楊丹嬌,張 敏,王俊偉,張 敏,劉怡雯,且華敏,田 維,趙光輝,葉忠明*,宋軍科*

(1.甘孜藏族自治州畜牧業(yè)科學(xué)研究所,四川康定 626000;2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,陜西楊陵 712100;3.焦作市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,河南焦作 454003)

藏豬(Tibetan pig)主要分布在西藏、青海、云南、甘肅、四川甘孜州和阿壩州等海拔3 000 m以上的高山草地地區(qū)[1]。藏豬養(yǎng)殖多以散養(yǎng)放牧為主,且受養(yǎng)殖技術(shù)、飼養(yǎng)管理和疾病等因素的影響,藏豬養(yǎng)殖過(guò)程中疾病的發(fā)生率呈逐年上升趨勢(shì)[2]。對(duì)西藏林芝地區(qū)藏豬腸道寄生蟲(chóng)感染情況調(diào)查發(fā)現(xiàn)[3-4],藏豬存在線蟲(chóng)、絳蟲(chóng)、棘頭蟲(chóng)、吸蟲(chóng)、原蟲(chóng)等寄生蟲(chóng)感染,總感染率高達(dá)64.34%(460/715)。藏豬的寄生蟲(chóng)感染可持續(xù)消耗豬營(yíng)養(yǎng),造成豬營(yíng)養(yǎng)不良、發(fā)育緩慢、降低飼料轉(zhuǎn)化率、增加養(yǎng)殖成本、降低養(yǎng)殖效益,感染還會(huì)引起繼發(fā)感染,嚴(yán)重者引起死亡,給當(dāng)?shù)啬撩駧?lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[5]。藏豬養(yǎng)殖是甘孜州傳統(tǒng)優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè)和農(nóng)民增收的支柱產(chǎn)業(yè),本文對(duì)甘孜州7個(gè)地區(qū)不同養(yǎng)殖場(chǎng)的藏豬新鮮糞便樣品中寄生蟲(chóng)感染進(jìn)行了調(diào)查,以期為當(dāng)?shù)夭刎i寄生蟲(chóng)病的有效防控提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 糞便樣本 2022年1月至2023年2月,共采集甘孜州7個(gè)地區(qū)藏豬養(yǎng)殖場(chǎng)176份新鮮藏豬糞便樣品(表1),其中腹瀉糞便68份, 非腹瀉糞便樣本108份。將采集到的新鮮糞便樣品逐一裝入干凈塑料袋內(nèi),詳細(xì)標(biāo)注信息后立即帶回實(shí)驗(yàn)室4℃保存?zhèn)錂z。

表1 臨床樣本信息

1.1.2 主要試劑 蒸餾水,實(shí)驗(yàn)室自制;精制鹽,中鹽榆林鹽化有限公司產(chǎn)品。

1.1.3 主要儀器 改良麥克馬斯特計(jì)數(shù)板,河南農(nóng)業(yè)大學(xué)寄生蟲(chóng)教研室提供;顯微鏡,重慶奧特光學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品;立式壓力蒸汽滅菌器,上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠產(chǎn)品;冰箱,青島海爾股份有限公司產(chǎn)品;超純水制造儀,四川優(yōu)普超純科技有限公司產(chǎn)品;電磁爐,寧波奧克斯廚房電器有限公司產(chǎn)品;AUY220型電子天平,上海光學(xué)儀器一廠產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 飽和鹽水漂浮法 用潔凈玻璃棒挑取3～5 g藏豬糞便至50 mL離心管中,并加入適量飽和鹽水?dāng)嚢柚羷驖{狀,之后加飽和鹽水至50 mL,混勻后經(jīng)60目網(wǎng)篩過(guò)濾至燒杯中,倒入小玻璃瓶中,并確保液面微凸于瓶口且不溢出。靜置10 min,用載玻片輕觸糞液液面,翻轉(zhuǎn)載玻片并蓋上蓋玻片,于100×顯微鏡下進(jìn)行鏡檢,仔細(xì)觀察蓋玻片覆蓋的所有區(qū)域,若發(fā)現(xiàn)卵囊/蟲(chóng)卵,于400×顯微鏡下拍照記錄。

1.2.2 卵囊/蟲(chóng)卵計(jì)數(shù)法 根據(jù)文獻(xiàn)[6]中報(bào)道的改良麥克馬斯特計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)每克糞便中的蟲(chóng)卵數(shù)(eggs per gram,EPG)和卵囊數(shù)(oocysts per gram,OPG)。計(jì)算公式為:OPG/EPG=[(n1+n2)/(2×0.15)]×60/2,公式可簡(jiǎn)化為OPG(EPG)=(n1+n2)/2×200。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS 25.0軟件中的卡方(χ2)檢驗(yàn)對(duì)不同因素下藏豬消化道寄生蟲(chóng)的感染率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。P>0.05為差異不顯著;P<0.05為差異顯著;P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 藏豬消化道寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵/卵囊形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果

形態(tài)學(xué)鑒定發(fā)現(xiàn),樣本中有3種線蟲(chóng)蟲(chóng)卵和1種球蟲(chóng)卵囊,分別為豬蛔蟲(chóng)(Ascarissuum)蟲(chóng)卵、豬毛尾線蟲(chóng)(Trichurissuis)蟲(chóng)卵、食道口線蟲(chóng)(Oesophagostomumspp.)蟲(chóng)卵和豬囊等孢球蟲(chóng)(Cystoisosporasuis)卵囊。

2.2 甘孜州藏豬消化道寄生蟲(chóng)感染情況

176份樣品中寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵/卵囊陽(yáng)性率為75%(132/176),豬囊等孢球蟲(chóng)卵囊陽(yáng)性率為43.18%(76/176)、豬蛔蟲(chóng)蟲(chóng)卵為42.04%(74/176)、豬毛尾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵為25.57%(45/176)、食道口線蟲(chóng)蟲(chóng)卵為5.11%(9/176)。不同地區(qū)藏豬糞便中消化道寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵/卵囊的陽(yáng)性率差異顯著(P<0.05)(表2)。

表2 不同地區(qū)消化道寄生蟲(chóng)感染情況

2.3 腹瀉和非腹瀉藏豬糞便樣品中寄生蟲(chóng)感染情況

腹瀉糞便樣本寄生蟲(chóng)感染率為80.88%(55/68),顯著高于健康糞便寄生蟲(chóng)感染率71.29%(77/108)(P<0.05)。豬囊等孢球蟲(chóng)卵囊在健康豬糞便樣本中感染率52.78%(57/108),極顯著高于腹瀉豬糞便樣本27.64%(19/68)(P<0.01),而豬毛尾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵在腹瀉糞便樣本中感染率35.29%(24/68),顯著高于健康豬糞便19.44%(21/108)(P<0.05),但蛔蟲(chóng)蟲(chóng)卵和食道口線蟲(chóng)蟲(chóng)卵在健康豬糞便樣本中感染率與腹瀉糞便樣本中感染率差異不顯著(P>0.05)(表3)。

表3 腹瀉和非腹瀉藏豬糞便中寄生蟲(chóng)感染情況

2.4 不同飼養(yǎng)模式藏豬消化道寄生蟲(chóng)感染情況

放牧藏豬感染率85.06%(74/87),顯著高于圈養(yǎng)藏豬65.17%(58/89)(P<0.05)。放牧藏豬糞便樣本中豬囊等孢球蟲(chóng)卵囊感染率70.11%(61/87),極顯著高于圈養(yǎng)16.85%(15/89)(P<0.01),放牧藏豬糞便中食道口線蟲(chóng)蟲(chóng)卵感染率9.2%(8/87),顯著高于圈養(yǎng)藏豬1.12%(1/89)(P<0.05),但豬蛔蟲(chóng)蟲(chóng)卵和豬毛尾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵在放牧和圈養(yǎng)藏豬糞便中的差異不顯著(P>0.05)(表4)。

表4 不同飼養(yǎng)模式藏豬消化道寄生蟲(chóng)感染情況

3 討論

甘孜州藏豬養(yǎng)殖主要以放牧為主,圈養(yǎng)藏豬養(yǎng)殖技術(shù)落后,其中消化道寄生蟲(chóng)病是藏豬最常見(jiàn)的疫病之一[7]。調(diào)查發(fā)現(xiàn),甘孜州部分地區(qū)藏豬消化道寄生蟲(chóng)總感染率為75%,高于文獻(xiàn)[3]調(diào)查的感染率(64.34%),低于文獻(xiàn)[8-9]的調(diào)查結(jié)果(83.3%)。同時(shí),甘孜州各地區(qū)之間消化道寄生蟲(chóng)感染差異顯著(P<0.05),可能因各地區(qū)的氣候條件、飼養(yǎng)管理水平和驅(qū)蟲(chóng)情況不同有相關(guān)。

寄生蟲(chóng)是引起豬腹瀉的主要病原之一,寄生蟲(chóng)主要導(dǎo)致腸上皮細(xì)胞壞死、脫落、腸黏膜形成異物并引起腹瀉[10]。本研究中腹瀉糞便樣本寄生蟲(chóng)感染率為80.88%(55/68),顯著高于非腹瀉糞便樣本寄生蟲(chóng)感染率71.29%(77/108)(P<0.05),藏豬雖然具有很強(qiáng)的抗病力和抗應(yīng)激能力[11],但寄生蟲(chóng)感染易引起藏豬腹瀉,降低豬的抵抗力。甘孜州地處青藏高原,氣溫較低,寒冷和惡劣的環(huán)境可能是影響病原體傳播和感染的一個(gè)因素[11-13]。

前期報(bào)道發(fā)現(xiàn),不同飼養(yǎng)模式下藏豬消化道道寄生蟲(chóng)感染情況不同,放牧養(yǎng)殖模式消化道寄生蟲(chóng)感染種類、感染率與感染強(qiáng)度多于圈養(yǎng)豬群[3]。本次研究發(fā)現(xiàn),放牧藏豬糞便樣本寄生蟲(chóng)感染率85.06%(74/87),顯著高于圈養(yǎng)藏豬糞便樣本寄生蟲(chóng)感染率65.17%(58/89)(P<0.05),與西藏林芝地區(qū)放牧藏豬寄生蟲(chóng)感染率顯著高于圈養(yǎng)結(jié)果一致。在甘孜州,藏豬、牦牛、藏羊混養(yǎng)放牧且密切接觸,致使放牧養(yǎng)殖藏豬寄生蟲(chóng)感染率偏高[14]。