盧欣欣， 郭妍婷， 王 晶， 張海軍， 邱 凱， 武書庚

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所農(nóng)業(yè)農(nóng)村部動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量安全飼料源性因子風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室農(nóng)業(yè)農(nóng)村部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100081）

飼料促生長(zhǎng)抗生素的長(zhǎng)期使用， 會(huì)引發(fā)細(xì)菌耐藥性、環(huán)境污染、動(dòng)物源食品抗生素藥物殘留、公共健康安全隱患等一系列問題（曾建國(guó)，2022）。自上世紀(jì)80 年代起，瑞典、丹麥、德國(guó)、歐盟、日本、 韓國(guó)以及美國(guó)相繼開始全面禁止飼料促生長(zhǎng)抗生素的使用（胡晗等，2022）。 2020 年7 月1 日起，我國(guó)開始全面實(shí)施禁抗令，飼料自此進(jìn)入“無(wú)抗時(shí)代”，“飼用替抗”技術(shù)迅速發(fā)展，抗菌促生長(zhǎng)的天然飼料添加劑是飼用替抗產(chǎn)品開發(fā)的重要方向（曾建國(guó)，2022）。

蘋果酸是2－羥基丁二酸， 在自然界以D-蘋果酸、L-蘋果酸和二者的混合物DL-蘋果酸三種形式存在，是人體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的重要有機(jī)酸，通過(guò)非氧化途徑、 氧化途徑和乙醛酸循環(huán)三種代謝途徑產(chǎn)生（Chi 等，2016）。 天然存在的蘋果酸都是L 型，它參與細(xì)胞線粒體能量代謝和細(xì)胞液與線粒體間還原當(dāng)量的轉(zhuǎn)移，具有顯著的抗氧化、降低胃腸道pH、改善吸收功能、抗炎及抗血栓形成、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育等作用（鮑文梅等，2023；吳軍林等，2015）。另外，蘋果酸具有芳香氣味能夠提高飼糧適口性，刺激動(dòng)物味蕾，促進(jìn)采食（梁靜等，2016）。飼糧添加蘋果酸能夠降低奶牛的瘤胃pH，提高微生物發(fā)酵效率， 促進(jìn)養(yǎng)分消化率和能量利用率，增加產(chǎn)奶量和飼料效率（El-Zaiat 等，2019；Wang 等，2009；Sniffen 等，2006），促進(jìn)山羊瘤胃發(fā)酵（施玲玲等，2008），提高斷奶仔豬腸道抗炎和抗氧化能力，改善腸道健康（張鵬光等，2022），提高斷奶仔兔生產(chǎn)性能和表觀消化率，提高蛋白質(zhì)合成利用率（潘孝青等，2013），提高異育銀鯽的增重率、特定生長(zhǎng)率和抗氧化能力（程義等，2019）。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，在肉仔雞基礎(chǔ)日糧中添加8 g/kg 的生物法蘋果酸能夠通過(guò)提高肉仔雞血液免疫能力和抗氧化能力、完善盲腸微生物群結(jié)構(gòu)來(lái)改善肉雞的生產(chǎn)性能，提高肉雞胸肌的保水性（Qiu 等，2022）。 本研究將在此基礎(chǔ)上評(píng)估生物法蘋果酸產(chǎn)品在肉雞大群試驗(yàn)中的促生長(zhǎng)和肉質(zhì)改善效果，進(jìn)一步驗(yàn)證前期試驗(yàn)結(jié)果，為生物法蘋果酸在肉雞飼糧中大規(guī)模的推廣應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 受試添加劑 生物法蘋果酸是工程菌Aureobasidium pullulans CCTCC NO:M2,012,223 以葡萄糖、 檸檬酸和玉米淀粉為底物經(jīng)微生物發(fā)酵所得。 本試驗(yàn)所用的生物法蘋果酸產(chǎn)品購(gòu)買于安徽某生物科技股份有限公司，成分包括20% L-蘋果酸和80%蒙脫石載體。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 本試驗(yàn)選用1000 只1 日齡的愛拔益加（AA）肉仔雞公雛，隨機(jī)分為2 個(gè)處理，每個(gè)處理10 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50 只雞。對(duì)照組為玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧， 處理組在基礎(chǔ)日糧中添加0.8%生物法蘋果酸。

1.3 試驗(yàn)日糧 試驗(yàn)日糧在參照NRC （1994）和NY/T 33-2004 的基礎(chǔ)上，結(jié)合AA 肉仔雞飼養(yǎng)手冊(cè)配制，基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。 試驗(yàn)飼料采用冷壓制粒，以顆粒料形式飼喂。

表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)采用四層立體網(wǎng)上養(yǎng)殖，飼養(yǎng)周期為42 d。 試驗(yàn)雞自由采食，自由飲水。試驗(yàn)過(guò)程中每日以重復(fù)為單位記錄死淘雞數(shù)、飼料添加總量；每日清晨8:30 和下午2:30 分別記錄雞舍溫度和濕度，定時(shí)清掃衛(wèi)生。 每周結(jié)料一次，以重復(fù)為單位對(duì)雞稱重一次，計(jì)算平均采食量、 死亡率和增重。 試驗(yàn)?zāi)┮灾貜?fù)為單位稱重，記錄總重量和總雞數(shù)，計(jì)算經(jīng)濟(jì)效益和死亡率、飼料轉(zhuǎn)化率。

試驗(yàn)過(guò)程中按常規(guī)的操作程序進(jìn)行疫苗接種防疫，記錄防疫情況；試驗(yàn)場(chǎng)地和雞舍清潔衛(wèi)生，并進(jìn)行正常消毒；試驗(yàn)雞舍通風(fēng)良好，并保持所需的溫度；飼料生產(chǎn)按標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；飲水水質(zhì)良好，無(wú)污染；試用雛雞健壯，達(dá)到商品雛雞標(biāo)準(zhǔn)。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)及方法

1.5.1 生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)開始時(shí)， 稱量肉仔雞的初始體重。 分別于試驗(yàn)21 d 和42 d 每個(gè)飼養(yǎng)階段結(jié)束時(shí)，早上空腹稱重并記錄耗料量。每天觀察記錄死亡動(dòng)物數(shù)量。 計(jì)算0 ~ 21、22 ~ 42 d 和0 ~42 d 平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和耗料增重比（F/G）。

1.5.2 屠宰性能 試驗(yàn)第42 天， 每處理隨機(jī)取40 只雞（每個(gè)重復(fù)4 只）進(jìn)行屠宰，分別測(cè)定屠體重、半凈膛重、全凈膛重，胸肌、腿肌、腹脂重量，計(jì)算屠體率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率及腹脂率。各項(xiàng)指標(biāo)計(jì)算公式如下：

1.5.3 肉品質(zhì) 屠宰時(shí)取右側(cè)胸大肌， 用肉色儀測(cè)定右側(cè)肌肉的亮度（L*）、紅度（a*）和黃度（b*），用以評(píng)價(jià)肉色；使用校準(zhǔn)便攜式pH 計(jì)，將pH 探頭插入肉中進(jìn)行測(cè)定， 每塊肉測(cè)定3 個(gè)不同位置，取平均值作為最終結(jié)果，記為pH45min。測(cè)完pH 后將右側(cè)雞胸肉放置于4 ℃冰箱；24 h 之后取出，每塊肉再測(cè)定3 個(gè)不同位置，取平均值作為最終結(jié)果，記為pH24h。屠宰時(shí)取左側(cè)胸大肌的中間部分， 修剪成長(zhǎng)×寬×厚為30 mm×15 mm×5 mm 的長(zhǎng)方體后稱重，然后用鐵絲釣住肉樣的一端， 使肌纖維垂直向上， 裝入空氣的塑料袋中，肉樣不與袋壁接觸，扎好袋口，懸掛于4 ℃冰箱中，放置24 h 后，取出肉樣用濾紙擦干并稱重，計(jì)算滴水損失。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 軟件的ttest 進(jìn)行分析，以P＜0.05 為差異顯著。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 日糧添加蘋果酸對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響如表2 所示，與對(duì)照組相比，日糧添加生物法蘋果酸使試驗(yàn)后期（22 ～42 d）平均日增重和料重比得到顯著改善， 平均日增重提高了7.53%（P =0.001），料重比降低了4.47%（P =0.002），并改善了全試驗(yàn)周期內(nèi)肉雞的生長(zhǎng)性能， 主要表現(xiàn)為料重比降低了4.09%（P =0.002）， 最終使42 d 時(shí)肉雞的平均體重提高了4.93%（P＜0.001）。 日糧添加蘋果酸對(duì)全試驗(yàn)周期內(nèi)肉雞的平均采食量和死淘率無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表2 日糧添加蘋果酸對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 日糧添加蘋果酸對(duì)肉雞屠宰性狀和肌肉品質(zhì)的影響 如表3 所示，與對(duì)照組相比，日糧添加蘋果酸對(duì)全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。日糧添加蘋果酸對(duì)胸肌肉色的亮度值、 紅度值和黃度值均無(wú)顯著影響 （P＞0.05）。 日糧添加蘋果酸對(duì)肉雞屠宰后45 min 和24 h 胸肌pH 均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。與對(duì)照組相比， 日糧添加蘋果酸顯著降低了胸肉的滴水損失（11.31%）（P＜0.001）。

表3 日糧添加蘋果酸對(duì)肉雞屠宰性狀和肌肉品質(zhì)的影響

3 討論

3.1 日糧添加蘋果酸對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響有機(jī)酸已被證實(shí)作為“飼用替抗”添加劑具有改善肉雞生產(chǎn)性能、 機(jī)體免疫和抗氧化能力及腸道健康的潛力（Abdelli 等，2020；Saleem 等，2020；Wang等，2019）。 肉雞飼糧中添加1.5%的乙酸、3.0%的檸檬酸可以有效改善日增重和料重比（SA AF 等，2008）， 添加3~4.5 g/kg 的包被有機(jī)酸（含35 g/kg乙酸、80 g/kg 丁酸、60 g/kg 甲酸、20 g/kg 磷酸和10 g/kg 乳酸）能夠顯著提高出欄重，降低料重比（崔海燕，2021）。產(chǎn)蛋后期蛋雞飲水中添加復(fù)合有機(jī)酸（含45%甲酸、10%丙酸）能夠顯著降低平均日采食量與料蛋比， 提高平均蛋重 （何紀(jì)塏等，2022）。 飼糧添加0.3%的復(fù)合有機(jī)酸 （甲酸≥23.9%、乳酸≥14.5%、檸檬酸≥4.0%、月桂酸≥8.6%） 能夠顯著提高生長(zhǎng)豬和斷奶仔豬的終末重、總增重、平均日采食量和平均日增重，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率， 降低料重比 （劉正群等，2022；李澤青等，2021）。本研究中日糧添加的生物法蘋果酸同樣提高了試驗(yàn)后期肉仔雞的平均日增重，降低了料重比，使出欄平均體重增加136.08 g，顯著改善了生產(chǎn)性能， 這也證實(shí)了前期的研究結(jié)果（Qiu 等，2022）。 這可能是生物法蘋果酸作為有機(jī)酸化劑可降低飼糧的酸結(jié)合力， 從而降低胃腸道pH，改善腸道微生物群結(jié)構(gòu)，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收利用，提高肉雞飼料轉(zhuǎn)化率（Kim 等，2005；Dibner 等，2002）。

3.2 日糧添加蘋果酸對(duì)肉雞屠宰性狀和肌肉品質(zhì)的影響 屠宰性狀（全凈膛率、胸肌率、腿肌率、腹脂率等）是評(píng)價(jià)家禽品種優(yōu)劣、飼養(yǎng)管理水平高低、生產(chǎn)效益好壞的重要指標(biāo)（陳文忠等，2022）。甲酸飼糧對(duì)肉雞全凈膛率、 腹脂率及器官指數(shù)無(wú)顯著影響（C,lnar 等，2009） ，也有研究表明對(duì)全凈膛率、右胸肌和右腿肌的產(chǎn)量無(wú)顯著影響（Garcia等，2007），酸化劑（含20.7%丁酸、17.5%丙酸銨、12.5%丙酸和4.2%硼酸） 對(duì)肉雞胸肌含量和腿肌重量沒有顯著影響（Brzóska 等，2013），蘋果酸飼糧同樣沒有顯著改善肉雞的屠宰性能（鮑文梅等，2023）。本研究中肉雞日糧添加生物法蘋果酸對(duì)全凈膛率、胸肌率、腿肌率和腹脂率均無(wú)顯著影響，與以上結(jié)果相一致。 但精油有機(jī)酸復(fù)合制劑（25.0%檸檬酸、16.7%山梨酸、1.7%百里香酚、1.0%香蘭素、55.6%脂肪）飼喂櫻桃谷肉鴨使屠宰性能指標(biāo)得到改善（陳文忠等，2022），抗菌肽、寡糖和有機(jī)酸復(fù)合制劑提高了科寶肉雞的胸肌率和腿肌率（張磊正等，2023）。 因此，飼糧有機(jī)酸可能不會(huì)對(duì)肉雞的屠宰性能產(chǎn)生影響， 但復(fù)合有機(jī)酸中除有機(jī)酸外的其他物質(zhì)可能會(huì)產(chǎn)生改善屠宰性能的效果。

優(yōu)質(zhì)禽肉消費(fèi)在食品業(yè)中占據(jù)重要地位，肉仔雞肉質(zhì)的提高對(duì)家禽產(chǎn)業(yè)鏈有舉足輕重的作用。 有機(jī)酸對(duì)肉質(zhì)具有積極的影響，可防止肉質(zhì)惡化， 且無(wú)化學(xué)殘留物 （Rathnayake 等，2021）。0.05%和0.1%復(fù)合有機(jī)酸（富馬酸、檸檬酸、蘋果酸和中鏈脂肪酸） 飼糧降低了豬肉的滴水損失（Lei 等，2018），使用乳酸、單寧酸、辛酸、丙酸、乙酸和丁酸的混合飼料使肉雞肌肉的滴水損失減少（65.85%）（Menconi 等，2014）。 包被復(fù)合有機(jī)酸（35 g/kg 乙酸、80 g/kg 丁酸、60 g/kg 甲酸、20 g/kg 磷酸和10 g/kg 乳酸） 顯著提高了肉雞胸肌系水力（崔海燕，2021）。然而由于有機(jī)酸類型、劑量及試驗(yàn)環(huán)境的差異，也有研究表明補(bǔ)充有機(jī)酸混合物（由富馬酸、檸檬酸、蘋果酸和中鏈脂肪酸組成）對(duì)豬肉肉色、pH、烹飪損失、滴水損失和系水力無(wú)顯著影響（Upadhaya 等，2014），有機(jī)酸微膠囊（包括檸檬酸和山梨酸）的使用不會(huì)顯著影響豬肉肉色、pH、感官屬性（顏色、硬度、大理石紋）、烹飪損失和系水力（Cho 等，2014），飼糧檸檬酸和富馬酸甚至使雞肉系水力降低26.45%（Attia，2018）。 本研究中日糧添加生物法蘋果酸顯著降低了胸肌肉的滴水損失，這可能歸因于生物法蘋果酸飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的協(xié)同效應(yīng)或飼料中抗氧化物質(zhì)的存在增強(qiáng)了肌肉抗氧化能力，從而減少胸肌的水分損失， 改善肉質(zhì) （Qiu 等，2022；Rathnayake 等，2021）。

4 結(jié)論

在中試條件下，日糧添加0.8%的生物法蘋果酸可顯著促進(jìn)肉雞生長(zhǎng)，還能增強(qiáng)肌肉系水力，改善肉品質(zhì)。因此，本研究認(rèn)為生物法蘋果酸可作為商業(yè)化飼料添加劑，在肉雞集約化養(yǎng)殖中推廣應(yīng)用。