郭明 馬利萍 李凱 楊天一 張滿讓

摘 要 選取了寶雞地區(qū)生產(chǎn)上常用的T337自根砧和M26中間砧分別搭配普通型富士‘長富2號(hào)和短枝型富士‘禮泉短富，對(duì)4種砧穗組合蘋果樹葉片的養(yǎng)分吸收和蔗糖代謝，短枝頂芽的激素代謝、成花基因表達(dá)等進(jìn)行了全面的評(píng)價(jià)，探究了不同砧木對(duì)普通型和短枝型富士系蘋果花芽分化的影響，以期為寶雞地區(qū)篩選適宜搭配富士系蘋果的最優(yōu)砧木類型。結(jié)果表明：同一富士系品種嫁接不同砧木類型，T337自根砧組合較M26中間砧組合有更高的開花率和更飽滿的短枝頂芽，并且在花芽生理分化期，T337自根砧組合中糖類物質(zhì)的合成和積累、蔗糖代謝和激素代謝水平以及成花基因的表達(dá)均顯著優(yōu)于M26中間砧組合?？梢姡琓337自根砧搭配富士系蘋果較M26中間砧搭配富士系蘋果更易成花。

關(guān)鍵詞 蘋果砧木；糖代謝；激素代謝；成花基因

蘋果（Malus domestica Borkh.）是薔薇科蘋果亞科蘋果屬的一種落葉果樹，也是中國種植面積最廣、產(chǎn)量最多的水果。如今，蘋果產(chǎn)業(yè)已成為國內(nèi)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)和農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重要組成部分，在解決“三農(nóng)”問題和實(shí)現(xiàn)鄉(xiāng)村振興中起到了難以替代的重要作用，因此，大力發(fā)展蘋果產(chǎn)業(yè)，推廣矮化密植栽培，提升經(jīng)濟(jì)效益，是我國完成蘋果產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型的大勢(shì)所趨[1]。

花芽的質(zhì)量和數(shù)量決定了果實(shí)的品質(zhì)和產(chǎn)量，直接影響經(jīng)濟(jì)效益[2]?；ㄑ康男纬奢^為復(fù)雜，通俗的講，就是由葉芽向花芽轉(zhuǎn)化的過程，也稱花芽分化。蘋果的花芽分化一般集中在6-9月，? 6-7月是分化盛期，蘋果樹花芽分化主要經(jīng)歷3個(gè)時(shí)期，分別為生理分化期、形態(tài)分化期和花芽進(jìn)一步發(fā)育期[3]。在嫁接蘋果樹的生長過程中，嫁接砧木和接穗間存在顯著的相互作用和廣泛的物質(zhì)交流[4]，砧木可直接影響接穗多方面的生長發(fā)育，而接穗品種又會(huì)影響砧木的生長發(fā)育和特性表現(xiàn)，其中砧木作為地下部分，它對(duì)接穗的影響作用更為顯著[5]。因此，從形態(tài)、生理以及基因表達(dá)方面探究不同砧木對(duì)蘋果樹花芽分化的影響，更有助于因地制宜地選出適宜的品種。

富士蘋果普遍存在成花難、早花早果性差的問題，而國內(nèi)對(duì)蘋果不同矮化栽培模式的研究主要集中在砧木適應(yīng)性和育種技術(shù)上[6]，對(duì)嫁接不同砧木的富士蘋果相關(guān)物質(zhì)代謝過程和花芽形成關(guān)系的研究較少。本試驗(yàn)選取生產(chǎn)上常用的T337自根砧和M26中間砧分別搭配短枝型富士品種‘禮泉短富和普通型富士品種‘長富2號(hào)，對(duì)4種砧穗組合蘋果葉片的養(yǎng)分吸收和蔗糖代謝，短枝頂芽的激素代謝和成花相關(guān)基因的表達(dá)水平進(jìn)行全面系統(tǒng)的評(píng)價(jià)，探討不同砧木對(duì)富士蘋果花芽分化的影響，以期為寶雞地區(qū)的富士品種篩選適宜的矮化砧木。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況與試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于西北農(nóng)林科技大學(xué)寶雞千陽蘋果試驗(yàn)示范站進(jìn)行，試驗(yàn)站地處寶雞市千陽縣南寨鎮(zhèn)（34°65′N，107°17′E），海拔890 m，屬于北溫帶大陸性季風(fēng)半濕潤氣候。試驗(yàn)區(qū)內(nèi)光照充足，基礎(chǔ)設(shè)施完善，蘋果的整個(gè)生長期均采用常規(guī)生產(chǎn)管理栽培模式。

本試驗(yàn)選用6 a生的長勢(shì)相對(duì)一致且生長狀況良好的4種不同砧穗組合，分別為‘長富2號(hào)/T337、‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果、‘禮泉短富/T337、‘禮泉短富/M26/新疆野蘋果，每個(gè)砧穗組合選取15株試驗(yàn)樹，以2020-04-15為盛花期，分別在2020年盛花期后30 d、50 d、? 70 d和90 d采集短枝頂芽及其毗鄰葉。

1.2 測(cè)定項(xiàng)目及方法

1.2.1 短枝頂芽大小以及成花率 隨機(jī)采集各砧穗組合蘋果樹大小相對(duì)一致的10個(gè)短枝（< 5 cm）頂芽，測(cè)量其大小和鮮質(zhì)量。參照Zuo等[7]的研究方法，盛花期在選定的樹體上分別標(biāo)記兩大樹枝，用于次年統(tǒng)計(jì)短枝（< 5 cm）上頂芽的開花率（開花率=花芽數(shù)/總芽數(shù)×100%）。

1.2.2 葉片可溶性糖含量以及糖代謝相關(guān)酶活性 葡萄糖、蔗糖、果糖和山梨醇的含量測(cè)定參照高騰騰[8]的方法，在75%的甲醇中提取可溶性糖，加入Ribitol作為內(nèi)標(biāo)，然后依次與甲氧基胺鹽酸鹽和甲基三甲基硅基三氟乙酰胺（MSTFA）衍生。衍生后的代謝產(chǎn)物采用Shimadzu GCMS-2010SE（Shimadzu Corporation，Tokyo，Japan）、DB-5MS毛細(xì)管柱（20 cm×0.18 mm×0.18 μm）和5 cm Duraguard柱（Agilent Technology，California，USA）進(jìn)行分析。

可溶性總糖含量的測(cè)定參照Buysse等[9]的方法，淀粉含量參考Clegg[10]的方法進(jìn)行測(cè)定，蔗糖磷酸合成酶（SPS）和蔗糖合成酶（SS）活性的測(cè)定參照Schrader等[11]的方法，中性轉(zhuǎn)化酶（NI）和酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）的活性參考Huang等[12]的方法進(jìn)行測(cè)定。

1.2.3 短枝頂芽激素含量 將置于-80 ℃保存的短枝頂芽用液氮研磨成粉末，參照Ma等[13]的方法，取0.3 g樣品，加入20 mL冷丙酮提取? 12 h。濃縮后，加入3次石油醚和兩次乙酸乙酯萃取物，然后再次濃縮，溶解于1 mL甲醇中，用0.22 μm過濾器過濾，并使用液相色譜-質(zhì)譜儀（LC-MS）（美國AB，QTRAP5500）測(cè)定植物激素IAA、GA3、ABA和ZR的濃度，并計(jì)算結(jié)果，各指標(biāo)重復(fù)3次，最后求平均值。

1.2.4 葉片糖代謝基因、短枝頂芽激素基因以及成花基因表達(dá)量 使用改良的CTAB法提取葉片和短枝頂芽中的總RNA[14]，總RNA濃度使用Nano Drop 2000c分光光度計(jì)（Thermo Fisher Science Inc.America）測(cè)定，并用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)提取RNA的完整性和純度。使用TaKaRa PrimeScriptTM RT Reagent試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，具體操作按照試劑盒說明書進(jìn)行。

使用SYBR PreMix Ex TaqII（Takara，京都，日本）試劑盒在QuantStudio5定量儀上進(jìn)行qRT-PCR反應(yīng)，內(nèi)參基因選用MdActin，用于數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化處理。10 μL的反應(yīng)體系包括5 μL的SYBR○[KG-*3/4][HT6”SS]R? Premix Ex TaqTM II 2×，各0.5 μL的上、下游引物，1 μL的cDNA和3 μL的dd H2O。反應(yīng)程序的設(shè)置參數(shù)為：95? ℃的預(yù)變性? 3 min，94? ℃的變性15 s，60? ℃的退火20 s，72? ℃的延伸? 20 s，設(shè)置40次循環(huán)，最后用2-ΔΔCt的方法計(jì)算基因的表達(dá)量，并對(duì)每個(gè)樣本進(jìn)行3次獨(dú)立的生物學(xué)重復(fù)，引物序列見表1，表中引物由上海生工生物工程股份有限公司進(jìn)行合成。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用Microsoft Excel 2010和SPSS 22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析和圖表制作，采用Duncans法用于顯著性分析（P<0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同砧木對(duì)普通型和短枝型富士系蘋果短枝頂芽的生長變化和開花率的影響

由圖1可知，4種矮化砧穗組合蘋果樹的短枝頂芽鮮質(zhì)量、長度和寬度在花后30 d到90 d均逐漸增加，這與蘋果的花誘導(dǎo)和花起始階段相對(duì)應(yīng)[15]，同時(shí)發(fā)現(xiàn)，T337自根砧組合的短枝頂芽在花后90 d的鮮質(zhì)量、長度和寬度均顯著大于M26中間砧組合，其中‘長富2號(hào)/T337的短枝頂芽鮮質(zhì)量、長度和寬度較‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果分別高出了15.55%、11.08%和4.43%，‘禮泉短富/T337比‘禮泉短富/M26/新疆野蘋果分別高出了18.16%、9.47%和5.63%。并且由圖1可以看出，同一富士系品種嫁接不同砧木類型后，T337自根砧組合的開花率均顯著高于M26中間砧組合，說明嫁接在T337自根砧上的富士蘋果樹可能更易開花。

2.2 不同砧木對(duì)普通型和短枝型富士系蘋果葉片糖代謝的影響

2.2.1 對(duì)葉片可溶性糖含量的影響 如圖2所示，4種砧穗組合蘋果葉片的葡萄糖和果糖含量總體上均表現(xiàn)為先降低，到花后50 d有所升高，之后又逐漸下降的趨勢(shì)，蔗糖、山梨醇和總糖含量的變化相似，總體均表現(xiàn)為從花后30 d到70 d一直升高，在花后70 d有一個(gè)峰值，而后逐漸下降的趨勢(shì)，淀粉含量則均表現(xiàn)為先降低后升高的趨勢(shì)。

同一富士系品種嫁接不同砧木類型，T337自根砧組合的葡萄糖和果糖含量在花后70 d均顯著高于M26中間砧組合。‘長富2號(hào)/T337的蔗糖、山梨醇和總糖含量在花后70 d均顯著高于‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果，‘禮泉短富/T337的山梨醇和總糖含量在花后70 d均顯著高于‘禮泉短富/M26/新疆野蘋果，而蔗糖含量無顯著差異?！L富2號(hào)/T337的淀粉含量在花后90 d顯著高于M26中間砧組合，‘禮泉短富/T337的淀粉含量在花后70 d顯著高于M26中間砧組合18.52%。

2.2.2 對(duì)葉片蔗糖代謝相關(guān)酶活性的影響 如圖3所示，不同砧穗組合蘋果葉片的蔗糖合成酶（SS合成方向）活性在整個(gè)花芽生理分化期呈現(xiàn)出先下降、再上升、最后下降的趨勢(shì)，并在花后? 70 d有一個(gè)最高峰，而蔗糖磷酸合成酶（SPS）從花后30 d到70 d一直呈上升趨勢(shì)，之后開始下降，酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）和中性轉(zhuǎn)化酶（NI）活性的變化趨勢(shì)相近，均表現(xiàn)為在花后30 d到90 d逐漸降低。其中‘長富2號(hào)/T337的SS活性在花后? 30 d、50 d和70 d均顯著高于‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果，SPS活性在花后70 d顯著高于‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果，‘長富2號(hào)/T337的AI和NI活性在花后90 d均顯著高于‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果。‘禮泉短富/T337的SS活性在花后4個(gè)時(shí)期均顯著高于‘禮泉短富/M26/新疆野蘋果，SPS活性在花后30 d和50 d均顯著高于‘禮泉短富/M26/新疆野蘋果，‘禮泉短富/T337的AI和NI活性在花后50 d、70 d和90 d均顯著高于‘禮泉短富/M26/新疆野? 蘋果。

2.2.3 對(duì)葉片蔗糖代謝相關(guān)基因表達(dá)水平的影響 如圖4所示，從花后30 d到70 d，蔗糖磷酸合成酶相關(guān)基因MdSPS6、蔗糖磷酸合成酶相關(guān)基因 MdSUSY1和蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因MdSUT1的表達(dá)水平均表現(xiàn)為逐漸升高的趨勢(shì)，而在花后90 d表現(xiàn)出不同程度的降低。同一富士系品種嫁接不同砧木類型，‘長富2號(hào)/T337短枝頂芽中MdSPS6和 MdSUSY1的表達(dá)水平在花后? 30 d均顯著低于‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果，而花后50 d、70 d和? 90 d的MdSPS6以及花后90 d的 MdSUSY1則均表現(xiàn)為相反的趨勢(shì)，‘長富2號(hào)/T337短枝頂芽中MdSUT1的表達(dá)水平在花后70 d和90 d均顯著高于‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果，其他兩個(gè)時(shí)期無顯著差異；類似地，‘禮泉短富/T337短枝頂芽中MdSPS6的表達(dá)水平在花后50 d、70 d和90 d均顯著高于‘禮泉短富/M26/新疆野蘋果， MdSUSY1的表達(dá)水平在花后30 d、50 d和70 d也顯著高于M26中間砧組合，T337自根砧組合短枝頂芽中MdSUT1的表達(dá)水平在花后70 d和90 d顯著高于M26中間砧組合。

2.3 不同砧木對(duì)普通型和短枝型富士系蘋果短枝頂芽激素代謝的影響

2.3.1 對(duì)短枝頂芽激素含量的影響 如圖5所示，不同砧穗組合富士蘋果短枝頂芽中ZR和IAA的含量總體上均呈先上升后下降的趨勢(shì)。同一富士系品種嫁接不同砧木類型，T337自根砧組合的ZR含量均顯著高于M26中間砧組合，其中，‘長富2號(hào)/T337的ZR含量在花后4個(gè)時(shí)期分別比‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果高出了84.80%、72.91%、61.80%和56.90%，‘禮泉短富/T337在花后4個(gè)時(shí)期分別比‘禮泉短富/M26/新疆野蘋果高出了82.70%、19.31%、? 37.63%和32.80%；T337自根砧組合的IAA含量均低于M26中間砧組合，在花后30 d和70 d最為顯著，其中，‘長富2號(hào)/T337的IAA含量分別比‘長富2號(hào)/M26/新疆野蘋果低了? 9.41%和17.22%，‘禮泉短富/T337則分別比‘禮泉短富/M26/新疆野蘋果低了12.31%和? 10.43%。

由圖5可知，不同砧穗組合富士蘋果短枝頂芽中ABA的含量均表現(xiàn)為隨花后時(shí)間的增加而緩慢升高的趨勢(shì)。同一富士系品種嫁接不同砧木類型，‘長富2號(hào)/T337的ABA含量在花后? 50 d、70? d和90 d均顯著高于M26自根砧組合，分別高出了15.73%、13.81%和12.14%，‘禮泉短富/T337的ABA含量在花后70 d和90 d的ABA含量分別高出M26自根砧組合11.41%和11.82%。而不同砧穗組合富士蘋果短枝頂芽中GA3含量的變化隨花后時(shí)間呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。同一富士系品種嫁接不同砧木類型，在花后30 d到70 d，T337自根砧組合的GA3含量均顯著低于M26中間砧組合，到花后70 d以后無顯著差異，‘長富2號(hào)/T337的GA3含量在花后30 d、50 d和70 d分別低于M26中間砧組合25.81%、? 35.76%和20.50%，‘禮泉短富/T337的GA3含量在花后30 d、50 d和70 d分別低于M26中間砧組合24.50%、48.20%和26.35%。

2.3.2 對(duì)短枝頂芽激素相關(guān)基因表達(dá)水平的影響 圖6顯示，生長素響應(yīng)因子 MdARF2的表達(dá)水平總體上隨花后時(shí)間的增加逐漸降低，同一富士系品種嫁接不同砧木類型，‘長富2號(hào)/T337短枝頂芽中 MdARF2的表達(dá)水平在花后30 d到90 d低于M26中間砧組合，‘禮泉短富嫁接兩種砧木的 MdARF2的表達(dá)水平在花后30 d到90 d也呈現(xiàn)相同的趨勢(shì)。GA3氧化酶基因（MdGA3ox）的表達(dá)水平從花后30 d到90 d總體上呈下降趨勢(shì)，‘長富2號(hào)/T337短枝頂芽中MdGA3ox的表達(dá)水平在花后50 d顯著低于M26中間砧組合，‘禮泉短富嫁接兩種不同砧木的MdGA3ox的表達(dá)水平無顯著差異。 MdABF3和 MdNCED1的表達(dá)水平在花后30 d到90 d呈上升趨勢(shì)，‘長富2號(hào)/T337短枝頂芽中的 MdABF3和 MdNCED1在花后70 d和90 d的表達(dá)水平明顯高于M26中間砧組合，‘禮泉短富/T337短枝頂芽中的 MdABF3和 MdNCED1在花后70 d的表達(dá)水平明顯高于M26中間砧組合。

2.4 不同砧木對(duì)普通型和短枝型富士系蘋果短枝頂芽成花基因表達(dá)水平的影響

本研究對(duì)控制開花的基因在短枝頂芽中的表達(dá)水平進(jìn)行了測(cè)定分析，以更好地了解不同砧木對(duì)花芽生理分化期的差異。成花整合子基因MdFT的表達(dá)模式與 MdSOC1相似，表達(dá)水平均表現(xiàn)為隨花后時(shí)間的延長而逐漸升高，MdFD也表現(xiàn)出相似的變化趨勢(shì)。此外，MdLFY和 MdAP1的表達(dá)水平從花后30 d到90 d基本呈現(xiàn)上升趨勢(shì)（圖7），在花后70 d略有下降，兩種成花負(fù)調(diào)控基因MdFLC-like和MdSVP的表達(dá)水平隨花后時(shí)間的延長變化不明顯。‘長富2號(hào)/T337短枝頂芽中MdFT、MdFD和 MdSOC1的表達(dá)水平在花后70 d顯著高于M26中間砧組合，其他時(shí)期無顯著差異。同樣，T337自根砧組合短枝頂芽中MdLFY和 MdAP1的表達(dá)水平在花后50 d、70 d和90 d均高于M26中間砧組合，對(duì)于成花抑制基因MdFLC-like和MdSVP，T337自根砧組合短枝頂芽中的表達(dá)水平在花后50 d和? 70 d均顯著低于M26中間砧組合。對(duì)于‘禮泉短富，促花基因的表達(dá)與‘長富2號(hào)的趨勢(shì)基本一致，而抑花基因MdFLC-like在花后? 30 d、70 d和90 d，MdSVP在花后30 d、50 d和? 70 d均表現(xiàn)為M26中間砧組合顯著高于T337自根砧組合。

3 討?? 論

本研究表明，不同富士蘋果短枝頂芽的生長均隨著花后時(shí)間的延長而逐漸增大，到90 d時(shí)短枝頂芽的形態(tài)已經(jīng)明顯趨于飽滿，這預(yù)示著混合芽向花芽轉(zhuǎn)變的生理分化過程已基本完成[15]。同一富士系品種嫁接不同砧木類型，T337自根砧當(dāng)年生短枝頂芽的生長速率明顯大于M26中間砧，通過第二年對(duì)開花率的統(tǒng)計(jì)可以看出，T337自根砧組合的開花率較M26中間砧組合更高。

影響果樹成花的因素眾多，主要有庫源物質(zhì)的分配和基因的調(diào)控等方面，其中果樹庫源器官或組織中糖類物質(zhì)的積累情況能夠直接反映葉片的光合效率[16]。Alison等[17]認(rèn)為植物‘源葉片產(chǎn)生的糖信號(hào)在成花誘導(dǎo)階段傳遞到頂端分生組織，最終誘導(dǎo)形成芽。研究表明，蘋果葉片中多種可溶性糖和淀粉的含量隨花后時(shí)間的推移而產(chǎn)生顯著變化[18]。在本研究中，同一接穗嫁接不同砧木的糖含量積累程度不同，并且隨著花后時(shí)間的推移，不同砧穗組合的單糖和淀粉含量也發(fā)生了顯著變化，與上述研究結(jié)果一致。Shalom等[19]的研究表明，糖類作為能量物質(zhì)參與了植物的生長發(fā)育和開花轉(zhuǎn)化。邢利博等[20]在研究糖代謝對(duì)成花的影響時(shí)指出，葉片中的蔗糖含量在5-6月處于上升趨勢(shì)，于6月20日左右達(dá)到最高值，之后逐漸下降。在本研究中，不同砧穗組合的蔗糖、山梨醇和總糖含量在花后30 d到70 d一直處于上升階段，到花后70 d時(shí)達(dá)到高峰，這與蘋果短枝頂芽在5月中旬開始進(jìn)入生理分化期，到6月20日開始形態(tài)分化一致，說明不同砧穗組合葉片的蔗糖積累對(duì)蘋果花芽分化有重要作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)淀粉的動(dòng)態(tài)合成過程涉及植物的成花誘導(dǎo)[21]，本研究結(jié)果顯示，不同砧穗組合葉片的淀粉含量在花后50 d到90 d均呈上升趨勢(shì)，表明淀粉的快速積累可能也是花芽孕育的必要條件，同時(shí)，本研究還發(fā)現(xiàn)，同一富士系品種嫁接不同砧木類型，總體上看，T337自根砧組合的糖含量和淀粉更高，更有利于花芽分化。

糖類物質(zhì)的代謝不僅能夠?yàn)榛ㄑ哭D(zhuǎn)變提供充足的能源物質(zhì)，而且中間產(chǎn)物也可作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)物質(zhì)調(diào)節(jié)植物的花芽分化進(jìn)程。蔗糖作為植物最重要的光合產(chǎn)物，是糖類的主要暫存形式之一，也是植物體內(nèi)重要的糖類運(yùn)輸物質(zhì)，其含量和運(yùn)輸過程對(duì)植物的生長發(fā)育作用巨大，是植物生理生化代謝過程的重要調(diào)節(jié)因子[22]。其中蔗糖代謝相關(guān)酶在蔗糖的積累和代謝過程中起著非常重要的作用，果樹的花芽分化過程與蔗糖代謝的多種酶有關(guān)，最為重要的是蔗糖磷酸合成酶（SPS）、蔗糖合成酶（SS）、酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）和中性轉(zhuǎn)化酶（NI）等。其中SS與植物生長密切相關(guān)，可作為衡量同化產(chǎn)物轉(zhuǎn)化、利用和代謝的重要指標(biāo)[23]。在蔗糖代謝過程中，SS和SPS催化果糖和6-磷酸果糖轉(zhuǎn)化為蔗糖，AI和NI催化蔗糖分解為果糖和葡萄糖[24]。葉珺琳[25]研究發(fā)現(xiàn)芥藍(lán)中熟品種NI的活性從花芽分化前至花芽分化后顯著降低。本研究中，SPS從花后30 d開始活性顯著增加，SS活性也在50 d后開始增加，而AI和NI顯著下降，相應(yīng)地，蔗糖含量從30 d到70 d顯著增加，果糖含量在30 d到50 d也出現(xiàn)不同程度的降低趨勢(shì)，與上述研究結(jié)果一致，說明蘋果花芽分化期間，酶的活性與糖含量有著顯著的相關(guān)性。MdSPS和MdSUSY是蘋果蔗糖代謝途徑中的兩個(gè)關(guān)鍵酶基因家族，Baxter等[26]將SPS基因從玉米轉(zhuǎn)移到煙草，發(fā)現(xiàn)比野生型開花更早，開花更多，說明SPS基因促進(jìn)了煙草早花性。蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（SUT）也稱蔗糖-H+共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，是一種生物膜結(jié)合蛋白，具有蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)能力，廣泛存在于植物的各個(gè)器官[27-28]。影響蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)水平的因素眾多，包括植物的生長發(fā)育水平[29]、蔗糖濃度[30]、光周期[31]以及植物激素[32]等的調(diào)節(jié)。在筆者的研究中，不同砧穗組合的蔗糖含量以及蔗糖信號(hào)在花芽分化過程中均有顯著變化，說明糖類物質(zhì)作為信號(hào)分子在植物不同組織間進(jìn)行傳遞，誘導(dǎo)花芽孕育起始。本研究發(fā)現(xiàn)，同一富士系品種嫁接不同砧木類型，總體上看，T337自根砧組合的糖含量以及SS和SPS活性均普遍高于M26中間砧組合，相關(guān)基因 MdSUSY1和MdSPS6的表達(dá)水平與酶的活性表現(xiàn)一致，而且蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因MdSUT1的表達(dá)水平在花后30 d到70 d也明顯升高，由此可以推測(cè)短枝頂芽中的蔗糖也可能大量合成并積累，同時(shí)，T337自根砧組合富士系蘋果的碳水化合物含量高于M26中間砧組合，更有利于花芽分化。

植物開花的分子基礎(chǔ)由內(nèi)源激素和環(huán)境信號(hào)所組成的的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)共同調(diào)節(jié)[33]。激素可以調(diào)節(jié)植物生命周期的各個(gè)階段，尤其是果樹的花芽分化期受激素的調(diào)節(jié)最為明顯，ABA、GA3、IAA和ZR含量的高低以及激素基因的表達(dá)水平共同調(diào)控著花芽的孕育[34]。ZR是CTK在木質(zhì)部中運(yùn)輸?shù)闹饕问?，含量越高越有利于花芽分化[35]。在對(duì)大櫻桃[36]和刺梨[37]花芽分化的研究中發(fā)現(xiàn)，ZR含量在花芽生理分化期逐漸提高，進(jìn)入形態(tài)分化期后呈下降趨勢(shì)。在本研究中，不同砧穗組合的ZR含量在花后30 d到70 d逐漸增加，到花后70 d開始緩慢下降，前人的研究認(rèn)為花后30 d到80 d是花芽孕育的關(guān)鍵時(shí)期，即花芽生理分化期[38]。本研究也發(fā)現(xiàn)在生理分化期的ZR含量較高，與上述研究一致。在葡萄中，未分化期至始原基分化盛期新梢中較高水平的ABA利于形成良好的花芽，在始原始體分化盛期，新梢ABA含量的升高可能有利于促進(jìn)始原基向花序原基分化[39]。對(duì)簕杜鵑[37]和無花果[40]的研究同樣表明，隨著花芽生理分化的進(jìn)行，ABA含量也呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)。 NCED1是ABA生物合成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，此外，ABF3是ABA信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的一個(gè)主要轉(zhuǎn)錄因子，Xu等[41]的研究表明，ABA含量與NCED的表達(dá)水平呈正相關(guān)。在蘋果中快速誘導(dǎo) NCED1的表達(dá)后，內(nèi)源ABA含量逐漸增加[42]。本試驗(yàn)中， MdNCED1和 MdABF3的表達(dá)水平在花后30 d到90 d總體呈上升趨勢(shì)，這與ABA含量隨花芽分化的進(jìn)行而逐漸上升表現(xiàn)出一致性。馬月萍等[43]的研究表明，在果樹中內(nèi)源激素IAA與GA3的含量越高，越有利于植物細(xì)胞的生長，但較低含量則對(duì)促進(jìn)成花有正向作用，同樣，李有梅等[38]也認(rèn)為，在蘋果樹的花芽生理分化期，較高的內(nèi)源激素IAA和GA3會(huì)抑制花芽的發(fā)育。張松文[44]研究認(rèn)為，在蘋果成花誘導(dǎo)期間的GA3含量越低越有利于果樹的成花，外源性GA的應(yīng)用抑制了蘋果的開花。Alcazar等[45]報(bào)告說，在擬南芥植物中 AtGA3ox3的表達(dá)水平與GA3含量呈正相關(guān)。本試驗(yàn)中，不同砧穗組合短枝頂芽內(nèi)IAA的含量均表現(xiàn)為先降低、再升高的趨勢(shì)。在花后70 d，短枝頂芽內(nèi)IAA的含量最低，同時(shí)生長素響應(yīng)因子 MdARF2的表達(dá)量隨花后時(shí)間的增加也呈下調(diào)趨勢(shì)。GA3含量在整個(gè)花芽分化期呈下降趨勢(shì)，這與不同砧穗組合富士蘋果短枝頂芽中MdGA3ox的表達(dá)水平表現(xiàn)出正相關(guān)性的研究結(jié)果一致，說明在生理分化期IAA和GA3含量的下降有利于蘋果由花芽生理分化期向形態(tài)分化期轉(zhuǎn)變。

同時(shí)，本研究發(fā)現(xiàn)，同一富士系品種嫁接不同砧木類型，總體上看，T337自根砧組合的ZR含量在花芽分化期間均顯著高于M26中間砧組合，并且在花后70 d到90 d，T337自根砧組合中ABA的含量均顯著高于M26中間砧組合，另外， MdNCED1和 MdABF3的表達(dá)水平在花后70 d和90 d與ABA含量的變化相似。對(duì)于IAA和GA3來說，兩種不同富士系品種在花后的4個(gè)時(shí)期均表現(xiàn)為T337自根砧組合低于M26中間砧組合，同時(shí)，不同砧穗組合富士系蘋果中T337自根砧組合的MdGA3ox和 MdARF2的表達(dá)水平一直低于M26中間砧組合，與激素含量表現(xiàn)出正相關(guān)性。杜立言等[46]的研究表明，花芽分化過程不是由單一激素調(diào)控的，而是由多種植物內(nèi)源激素相互作用并共同調(diào)控，綜合多種植物激素代謝水平的差異，筆者推測(cè)對(duì)于同一富士系品種，T337自根砧組合比M26中間砧組合更有利于成花。

一般來說，開花植物的營養(yǎng)階段向生殖階段的過渡過程涉及許多分子和生理生化活動(dòng)，大量研究將SVP和FLC確定為開花抑制基因，作用是抑制植物向開花過渡[47-48]，其中SVP是MADS-box家族的重要成員，受溫敏、自主調(diào)節(jié)和赤霉素等多種途徑的調(diào)控，主要功能是促進(jìn)植物的營養(yǎng)生長，同時(shí)抑制芽向開花過渡[49]。作為關(guān)鍵的促花基因，SOC1和FT也是開花誘導(dǎo)途徑的核心基因[50]，其中SOC1的產(chǎn)物可以整合多種信號(hào)，如光周期、溫度、激素和生命周期等，這些信號(hào)由兩個(gè)對(duì)抗性的開花基因CO和FLC共同協(xié)調(diào)發(fā)揮作用[51]?；ǚ稚M織基因 AP1受SOC1調(diào)控， AP1在葉片和短枝中的表達(dá)水平與SOC1相似[52]。在本研究中，同一富士系品種嫁接不同砧木類型，T337自根砧組合富士系品種短枝頂芽中MdFLC-like和MdSVP的表達(dá)水平均低于M26中間砧組合，而T337自根砧組合中 MdSOC1、 MdAP1、MdFT等促花基因的表達(dá)水平總體上高于M26中間砧組合，因此，筆者推測(cè)在富士系品種嫁接不同砧木的條件下，T337自根砧組合較M26中間砧組合更易成花。

4 結(jié)? 論

同一富士系品種嫁接不同砧木類型，T337自根砧組合較M26中間砧組合有更高的開花率和更飽滿的短枝頂芽，在花芽生理分化期，T337自根砧組合糖類物質(zhì)的合成和積累、蔗糖代謝和激素代謝水平以及成花基因的表達(dá)在大部分時(shí)期均顯著優(yōu)于M26中間砧組合?？傮w來看，T337自根砧組合更易成花。

參考文獻(xiàn) Reference：

［1］ 蓋亞茹.蘋果矮化栽培技術(shù)探究[J].智慧農(nóng)業(yè)導(dǎo)刊，2022，?? 2（2）：36-38.

GAI Y R.Study on apple dwarfing cultivation technology[J].Journal of Smart Agriculture，2022，2（2）：36-38.

[2] 范 露.噴施NAA對(duì)‘長富2號(hào)蘋果花芽發(fā)育生理特性及相關(guān)基因表達(dá)的影響[D].陜西楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2019.

FAN L.Effect of NAA spraying on the physiological characteristics of flower bud development and related gene expression in ‘Nagafu No.2 apple[D].Yangling Shaanxi：Northwest A&F University，2019.

[3] 張亞芹，張娟玲，潘換來，等.淺談蘋果樹花芽分化與促花措施[J].果樹實(shí)用技術(shù)與信息，2021（11）：4-5.

ZHANG Y Q，ZHANG J L，PAN H L，et al.Discussion on flower bud differentiation and flower-promoting measures of apple tree[J].Practical Technology and Information of Fruit Trees，2021（11）：4-5.

[4] 曹建華，林位夫，陳俊明.砧木與接穗嫁接親合力研究綜述[J].熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005（4）：68-73.

CAO J H，LIN W F，CHEN J M.Studies of affinity between rootstock and scion[J].Chinese Journal of Tropical Agriculture，2005（4）：68-73.

[5] 姜 林，李 凌，張翠玲，等.國內(nèi)外蘋果新矮化砧作中間砧對(duì)紅富士樹體生長結(jié)果的影響[J].北方果樹，2000（3）：4-6.

JIANG L，LI L，ZHANG C L，et al.Effects of excellent new domestic and foreign apple dwarf stocks as intermediate stock on the growth and bearing of Fuji[J].Northern Fruits，2000（3）：4-6.

[6] 董然然，安貴陽，趙政陽，等.不同樹形矮化自根砧蘋果的冠內(nèi)光照及其生長和產(chǎn)量比較[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，46（9）：1867-1873.

DONG R R，AN G Y，ZHAO ZH Y，et al.Comparison of light interception ability and growth and yield of different apple tree shapes on dwarf rootstock[J].Scientia Agricultura Sinica，2013，46（9）：1867-1873.

[7] ZUO X，ZHANG D，WANG S，et al.Expression of genes in the potential regulatory pathways? controlling alternate bearing in ‘Fuji（Malus domestica Borkh.） apple trees during flower induction[J].Plant Physiology and Biochemistry，2018，132：579-589.

[8] 高騰騰.多巴胺對(duì)蘋果叢枝菌根共生的影響研究[D].陜西楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2019.

GAO T T.Effects of dopamine on arbuscular mycorrhizal symbiosis of apple[D].Yangling Shaanxi：Northwest A & F University，2019.

[9] BUYSSE J A N，MERCKX R.An improved colorimetric method to quantify sugar content of plant tissue[J].Journal of Experimental Botany，1993，44（10）：1627-1629.

[10] [ZK（#]CLEGG K M.The application of the anthrone reagent to the estimation of starch in cereals[J].Journal of the Science of Food and Agriculture，1956，7（1）：40-44.

[11] SCHRADER S，SAUTER J J.Seasonal changes of sucrose-phosphate synthase and sucrose synthase activities in poplar wood （Populus× canadensis Moench 'robusta'） and their possible role in carbohydrate metabolism[J].Journal of Plant Physiology，2002，159（8）：833-843.

[12] HUANG Y W，NIE Y X，WAN Y Y，et al.Exogenous glucose regulates activities of antioxidant enzyme，soluble acid invertase and neutral invertase and alleviates dehydration stress of cucumber seedlings[J].Scientia horticulturae，2013，162：20-30.

[13] MA L，ZHANG X，MENG Y，et al.Influence of spraying GA3 and 6-BA on endogenous hormone content and the flowering rate of ‘Fuji apple[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica，2018，52（6）：236-248.

[14] GAMBINO G，PERRONE I，GRIBAUDO I.A rapid and effective method for RNA extraction from different tissues of grapevine and other woody plants[J].Phytochemical Analysis，2008，19（6）：520-525.

[15] FOSTER T，JOHNSTON R，SELEZNYOVA A.A morphological and quantitative characterization of early floral development in apple （Malus×domestica Borkh.）[J].Annals of Botany，2003，92（2）：199-206.

[16] TURNBULL C.Long-distance regulation of flowering time[J].Journal of Experimental Botany，2011，62（13），4399-4413.

[17] ALISON M，SMITH S C Z.Starch degradation[J].Annual Review of Plant Biology，2005，56：73-98.

[18] WNSCHE J N，GREER D H，LAING W A，et al.Physiological and biochemical leaf and tree responses to crop load in apple[J].Tree Physiology，2005.25（10）：1253-1263.

[19] SHALOM L，SAMUELS S，ZUR N，et al.Fruit load induces changes in global gene expression and in abscisic acid （ABA） and indole acetic acid （IAA） homeostasis in citrus buds[J].Journal of Experimental Botany，2014，65（12）：3029-3044

[20] 邢利博，張慶偉，韓明玉，等.PBO對(duì)蘋果幼樹生長、葉片品質(zhì)及成花的影響[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2013，41（5）：141-148.

XING L B，ZHANG Q W，HAN M Y，et al.Effects of spraying PBO on growth，leaf quality and flower formation of young apple tree[J].Journal of Northwest A&F?? University（Natural Science Edition），2013，41（5）：141-148.

[21] PAUL M.Trehalose 6-phosphate[J].Current Opinion in Plant Biology，2007，10（8）：303-309.

[22] ZHANG Q，SONG X，BARTELS D.Sugar metabolism in the desiccation tolerant grass Oropetium thomaeum in response to environmental stresses[J].Plant Science，2018，270（7）：30-36.

[23] LIU L，SHAO T，YANG H，et al.The endogenous plant hormones and ratios regulate sugar and dry matter accumulation in Jerusalem artichoke in salt-soil[J].Science of the Total Environment，2016，57（8）：40-48.

[24] RUAN Y L.Sucrose metabolism：gateway to diverse carbon use and sugar signaling[J].Annual Review of Plant Biology，2014，65（1）：33-67.

[25] 葉珺琳.不同熟性芥藍(lán)品種品質(zhì)形成及活性氧代謝的研究[D].廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

YE J L.Research of quality formation and active oxygen metabolism in different varieties of Chinese kale[D].Guangzhou：South China Agricultural University，2016.

[26] BAXTER C J，F(xiàn)OYER CH，TURNER J，et al.Elevated sucrose-sphosphate synthase activity in transgenic tobacco sustains photosynthesis in older leaves and alters development[J].Journal of Experimental Botany，2003，? 54（389）：1813-1820.

[27] GU J，ZENG Z，WANG Y.Transcriptome analysis of carbohydrate metabolism genes and molecular regulation of sucrose transport gene LoSUT on the flowering process of developing oriental hybrid lily ‘Sorbonne? Bulb[J].International Journal of Molecular Sciences，2020，21（9）：3092.

[28] 王 潔，蔡昱萌，張 楠，等.植物蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)的調(diào)控因素與分子機(jī)制[J].生物技術(shù)通報(bào)，2021，37（3）：115-124.

WANG J，CAI Y M，ZHANG N，et al.Regulatory factors and molecular mechanism of sucrose transporters expressions in plant[J].Biotechnology Bulletin，2021，37（3）：115-124.

[29] 張 釗.山梨醇和蔗糖在蘋果抵抗干旱脅迫中的作用研究[D].陜西楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2016.

ZHANG ZH.Study on the role of sorbitil/sucrose? inresisting drought stress in apple? leaves[D].Yangling Shaanxi：Northwest A&sF University，2016.

[30] VAUGHN M W，HARRINGTON G N，BUSH D R.Sucrose-mediated transcriptional regulation of sucrose symporter activity in the phloem[J].Proceedings of the National Academy of Sciences，2002，99（16）：10876-10880.

[31] 肖 紅，張立軍，杜國華，等.發(fā)育時(shí)期和光誘導(dǎo)對(duì)擬南芥AtSUC2基因表達(dá)的影響[J].生物技術(shù)通報(bào)，2011，27（7）：60-64.

XIAO H，ZHANG L J，DU G H，et al.Effect of light induction and developmental stages on expression of AtSUC2? gene in arabidopsis[J].Biotechnology Bulletin，2011，27（7）：60-64.

[32] LEE B R，ISLAM M T，PARK S H.Antagonistic shifting from abscisic acid-to salicylic acid-mediated sucrose accumulation contributes to drought tolerance in Brassica napus[J].Environmental and Experimental Botany，2019，162：38-47.

[33] 樊 勝，張嵐清，劉 柯，等.蘋果‘長富2號(hào)開花調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子基因MdSPL6的克隆及表達(dá)分析[J].園藝學(xué)報(bào)，2016，43（11）：2089-2098.

FAN SH，ZHANG L Q，LIU K，et al.Cloning and expression of the flowering regulation transcription factor geneMdSPL6? in? Malus×domestica[J].Acta Horticulturae Sinica，2016，43（11）：2089-2098.

[34] SHALOM L，SAMUELS S，ZUR N，et al.Fruit load induces changes in global gene expression and in abscisic acid （ABA） and indole acetic acid （IAA） homeostasis in citrus buds[J].Journal of Experimental Botany，2014，65（12）：3029-3044.

[35] 宋 楊，竇連登，張紅軍.藍(lán)莓不同品種花芽形成過程中內(nèi)源激素的變化[J].中國南方果樹，2014，43（5）：106-108，114.

SONG Y，DOU L D，ZHANG H J.Changes of endogenous hormones during flower bud formation in different blueberry varieties[J].South China Fruits，2014，43（5）：106-108，114.

[36] 王玉華，范崇輝，沈 向，等.大櫻桃花芽分化期內(nèi)源激素含量的變化[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2002，11（1）：64-67.

WANG Y H，F(xiàn)AN CH H，SHEN X，et al.Changes in endogenous hormones during the flower bud differentiation of sweet cherry[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica，2002，11（1）：64-67.

[37] 樊衛(wèi)國，劉國琴，安華明，等.刺梨花芽分化期芽中內(nèi)源激素和碳、氮營養(yǎng)的含量動(dòng)態(tài)[J].果樹學(xué)報(bào)，2003，20（1）：40-43.

FAN W G，LIU G Q，AN H M，et al.Study on the changes of endogenous hormones，carbohydrate and ni-trogen nutrition at the flower bud differentiation stage of rosa rox-burghii[J].Journal of Fruit Science，2003，20（1）：40-43.

[38] 李有梅，邢利博，張 東，等.噴施IAA抑制富士幼樹花芽孕育的機(jī)制[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2015，24（4）：84-89.

LI Y M，XING L B，ZHANG D，et al.Effect of lAA spraying on floral lnduction in ‘Fuji apple（Malus domestica Borkh）[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica，2015，24（4）：84-89.

[39] 王 博，羅惠格，覃富強(qiáng)，等.葡萄花芽分化研究進(jìn)展[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2022，16（5）：1-14.

WANG B，LUO H G，QIN F Q，et al.Research progresses of grape floral differentiation[J].Journal of Southern Agriculture，2022，16（5）：1-14.

[40] 羅羽洧，解衛(wèi)華，馬 凱.無花果花芽分化與內(nèi)源激素含量的關(guān)系[J].西北植物學(xué)報(bào)，2007，27（7）：1399-1404.

LUO Y W，XIE W H，MA K.Correlation between endogenous hormones contents and flower bud differentiation stage of Ficuscarica L[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica，2007，27（7）：1399-1404.

[41] XU P P，CAI W M.Functional characterization of the BnNCED3 gene in Brassica napus[J].Plant Science，2017，256：16-24.

[42] KONDO? S.Dehydration tolerance in apple seedlings is affected by an inhibitor of ABA 8′-hydroxylase CYP707A[J].Journal of Plant Physiology，2012，169：234-241.

[43] 馬月萍，戴思蘭.植物花芽分化機(jī)理研究進(jìn)展[J].分子植物育種，2003，1（4）：539-545.

MA Y P，DAI S L.Flower bud differentiation mechanism of anthophyta[J].Molecular Plant Breeding，2003，1（4）：539-545.

[44] 張松文.富士響應(yīng)外源GA3和“大小年結(jié)果信號(hào)”花芽孕育的生理分子機(jī)制[D].陜西楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2016.

ZHANG S W.Physiological and molecular resonsesof “Fuji” apple （Malus domestica Borkh.） to GA3 application and alternate bearingsignal during floral bud differentiation[D].Yangling Shaanxi：Northwest A&F University，2016.

[45] ALCAZAR R，GARCIA-MARTINEZ J L，CUEVAS J C，et al.Overexpression of ADC2 in Arabidopsis induces dwarfism and late-flowering through GA deficiency[J].Plant Journal，2005，43：425-436.

[46] 杜立言，俞潔蕾，周春玲.內(nèi)源激素對(duì)木本植物花芽分化影響研究進(jìn)展[J].青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2021，38（2）：79-84.

DU L Y，YU J L，ZHOU CH L.Research progress in the effect of endogenous hormones on flower bud differentiation of woody plants[J].Journal of Qingdao Agricultural University（Natural Science Edition），2021，38（2）：79-84.

[47] FLACHOWSKY H，SZANKOWSKI I，WAIDMANN S，? et al.The MdTFL1? gene of apple （Malus×domestica Borkh.） reduces vegetative growth and generation time[J].Tree Physiology，2012，32 （10）：1288-1301.

[48] KOTODA N，WADA M. MdTFL1，aTFL1-like? gene of apple，retards the transition from the vegetative to reproductive phase in transgenic Arabidopsis.Plant Science，2002，168 （1）：95-104.

[49] WANG D，SHENG ZH，SHAO L，et al.Transcriptome profiling reveals differentially expressed genes associated with wizened flower bud formation in Chinese pear （Pyrus bretschneideri Rehd.）[J].The Journal of Horticultural Science & Biotechnology，2016，91（3）：227-235

[50] LEE J，LEE I.Regulation and function of SOC1，a flowering pathway integrator[J].Journal of Experimental Botany，2010，61（9）：2247-2254.

[51] MOON J，LEE H，KIM M，et al.Analysis of flowering pathway integrators in Arabidopsis[J].Plant and Cell Physiology，2005，46 （2）：292-299

[52] SAVINI G，NERI D，ZUCCONI F，et al.Lateral shoot growth of apple，pear and cherry with selective disbudding on newly planted trees[J].Acta Horticulturae，2007，732（2）：587-592.

Effects of? Different Rootstocks on Flower Bud Differentiation of

Common and Short-branched Fuji Apple

Abstract In this study，the effects of different rootstocks on flower bud differentiation of common and short branch Fuji apples were investigated.Specifically，the T337 rootstock and M26 intermediate rootstock，commonly used in Baoji apple production，were selected for grafting with common Fuji ‘Nagafu No.2 and short branch Fuji ‘Liquan Fuji，respectively.The nutrient uptake and sucrose metabolism of apple leaves，hormone metabolism and flowering gene expression in short shoot apical buds of the four rootstock combinations were comprehensively evaluated the aim was to identify the optimal rootstock type for the Baoji area.The results showed that the T337 rootstock combination exhibited higher flowering rate and fuller spur buds compared with the M26 interstock combination when grafted on different rootstock types of the same Fuji variety.Moreover，during the period of flowering bud physiological differentiation，the T337 rootstock combination demonstrated significantly improved expression of sugar synthesis and accumulation，sucrose metabolism，hormone metabolism，and flowering genes compared to the M26 interstock combination.In conclusion，T337 rootstock is an optimal rootstock type for the Baoji area.

Key words Apple rootstock; Glucose metabolism; Hormone metabolism; Flowering genes