趙勝杰，盛敏，仲偉平

1.河南省動物疫病預(yù)防控制中心，鄭州 450000；

2.河南省開封市動物疫病預(yù)防控制中心，河南開封 475000

布魯氏菌病（以下簡稱布?。┦怯刹剪斒暇鸬? 種人畜共患傳染病，該病嚴(yán)重威脅畜牧業(yè)健康發(fā)展和公共衛(wèi)生安全，被世界動物衛(wèi)生組織列為B 類傳染病，在我國被列為二類動物疫病[1]。布魯氏菌可感染60 多種家畜、家禽和野生動物，任何品種、年齡的牛羊均能被感染，其中成年牛羊感染率高于犢牛和羔羊，母畜感染率高于公畜[2]。該病主要侵害動物生殖器官，可引起母畜流產(chǎn)，公畜睪丸炎及附睪炎等。人主要通過與患病牛羊及其制品接觸感染，其中羊種布魯氏菌對人的傳染性和致病性最強(qiáng)，感染后會影響患者生殖健康和生活質(zhì)量，嚴(yán)重者喪失勞動力[3-4]。因此，我國將其作為當(dāng)前重點防控的人獸共患傳染病之一。

河南是牛羊養(yǎng)殖大省，屬于家畜布病防控一類地區(qū)，近年來布病凈化工作取得一定成效，牛羊布病流行率呈逐年下降趨勢。由于動物及其產(chǎn)品的調(diào)運和流動頻繁，部分地區(qū)布病疫情出現(xiàn)反彈，且近年來人間布病病例人數(shù)持續(xù)上升，牛羊布病的防控和凈化工作仍面臨挑戰(zhàn)。為保障牛羊養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展和公共衛(wèi)生安全，2022 年對河南省未免疫牛羊場群進(jìn)行了布病感染情況調(diào)查，并按場點類別和動物種類對調(diào)查結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計分析，掌握了河南省牛羊布病感染情況和流行特點，能夠更有針對性地防控牛羊布病。

1 材料與方法

1.1 材 料

168 個牛羊養(yǎng)殖場（戶）來自河南省15 個地市。對被調(diào)查牛羊場（戶）采用估計流行率的抽樣策略，設(shè)置置信水平為95%、可接受絕對誤差為5%、預(yù)期流行率為2%，依據(jù)存欄量進(jìn)行系統(tǒng)隨機(jī)抽樣，共抽取血清樣品4 902 份。其中：肉牛32 場次，樣品972份；奶牛51 場次，樣品1 525 份；羊85 場次，樣品2 405 份。

1.2 方 法

布病抗體檢測采用虎紅平板凝集試驗初檢和試管凝集試驗確診的垂直試驗策略。

1）虎紅平板凝集試驗。在一次性反應(yīng)板上，每孔加入30 μL待檢血清，再在待檢血清上加入30 μL布魯氏菌抗原，將血清和抗原充分?jǐn)嚢杌靹?，靜置3 min后觀察結(jié)果。血清與抗原混合物產(chǎn)生顆粒狀凝集的，判定為陽性；血清與抗原混合物為均勻粉紅色液體、無凝集顆粒的，則判定為陰性。

2）試管凝集試驗。針對虎紅平板凝集試驗陽性樣品，采用試管凝集試驗進(jìn)行復(fù)檢。每份樣品用4支凝集試管，羊血清第1管加入920 μL 稀釋液，牛血清第1 管加入960 μL 稀釋液，第2～4 管各加入500 μL 稀釋液，取待檢血清（羊血清80 μL 或牛血清40 μL）加入第1管內(nèi)，并混合均勻。取500 μL混合液加入第2 管并混合均勻，倍比稀釋至第4 管，從第4 管棄去混勻液500 μL。稀釋完畢后，再向各管中加入稀釋后抗原500 μL，羊血清樣品第1～4 管血清稀釋度依次為1:25、1:50、1:100 和1:200，牛血清樣品血清稀釋度依次為1:50、1:100、1:200 和1:400。將樣品和陰陽性對照置于37 ℃溫箱內(nèi)孵育18～24 h后觀察結(jié)果。羊血清樣品1:50 血清稀釋度出現(xiàn)“++”及以上凝集現(xiàn)象的，判定為陽性；1:25 血清稀釋度出現(xiàn)“++”的判為可疑。牛血清樣品1:100血清稀釋度出現(xiàn)“++”凝集現(xiàn)象的，判定為陽性；1:50 稀釋度出現(xiàn)“++”的判為可疑?？梢膳Ｑ?0 d 后再次采樣檢測仍為可疑的，判為陽性。

2 結(jié)果與分析

2.1 總體情況

對168 個場群的4 902 份牛羊血清樣品進(jìn)行布病感染抗體檢測。檢出布病陽性場（戶）9 個，平均場群陽性率為5.36%；檢出陽性樣品23 份，平均個體陽性率為0.47%。

2.2 牛群布病檢測結(jié)果

共對83個場群的2 497份樣品進(jìn)行布病抗體檢測，檢出陽性場群3 個，陽性樣品6 份，牛群布病感染抗體平均場群陽性率和個體陽性率分別為3.61%和0.24%。

由表1 可知，將檢測結(jié)果按照場點類別進(jìn)行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，種牛場和屠宰場均無陽性樣品檢出，牛群布病主要流行于商品代牛場（戶）中。66 個商品代牛場（戶）的1 937份牛血清樣品中，有來自3個場（戶）的6 份樣品檢測結(jié)果為陽性，其場群和個體陽性率分別為4.55%和0.31%。

表1 不同場點牛群布病檢測結(jié)果

將檢測結(jié)果按照肉牛和奶牛進(jìn)行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，肉牛場（戶）中無陽性樣品檢出，牛群布病主要流行于奶牛群體中。51 個奶牛場群的1 525 份血清樣品中，有來自3 個場群的6 份樣品檢測結(jié)果為陽性，其場群和個體陽性率分別為5.88%和0.39%。

牛群中所檢出陽性樣品主要分布于奶牛場群，將檢測結(jié)果按照奶牛不同生產(chǎn)階段進(jìn)行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，非泌乳奶牛中無陽性樣品檢出，牛群布病主要流行于泌乳奶牛。30 個泌乳奶牛場群的890 份血清樣品中，有來自3 個場群的6 份樣品檢測結(jié)果為陽性，其場群和個體陽性率分別為10.00%和0.67%。

2.3 羊群布病檢測結(jié)果

共檢測羊養(yǎng)殖場（戶）85 個，樣品2 405 份，檢出陽性場群6 個，陽性樣品17 份，羊群布病感染抗體平均場群陽性率和個體陽性率分別為7.06%和0.71%。

將檢測結(jié)果按照場點類別進(jìn)行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，種羊場和散養(yǎng)戶無陽性樣品檢出，羊群布病主要流行于商品代羊場（戶）。57 個商品代羊場（戶）的1 710 份羊血清樣品中，有來自6 個場群的17 份樣品檢測結(jié)果為陽性，其場群和個體陽性率分別為10.53%和0.99%（表2）。

表2 不同場點羊群布病檢測結(jié)果

3 討 論

河南省牛羊布病感染抗體平均場群陽性率為5.36%，平均個體陽性率為0.47%。其中，奶牛平均場群陽性率為5.88%，平均個體陽性率為0.39%；羊平均場群陽性率為7.06%，平均個體陽性率為0.71%。2016年河南省奶牛布病場群和個體陽性率分別為18.52%和2.54%[3]，2020 年河南省羊群布病感染抗體場群和個體陽性率分別為7.55% 和1.49%[4]。與往年相比，河南省牛、羊布病感染抗體場群和個體陽性率均有明顯下降，提示河南省牛羊布病凈化工作取得了一定成效。

河南省牛羊布病具有較明顯的群間分布特征，主要流行于商品代規(guī)模場（戶）中，這與2016—2018年安徽省牛羊布魯氏菌病血清學(xué)監(jiān)測結(jié)果一致[5]。商品代規(guī)模場（戶）布病流行率高，可能與其飼養(yǎng)密度大，且牛羊流動相對頻繁有關(guān)。商品代規(guī)模場（戶）應(yīng)堅持自繁自養(yǎng)生產(chǎn)模式，減少引種和外購動物，加強(qiáng)引種隔離和檢測，降低病原傳入風(fēng)險。同時，應(yīng)科學(xué)規(guī)劃，合理飼養(yǎng)，避免養(yǎng)殖密度過高，降低疫病在群內(nèi)散播風(fēng)險。

部分羊養(yǎng)殖場（戶）未落實布病“非凈即免”政策，且羊群疫病凈化工作相對落后，這可能是羊群布病流行率高于牛群的原因之一。種羊場和布病流行率低的規(guī)模羊場應(yīng)積極開展布病凈化工作，通過監(jiān)測、淘汰布病陽性個體，逐步實現(xiàn)場群無疫目標(biāo)。免疫接種能夠有效降低布病的感染率和傳播速度，不具備凈化條件的養(yǎng)殖場（戶），應(yīng)積極加強(qiáng)免疫接種，提高羊群免疫力，降低布病感染幾率[6]。

牛的布病主要流行于奶牛場群，尤其以泌乳奶牛為主，河南省某地區(qū)奶牛布魯氏桿菌病感染情況調(diào)查也提示不同生長發(fā)育階段奶牛陽性率具有較大差異，其中以成年母牛陽性率最高[7]。母畜布病流行率高，發(fā)病幾率大，可能與妊娠期母畜更易感染布魯氏桿菌有關(guān)[8-11]。布魯氏桿菌感染母畜后，可造成妊娠母畜出現(xiàn)不同程度流產(chǎn)，且會隨著乳汁、生殖道分泌物等排出體外，污染周邊環(huán)境，威脅同群動物。因此，母畜的布病防控尤為重要，應(yīng)加強(qiáng)其擠奶和分娩等重要環(huán)節(jié)的生產(chǎn)管理和清洗消毒工作。同時，還要加強(qiáng)流產(chǎn)胎兒、胎衣、分泌物等無害化處理，對其可能污染的環(huán)境進(jìn)行徹底消毒，常用的消毒劑有1%來蘇爾、10%石灰乳、2%福爾馬林和4%火堿等[12]。

調(diào)查結(jié)果顯示，河南省牛羊布病流行情況總體可控。與往年相比，牛羊布病感染抗體場群陽性率和個體陽性率均呈下降趨勢，但商品代牛羊養(yǎng)殖場（戶）流行率偏高，布病的防控和凈化工作仍面臨挑戰(zhàn)。陽性樣品主要來自于泌乳奶牛和商品代規(guī)模羊場，需要依據(jù)調(diào)查結(jié)果進(jìn)一步改進(jìn)和落實布病凈化工作。