李蒙 蘇世平 張正中 李超群 陳君嬋 李毅

摘 要 以室溫貯藏條件下0～4 a的紅砂（Reaumuria soongorica）種子為試驗(yàn)材料，通過測定不同貯藏年限紅砂種子的萌發(fā)指標(biāo)、生理指標(biāo)及種胚顯微結(jié)構(gòu)，探究紅砂種子在貯藏老化過程中種子活力及其生理和顯微結(jié)構(gòu)的變化特征。結(jié)果表明：隨著貯藏年限的增加，紅砂種子芽長、萌發(fā)率、萌發(fā)勢(shì)、 發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)和含水量逐漸降低，超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、可溶性糖（soluble sugar，SS）和可溶性蛋白（soluble protein，SP）含量呈先升高后降低的趨勢(shì)，丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量逐漸上升。紅砂種子萌發(fā)指標(biāo)與MDA含量呈顯著（P<0.05）負(fù)相關(guān)，與SS、SP呈正相關(guān)。當(dāng)年采收的種子，胚部細(xì)胞排列緊密，貯藏3～4 a的種子胚部細(xì)胞排列散亂，木質(zhì)化程度加深著色效果明顯，并伴隨子葉逐漸縮小的現(xiàn)象。綜上認(rèn)為，紅砂種子含水量、MDA和SP含量可較為準(zhǔn)確地反映其活力，且紅砂種子活力變化的節(jié)點(diǎn)在2～3 a之間。在實(shí)際生產(chǎn)中，建議選擇采收后室溫貯藏1 a的種子為播種材料。

關(guān)鍵詞 紅砂種子；貯藏年限；種子活力；生理指標(biāo)；種胚顯微結(jié)構(gòu)

種子是植物遺傳資源的有效保存體，其在貯藏過程中內(nèi)部結(jié)構(gòu)和內(nèi)含物都會(huì)發(fā)生一系列的變化[1]，主要表現(xiàn)在萌發(fā)特性、抗氧化酶活性、內(nèi)部代謝物質(zhì)含量（如可溶性蛋白、可溶性糖、丙二醛等）和細(xì)胞結(jié)構(gòu)等方面[2]。貯藏時(shí)間是影響種子活力水平和萌發(fā)特性的主要因素之一，貯藏時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致種子種胚發(fā)育受到抑制、幼苗生長緩慢、植株發(fā)育不良[3]，從而影響作物、飼草、林木等種質(zhì)資源的保育和創(chuàng)新，給農(nóng)林生產(chǎn)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[4]。如室溫貯藏10 a的沙蔥（Allium mongolicum）種子其萌發(fā)率和萌發(fā)勢(shì)隨貯藏年限的增加逐漸降低，呼吸速率和各類抗氧化酶活性隨貯藏年限的增加呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)，其有效的貯藏期限為3 a[5]。隨著貯藏年限的增加沙芥種子（Pugioniym cornutum）和斧形沙芥（Pugioniym dolabratum）種子可溶性糖和淀粉含量呈先上升后降低的趨勢(shì)，其平均壽命為4 a和6 a[6]。

紅砂（Reaumuria soongorica）是廣泛分布在中國西北干旱荒漠地區(qū)的多年生小灌木[7]，具有較強(qiáng)的耐旱、耐鹽堿等特性，對(duì)荒漠地區(qū)的生態(tài)修復(fù)發(fā)揮著重要作用[8]。作為典型的荒漠植被，其多以種子為繁殖材料。關(guān)于貯藏條件對(duì)紅砂種子的影響，前人的研究主要集中在不同溫度及濕度方面。高茜[9]報(bào)道，隨著貯藏溫度的變化，紅砂種子SOD、POD活性逐漸降低，且在-8 ℃貯藏條件下能有效抑制種子衰老，保持種子活力。王鑫鑫等[10]研究發(fā)現(xiàn)，紅砂種子在高溫高濕環(huán)境條件下，其萌發(fā)指標(biāo)和保護(hù)酶活性降低，內(nèi)部代謝物質(zhì)含量增加。然而目前，關(guān)于不同貯藏年限對(duì)紅砂種子活力、生理特征及種胚顯微結(jié)構(gòu)影響等方面的研究尚未見報(bào)道。

本試驗(yàn)以室溫貯藏0～4 a的紅砂種子作為試驗(yàn)材料，研究紅砂種子活力、生理特性及內(nèi)部顯微結(jié)構(gòu)的變化，以期初步探索紅砂種子在貯藏過程中的生理生化變化機(jī)制。本研究結(jié)果將為紅砂種子采收、培育及種苗生產(chǎn)提供方法指導(dǎo)，并為紅砂種子老化機(jī)理探索提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試種子分別于2017-2021年每年11月采收于甘肅省武威市紅砂種源試驗(yàn)基地相同母株。每個(gè)年限的種子采收后均用14目篩子凈種，室內(nèi)陰干后置于自封袋中，室溫保存。

1.2 測定指標(biāo)與方法

1.2.1 種子萌發(fā)指標(biāo)的測定 選取2017-2021年5個(gè)年限均勻飽滿的紅砂種子各100粒，并設(shè)置3次重復(fù)，共1 500粒（約2.1 g）種子。用10%的84消毒液消毒20 min后，用蒸餾水沖洗3次，并在蒸餾水中浸種24 h后，將種子置于墊有潤濕紗布的發(fā)芽盒中。萌發(fā)試驗(yàn)在溫度（25±1）? ℃，相對(duì)濕度35%的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中進(jìn)行。萌發(fā)過程中每日16：00-18：00觀察并統(tǒng)計(jì)種子發(fā)芽個(gè)數(shù)，同時(shí)稱量補(bǔ)充已損失水分。種子發(fā)芽以露白為標(biāo)準(zhǔn)，萌發(fā)總天數(shù)為種子置培養(yǎng)箱當(dāng)天至連續(xù)3 d不發(fā)芽截止的天數(shù)。待發(fā)芽結(jié)束后（第11 天），選取5個(gè)年限的正常種苗（每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取10株幼苗進(jìn)行測定）用方格紙測量芽長，并按以下公式計(jì)算萌發(fā)率、萌發(fā)勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)[11-14]。

GP=n1/N×100%（1）

GE=n2/N×100%（2）

GI=∑（Gt/Dt）（3）

VI=GP×L（4）

其中：GP為萌發(fā)率，GE為萌發(fā)勢(shì)，GI為發(fā)芽指數(shù)，VI為活力指數(shù)，n1為正常發(fā)芽的種子數(shù)，n2為單日發(fā)芽種子數(shù)出現(xiàn)高峰前的所有發(fā)芽種子數(shù)，N為供試種子總數(shù)，L為芽長（cm），Gt為第t天的發(fā)芽數(shù)，Dt為相應(yīng)的發(fā)芽時(shí)間（d）。

1.2.2 種子含水量測定 本試驗(yàn)嚴(yán)格按照國際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì)檢驗(yàn)規(guī)程[15]，對(duì)每個(gè)年限貯藏后的紅砂種子含水量進(jìn)行測定。每個(gè)年限稱取約? 4.5 g（共67.5 g）籽粒飽滿均一、無蟲害的紅砂種子，放入鋁盒并進(jìn)行稱量，并設(shè)置3次重復(fù)。將供試鋁盒蓋全部開啟后，迅速放入130 ℃的烘箱內(nèi)，烘干2 h。到達(dá)預(yù)定時(shí)間后，蓋好鋁盒蓋，迅速放入干燥器里冷卻干燥后進(jìn)行稱量。

種子含水量計(jì)算公式為：種子含水量=? （M2-M1）/（M2-M3）×100%

其中，M1為鋁盒及蓋子和樣品烘干后總質(zhì)量（g），M2為鋁盒及蓋子和樣品烘干前總質(zhì)量（g），M3為鋁盒及蓋子的總質(zhì)量（g）。

1.2.3 生理指標(biāo)的測定 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性：SOD活性采用氮藍(lán)四唑還原法[16]測定。稱0.20 g吸脹的紅砂種子放入預(yù)冷的研缽中，加入2 mL 0.05 μmol/L pH 7.8的磷酸緩沖液研磨成勻漿，再用緩沖液定容至10 mL，在4 ℃條件下12 000 r/min離心20 min，以0.1 mL上清液（粗酶液）為A液，加B液（1.5 mL 50 mmol/L磷酸緩沖液，0.3 mL 130 mmol/L甲硫氨酸溶液，0.3 mL 750 μmol/L氮藍(lán)四唑溶液，0.3 mL 20 μmol/L核黃素溶液，0.3 mL 100 μmol/L EDTA-Na2溶液，蒸餾水0.1 mL）測定SOD活性，2支對(duì)照管加樣只需將A液換為蒸餾水即可，1支遮光處理，1支同測試管一起在25 ℃ 4 000 lx光照度下光還原15 min。以暗處理管為對(duì)照，采用酶標(biāo)儀（spectra MAX 190，美國）在560 nm波長處測定吸光度值用以計(jì)算酶活性，每個(gè)年限設(shè)置4次生物學(xué)重復(fù)（各生理指標(biāo)重復(fù)數(shù)相同）。

可溶性糖（soluble sugar，SS）含量：SS含量采用蒽酮-乙酸乙酯比色法[17]測定。稱0.20 g吸脹的紅砂種子放入預(yù)冷的研缽中，加入蒸餾水研磨成勻漿，并定容至10 mL，于沸水中提取30 min（提取兩次），取0.5 mL于20 mL試管中，加蒸餾水1.5 mL，再加0.5 mL蒽酮-乙酸乙酯溶液以及5 mL濃硫酸，并設(shè)空白對(duì)照（不加樣液），采用酶標(biāo)儀在630 nm波長處測定吸光度值。

可溶性蛋白（soluble protein，SP）含量：SP含量采用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法測定[18]。稱? 0.20 g吸脹的紅砂種子放入預(yù)冷的研缽中，加蒸餾水研磨并定容至10 mL，取3 mL勻漿離心，吸取0.5 mL上清液，加0.5 mL蒸餾水，5 mL考馬斯亮藍(lán)G-250試劑混勻，放置2 min后，采用酶標(biāo)儀在595 nm波長處測定吸光度值。

丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量：MDA含量采用高俊鳳[19]的方法測定。稱0.20 g吸脹的紅砂種子放入預(yù)冷的研缽中，加入2 mL 10%三氯乙酸溶液，研磨并定容至5 mL，3 000?? r/min離心10 min，上清液即為樣品提取液。取上清液1 mL，對(duì)照管加1 mL蒸餾水，分別加2 mL?? 0.6%硫代巴比妥酸溶液，混勻后置于沸水浴中煮15 min，冷卻后離心取上清液，采用酶標(biāo)儀分別在450 nm、532 nm和600 nm波長處測定吸光? 度值。

1.2.4 解剖結(jié)構(gòu)的觀測 隨機(jī)選取不同貯藏年限的種子各20粒，共100粒種子（約0.14 g），經(jīng)FAA[無水乙醇∶37%甲醛∶冰乙酸=18∶1∶1（體積比）]固定48 h冷藏后，制作石蠟切片，植物番紅染色液染色2 h，再將切片放入不同濃度梯度的酒精中脫色3～8 s，再用植物固綠染色液染色20 s后二次脫色，最后中性樹膠封片[20]。NIKON E100顯微鏡對(duì)各年限紅砂種子胚結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察，NIKON DS-U3成像系統(tǒng)拍照。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用EXCEL 2019軟件進(jìn)行萌發(fā)指標(biāo)及生理指標(biāo)的計(jì)算和制圖，圖表中數(shù)據(jù)均為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”。利用SPSS 21.0軟件中的單因素（One-way ANOVA）和Duncans法進(jìn)行萌發(fā)指標(biāo)及生理指標(biāo)的方差分析和多重比較（α=0.05），?? P<0.05代表差異顯著。采用Pearson相關(guān)分析方法分析萌發(fā)指標(biāo)和生理指標(biāo)之間的關(guān)系。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同貯藏年限對(duì)紅砂種子萌發(fā)特性的影響

由圖1和表1可知，隨貯藏年限的增加，紅砂種子萌發(fā)指標(biāo)均呈逐漸降低的趨勢(shì)。在0～2 a的貯藏期內(nèi)，種子萌發(fā)指標(biāo)下降趨勢(shì)較小，而在? 3～4 a的貯藏期內(nèi)，種子萌發(fā)指標(biāo)下降趨勢(shì)明顯。其中貯藏2 a和3 a的種子萌發(fā)指標(biāo)變化最大，貯藏4 a的種子萌發(fā)指標(biāo)顯著低于（P<0.05）0～3 a的種子。此外從萌發(fā)率曲線可以看出，貯藏0～2 a的種子萌發(fā)速率也大于3～4 a的種子?？傮w來看，室溫貯藏1 a的紅砂種子，其萌發(fā)效果? 最佳。

2.2 不同貯藏年限對(duì)紅砂種子含水量的影響

由圖2可知，紅砂種子含水量隨貯藏年限的增加逐漸減小。當(dāng)年采收的種子含水量最高，與貯藏1 a相比差異不顯著（P>0.05），與2～4 a相比差異顯著（P<0.05），貯藏2 a和3 a的種子含水量差異顯著（P<0.05）且降幅最大為? 21.76%。貯藏4 a的種子含水量最低，顯著低于貯藏0～2 a的種子（P<0.05）。

2.3 不同貯藏年限對(duì)紅砂種子超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響

由圖3可知，紅砂種子SOD活性隨貯藏年限的增加呈先增加后降低的趨勢(shì)，至第4 年降至最低，僅為44.31 U/g。其中貯藏1 a的種子SOD活性最高，達(dá)到170.67 U/g，與其他各貯藏年限相比差異顯著（P<0.05），貯藏1 a和2 a的種子SOD活性變化最大，降幅為37.35%。

2.4 不同貯藏年限對(duì)紅砂種子內(nèi)部代謝物質(zhì)含量的影響

紅砂種子可溶性糖（SS）和可溶性蛋白（SP）含量隨著貯藏年限的增加都呈先增加后降低的趨勢(shì)（圖4-A，4-B），且均在貯藏1 a時(shí)達(dá)到峰值，分別為5.15 mg/g、4.37 mg/g，在貯藏4 a時(shí)降至最低，分別為2.82 mg/g、2.38 mg/g，與其他年限相比差異顯著（P<0.05）。其中SS含量在貯藏3 a和4 a間降幅最大為31.88%，SP含量在貯藏1 a和2 a間降幅最大為24.54%。紅砂種子MDA含量隨著貯藏年限的增加呈逐漸升高的趨勢(shì)（圖4-C），當(dāng)年采收的種子MDA含量最低，僅為3.97 μmol/g，顯著低于其他年限（P<0.05），貯藏4 a種子MDA含量最高，達(dá)到14.28?? μmol/g，顯著高于其他貯藏年限? （P<0.05）。其中貯藏1 a和2 a的種子MDA含量增幅最大，為? 96.30%。

2.5 貯藏年限對(duì)紅砂種子胚解剖結(jié)構(gòu)的影響

由圖5可以看出，室溫貯藏條件下，各年限種子隨著貯藏年限的增加，種子胚與種皮之間的間隙逐漸增大。

貯藏2 a的種子胚表層薄壁細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞，種皮薄壁細(xì)胞出現(xiàn)破裂現(xiàn)象而且界限不明顯（圖5-C）；貯藏3～4 a的種子胚，其子葉逐漸減小（圖5-D），薄壁細(xì)胞排列散亂，種皮薄壁細(xì)胞厚度減?。▓D5-E），染色劑著色效果較差，但種子胚的薄壁細(xì)胞染色程度卻進(jìn)一步加深。

2.6 各貯藏年限紅砂種子生理指標(biāo)與萌發(fā)指標(biāo)的相關(guān)性

由表2可知，不同貯藏年限的紅砂種子MDA含量與各萌發(fā)指標(biāo)呈極顯著負(fù)相關(guān)（P

3 討? 論

3.1 不同貯藏年限紅砂種子的萌發(fā)特性

種子壽命和活力反映了種子質(zhì)量及其綜合特性，高活力種子擁有在惡劣環(huán)境條件下正常萌發(fā)和出苗的能力[21]。芽長、萌發(fā)率和萌發(fā)勢(shì)等是種子活力狀況評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)，種子活力越高則其抗逆能力越強(qiáng)[22]。本研究發(fā)現(xiàn)，紅砂種子萌發(fā)指標(biāo)隨貯藏年限的增加逐漸降低，其在貯藏的0～? 2 a內(nèi)均能正常萌發(fā)，萌發(fā)指標(biāo)也都比較高。但在貯藏第3年時(shí)，由于種子內(nèi)部營養(yǎng)物質(zhì)的損失，其萌發(fā)指標(biāo)均有大幅度的下降，這與老芒麥 （Elymus sibiricus） 和燕麥（Avena sativa） 種子的貯藏研究得出的結(jié)果一致[23-24]。試驗(yàn)表明，室溫貯藏條件下，紅砂種子活力變化的節(jié)點(diǎn)在貯藏第? 2～3 年，考慮到維持種子高活力的因素，紅砂種子安全的貯藏年限應(yīng)保持在2 a之內(nèi)。

3.2 不同貯藏年限紅砂種子SOD活性的變化

SOD是抗氧化系統(tǒng)中重要的保護(hù)酶，可以通過歧化作用清除種子細(xì)胞內(nèi)積累的活性氧自由基，種子SOD活性越高則其抗氧化能力越強(qiáng)，種子活力也越高[25]。本研究發(fā)現(xiàn)，貯藏0～1 a的紅砂種子SOD活性較高，說明種子活力較高，抗逆能力強(qiáng)。貯藏第3年活性氧自由基迅速積累，SOD活性急劇下降，種子活力隨之減弱，這與常海文[26]對(duì)貯藏3 a的沙蔥（Allium mongolicum）種子SOD活性的研究得出的結(jié)果一致。筆者推測，種子貯藏初期，活性氧自由基增加，為清除活性氧自由基維持代謝平衡SOD活性升高，但隨著貯藏年限的延長，活性氧自由基進(jìn)一步積累，代謝平衡被破壞，SOD活性持續(xù)降低。

3.3 不同貯藏年限紅砂種子內(nèi)部相關(guān)物質(zhì)含量的變化

首先，種子含水量與其貯藏時(shí)間密切相關(guān)，種子貯藏過程中含水量的變化會(huì)對(duì)其活力及耐貯性產(chǎn)生較大影響[27]。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著貯藏年限的增加紅砂種子的水分逐漸減少，種子含水量與其萌發(fā)指標(biāo)呈正相關(guān)，這與辛慧慧[28]對(duì)不同貯藏年限紅豆草（Onobrychis viciaefolia）種子含水量對(duì)萌發(fā)指標(biāo)的研究結(jié)果類似。由此得出，室溫貯藏條件下，紅砂種子在0～2 a的貯藏期內(nèi)含水量不會(huì)影響其生活力，種用價(jià)值未受影響。

其次，貯藏1 a的種子其呼吸速率加快，種子內(nèi)各類大分子物質(zhì)轉(zhuǎn)化為可溶性糖[29]，其含量較當(dāng)年采收有所增加，但隨著貯藏年限的延長，種子內(nèi)部生理生化反應(yīng)持續(xù)消耗可溶性糖，其含量開始下降，這與披堿草（Elymus nutans）和藍(lán)莖冰草（Agropyrom smithii）種子可溶性糖含量隨貯藏時(shí)間的增加先升高后降低的情況一致[30-31]。可溶性蛋白為植物的生長發(fā)育提供了氮素營養(yǎng)，在老化種子內(nèi)蛋白質(zhì)發(fā)生羰基化作用使蛋白質(zhì)功能特性消失，影響正常的糖酵解、三羧酸循環(huán)等生化過程[32]。有研究表明，苜蓿（Medicago sative）種子、沙芥（Pugionium cornutum）種子和沙蔥（Allium mongolicum）種子在貯藏過程中，其可溶性糖含量均呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)[33-35]。本研究發(fā)現(xiàn)，貯藏1 a的紅砂種子可溶性蛋白含量最高，但從第3年起其含量開始下降，貯藏第4年時(shí)降至最低。由此推測紅砂種子在貯藏后期，其內(nèi)部物質(zhì)能量代謝受到影響，薄壁細(xì)胞逐漸被破壞，導(dǎo)致細(xì)胞無法合成新的蛋白質(zhì)，造成可溶性蛋白含量降低，種子活力下降。

再次，MDA是植物膜脂過氧化的最主要產(chǎn)物之一，可以反映種子生物膜系統(tǒng)受毒害的程度[36]。方驕陽等[37]研究得出，隨著貯藏時(shí)間的變化香椿[Toona sinensis （A.Juss）Rem]種子內(nèi)MDA含量逐漸增加，這與本試驗(yàn)結(jié)果一致。筆者發(fā)現(xiàn)室溫貯藏條件下，隨著貯藏年限的增加MDA含量逐漸增加。尤其在貯藏2 a和貯藏3 a間的增加幅度最為明顯。因此推測，貯藏第3年時(shí)種子老化程度加劇，脂膜過氧化物增加，種子內(nèi)環(huán)境進(jìn)一步惡化，MDA迅速增加。

3.4 不同貯藏年限紅砂種子種胚顯微結(jié)構(gòu)特征

種子胚細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性與其貯藏時(shí)間密切相關(guān)[38]，種胚細(xì)胞的畸變和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的損傷將導(dǎo)致種子活力下降[39]。本研究發(fā)現(xiàn)，各貯藏年限的紅砂種子，在種子胚的薄壁細(xì)胞結(jié)構(gòu)及染色液著色情況上均有較大差異。在貯藏0～1 a時(shí)，種子胚與種皮間的間隙較小，二者薄壁細(xì)胞排列緊密，膜結(jié)構(gòu)比較完整，但隨著貯藏年限的增加，胚外層薄壁細(xì)胞被損害，染色程度加深，這些現(xiàn)象與紅砂種子的SOD活性、MDA含量密切相關(guān)。在貯藏初期，種子內(nèi)部抗氧化酶活性較高，胚部細(xì)胞受損傷程度小，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整。貯藏后期， MDA含量增高，細(xì)胞受毒害程度加劇，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)遭到破壞，薄壁細(xì)胞破裂，種子活力降低。胚的薄壁細(xì)胞染色逐漸加深的原因則是，隨著種子貯藏年限的增加，其木質(zhì)化程度越來越高[40]，因?yàn)榉t能將細(xì)胞內(nèi)的木質(zhì)素染成紅色，故胚的薄壁細(xì)胞呈現(xiàn)出了著色逐漸加深的現(xiàn)象。同時(shí)筆者也發(fā)現(xiàn)貯藏年限為3～4 a的紅砂種子，其含水量已經(jīng)達(dá)到超干狀態(tài)，種子因吸脹損傷嚴(yán)重而出現(xiàn)了子葉逐漸縮小的情況。

4 結(jié)? 論

在室溫貯藏條件下，紅砂種子活力變化的節(jié)點(diǎn)在2～3 a之間，貯藏4 a以上的種子已基本喪失種用價(jià)值。采收后貯藏1 a的種子可溶性糖和蛋白含量最高，細(xì)胞膜及細(xì)胞器結(jié)構(gòu)完整。在紅砂的育種和栽培過程中，建議以貯藏1 a的種子為播種材料。

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Effects of Different Storage Years on Physiological Characteristics and Embryo Structure of Reaumuria soongorica Seeds

Abstract

In this study， Reaumuria soongorica seeds stored at room temperature for 0-4 a were used as experimental materials， the germination index， physiological index and embryo microstructure of Reaumuria soongorica seeds with different storage years were measured to explore the changes in seed vigor， physiology and microstructure during storage and aging. The results showed that the bud length， germination rate， germination potential， germination index， vigor index and water content of Reaumuria songarica seeds decreased gradually with the increasing storage years. The activity of superoxide dismutase （SOD）， the contents of soluble sugar （SS） and soluble protein （SP） increased and then decreased， while the content of malondialdehyde （MDA） increased gradually. The germination index of Reaumuria songarica seeds was negatively correlated with MDA content （P<0.05）， and positively correlated with SS and SP. Seeds harvested in the current year， had closely arranged embryo cells， whereas seeds stored of 3-4 years exhibited disordered embryo cell arrangement， the degree of lignification deepened and the colouring effect was obvious， and the phenomenon of gradual shrinkage with cotyledons was also observed. In conclusion， the water content， MDA and SP content of Reaumuria songarica seeds can accurately reflect their viability， and the node of seeds vigor change were between 2-3 a. In the production， it is recommended to select seeds stored at room temperature for 1 year post-harvest as sowing materials. The results of this experiment provide a theoretical for the vigor repair and safe storage of Reaumuria songarica seeds in the future.

Key words Reaumuria soongorica seeds; Storage life; Seed vigor; Physiological indicators; Microstructure of seed embryo