何 笛,王煜東,楊 璐,夏 利

2型糖尿病(T2DM)合并骨質(zhì)疏松(OP)是一種常見的并發(fā)癥,因患者長(zhǎng)期高血糖導(dǎo)致糖化終產(chǎn)物堆積,損傷骨膠原纖維和基質(zhì),使骨強(qiáng)度降低所致[1]。T2DM合并OP表現(xiàn)為骨量減少,骨質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞,骨質(zhì)強(qiáng)度下降,容易發(fā)生骨折[2]。唑來(lái)膦酸已在骨質(zhì)疏松癥、癌骨轉(zhuǎn)移、高血鈣癥中發(fā)揮出重要作用。辛伐他汀是一種降低膽固醇的藥物,也被稱為他汀類藥物,可以有效降低低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的水平,從而降低冠心病、心肌梗死等心血管疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)[3]。本研究將唑來(lái)膦酸聯(lián)合辛伐他汀應(yīng)用在T2DM合并OP患者中,通過(guò)對(duì)190例患者進(jìn)行分析比較,旨在為提高患者療效提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年7月至2022年7月本院收治的T2DM合并OP患者190例為研究對(duì)象。分為研究組95例,對(duì)照組95例,2組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究方案經(jīng)本院倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①符合《原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥診治指南(2011年)》[4]中診斷標(biāo)準(zhǔn);②初診,糖尿病病程不超過(guò)3年,均服用降糖藥物控制血糖,未應(yīng)用胰島素;③患者及家屬均知情同意并簽署承諾書者。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①重要臟器存在器質(zhì)性改變者;②近期接受抗骨質(zhì)疏松治療者;③存在其他原因?qū)е碌墓谴x病患者;④對(duì)研究藥物過(guò)敏者;⑤合并惡性腫瘤者;⑥認(rèn)知障礙不能配合本研究者;⑦有其他并發(fā)癥。

1.2 方法

1.2.1 對(duì)照組 靜脈滴注唑來(lái)膦酸(南京海潤(rùn)醫(yī)藥有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H20051986)5 mg/100 mL,速度為30 mL/h,治療1次。

1.2.2 研究組 在對(duì)照組基礎(chǔ)上加入辛伐他汀(浙江京新藥業(yè)股份有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H20000009)40 mg,晚上7點(diǎn)服用,治療10個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 胰島細(xì)胞指標(biāo) 于治療前、治療10個(gè)月后通過(guò)穩(wěn)態(tài)模型進(jìn)行計(jì)算,包括胰島素分泌指數(shù)(HOMA-β)、胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。HOMA-β=20×空腹胰島素/(空腹血糖-3.5),HOMA-IR=空腹血糖×空腹胰島素/22.5。

1.3.2 骨密度、骨代謝指標(biāo) 采集患者治療前、治療10個(gè)月后清晨空腹肘靜脈血3 mL,通過(guò)3 000 r/min離心15 min后,取上層血清低溫保存待測(cè)。使用DCS-600EXV骨密度儀(日本日立阿洛卡)檢測(cè)患者骨密度Ward三角區(qū)、腰椎骨L1—4、股骨頸骨密度。使用電化學(xué)發(fā)光免疫法檢查骨吸收標(biāo)志物1型膠原C端β特殊序列(β-CTX)指標(biāo),試劑盒購(gòu)自武漢菲越生物科技有限公司;使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)骨硬化蛋白及骨保護(hù)素(OPG),試劑盒購(gòu)自上海酶聯(lián)生物科技有限公司;使用放射免疫法檢查骨鈣素(OC),試劑盒購(gòu)自北京福瑞潤(rùn)澤生物技術(shù)有限公司;使用全自動(dòng)生化儀(博科 BK-1200)檢測(cè)骨堿性磷酸酶活力(BALP)。

1.3.3 血清微小RNA-16(miR-16)、微小RNA-30a(miR-30a)測(cè)定 采集所有患者的清晨空腹外周靜脈血3 mL,通過(guò)3 500 r/min離心10 min后,收集上層血清放置在低溫環(huán)境下保存待測(cè)。通過(guò)北京奧維亞生物公司生產(chǎn)的試劑盒進(jìn)行核糖核酸(RNA)提取并逆轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)RNA(cRNA),而后行基因擴(kuò)增,使用primer5軟件進(jìn)行基因檢測(cè)的合成及設(shè)計(jì)引物,內(nèi)參為U6。U6:上游引物5′-ccatgctcttctactcct-3′,下游引物5′-CACTGATGTCGGTTAGTT-3′。miR-16引物,上游為5’-GCGGTTAATGCTAATCGTGAT-3’,下游為5’-GTGCAGGGTCCGAGGT-3’。miR-30a引物,上游為5’-GTTGAGCTCTTGCTCCAGCC-3’,下游為5’-CGTGGATCAGTTTCCTG-3’。通過(guò)ABI7500型實(shí)時(shí)定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)儀進(jìn)行qPCR反應(yīng),反應(yīng)條件為95 ℃預(yù)變性10 min,95 ℃ 15 s,60 ℃ 60 s,共40個(gè)循環(huán),通過(guò)2-△△CT公式計(jì)算2種因子的相對(duì)表達(dá)量。

1.3.4 不良反應(yīng) 包括惡心嘔吐、乏力、頭暈、發(fā)熱、便秘、腹痛等情況。

2 結(jié)果

2.1 2組患者一般資料比較 研究組男性43例(45.3%),對(duì)照組男性45例(47.4%),2組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。

表1 一般資料比較

2.2 2組患者胰島細(xì)胞指標(biāo)比較 2組患者治療10個(gè)月后HOMA-β水平高于治療前(P<0.05),HOMA-IR低于治療前(P<0.05),見表2。

表2 2組患者胰島細(xì)胞指標(biāo)比較

2.3 2組患者骨密度、骨代謝指標(biāo)比較 2組患者治療10個(gè)月后Ward三角區(qū)骨密度、腰椎骨L1—4骨密度、股骨頸骨密度、OPG、BALP、OC、骨硬化蛋白與治療前相比均升高(P<0.05),β-CTX與治療前相比均降低(P<0.05),見表3和表4。

表3 2組患者骨密度指標(biāo)比較

表4 2組患者骨代謝指標(biāo)比較

2.4 2組患者miR-16、miR-30a比較 2組患者治療10個(gè)月后miR-16、miR-30a與治療前比較均降低(P<0.05),見表5。

表5 2組患者miR-16、miR-30a比較

2.5 2組患者不良反應(yīng)比較 2組患者惡心嘔吐、乏力、頭暈、發(fā)熱、便秘、腹痛發(fā)生率,見表6。

表5 2組患者不良反應(yīng)比較[n(%)]

3 討論

T2DM合并OP患者表現(xiàn)為局部酸痛或鈍痛,加重時(shí)可出現(xiàn)夜間疼痛,部分患者由于骨質(zhì)疏松,身高會(huì)出現(xiàn)縮短[5]。

研究[6]表明,將辛伐他汀應(yīng)用在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松女性骨折患者中效果顯著,能夠有效促進(jìn)骨折愈合,改善骨密度及骨代謝。本研究結(jié)果顯示,治療10個(gè)月后研究組HOMA-β較對(duì)照組高,HOMA-IR較對(duì)照組低,這是因?yàn)镠OMA-β即胰島素的分泌響應(yīng)能力,血糖水平越高,胰島β細(xì)胞分泌的胰島素就越多[7]。HOMA-IR即機(jī)體的胰島素敏感性,血糖升高后,胰島素會(huì)促進(jìn)組織細(xì)胞攝取葡萄糖并利用其作為能量來(lái)源,胰島素抵抗意味著細(xì)胞對(duì)胰島素的反應(yīng)減弱,需要更多的胰島素才能完成相同的生理反應(yīng)[8]。辛伐他汀可通過(guò)抑制肝臟內(nèi)膽固醇合成,增加肝臟膽固醇的攝取和降解,從而促進(jìn)膽固醇轉(zhuǎn)化為類固醇激素前體的代謝途徑,使胰島β細(xì)胞合成和分泌胰島素的能力增強(qiáng)[9]。辛伐他汀還可以通過(guò)抑制解酸性磷酸酶活性,從而降低細(xì)胞內(nèi)蛋白酪氨酸磷酸化水平,促進(jìn)胰島素信號(hào)通路的傳遞和胰島素作用于細(xì)胞的效應(yīng),改善機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性和胰島素抵抗程度,從而降低HOMA-IR。治療10個(gè)月后研究組Ward三角區(qū)、腰椎骨L1—4及股骨頸骨密度均較對(duì)照組高,且β-CTX較對(duì)照組低,OPG、BALP、OC、骨硬化蛋白較對(duì)照組高,究其原因在于辛伐他汀可以抑制破骨細(xì)胞前體細(xì)胞的分化和成熟,抑制骨吸收因子的產(chǎn)生和釋放,并促進(jìn)骨密度的增加[10]。伐他汀可以改善機(jī)體代謝異常,降低胰島素抵抗,提高機(jī)體對(duì)鈣質(zhì)的吸收和利用,從而調(diào)節(jié)骨代謝,降低β-CTX水平。另外,辛伐他汀通過(guò)抑制骨吸收、增加OPG水平、協(xié)同提高BALP和OC水平、增加骨密度等多種途徑促進(jìn)骨形態(tài)的發(fā)育和修復(fù),從而對(duì)T2DM合并OP患者的治療產(chǎn)生積極作用。治療10個(gè)月后研究組miR-16、miR-30a較對(duì)照組低,這是由于miR-16是一種高度保守的miRNA分子,主要通過(guò)抑制mRNA的翻譯或增強(qiáng)mRNA降解來(lái)影響基因表達(dá)[11]。miR-30a也是一種常見的miRNA分子,具有廣泛的生物學(xué)功能,在心血管疾病、癌癥等多種疾病中起著重要作用[12]。辛伐他汀可以通過(guò)調(diào)節(jié)Bcl-2/Bax和Caspase家族等基因表達(dá),促進(jìn)骨細(xì)胞的生存和增殖,從而降低miR-16和miR-30a的表達(dá)。除此之外,研究組不良反應(yīng)發(fā)生率較對(duì)照組低,這可能是因?yàn)樾练ニ〉陌胨テ谳^長(zhǎng),需要控制服藥時(shí)間,通常建議在晚上服用,以充分發(fā)揮降低膽固醇的療效,并減少不良反應(yīng)的發(fā)生。