蘇大為 劉玲 楊志龍

(1.蘭州市第一人民醫(yī)院心血管內(nèi)科,甘肅 蘭州 730050;2.甘肅省中心醫(yī)院心血管內(nèi)科,甘肅 蘭州 730080;3.蘭州市第一人民醫(yī)院健康管理中心,甘肅 蘭州 730050)

心力衰竭是各種心臟疾病終末階段所表現(xiàn)出來的一種綜合征,具有高患病率、致殘率及死亡率,且病情復雜,預后差,是威脅人類健康的重大疾病之一[1]。目前治療心力衰竭的主要手段是藥物治療,西藥以利尿劑、強心劑、擴血管劑等為主,但往往由于心力衰竭合并癥多且病情反復、藥物耐受性不良等因素影響療效[2]。中醫(yī)學認為心衰總病機是“氣虛血瘀水?！?治療總原則以益氣活血利水為法[3]。中藥提取物黃芩苷是從黃芩中提取的一種酮類化合物,具有抗炎、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等作用。近年來已發(fā)現(xiàn),在各種心血管疾病治療中表現(xiàn)出免疫調(diào)節(jié)、抗炎以及保護心肌細胞等作用[4],例如,黃芩苷可對心臟驟停后缺血性心肌損傷提供心臟保護[5],對心肌衰竭大鼠心律失常、心室重構(gòu)、凋亡起保護作用[6]。目前,雖有較多文獻證實黃芩苷對心肌細胞損傷有保護作用,但具體的作用機制尚不清楚。Janus激酶2/信號轉(zhuǎn)導子和轉(zhuǎn)錄激活子3(JAK2/STAT3)信號通路是重要的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導通路家族,可參與調(diào)節(jié)細胞多種生物學特性及炎性反應等。研究表明,JAK2/STAT3信號通路參與調(diào)控心肌炎心肌損傷的發(fā)展[7],在腦缺血再灌注損傷炎性反應中也發(fā)揮重要作用[8]。但黃芩苷對脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)誘導的心肌細胞增殖、凋亡的影響及對JAK2/STAT3信號通路作用尚未可知?；诖?進行了本研究實驗,旨在為心肌損傷的體外研究提供新的理論參考。

1 材料與方法

1.1 主要材料、藥品與試劑 大鼠心肌細胞(H9C2)購自河南省工業(yè)微生物菌種工程技術(shù)研究中心。胎牛血清(FBS)(貨號:10270-106)、DMEM培養(yǎng)基(貨號:12100)購自美國Gibco公司,黃芩苷(貨號:B20570)、LPS(貨號:S11060-10mg)、JAK2/STAT3通路抑制劑AG490(貨號:S31521)、JAK2/STAT3通路激活劑colivelin(貨號:867021-83-8)購自上海源葉生物科技有限公司,5-乙炔基-2′脫氧尿嘧啶核苷(EdU)細胞增殖檢測試劑盒(貨號:ST067)購自上海碧云天生物技術(shù)有限公司,Hochest 33258染色試劑盒購自江蘇凱基生物技術(shù)股份有限公司,活細胞計數(shù)試劑盒-8(CCK-8)(貨號:40203ES80)購自上海翌圣生物有限公司,逆轉(zhuǎn)錄試劑盒(貨號:R312-02)、SYBR Premix Ex Taq II試劑盒(貨號:Q711-02)購自杭州主諾生物技術(shù)有限公司,RIPA裂解液(貨號:R0010)購自北京索萊寶公司,BCA蛋白試劑盒(貨號:ab207001)購自英國Abcam公司,鼠抗人[JAK2(貨號:SAB4501601,稀釋比例:1∶1 000)購自Sigma公司、STAT3(貨號:TA347058,稀釋比例:1∶5 000)購自北京中杉金橋公司、p-JAK2(貨號:WL02997,稀釋比例:1∶500)購自萬類生物科技有限公司、p-STAT3(貨號:sc-8059,稀釋比例:1∶1 000)購自SantaCruz公司、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)(貨號:66470-2-Ig,稀釋比例:1∶3 000)、細胞周期蛋白D1(Cyclin D1)(貨號:60186-1-Ig,稀釋比例:1∶5 000)及β-actin一抗(貨號:66009-1-Ig,稀釋比例:1∶5 000)購自武漢三鷹生物有限公司]、辣根過氧化物酶標記的山羊抗鼠IgG(二抗)(貨號:ab6789,稀釋比例:1∶5 000)購自英國Abcam公司。DM1000型倒置熒光顯微鏡(德國Leica公司),MCO18AIC型二氧化碳培養(yǎng)箱(日本三洋電機公司),7Champ Gd5000型凝膠成像系統(tǒng)(杭州賽智科技有限公司),500型實時熒光定量PCR儀器(美國ABI公司),酶標儀(Multiskan FC,美國Thermo公司)等。

1.2 方法

1.2.1 H9C2細胞培養(yǎng) 心肌細胞株H9C2接種于含10% FBS的DMEM培養(yǎng)基中,并置于70%～80%濕度,5% CO2,37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),隔2～3 d更換一次培養(yǎng)液,生長密度達>80%時傳代,達到對數(shù)期生長時用于實驗。

1.2.2 分組與干預 將心肌細胞分為對照組、LPS組和LPS+5、10、20、40 μmol/L黃芩苷組。對照組細胞不做干預,LPS組以1 μg/mL LPS刺激24 h構(gòu)建體外炎癥模型,LPS+5、10、20、40 μmol/L黃芩苷組在LPS組的基礎(chǔ)上加入5、10、20、40 μmol/L黃芩苷。篩選出最適濃度黃芩苷后,再次分組:對照組、LPS組、LPS+10 μmol/L黃芩苷組、LPS+AG490組、LPS+10 μmol/L黃芩苷+AG490組和LPS+10 μmol/L黃芩苷+colivelin組。LPS+AG490組是在LPS組的基礎(chǔ)上,加入20 μmol/L AG490,LPS+10 μmol/L黃芩苷+AG490組在LPS組的基礎(chǔ)上,加入10 μmol/L黃芩苷,同時加入20 μmol/L AG490,LPS+10 μmol/L黃芩苷+colivelin組在LPS組的基礎(chǔ)上,加入10 μmol/L黃芩苷,同時加入0.5 μmol/L colivelin,復孔為3個,培養(yǎng)箱培養(yǎng)(37 ℃,5% CO2)。

1.2.3 酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)法測定H9C2細胞因子表達情況 細胞分組方法同1.2.2,干預24 h的細胞,取各組細胞上清液,分別遵循白細胞介素(IL)-6、IL-1β和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)ELISA試劑盒說明書操作步驟,測定細胞炎癥因子IL-6、IL-1β和TNF-α表達水平。

1.2.4 CCK-8法測定H9C2細胞活力 取干預24和48 h的各組細胞,加入10 μL CCK-8溶液培養(yǎng),2 h后使用酶標儀測450 nm處各孔的吸光度值,計算細胞活力。細胞活力(%)=(LPS組或5、10、20、40 μmol/L黃芩苷組OD值/對照組OD值)×100%。

1.2.5 EdU法測定H9C2細胞增殖率 各組細胞EdU處理:去除培養(yǎng)液后4%多聚甲醛固定(0.5 mL,室溫15 min),BSA洗滌(0.5 mL 3%,3次);TritonX-100去除BSA(0.5 mL 0.3% )后室溫10 min,BSA洗滌(3次);加200 μL Click反應液(現(xiàn)配現(xiàn)用,12孔板),室溫孵育30 min(避光)后去除Click反應液;每孔加入0.5 mL Hoechst(室溫孵育10 min),去除Hoechst;拍照(熒光顯微鏡,Zen處理圖片)。細胞增殖率(%)=(紅光細胞/藍光細胞)×100%。

1.2.6 Hochest 33258染色法測定H9C2細胞的凋亡情況 取各組干預24 h的細胞,PBS洗滌細胞2次(每次5 min),加入新鮮配置4%多聚甲醛,4 ℃固定10 min。PBS洗滌細胞3次(每次5 min),Hochest 33258染色液(5 mg/L)染色10 min,PBS洗滌細胞3次(每次5 min),封固后熒光顯微鏡觀察、隨機選擇3個視野拍照,分析細胞凋亡情況。細胞凋亡特征為核體積濃縮變小,染色不均濃染且所發(fā)熒光較強,呈亮藍色。細胞凋亡率(%)=(凋亡細胞數(shù)/總細胞數(shù))×100%。

1.2.7 實時熒光定量PCR(RT-qPCR)測定H9C2細胞中Cyclin D1、Caspase-3 信使RNA相對表達量 RNA抽提試劑盒提取各組干預24 h后的細胞總RNA,測定其濃度阿純度后進行反轉(zhuǎn)錄。PCR檢測(上樣量=2 μL)程序為:預變性(95 ℃)10 min,變性(95 ℃)10 s,退火(60 ℃)20 s,延伸(72 ℃)34 s。40個循環(huán)(復孔=5個)。內(nèi)參基因為GAPDH,以2-ΔΔCt法計算目的基因相對表達量。引物序列見表1。

表1 Cyclin D1和Caspase-3引物序列

1.2.8 蛋白免疫印跡(WB)法檢測H9C2細胞中增殖、凋亡與JAK2/STAT3信號通路相關(guān)蛋白的表達水平 細胞分組同1.2.2,干預24 h時,收集各組細胞,提取蛋白并進行定量后上樣,凝膠電泳,轉(zhuǎn)膜,封閉2 h后參照抗體說明書加入一定稀釋比例的一抗(JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、Caspase-3、Cyclin D1及β-actin),孵育過夜(4 ℃),第二天TBST洗滌,加二抗(山羊抗鼠IgG),孵育2 h后進行洗滌(3次),顯影液顯色后拍照。G代表蛋白灰度值,蛋白相對表達量=(G目的蛋白/G內(nèi)參蛋白β-actin)。

2 結(jié)果

2.1 黃芩苷抑制LPS誘導的H9C2細胞的炎癥 ELISA結(jié)果顯示,與對照組相比,LPS組和LPS+5、10、20、40 μmol/L黃芩苷組細胞炎癥因子TNF-α表達水平顯著升高(P<0.05),LPS組和LPS+5、10、20 μmol/L黃芩苷組細胞炎癥因子IL-6表達水平顯著升高(P<0.05),LPS組和LPS+5、10 μmol/L黃芩苷組細胞炎癥因子IL-1β表達水平顯著升高(P<0.05);與LPS組相比,LPS+5、10、20、40 μmol/L黃芩苷組細胞炎癥因子IL-6、IL-1β和TNF-α表達水平降低,其中LPS+5 μmol/L黃芩苷組的IL-6和IL-1β無顯著差異(P>0.05),LPS+10、20和40 μmol/L黃芩苷組均有顯著性差異(P<0.05)。見圖1。

圖1 ELISA法測定黃芩苷對LPS誘導的H9C2細胞炎癥因子的影響

2.2 黃芩苷促進LPS誘導H9C2細胞的活力 使用CCK-8法檢測黃芩苷對H9C2細胞活力的影響,實驗結(jié)果顯示,干預24 h時,與對照組比較,LPS組和LPS+5、10、20、40 μmol/L黃芩苷組細胞活力顯著降低,除LPS+10 μmol/L黃芩苷組外其余組差異均有顯著性(P<0.05);與LPS組相比,LPS+10 μmol/L黃芩苷組細胞活力顯著升高(P<0.05),其余組無顯著性差異(P>0.05)。干預48 h時,與對照組比較,LPS組和5、10、20、40 μmol/L黃芩苷組細胞活力均顯著降低(P<0.05);與LPS組相比,5、10、20、40 μmol/L黃芩苷組細胞活力無顯著性差異(P>0.05);與24 h相比,48 h LPS組和5、10、20、40 μmol/L黃芩苷組均顯著降低(P<0.05)(圖2)。為排除細胞活力對后續(xù)實驗的影響,選擇干預24 h與LPS組有顯著差異且較低濃度的LPS+10 μmol/L黃芩苷組加入JAK2/STAT3信號通路抑制劑AG490和通路激活劑colivelin進行JAK2/STAT3通路驗證實驗。

圖2 CCK-8法測定黃芩苷對LPS誘導的H9C2細胞活力的影響

2.3 黃芩苷抑制JAK2/STAT3通路促進LPS誘導H9C2細胞的增殖 EdU法檢測細胞的增殖,干預24 h,LPS組EdU陽性細胞數(shù)變少,黃芩苷處理后EdU陽性細胞數(shù)變多(圖3A),定量后發(fā)現(xiàn)(圖3B),LPS組細胞增殖率較對照組顯著下降(P<0.05);LPS+10 μmol/L黃芩苷組和LPS+AG490組細胞增殖率較LPS組顯著上升(P<0.05);LPS+10 μmol/L黃芩苷+AG490組細胞增殖率較LPS+10 μmol/L黃芩苷組顯著增加(P<0.05),LPS+10 μmol/L黃芩苷+colivelin組較LPS+10 μmol/L黃芩苷組顯著下降(P<0.05)。

圖3 EdU法檢測黃芩苷對LPS誘導的H9C2細胞增殖率的影響

2.4 黃芩苷抑制JAK2/STAT3通路減輕LPS誘導H9C2細胞的凋亡 干預24 h后,與對照組相比,LPS組細胞凋亡率顯著升高(P<0.05);與LPS組相比,LPS+10 μmol/L黃芩苷組和LPS+AG490組細胞凋亡率顯著降低(P<0.05);與LPS+10 μmol/L黃芩苷組相比,LPS+10 μmol/L黃芩苷+AG490組細胞凋亡率顯著降低(P<0.05),LPS+10 μmol/L黃芩苷+colivelin組細胞凋亡率顯著升高(P<0.05)。見圖4。

圖4 Hoechst檢測黃芩苷對LPS誘導的H9C2細胞凋亡的影響

2.5 黃芩苷促進LPS誘導H9C2細胞Cyclin D1蛋白表達并抑制Caspase-3蛋白表達 對增殖凋亡相關(guān)Cyclin D1和Caspase-3蛋白表達水平進行檢測,結(jié)果顯示,LPS組Cyclin D1蛋白水平較對照組顯著下降,而Caspase-3蛋白水平較對照組顯著上升(P<0.05);LPS+10 μmol/L黃芩苷組和LPS+AG490組Cyclin D1蛋白水平較LPS組顯著上升,Caspase-3蛋白水平較LPS組顯著下降(P<0.05);LPS+10 μmol/L黃芩苷+AG490組Cyclin D1蛋白水平較LPS+10 μmol/L黃芩苷組顯著上升,Caspase-3蛋白水平較LPS+10 μmol/L黃芩苷組顯著下降(P<0.05),LPS+10 μmol/L黃芩苷+colivelin組Cyclin D1蛋白水平較LPS+10 μmol/L黃芩苷組顯著下降,Caspase-3蛋白水平較LPS+10 μmol/L黃芩苷組顯著上升(P<0.05)。見圖5。

圖5 黃芩苷對LPS誘導的H9C2細胞中Cyclin D1和Caspase-3表達水平的影響

2.6 黃芩苷促進LPS誘導H9C2細胞Cyclin D1 mRNA表達并抑制Caspase-3 mRNA表達 對增殖凋亡相關(guān)基因Cyclin D1和Caspase-3 mRNA水平檢測,結(jié)果顯示,LPS組Cyclin D1 mRNA表達水平較對照組顯著降低,而Caspase-3 mRNA表達水平顯著升高(P<0.05);與LPS組相比,LPS+10 μmol/L黃芩苷組和LPS+AG490組Cyclin D1 mRNA表達水平顯著升高,Caspase-3 mRNA表達水平顯著降低(P<0.05);與LPS+10 μmol/L黃芩苷組相比,LPS+10 μmol/L黃芩苷+AG490組Cyclin D1 mRNA表達水平顯著升高,Caspase-3 mRNA表達水平顯著降低(P<0.05),LPS+10 μmol/L黃芩苷+colivelin組Cyclin D1 mRNA表達水平顯著降低,Caspase-3 mRNA表達水平顯著升高(P<0.05)。見圖6。

圖6 黃芩苷對LPS誘導的H9C2細胞中Cyclin D1和Caspase-3表達的影響

2.7 黃芩苷抑制LPS誘導H9C2細胞JAK2/STAT3通路的活化 為了確定黃芩苷對JAK2/STAT3信號通路活化狀態(tài)的影響,本研究檢測了該通路的關(guān)鍵性蛋白JAK2、STAT3和p-JAK2、p-STAT3的表達水平(圖7A),蛋白定量分析結(jié)果顯示(圖7B),各組間JAK2和STAT3蛋白表達水平無顯著差異(P>0.05);與對照組相比,LPS組p-JAK2和p-STAT3表達水平顯著升高(P<0.05);與LPS組相比,LPS+10 μmol/L黃芩苷組和LPS+AG490組p-JAK2和p-STAT3表達水平顯著降低(P<0.05);與LPS+10 μmol/L黃芩苷組相比,LPS+10 μmol/L黃芩苷+AG490組p-JAK2和p-STAT3表達水平顯著降低(P<0.05),LPS+10 μmol/L黃芩苷+colivelin組p-JAK2和p-STAT3表達水平顯著升高(P<0.05)。

圖7 WB檢測黃芩苷對LPS誘導的H9C2細胞中JAK2/STAT3信號通路相關(guān)蛋白表達的影響

3 討論

近年來心力衰竭在我國發(fā)病率日益增高,已嚴重威脅人類的生命健康。目前抗心力衰竭的藥物很多,但該病仍不能被治愈,患者生活質(zhì)量和壽命未有顯著提升,國家醫(yī)療支出不斷增加,給患者家庭和社會造成了巨大的負擔及經(jīng)濟壓力[9]。為此,尋找新的治療藥物尤為重要。在中藥辨證論治中,蔣梅先[10]將心力衰竭分期論治,分為兩期:慢性穩(wěn)定期、急性加重期。前者主要是氣虛血瘀、氣陰虧虛、心腎陽虛,宜益氣養(yǎng)陰、益氣通絡、溫補心陽。后者多陽虛水泛、心血瘀滯、痰濁壅肺,宜溫陽利水、活血散瘀、化痰降氣宣肺;黃芩苷為黃酮類化合物,主要從黃芩苷中提取而來,其在糖尿病、冠心病、高血壓以及并發(fā)病中應用廣泛,且有抗氧化、抗炎癥、抑制細胞凋亡的功能,不僅可抑制心梗,還能在缺血再灌注治療中保護心肌細胞,此外黃芩苷還可以抑制LPS和病毒性心肌炎誘發(fā)的心肌細胞凋亡[11]。李萌芳等[12]研究發(fā)現(xiàn),黃芩苷通過調(diào)控STIM1-SOCE鈣超載減輕LPS引起的心肌細胞凋亡。劉宇等[13]研究發(fā)現(xiàn),黃芩苷可減輕慢性心肌衰竭大鼠心肌損傷,其作用機制可能與上調(diào)蛋白激酶B(Akt)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號通路表達有關(guān)。Xue等[14]研究證實,黃芩苷通過芳烴受體抑制炎癥并減輕心肌缺血損傷。提示黃芩苷對心肌細胞有廣泛的保護作用。本研究發(fā)現(xiàn),LPS誘導后細胞炎癥因子IL-6、IL-1β和TNF-α表達水平升高,24、48 h細胞活力降低,提示LPS誘導大鼠心肌細胞炎癥模型構(gòu)建成功,且LPS可以降低細胞的活力。與LPS組相比,LPS+10、20和40 μmol/L黃芩苷組IL-6、IL-1β與TNF-α含量降低,24 h LPS+10 μmol/L黃芩苷組細胞活力升高,說明了10 μmol/L黃芩苷可以抑制LPS誘導的H9C2細胞炎癥,提高細胞的活力。因此,選擇干預24 h的濃度較低的10 μmol/L黃芩苷進行后續(xù)的實驗,結(jié)果表明,LPS誘導后細胞增殖受到抑制,細胞凋亡被誘導增加,加入10 μmol/L黃芩苷處理后,顯著逆轉(zhuǎn)了這些指標的變化,證明了黃芩苷可以促進LPS誘導的H9C2細胞的增殖,抑制其凋亡,有良好的醫(yī)學應用前景。Cyclin D1是細胞增殖過程中標志蛋白,作為細胞周期蛋白依賴性激酶4(CDK)和CDK6的變構(gòu)調(diào)節(jié)劑的作用來調(diào)節(jié)從G1期到S期的轉(zhuǎn)變,Cyclin D1的高表達可促進細胞增殖[15]。細胞凋亡是一種多種因素誘導程序性細胞死亡的生物學過程,Caspase-3是執(zhí)行細胞凋亡的關(guān)鍵因子,活化后切割多種底物,調(diào)節(jié)有絲分裂后神經(jīng)元(PMN)和神經(jīng)前體細胞(NPC)中的程序性細胞死亡(PCD),在細胞凋亡中起重要作用[16]。本研究發(fā)現(xiàn),LPS誘導后細胞Cyclin D1 mRNA及蛋白表達水平降低,Caspase-3 mRNA及蛋白表達水平升高,加入10 μmol/L黃芩苷處理后,顯著逆轉(zhuǎn)了Cyclin D1和Caspase-3的表達,提示黃芩苷可能是通過上調(diào)Cyclin D1表達和下調(diào)Caspase-3表達來促進LPS誘導的H9C2細胞的增殖,抑制其凋亡,研究結(jié)果與Xue等[14]研究相一致。

JAK2/STAT3信號通路是廣泛參與細胞分化、炎性反應調(diào)節(jié)的重要通路。研究證實,JAK2/STAT3信號通路在心肌細胞的多種損傷中起關(guān)鍵作用,抑制該通路能明顯降低脂質(zhì)化過氧化產(chǎn)物的生成,進而降低細胞凋亡,減輕心肌細胞損傷[17]。Das等[18]研究發(fā)現(xiàn),雷帕毒素可通過調(diào)控JAK2/STAT3信號通路保護心肌缺血再灌注損傷。Hattori等[19]發(fā)現(xiàn)缺血處理可激活JAK2/STAT3信號通路,明顯增加p-JAK2、p-STAT3和Bcl-2表達,減少Bax和Caspase-3表達,從而減少心肌細胞凋亡,改善心臟缺血后收縮功能。另有研究發(fā)現(xiàn),感染性休克時會釋放促炎細胞因子,并通過JAK/STAT3通路損害心臟功能,環(huán)磷酸腺苷交換蛋白1(Epac1)過表達可抑制JAK/STAT3通路,減輕心肌細胞損傷[20]。以上研究證明了JAK2/STAT3信號通路與心肌細胞的損傷密切相關(guān)。此外,有研究表明,黃芩苷可通過抑制JAK2/STAT3信號傳導,減少炎癥因子的釋放,減輕膠原誘導的關(guān)節(jié)炎[21]。但目前黃芩苷通過JAK2/STAT3信號通路對心肌損傷的影響鮮有報道。因此,本研究分析了黃芩苷對JAK2/STAT3通路的影響,發(fā)現(xiàn)LPS誘導后細胞p-JAK2和p-STAT3蛋白表達升高,加入10 μmol/L黃芩苷處理后,p-JAK2和p-STAT3蛋白表達降低,提示了黃芩苷可能抑制了JAK2/STAT3通路活化狀態(tài)。所以在LPS+10 μmol/L黃芩苷組中加入JAK2/STAT3信號通路抑制劑AG490和激活劑colivelin進行JAK2/STAT3通路驗證實驗,發(fā)現(xiàn)與LPS+10 μmol/L黃芩苷組相比,AG490增強了黃芩苷對細胞增殖、Cyclin D1表達水平的升高,細胞凋亡及Caspase-3表達、p-JAK2和p-STAT3蛋白表達的降低,colivelin則削弱了這些變化,以上結(jié)果均說明黃芩苷可能通過下調(diào)p-JAK2、p-STAT3、Caspase-3蛋白表達水平,上調(diào)Cyclin D1蛋白表達水平,促進細胞增殖,并誘導細胞凋亡,這些研究結(jié)果與Jin等[20]和Sun等[21]結(jié)果相符。

4 結(jié)論

黃芩苷可抑制JAK2/STAT3信號通路的活化并上調(diào)Cyclin D1和下調(diào)Caspase-3表達促進LPS誘導的大鼠心肌H9C2細胞增殖,抑制其凋亡,并緩解其炎癥。本研究從細胞功能方面揭示了黃芩苷對LPS誘導的H9C2細胞中的作用,表明了黃芩苷對LPS誘導的心肌損傷的治療有一定積極效果,并且補充了黃芩苷作用LPS誘導大鼠心肌細胞的一個新的作用機制,但是否存在其他機制參與心肌細胞的生物學行為有待進一步研究。