì)西葫蘆幼苗葉片光合色素含量的影響
由表5 可知,與對(duì)照(CK)相比,干旱低溫脅迫(DL)下西葫蘆幼苗葉片的葉綠素a、葉綠素b、類胡蘿卜素含量和葉綠素總量分別降低28.35%、25.72%、20.00%、27.18%(P<0.05)。 干旱低溫脅迫下不同濃度黃腐酸鉀處理西葫蘆幼苗葉片的葉綠素a、葉綠素b、葉綠素總量和類胡蘿卜素含量均比DL 處理有不同程度的提高,且隨黃腐酸鉀濃度增加表現(xiàn)為先增加再降低趨勢(shì),以T3 處理的葉片光合色素含量增幅最大,比DL 處理分別增加18.69%、19.23%、19.66%(P<0.05)和12.50%。表明黃腐酸鉀可有效增加干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗葉片的光合色素含量,最適濃度為0.05%(T3)。
2.5 干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀對(duì)西葫蘆幼苗葉片光合指標(biāo)的影響
由表6 可知,干旱低溫脅迫處理(DL)西葫蘆幼苗葉片的凈光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)、氣孔導(dǎo)度(Gs)、胞間二氧化碳濃度(Ci)均顯著低于對(duì)照(CK),分別降低19.06%、18.36%、17.95%和14.35%。 干旱低溫脅迫下不同濃度黃腐酸鉀處理西葫蘆幼苗葉片的Pn、Tr、Gs、Ci 與DL 處理相比均有不同程度的提高,并隨黃腐酸鉀濃度增加呈先升后降趨勢(shì),其中T3 處理的各指標(biāo)值均最高, 分別比DL 處理提高17. 95%、12.41%、12.50%、7.37%(P<0.05)。 表明黃腐酸鉀一定程度上能夠緩解干旱低溫脅迫對(duì)西葫蘆幼苗光合的抑制,濃度0.05%處理(T3)緩解作用最顯著。
2.6 干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀對(duì)西葫蘆幼苗葉片熒光參數(shù)的影響
由表7 可知,干旱低溫脅迫(DL)下西葫蘆幼苗葉片的Fv/ Fm、ΦPSⅡ、ETR、qP 顯著低于對(duì)照(CK), 分別降低4. 37%、18. 69%、20. 38% 和15.29%,Fo、NPQ 分別顯著升高8.02%、19.80%,表明干旱低溫脅迫造成葉片PSⅡ部分失活或傷害,光反應(yīng)能力降低,光合效率、光能利用效率降低。 干旱低溫脅迫下不同濃度黃腐酸鉀處理均能不同程度緩解西葫蘆幼苗葉片Fv/ Fm、ΦPSⅡ、ETR、qP 的降低和Fo、NPQ 的升高。 總體上來(lái)看,葉片Fv/ Fm、ΦPSⅡ、ETR、qP 隨黃腐酸鉀濃度增加均表現(xiàn)為先升高再降低趨勢(shì),Fo、NPQ 則是先降低再升高趨勢(shì)。 其中,與DL 相比,T3 處理(0.05%)西葫蘆幼苗葉片的Fv/ Fm、ΦPSⅡ、ETR、qP 最大,分別增加4. 25%、17. 57%、14. 85% 和14.01%,Fo、NPQ 分別降低5.30%和15.79%。 說(shuō)明適宜濃度的黃腐酸鉀可以一定程度上降低干旱低溫脅迫對(duì)西葫蘆幼苗PSⅡ的傷害,提高光合效率。
3 討論
逆境脅迫下植物的株高、莖粗、干鮮重受到抑制,生長(zhǎng)發(fā)育受阻[17] 。 本研究表明,干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗生長(zhǎng)發(fā)育受到抑制,且隨著黃腐酸鉀濃度增加幼苗株高、莖粗、干鮮重均有不同程度的增加,表明黃腐酸鉀一定程度上緩解了干旱低溫脅迫對(duì)西葫蘆幼苗生長(zhǎng)的抑制。 這與周海濤[18] 、王研[19] 等的研究結(jié)果基本一致。植物可以通過(guò)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖的累積增加細(xì)胞液濃度和降低水勢(shì),以增強(qiáng)吸水能力,抵御逆境造成的危害[20] 。本研究中,黃腐酸鉀處理一定程度上提高干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗葉片的脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白含量。 這與趙永長(zhǎng)[9] 、孫海燕[21] 等的研究結(jié)果部分一致,表明黃腐酸鉀可以增加干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗的細(xì)胞液濃度,調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓,提高幼苗的抗逆性。
受到非生物脅迫時(shí),植物體內(nèi)活性氧會(huì)積累,加重膜脂過(guò)氧化致使膜系統(tǒng)受損,其主要產(chǎn)物丙二醛直接反映細(xì)胞膜過(guò)氧化程度,間接反映植物體內(nèi)活性氧水平[22-24] 。 植物體內(nèi)的SOD、POD、CAT 是重要的抗氧化酶,可以清除超氧陰離子自由基、過(guò)氧化氫和羥自由基,減少活性氧,降低膜脂過(guò)氧化,穩(wěn)定細(xì)胞膜透性[25-27] 。 本研究表明,干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗葉片的MDA 含量增加,SOD、POD、CAT 活性升高,這與前人研究結(jié)果基本一致。 張小冰等[28] 研究發(fā)現(xiàn),腐植酸提高干旱脅迫下玉米幼苗葉片的SOD、POD、CAT 活性,降低MDA 含量。 金平等[29] 研究表明,低溫脅迫下腐植酸可提高水稻葉片脯氨酸含量,減少MDA含量,提高水稻抗冷性。 本試驗(yàn)結(jié)果表明,黃腐酸鉀一定程度上提高干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗葉片的SOD、POD、CAT 活性,降低其MDA 含量。說(shuō)明黃腐酸鉀能夠減輕膜脂過(guò)氧化程度,提高植物的抗逆性。
葉綠素是植物進(jìn)行光合作用的主要色素,在一定范圍內(nèi)光合速率與葉綠素含量關(guān)系密切[30,31] 。 本試驗(yàn)中,干旱低溫脅迫一定程度上減少幼苗葉片中類胡蘿卜素和葉綠素的合成。 其原因可能是,該脅迫導(dǎo)致光合色素降解程度加重,從而使葉綠素積累量下降[32] ,而黃腐酸鉀能夠抑制色素降解。 植物在非生物脅迫下可以通過(guò)光合參數(shù)Pn、Ci、Gs、Tr 的變化反映光合作用的強(qiáng)弱[33] 。李英浩等[34] 研究表明,腐植酸可以改善干旱脅迫下燕麥葉片的光合性能;張彩鳳等[12] 研究指出,腐植酸鉀可以減輕低溫脅迫后植物的蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度、凈光合速率的降低程度。 本試驗(yàn)結(jié)果表明,干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗葉片的Pn、Ci、Gs、Tr 顯著降低,而干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀處理西葫蘆幼苗葉片的各光合參數(shù)值與DL 相比顯著增加。 這說(shuō)明黃腐酸鉀能夠增強(qiáng)干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗葉片光合色素的穩(wěn)定性,提高光合速率。
葉綠素?zé)晒鈪?shù)是研究植物光合功能的重要指標(biāo),可以反映植物在逆境下光合作用的真實(shí)行為[35] 。 本試驗(yàn)中,干旱低溫脅迫下西葫蘆幼苗葉片的Fv/ Fm 、ΦPSⅡ、ETR、qP 低于對(duì)照(CK),Fo、NPQ 則高于CK。 這表明西葫蘆幼苗葉片PSⅡ光合機(jī)構(gòu)受到傷害,熱能形式消耗掉的能量增加,光合效率降低,與杜清潔[36] 、卞鳳娥[37] 等的研究結(jié)果類似。 干旱低溫脅迫下黃腐酸鉀處理西葫蘆幼苗葉片的Fv/ Fm、ΦPSⅡ、ETR、qP 均有不同程度的升高,Fo、NPQ 則降低,表明黃腐酸鉀在一定程度上緩解干旱低溫脅迫對(duì)西葫蘆幼苗葉片PSⅡ的傷害,提高PSⅡ反應(yīng)中心的光化學(xué)活性,繼而提高光合效率。
4 結(jié)論
本研究表明:黃腐酸鉀一定程度上能夠減輕干旱低溫脅迫對(duì)西葫蘆幼苗生長(zhǎng)的抑制;提高抗氧化酶活性,降低活性氧含量;降低MDA 含量,減輕膜脂過(guò)氧化程度;增加滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量,維持細(xì)胞內(nèi)滲透平衡;增加葉綠素含量,增強(qiáng)光合作用,降低PSⅡ光合機(jī)構(gòu)受到的傷害,提高光合效率,增強(qiáng)西葫蘆幼苗的抗逆性。 整體上看,各處理中以0.05%黃腐酸鉀處理(T3)效果最佳,西葫蘆幼苗葉面積、全株鮮重、全株干重、脯氨酸含量和SOD、POD、CAT 活性與DL(干旱低溫脅迫)相比,分別顯著增加13.89%、16.20%、17.43%、19.43%和13.48%、7.13%、16.28%,MDA 含量降低14.37%;葉綠素總量、凈光合速率顯著增加19. 66% 和17.95%;葉片的Fv/ Fm、ΦPSⅡ、ETR、qP 顯著升高4.25%、17.57%、14.85%、14.01%,Fo、NPQ 分別降低5.30%、15.79%。 綜上,黃腐酸鉀可以在一定程度上緩解干旱低溫脅迫對(duì)西葫蘆幼苗生長(zhǎng)和生理生化的抑制作用,以0.05%黃腐酸鉀處理(T3)效果較為顯著。
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