鄧毅民，藺文龍，林為民*，黃新，史文軍

1.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第八師143團(tuán)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，新疆石河子 832000；

2.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)第八師畜牧獸醫(yī)工作站，新疆石河子 832000；

3.新疆農(nóng)墾科學(xué)院，新疆石河子 832000

新疆師市養(yǎng)殖奶牛的歷史可追溯至上世紀(jì)60年代，直至2009年未見(jiàn)關(guān)于牛病毒性腹瀉（BVD）的相關(guān)報(bào)道；2002 年，師市分6 個(gè)批次從澳大利亞進(jìn)口16 673 頭荷斯坦黑白花奶牛，均由北京市進(jìn)出口檢疫檢驗(yàn)局檢疫合格（牛病毒性腹瀉病毒等7 種病毒檢測(cè)均為陰性），指定隔離場(chǎng)隔離45 d 后運(yùn)回師市。截至目前，師市發(fā)展到1 700 頭以上的奶牛場(chǎng)19 個(gè)；2016 年之后，有1 個(gè)牛場(chǎng)使用挪威紅牛凍精×荷斯坦奶牛，培育出挪荷牛1 273 頭；有2 個(gè)牛場(chǎng)使用弗萊維赫乳肉兼用牛凍精×荷斯坦奶牛，培育出弗荷牛1 452 頭；分別與本場(chǎng)荷斯坦奶牛分群飼養(yǎng)。目前，師市飼養(yǎng)有荷斯坦奶牛、挪荷乳肉兼用牛和弗荷乳肉兼用牛等3個(gè)品系的產(chǎn)奶牛。

李佑民等[1]于1983 年首次在我國(guó)吉林省發(fā)現(xiàn)了輸入性牛病毒性腹瀉病例，并成功分離鑒定牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）毒株；2009 年，李娜等[2]首次在師市分離到BVDV。近幾年，筆者在工作中也經(jīng)常接到部分規(guī)模牛場(chǎng)3個(gè)品系的牛均發(fā)現(xiàn)“早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎和犢牛腹瀉”等臨床癥狀的報(bào)告，嚴(yán)重腹瀉還能引起犢牛死亡[3-5]，給師市奶牛養(yǎng)殖造成重大危害。為掌握牛病毒性腹瀉/黏膜病在師市的感染狀況，以及不同品系間BVDV 感染是否存在差異，筆者所在課題組對(duì)師市范圍的19 個(gè)未免疫BVDV 疫苗的牛場(chǎng)，采集不同生長(zhǎng)階段牛的血樣，進(jìn)行牛病毒性腹瀉/黏膜病毒（BVD-MD）病原和抗體的檢測(cè)，以期掌握BVDV 在師市牛場(chǎng)中的感染狀況，為師市防控BVD提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源

以預(yù)期流行率抽樣原則，3 個(gè)品系的犢牛、青年牛、后備牛和成母牛分別采用分階段抽樣原則。第一階段，采取普查的方法，19 個(gè)規(guī)模牛場(chǎng)全部作為抽樣單元；第二階段，抽樣場(chǎng)內(nèi)按照95%置信水平(CI)、10%可接受誤差、50%預(yù)期流行率進(jìn)行抽樣。共采集血清樣品7 965 份，其中：荷牛血清5 952 份，弗荷牛1 037 份，挪荷牛976 份，血清－20 ℃保存?zhèn)溆?，詳?jiàn)表1。樣品的免疫情況：17 個(gè)牛場(chǎng)免疫疫苗，2個(gè)牛場(chǎng)未免疫疫苗。

表1 3個(gè)品系牛血清樣品采集情況 份

1.2 檢測(cè)試劑

牛病毒性腹瀉（BVD）實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：BVDV20220802P），購(gòu)于哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司；牛病毒性腹瀉ELISA 檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：2109001），購(gòu)于青島瑞爾生物技術(shù)有限公司。

1.3 檢測(cè)方法

試驗(yàn)由新疆農(nóng)墾科學(xué)院獸醫(yī)研究所進(jìn)行BVDV 抗原、抗體的檢測(cè)，BVDV 抗原、抗體檢測(cè)均按照檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)的操作方法和判斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

1.4 數(shù)據(jù)處理

對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 軟件進(jìn)行整理和制圖，并將其按照不同年齡段、不同品系等進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，利用χ2檢驗(yàn)法進(jìn)行差異性比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 BVDV抗原檢測(cè)情況

由表2 可知：共檢測(cè)血清樣品7 965 頭份，陽(yáng)性樣品檢出137 頭份，BVDV 陽(yáng)性總檢出率為1.72%。其中：荷成母牛血清樣品檢出率最高，為3.70%，弗荷犢牛血清樣品檢出率最低，為0.49%；3 個(gè)品系間牛血清樣品總檢出率差異不顯著，說(shuō)明不同品系牛之間不影響B(tài)VDV 的流行；3個(gè)品系青年牛、后備牛和成母牛BVDV 陽(yáng)性率顯著高于犢牛，這可能由于犢牛單獨(dú)飼喂、與其他牛只接觸機(jī)會(huì)少和生長(zhǎng)時(shí)間短的原因，或者是成年牛在懷孕期間感染BVDV,導(dǎo)致該病毒在幼牛體內(nèi)建立免疫耐受或者持續(xù)感染有關(guān)。

2.2 BVDV抗體檢測(cè)情況

由表3 可知：共檢測(cè)血清樣品7 965 頭份，抗體陽(yáng)性樣品檢出5 272 頭份，抗體陽(yáng)性總檢出率為66.19%。其中：荷成母牛血清樣品抗體檢出率最高，為89.66%，挪荷犢牛血清樣品抗體檢出率最低，為39.37%；3 個(gè)品系牛間血清樣品抗體平均檢出率差異不顯著，也表明抗體陽(yáng)性率高低不因品系不同而存在差異；3 個(gè)品系青年牛、后備牛和成母牛BVDV 抗體陽(yáng)性率顯著高于犢牛，這可能與犢牛單獨(dú)飼喂、與其他牛只接觸機(jī)會(huì)少和生活時(shí)間短有關(guān)。

表3 3個(gè)品系牛血清樣品BVDV抗體檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.3 BVDV抗原/抗體場(chǎng)群陽(yáng)性統(tǒng)計(jì)情況

檢測(cè)19 個(gè)牛場(chǎng)的血清樣品，13 個(gè)牛場(chǎng)BVDV抗原顯示陽(yáng)性，場(chǎng)群抗原陽(yáng)性率為68.42%；BVDV抗原陽(yáng)性最高的牛場(chǎng)檢出率為2.44%，BVDV 抗原陽(yáng)性最低的牛場(chǎng)檢出率為0.37%。19個(gè)牛場(chǎng)BVDV抗體顯示陽(yáng)性，場(chǎng)群抗體陽(yáng)性率為100%；BVDV 抗體陽(yáng)性最高的牛場(chǎng)檢出率為53.73%，BVDV 抗體陽(yáng)性最低的牛場(chǎng)檢出率為23.29%。

3 討 論

Ran 等[6]調(diào)查發(fā)現(xiàn)，全世界牛血清流行率為11.1%～100%；李娜等[2]對(duì)新疆石河子地區(qū)BVDV 的分子流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，BVDV 抗原陽(yáng)性率為39.06%；王晨豫等[7]調(diào)查結(jié)果顯示，BVDV 抗原陽(yáng)性率為1.63%；王龍等[8]調(diào)查結(jié)果顯示，BVDV 抗原陽(yáng)性率為3.71%；張宇名等[9]調(diào)查結(jié)果顯示，BVDV 抗原陽(yáng)性率為1.94%。本試驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，師市BVDV 的血清抗原陽(yáng)性率為1.72%，其中：荷?？乖?yáng)性率為1.73%，弗荷?？乖?yáng)性率為1.35%，挪荷牛抗原陽(yáng)性率為2.05%；相較于新疆境內(nèi)其他地區(qū)和山東部分地區(qū)，師市BVDV 的抗原陽(yáng)性率暫處于較低水平，這與近3 年師市加強(qiáng)BVD“檢疫–清除–檢疫–清除”等凈化措施的落實(shí)密切相關(guān)，需要在后面的工作中繼續(xù)強(qiáng)化。