袁 圣

(江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇 泰州 225300)

二、鰓絲鏡檢的標(biāo)準(zhǔn)化

鰓是魚的主要呼吸器官，也是容易病變的組織，對鰓絲鏡檢是魚體檢查的重要工作之一。鰓絲鏡檢應(yīng)做好兩個標(biāo)準(zhǔn)化，分別是鰓絲水浸片制作的標(biāo)準(zhǔn)化和顯微鏡使用的標(biāo)準(zhǔn)化。

(一)鰓絲水浸片制作步驟(鰓絲水浸片制作的標(biāo)準(zhǔn)化)

首先準(zhǔn)備好數(shù)片干凈的載玻片、蓋玻片；從圖13 中3 部位處剪取適量鰓絲，放置于載玻片上；將剪好的鰓絲推到載玻片中間，用膠頭滴管滴1滴生理鹽水(或池塘水)到鰓絲上；將蓋玻片貼著載玻片邊緣輕輕往下放，直至接觸到鰓絲；輕壓蓋玻片，使鰓絲均勻分布(圖14、圖15)。

圖13 鰓絲水浸片選取位置

圖14 通過鏡檢可發(fā)現(xiàn)初期的爛鰓

圖15 正確壓片后鰓絲相互分離

(二)鰓絲水浸片制作注意事項

選取的鰓絲最好是靠近下頜部位的，此處寄生蟲相對較多。鰓絲剪取要適量，若剪取過多會導(dǎo)致壓片不勻，鰓絲相互重疊影響觀察；若鰓絲剪取過少會導(dǎo)致樣品過少，不能真實反映鰓部情況。壓片時，應(yīng)適度按壓蓋玻片，如果按壓過重會將鰓組織壓碎，大量的血細(xì)胞流出，影響觀察結(jié)果；按壓過輕則會導(dǎo)致鰓絲相互重疊影響觀察結(jié)果；壓片的速度不能太快，若快速按壓時會有大量空氣被壓進水浸片中形成氣泡，影響觀察。

(三)顯微鏡使用的操作步驟(顯微鏡使用的標(biāo)準(zhǔn)化)

將組裝好的顯微鏡插上電源，觀察是否通電；將制作好的鰓絲水浸片置于載物臺上，用夾子固定好，并將物鏡中的低倍鏡調(diào)節(jié)至觀察部位；調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，將載物臺調(diào)節(jié)至離物鏡最近處；調(diào)動粗準(zhǔn)焦螺旋，將載物臺逐漸向下移動，直至看見物體；調(diào)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋，直至觀察到清晰的圖像。對觀察的結(jié)果進行記錄。

(四)顯微鏡使用的注意事項

觀察時先用低倍鏡觀察，再用高倍鏡觀察(先用紅色的物鏡，再用黃色的物鏡)。

注意光圈等的調(diào)節(jié)，往往將光圈調(diào)節(jié)至最小時觀察的物體最清晰，進光量過多時視野較亮，無法觀察到清晰的圖像(圖16)。

圖16 同一視野下的顯微圖像，右邊為調(diào)小光圈后

顯微鏡使用的插座最好有接地線，否則帶水操作時存在觸電的風(fēng)險。

(五)鰓絲觀察的要點

重點觀察寄生蟲及鰓絲狀況，爛鰓發(fā)生后需對鰓絲鏡檢，以確定是否有寄生蟲感染(圖17)。常見的寄生蟲可以通過鏡檢發(fā)現(xiàn)，如：斜管蟲(圖18)、車輪蟲(圖19)、小瓜蟲、孢子蟲(孢囊需被壓破，才能看到里面的孢子蟲)(圖20、圖21、圖22、圖23)、杯體蟲(圖24、圖25)、隱鞭蟲(圖26)、中華鳋(圖27)、鉤介幼蟲(圖28)、三代蟲(頭部分為兩葉，沒有眼點)(圖29)、指環(huán)蟲(頭部分為4 葉，有4 個眼點)(圖30)等；鰓絲的狀況可作為評價鰓部是否病變的重要指標(biāo)，如發(fā)現(xiàn)鰓絲有血竇(提示為爛鰓初期)(圖31)、氣泡(圖32)時需要及時消毒處理。鰓絲鏡檢時，常見的如黑色素細(xì)胞(圖33)、有機質(zhì)(圖34)等易被認(rèn)錯。最后結(jié)合魚的游動形態(tài)，對鰓部的問題進行確診。爛鰓等可導(dǎo)致生理性缺氧，即使池塘中溶氧充足，魚也會呈現(xiàn)缺氧狀態(tài)。

圖17 爛鰓

圖18 顯微鏡下的斜管蟲

圖19 顯微鏡下的車輪蟲

圖20 微山尾孢蟲寄生于鱖鰓部形成的孢囊

圖21 孢囊的顯微圖片

圖22 斑點叉尾鮰鰓部由尾孢蟲形成的孢囊

圖23 顯微鏡下的尾孢蟲

圖24 鰓絲上的纖毛蟲

圖25 寄生于鱗片的杯體蟲

圖26 顯微鏡下的鰓隱鞭蟲

圖27 顯微鏡下的中華鳋

圖28 顯微鏡下的鉤介幼蟲

圖29 顯微鏡下的三代蟲

圖30 顯微鏡下的指環(huán)蟲

圖31 鰓絲上的血竇

圖33 鰓絲內(nèi)的黑色素細(xì)胞

圖34 黏附在鰓絲的有機質(zhì)

(待 續(xù))